张高飞于玥邬晓鸥李军
(深圳市药品检验所518057)
【摘要】目的建立保健食品中人参总皂苷含量的测定方法。方法用水提取人参总皂苷类成分，经水饱和正丁醇萃取、氨试液洗涤除杂后，试样中的人参皂苷类成分在高氯酸的作用下与香草醛反应，产生特征的紫红色，在560nm下测定吸光度。结果人参总皂苷在0.0722～0.2165mg质量范围内与吸光度线呈良好的线性关系，平均回收率为95.9%。结论本文建立的方法简单、便捷，准确性、重复性好，可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。
【关键词】保健食品人参总皂苷分光光度法
【中图分类号】R93【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）20-0217-02
皂苷类成分是参类中的主要活性物质,具有滋补强壮，增强免疫，抗疲劳的功效[1]，常用的检测方法为紫外分光光度法[2-5]。目前市售含参类的保健食品有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液等，均是以总皂苷含量来评价其产品的质量和功效。其测定方法大多都是按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的方法检测[6]，在实际应用中，主要存在以下问题：1、固定的树脂柱载样量与不确定的样品总皂苷含量之间的矛盾，部分样品存在柱容量超载的情况，测定结果偏差严重。2、部分样品经过大孔树脂柱除杂后，仍存在干扰比色测定的杂质。3、操作步骤欠规范，导致测定结果重现性差。本文针对总皂苷的提取方式、以及测定过程中的参数进行研究，建立了保健食品中人参总皂苷的测定方法。
1仪器、材料与试药
岛津UV2450紫外分光光度计；瑞士梅特勒XS105DU电子天平；上海一恒电热恒温水浴锅；人参皂苷Re(中检所，批号110754-200822，含量88.8%)；儿童装高丽红参液，舒灵胶囊，舒慰快牌胃肠液均购自市场；水为蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1供试品溶液的制备
固体试样：称取1g样品，置100mL容量瓶中，加水80mL，超声提取30min，放冷至室温，用水定容至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25mL，进行萃取。
液体试样：吸取试样10mL至分液漏斗中(含乙醇的保健食品，水浴挥尽乙醇)，加水至约25mL，进行萃取。
在已处理好的试样中加入20mL水饱和正丁醇，振摇萃取3次，取正丁醇层(必要时可离心)，合并提取液，用20mL氨试液洗涤3次，置蒸发皿中100℃水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至25mL量瓶中，甲醇定容，即得。
2.2标准曲线的绘制
分别精密吸取人参皂苷Re标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL于10mL具塞比色管中，水浴挥干溶剂，加入0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液，再加入0.8mL高氯酸，使残渣溶解，于60℃水浴加热10min，冰浴冷却后，精密加入冰乙酸5mL，摇匀，于560nm波长处测定吸光度。取供试品溶液1mL于10mL具塞比色管中，自“水浴挥干溶剂”起操作。
3方法学考察
3.1线性关系
取人参皂苷Re对照品0.01804g，置100mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，作为标准溶液，精密量取标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL分别置10mL比色管中，水浴蒸干，显色，以对照品的质量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：y=4.4807x－0.0886，r=0.9997。结果表明，人参皂苷Re对照品质量在0.0722～0.2165mg之间与吸光度呈良好的线性关系。
3.2萃取次数
取舒灵胶囊、儿童装高丽红参液，按2.1制备样品水提取液，用水饱和正丁醇分别萃取3、4、5次，结果表明，萃取3次可将人参总皂苷提取完全(表1)。
表1萃取次数比较结果
3.3热稳定性考察
由于正丁醇沸点较高，为此对人参皂苷的热稳定性进行考察，以便选取合适的水浴温度。取人参皂苷Re标准溶液0.6mL，分别按60℃、100℃水浴蒸干、100℃水浴蒸干后继续放置30min处理，测定结果分别为0.663、0.658、0.653，表明人参皂苷的热稳定性良好，因此水浴温度选为100℃。
3.4显色稳定性
取人参皂苷Re标准溶液0.3mL，显色后每隔10min测定其吸光度，结果表明，显色后的紫红色溶液不稳定，吸光度呈下降趋势，因此显色完成后需在10min内完成测定。
3.5重复性试验
取舒灵胶囊按2.1下方法制备6份供试品溶液，分别测定，结果表明本方法重复性良好(表2)。
表2重复性试验结果
4讨论
本方法通过采用正丁醇溶液萃取，氨试液洗涤除杂的方法富集人参总皂苷，并直接在比色管中显色，减少转移步骤，同时考察了实验过程中的萃取次数、热稳定性、显色稳定性等参数，使得分析过程更标准化，具有除杂效果好、重复性好，操作性强的特点，经过方法学考察，结果均能满足测定需求，因此可作为保健食品中总皂苷含量的测定方法。
参考文献
[1]《天然药物化学》肖崇厚主编，上海科学技术出版社1987:298
[2]刘华刚、肖柳华、陆中海等含人参皂苷的中药制剂含量测定研究进展[J]广西中医学院学报2001,18(1)：106-108
[3]徐国治、胡国栋、姜平等五补液中人参皂甙含量测定[J]甘肃中医学院学报1994,11(4)：41-42
[4]黄勇、许倩兮、彭光华藏药雪灵芝中总皂苷含量的测定[J]中国药师2010，13(1)：94-96
[5]王盛凉、徐宁银食品中西洋参总皂甙的比色测定法[J]食品科学1996,17(5)：46-48
[6]《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中华人民共和国卫生部2003：306