导读:本文包含了磷酸酰肌醇激酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:胰岛素,血糖稳态,毒蕈碱型胆碱能受体,六磷酸肌醇激酶
磷酸酰肌醇激酶论文文献综述
张隽[1]（2019）在《GPCR信号依赖的六磷酸肌醇激酶1（IP6K1）磷酸化在胰岛素分泌中的作用探究》一文中研究指出胰岛素是一种由胰岛β细胞分泌的多肽激素,对维持血糖浓度、调节机体葡萄糖稳态起重要作用。分泌至血液中的胰岛素量异常是糖尿病发病的根本原因。六磷酸肌醇(IP6)是一种在细胞中广泛存在、功能多样的高级磷酸肌醇,能被六磷酸肌醇激酶(IP6Ks)焦磷酸化生成焦磷酸肌醇(IP7)。已有研究表明,IP6K1与IP7能提高胰岛β细胞分泌能力,且IP6K1基因敲除小鼠中血清胰岛素含量显着低于野生型。这些结果均暗示IP6K1在体内可能具有调控胰岛素分泌的作用,但具体机制尚不明确。本文从蛋白翻译后修饰数据库中获得IP6K1磷酸化位点相关信息,从中受到启发,认为IP6K1磷酸化或可调控IP6K1蛋白的肌醇激酶活性,影响IP7的生成,从而影响胰岛β细胞分泌能力。为验证该假设,本文在体内外探究了 IP6K1磷酸化对其肌醇激酶活性的影响;并以HEK293细胞、Ins-1E大鼠胰岛癌细胞及C57/BL21小鼠为模型,探明了在生理条件下,IP6K1受何种因素刺激,经过怎样的信号通路激活其磷酸化。在此基础上还研究了该信号的天然来源,发现IP6K1在神经调控腺体及腺细胞分泌活动中的重要作用。实验结果表明,当机体需要更多胰岛素维持血糖稳态时,迷走神经背核(dorsal motor nucleus,DMV)激活后通过副交感神经系统的迷走神经将信号传输至胰腺中的神经末梢,释放乙酰胆碱。在胰岛β细胞中的毒蕈碱型乙酰胆碱受体与乙酰胆碱结合后,通过M3R-Gq/11-PLC-DAG-nPKC-IP6K1信号通路使IP6K1磷酸化水平提高,促进其酶活,在胞内合成更多IP7,进而促进胰岛素分泌。这种神经调控β细胞胰岛素分泌的机制与葡萄糖引起的胰岛素释放共同维持机体内血糖稳态。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2019-06-01）
李诗恒[2]（2019）在《I型γ亚型磷酸磷脂酰肌醇激酶促进叁阴性乳腺癌转移的机制研究》一文中研究指出意义:有临床研究表明I型γ亚型磷酸磷脂酰肌醇激酶(Type I phosphatidylinositol phosphate kinase,PIPKIγ)通过促进肿瘤转移而导致乳腺癌病人预后差。PIPKIγ高表达在淋巴结转移的乳腺癌病人中五年和十年的生存率明显低于低表达或者不表达的患者。在侵袭性乳腺癌的病人中PIPKIγ表达也较高。PIPKIγ在肿瘤细胞中主要调控细胞的迁移,作为肿瘤转移的初始步骤,我们推测PIPKIγ是主要通过这一机制来促进肿瘤细胞转移的。而PIPKIγ共有六个亚型,其中亚型2(Type I phosphatidylinositol phosphate kinase isoform2,PIPKIγ_i2)主要作用于黏着斑并调节黏着斑更新。因此PIPKIγ_i2可能作为导致肿瘤转移的主要因素。目的:本研究旨在探究是否是PIPKIγ中亚型2在转移过程中起主要作用,并且为供预测叁阴性乳腺癌的预后更精确的生物学标记物供证据。方法:(1)细胞学实验:利用人类叁阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和鼠源叁阴性乳腺癌细胞系4T1作为研究主要模型,并相应分别敲除pan-PIPKIγ和PIPKI_i2。对其细胞特性进行检测。MTT比色实验检测肿瘤细胞增殖,基质降解实验检测肿瘤细胞的侵袭性。(2)生物化学实验:为检测敲除pan-PIPKIγ或PIPKIγ_i2细胞系内与肿瘤细胞生长和侵袭相关的信号通路丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Protein kinase B,AKT)和细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated proteinkinase 1/2,ERK1/2)是否受影响,应用western blot检测AKT和ERK1/2的磷酸化情况,以及金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9),上皮细胞向间质细胞转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)标记物的表达。(3)体内实验:本研究中,为探究是否敲除PIPKIγ_i2也可以与敲除pan-PIPKIγ作用一致,我们应用BALB/C小鼠来构建叁阴性乳腺癌肿瘤模型。分别将表达sh NC,sh PIPKIγ,sh PIPKIγ_i2的4T1细胞稳转细胞系注射进入小鼠乳腺脂肪垫内。观察小鼠肿瘤的生长曲线、肿瘤大小以及肺转移情况。(4)组织化学实验:检测肿瘤组织中的缺氧情况、肿瘤相关巨噬细胞的浸润,肿瘤内血管生成情况以及程序性细胞死亡蛋白-1配体(Programmed death ligand 1,PD-L1)表达情况,利用免疫组织化学和免疫荧光的方法对相关的标记物进行检测。结果:体外实验中,我们特异性地在鼠源叁阴性乳腺癌细胞4T1和人类叁阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中敲低PIPKIγ_i2并分析其生物学性状。正如所预期的,敲低PIPKIγ_i2可降低肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且可与敲低pan-PIPKIγ的降低程度一致。敲低PIPKIγ_i2与敲低PIPKIγ一致在MDA-MB-231和4T1细胞中AKT和ERK1/2,MMP9的表达也有所下降。AKT和ERK1/2的磷酸化水平在叁阴性乳腺癌中增高,促进肿瘤细胞增殖和迁移。MMP9也被认为是肿瘤细胞侵袭过程中降解周围基质的主要的酶,高表达MMP9往往会对肿瘤产生不良预后。然而敲低PIPKI_i2在抑制4T1肿瘤在体内转移和进展中并没有显着影响。在肿瘤组织中,敲低PIPKI_i2和对照组在肿瘤生长、缺氧状况、巨噬细胞浸润和血管生成方面以及肿瘤微环境内PD-L1表达量的状态相同。但是在敲低pan-PIPKIγ的肿瘤组织中以上指标均受到显著的抑制。进一步的研究表明仅敲除PIPKIγ_i2与敲除PIPKIγ所有的亚型不同对于上皮细胞向间质细胞转化(EMT)标记物以及非贴壁性生长并没有显着的抑制作用。本研究在4T1细胞中检测了上皮细胞性标记物紧密连接蛋白-1(Tight junction protein-1,ZO-1)和E-cadherin,以及间质细胞性标记物vimentin和snail。其中敲低pan-PIPKIγ的4T1细胞ZO-1和E-cadherin有所上升,vimentin有轻微下降,在叁阴性乳腺癌中重要的EMT转录因子snail显着下降。然而单独敲除PIPKIγ_i2的4T1细胞并没有引起相一致的EMT的标记物改变。同时,在敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2的MDA-MB-231细胞中snail的表达也是如此。在乳腺癌细胞中相比与其他E盒结合锌指蛋白(Zinc finger binding homeobox 1,ZEB)和Twist家族,snail在乳腺癌细胞的转移中起到更加显着的作用。过表达snail或者敲低snail在接种乳腺癌细胞的小鼠中分别可增加或减少小鼠的肺部转移灶的数量。因此,PIPKIγ_i2虽然是肿瘤细胞迁移和增殖所必需的,但是在叁阴性乳腺癌肿瘤转移的过程中这些特征并不是起到决定性的。肿瘤细胞的转移涉及到多方面的因素,在本研究中,主要检测了缺氧、巨噬细胞浸润、肿瘤内血管生成以及上皮细胞向间质细胞转化相关标记物。由以上结果,我们推测PIPKIγ_i2的敲除并不足以抑制肿瘤的转移,可能有PIPKIγ的亚型协同作用来抑制肿瘤细胞的转移。结论:(1)敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2均可以降低人类叁阴性乳腺癌MDA-MB-231和鼠源叁阴性乳腺癌细胞4T1的增殖速率和迁移能力,并且AKT与ERK1/2的磷酸化降低,示pan-PIPKIγ和PIPKIγ_i2可能通过调节AKT与ERK1/2两条信号通路来影响肿瘤细胞的增殖与迁移的。(2)敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2均可以降低鼠源叁阴性乳腺癌细胞4T1的侵袭能力,并且MMP9的表达在敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2的4T1细胞中均减少。(3)在接种分别表达shNC,sh PIPKIγ,sh PIPKIγ_i2的4T1细胞的荷瘤小鼠中,敲低pan-PIPKIγ相比于对照组可降低肿瘤增长速率和肺部转移,而仅敲低PIPKIγ_i2的肿瘤相比于对照组无变化。(4)仅敲低PIPKIγ_i2的肿瘤增长速率和肺部转移程度并未改善的机制,与肿瘤微环境和肿瘤细胞本身的EMT程度有关。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-05-01）
李莘,牛勃,王建华[3]（2018）在《Ⅰ型磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶在神经发育性疾病中的作用及其机制研究》一文中研究指出Ⅰ型磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶(typeⅠphosphatidylinositol 4-phosphate 5-kinase,PIP5KIs)是体内合成4,5-二磷酸磷脂酰肌醇[phosphatidylinositol4,5-bisphosphate,PI(4,5)P2]的关键酶,PIP5KIs催化磷酸化4-磷酸磷脂酰肌醇(PI4P)肌醇环上第(本文来源于《发育医学电子杂志》期刊2018年02期）
匡巍,余昌胤[4]（2018）在《磷脂酰肌醇-3磷酸激酶/AKT/雷帕霉素靶蛋白信号通路参与中枢神经损伤保护与修复的研究进展》一文中研究指出中枢神经细胞对各种损伤刺激耐受差,损伤后神经修复困难。因此促进神经保护增强神经再生能力已成为神经治疗关键。磷脂酰肌醇-3磷酸激酶/AKT/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路是调节细胞周期的重要通路,在细胞增殖、生长、分化过程中起中心调控作用,在神经损伤过程中通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路可减少神经细胞死亡,促进神经修复。该文对PI3K/AKT/mTOR信号通路在中枢神经损伤保护作用、修复机制及可能风险作一综述,探讨将PI3K/AKT/mTOR信号通路作为靶点治疗中枢神经疾病。(本文来源于《安徽医药》期刊2018年02期）
王永荣,刘飞,许元富[5]（2018）在《六磷酸肌醇激酶(IP6Ks)的生物学功能及其在疾病中的作用》一文中研究指出可溶性和脂质状态的磷酸肌醇在真核细胞中广泛存在,它们在细胞的发育和生物学功能中起到重要作用。其中,六磷酸肌醇激酶(inositol hexaphosphate kinases,IP6Ks)是焦磷酸肌醇合成的限速酶,它可以在肌醇环第一位、第叁位或第五位已有的磷酸基团上再加一个磷酸基团合成焦磷酸肌醇,例如5-焦磷酸–五磷酸肌醇(5-pyrophosphate inositol pentaphosphate,IP_7、PP-IP_5)和1,3-二焦磷酸肌醇–四磷酸(bis-diphosphoinositol tetrakisphosphate,IP_8、[PP]_2-IP_4)。IP6Ks通过以上过程在DNA修复、染色体重组、细胞死亡、凝血作用、造血调控、免疫调控、癌症进展等方面发挥作用,因而受到越来越多的重视。该文基于近期IP6Ks的相关研究进展,就IP6Ks在细胞功能调控以及疾病治疗中的作用作一综述。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2018年01期）
孙冲,姚远,耿梦婷,王运林,尚璐[6]（2016）在《木薯磷脂酰肌醇磷酸5-激酶PIP5K9基因的克隆及表达分析》一文中研究指出磷脂酰肌醇磷酸5-激酶9(PIP5K9)参与负调控植物碱性/中性转化酶的活性。本研究根据拟南芥PIP5K9基因序列信息,BLAST搜索木薯基因组数据库,找到木薯PIP5K9基因序列信息,利用RT-PCR方法克隆了木薯PIP5K9基因,命名为Me PIP5K9。生物信息学分析结果表明,该基因全长5 421 bp,包含8个外显子和7个内含子,CDS区全长2 496 bp,编码831个氨基酸。蛋白的N端包含8个MORN结构域,C端具有PIPKc结构域。序列比对和系统进化树分析结果表明,Me PIP5K9与麻风树PIP5K9亲缘关系最近,其次为蓖麻。基因表达分析发现,Me PIP5K9在叶片中表达量最高,其次是须根、茎和花,在块根和果中的表达量最低。本研究分离鉴定了木薯PIP5K9基因,分析了该基因的生物学信息及在不同组织中的表达模式,为进一步探讨其调控木薯碱性/中性转化酶的活性奠定基础。(本文来源于《分子植物育种》期刊2016年09期）
高楚云[7]（2016）在《多磷酸肌醇激酶MoAsp1在稻瘟病菌中的功能研究》一文中研究指出水稻是我国原产历史最悠久的粮食作物,也是世界最主要的粮食作物之一。全世界有近叁分之一的人口以大米为主食,水稻对世界人民粮食民生问题的重要性可见一斑。稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病作为世界叁大水稻病害之一,其流行之广、危害之大,无时无刻不牵动着世界研究者的眼球。目前,世界主流的防治方法是水稻品种改良和化学防治,但是由于稻瘟病菌的广泛传播,极易引起病菌致病型突变以及抗药性群体快速扩张,导致目前稻瘟病防治战略举步维艰。因此,世界稻瘟病研究者都在积极寻找,能够从致病机制方面根治稻瘟病的方法,从而为世界粮食病害提供新的防治策略,同时为新型杀菌剂的开发提供候选靶标。本论文主要对多磷酸肌醇激酶在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能进行分析,研究结果如下:在酵母的研究中发现,酵母Vip1通过对多磷酸肌醇(IP6)的磷酸化作用直接参与细胞内焦磷酸肌醇(IP7或IP8)的合成,后者是多种细胞过程的胞内高能信号分子。本文的研究在稻瘟病菌体内鉴定到一个酵母VIP1的同源基因MoASP1,经过预测,发现该基因氨基端具有保守的”rimK”ATP-grasp功能域和一个羧基端类磷酸酶功能域。通过对基因敲除突变体表型分析我们发现,与野生型Guy11及基因互补菌株相比,突变体菌株的营养生长、无性繁殖和致病力均受影响。同时,突变体菌株对细胞壁胁迫和氧化胁迫的应答能力也异常于野生型。这说明MoASP1基因对稻瘟病菌的生长发育起着重要作用。酵母Vip1及一些同源蛋白已被报道出主要是通过影响微管细胞骨架这一保守的生物学特征来参与真菌的生长发育。其中,由Vip1参与合成的焦磷酸肌醇对+Tips蛋白复合体的中心——EB1家族蛋白的调控作用具有浓度依赖性和胞内环境依赖性,EB1蛋白对微管尖端及尖端蛋白起着关键作用。在本文对稻瘟病菌MoAsp1敲除突变体的研究中,发现MoAsp1对微管蛋白同样具有调控作用,并以此影响稻瘟病菌的极性生长,从而引起突变体致病能力下降。(本文来源于《南京农业大学》期刊2016-06-01）
王红鸾,汪俊,郭韶梅,蔡金莲,付强[8]（2016）在《磷酸酰肌醇-3激酶γ抑制剂AS605240对治疗呼吸机相关性肺损伤大鼠的影响》一文中研究指出目的:建立呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury,VALI)大鼠模型,了解磷酸酰肌醇-3激酶γ(phosphatidylinositol 3-hydroxy kinase gamma,PI3Kγ)小分子抑制剂AS605240对其的影响,探讨可能的作用机制。方法:将30只SD大鼠随机均分为3组:对照组、VALI模型组和AS605240处理组。对照组不作机械通气处理;VALI模型组行大潮气量(40 ml/kg)机械通气;AS605240处理组,机械通气前10 min静脉预注AS605240 20 mg/kg。大鼠机械通气4 h后放血处死,计算肺湿干重(W/D)比值。收集肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid,BALF),测定其总蛋白含量并行白细胞(WBC)计数。采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8及IL-10的细胞因子浓度,比色法测定血清和BALF中超氧化物歧化酶(superoxide dismu-tase,SOD)活性及丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)浓度。结果:(1)与对照组相比,AS605240处理组与VALI模型组其W/D、WBC计数、总蛋白含量均升高(均P<0.05);AS605240处理组与VALI模型组相比,AS605240组W/D、WBC计数、TP含量均降低(均P<0.05)。(2)与对照组相比,AS605240处理组与VALI模型组大鼠BALF和血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平和MDA活性均明显升高、而IL-10和SOD浓度则明显降低(均P<0.05)。与VALI模型组相比,AS605240组BALF及血清中TNF-α、IL-6、IL-8和MDA活性降低,IL-10和SOD浓度增高(均P<0.05)。结论:AS605240能够有效防治VALI,其机制可能与抑制各种炎性因子、抑制肺部微循环通透性的增加及减少内脂质过氧化等有关。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2016年04期）
占华东[9]（2015）在《植物多磷酸肌醇激酶基因（IPK2）的功能研究》一文中研究指出多磷酸肌醇激酶(IPK2/IPMK)是IP3依赖的多磷酸肌醇合成途径中一个极为关键的组分,它能够在6位和3位磷酸化Ins(1,4,5)P3生成Ins(1,4,5,6)P4和Ins(1,3,4,5,6)P5。然而值得注意的是,IPK2最初是作为酵母精氨酸代谢转录调节因子而被鉴定出来的。IPK2能够以分子伴侣的方式促进并稳定ArgR-Mcm1转录复合体形成,进而参与酵母精氨酸合成与降解相关基因的转录调控。最新研究证实IPK2介导酵母精氨酸转录调控与其激酶活性无关,因此IPK2/IPMK是一种多功能蛋白,它还可以通过磷酸肌醇非依赖的方式来起作用。到目前为止,IPK2/IPMK已知的磷酸肌醇非依赖途径有两种：(1)通过磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)活性介导的磷脂酰肌醇信号途径。酵母和哺乳动物IPK2/IPMK不仅能够催化磷酸肌醇代谢,而且还具有P13K活性。(2)通过与细胞内关键蛋白因子直接相互作用的途径。近年来哺乳动物IPMK被发现能够通过与细胞内关键蛋白因子,如mTOR和AMPK相互作用来调控细胞能量和物质代谢。拟南芥多磷酸肌醇激酶是第一个被报道出来的植物IPK2蛋白,它由两个高度相似的成员AtIPK2α和AtIPK2β组成。过量表达研究表明AtIPK2β可以促进拟南芥分枝和提高烟草对盐、旱以及氧化胁迫抵抗能力,然而AtIPK2究竟在植物体内起什么作用还不知道。AtIPK2调控植物生长发育是否依赖其激酶活性也更是不清楚。本研究从突变体入手对AtIPK2α和AtIPK2β的生理功能进行了系统的分析,并且进一步就其功能与激酶活性的关系进行了探究。另外,本研究还对单子叶模式植物水稻的多磷酸肌醇激酶基因(OsIPK2)的几个T-DNA插入突变体进行了鉴定。此外,通过异源表达的方式对OsIPK2在拟南芥生长发育以及非生物逆境应答中的作用进行了初步研究。主要研究结果如下：1. atipk2aatipk2β双突变致死：由于atipk2α和atipk2β单突变体都没有表型,于是对这两个材料进行了杂交。然而在F2代群体中并没有筛选到基因型为atipk2α/atipk2α;atipk2β/atipk2β的双突变植株,而且在atipk2α/atipk2α;AtIPK2β/ atipk2β和AtIPK2α/atipk2α;atipk2β/atipk2β材料的自交后代中依然无法获得双突变,从而证实atipk2aatipk2β双突变致死。2. atipk2aatipk2β双突变雄配子体传递异常：正反交实验表明无论是atipk2α/ atipk2α;AtIPK2β/atipk2β还是AtIPK2α/atipk2α;atipk2β/atipk2β,当它们作为母本的时候,atipk2aatipk2β都能够正常传递到下一代。然而当atipk2α/atipk2α;AtIPK2β/ atipk2β和AtIPK2α/atipk2α;atipk2β/atipk2β作为父本的时候,atipk2aatipk2β的遗传传递则被严重抑制,因此双突变致死特异性与雄配子体相关。互补实验证实atipk2aatipk2β双突变致死是由AtIPK2基因突变引起。3. atipk2aatipk2β双突变花粉发育和花粉管导向异常：细胞学分析表明约20%的atipk2aatipk2β双突变花粉不能正常形成,这些花粉要么因内容物萎缩而扭曲变形,要么因内容物缺失而空泡化。需要指出的是大部分双突变花粉是能够正常形成的,它们具有正常的活力和细胞核组成,而且花粉萌发和花粉管生长也都能够正常进行。然而这些atipk2aatipk2β双突变花粉管向胚囊的导向生长出现异常,它们不能正常进入珠孔完成受精。4.AtIPK2α和AtIPK2β参与胚胎发生过程：在atipk2α/atipk2α;AtIPK2β/atipk2β和AtIPK2α/atipk2α;atipk2β/atipk2β材料的自交果荚中能够观察到多种类型的异常种子。与此一致,胚胎透明显示当大部分atipk2α/atipk2α;AtIPK2β/atipk2β和AtIPK2α/atipk2α;atipk2β/atipk2β自交果荚种子进入鱼雷胚的时候,部分种子因胚胎发育异常而停滞在心形期或心形期之前。单胚胎Genotyping-PCR分析表明除atipk2aatipk2β双突变致死外,部分atipk2α/atipk2α;AtIPK2β/atipk2β和AtIPK2α/ atipk2α; atipk2β/atipk2β胚胎的发育也不能正常进行。5. AtIPK2调控雄配子和胚胎发生与其激酶活性相关：利用氨基酸定点突变技术构建了丧失催化活性以及特异性抑制3位激酶活性的突变型AtIPK2β*。在自身启动子和Lat52花粉特异性启动子的驱动下,将这些突变型AtIPK2β*连同野生型AtIPK2β一起导入到AtIPK2α/atipk2α;atipk2β/atipk2β材料。分析表明只有野生型AtIPK2β能够互补双突变致死,激酶活性丧失和3位激酶活性被抑制的AtIPK2β*则不能,从而证实双突变致死与AtIPK2激酶活性直接相关。6.鉴定了四个osipk2 T-DNA插入突变体：从水稻突变体库购买了四个标注为OsIPK2基因的T-DNA插入突变体(编号分别为03Z11CQ55、04Z11MC60、 PFG_2C40149以及PFG_2C40126)。其中前叁个突变材料要么因为没有表型,要么因为没有实际插入而无法使用。Genotyping-PCR证实PFG_2C40126材料在OsIPK2的5'UTR存在T-DNA插入,田间生长的PFG_2C40126材料表现出分蘖增加和结实率下降,不过令人遗憾的是其表型和基因型不能共分离。7.异源表达OsIPK2影响拟南芥生长发育：由于借助水稻突变体来研究OsIPK2的生理功能暂时无法实现,于是通过拟南芥异源表达的方式对OsIPK2的功能进行了分析。与野生型相比,35S:OsIPK2转基因拟南芥在多个发育过程(包括主根生长、莲座叶形态以及植株大小)都表出现不同程度的改变。8.异源表达OsIPK2提高拟南芥对盐旱胁迫的抵抗能力：RT-PCR分析表明OsIPK2是一个压力应答基因,其表达受ABA和盐处理诱导,进一步分析发现OsIPK2能显着提高拟南芥抵抗盐旱胁迫的能力。综上所述,AtIPK2α和AtIPK2β能够以功能冗余性的方式调控雄配子体和胚胎发生,而且这个过程依赖其磷酸肌醇激酶活性,另外异源表达分析也为OsIPK2的内源功能研究提供了参考。(本文来源于《武汉大学》期刊2015-04-01）
刘昊刚,辛永宁,姜曼,宣世英[10]（2014）在《磷脂酰肌醇-4-激酶和磷脂酰肌醇-4-磷酸在不同病毒复制中作用的研究进展》一文中研究指出诸多病毒对宿主脂质代谢、脂质膜的运输以及脂质介导的信号转导均会产生影响。磷酸肌醇(phosphoinositides,PIs)是一类参与以上几种细胞过程的一种磷脂。磷脂酰肌醇是PIs的基本骨架,磷脂酰肌醇5个羟基中3、4、5位羟基可被激酶可逆的磷酸化后总共得到7种PIs,包括磷脂酰肌醇-3-磷酸(phosphatidylinositol-3-phosphate,PI3P)、磷脂酰肌醇-4-磷酸(phosphatidylinositol 4-phosphate,(本文来源于《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》期刊2014年05期）
磷酸酰肌醇激酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
意义:有临床研究表明I型γ亚型磷酸磷脂酰肌醇激酶(Type I phosphatidylinositol phosphate kinase,PIPKIγ)通过促进肿瘤转移而导致乳腺癌病人预后差。PIPKIγ高表达在淋巴结转移的乳腺癌病人中五年和十年的生存率明显低于低表达或者不表达的患者。在侵袭性乳腺癌的病人中PIPKIγ表达也较高。PIPKIγ在肿瘤细胞中主要调控细胞的迁移,作为肿瘤转移的初始步骤,我们推测PIPKIγ是主要通过这一机制来促进肿瘤细胞转移的。而PIPKIγ共有六个亚型,其中亚型2(Type I phosphatidylinositol phosphate kinase isoform2,PIPKIγ_i2)主要作用于黏着斑并调节黏着斑更新。因此PIPKIγ_i2可能作为导致肿瘤转移的主要因素。目的:本研究旨在探究是否是PIPKIγ中亚型2在转移过程中起主要作用,并且为供预测叁阴性乳腺癌的预后更精确的生物学标记物供证据。方法:(1)细胞学实验:利用人类叁阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和鼠源叁阴性乳腺癌细胞系4T1作为研究主要模型,并相应分别敲除pan-PIPKIγ和PIPKI_i2。对其细胞特性进行检测。MTT比色实验检测肿瘤细胞增殖,基质降解实验检测肿瘤细胞的侵袭性。(2)生物化学实验:为检测敲除pan-PIPKIγ或PIPKIγ_i2细胞系内与肿瘤细胞生长和侵袭相关的信号通路丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Protein kinase B,AKT)和细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated proteinkinase 1/2,ERK1/2)是否受影响,应用western blot检测AKT和ERK1/2的磷酸化情况,以及金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9),上皮细胞向间质细胞转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)标记物的表达。(3)体内实验:本研究中,为探究是否敲除PIPKIγ_i2也可以与敲除pan-PIPKIγ作用一致,我们应用BALB/C小鼠来构建叁阴性乳腺癌肿瘤模型。分别将表达sh NC,sh PIPKIγ,sh PIPKIγ_i2的4T1细胞稳转细胞系注射进入小鼠乳腺脂肪垫内。观察小鼠肿瘤的生长曲线、肿瘤大小以及肺转移情况。(4)组织化学实验:检测肿瘤组织中的缺氧情况、肿瘤相关巨噬细胞的浸润,肿瘤内血管生成情况以及程序性细胞死亡蛋白-1配体(Programmed death ligand 1,PD-L1)表达情况,利用免疫组织化学和免疫荧光的方法对相关的标记物进行检测。结果:体外实验中,我们特异性地在鼠源叁阴性乳腺癌细胞4T1和人类叁阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中敲低PIPKIγ_i2并分析其生物学性状。正如所预期的,敲低PIPKIγ_i2可降低肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且可与敲低pan-PIPKIγ的降低程度一致。敲低PIPKIγ_i2与敲低PIPKIγ一致在MDA-MB-231和4T1细胞中AKT和ERK1/2,MMP9的表达也有所下降。AKT和ERK1/2的磷酸化水平在叁阴性乳腺癌中增高,促进肿瘤细胞增殖和迁移。MMP9也被认为是肿瘤细胞侵袭过程中降解周围基质的主要的酶,高表达MMP9往往会对肿瘤产生不良预后。然而敲低PIPKI_i2在抑制4T1肿瘤在体内转移和进展中并没有显着影响。在肿瘤组织中,敲低PIPKI_i2和对照组在肿瘤生长、缺氧状况、巨噬细胞浸润和血管生成方面以及肿瘤微环境内PD-L1表达量的状态相同。但是在敲低pan-PIPKIγ的肿瘤组织中以上指标均受到显著的抑制。进一步的研究表明仅敲除PIPKIγ_i2与敲除PIPKIγ所有的亚型不同对于上皮细胞向间质细胞转化(EMT)标记物以及非贴壁性生长并没有显着的抑制作用。本研究在4T1细胞中检测了上皮细胞性标记物紧密连接蛋白-1(Tight junction protein-1,ZO-1)和E-cadherin,以及间质细胞性标记物vimentin和snail。其中敲低pan-PIPKIγ的4T1细胞ZO-1和E-cadherin有所上升,vimentin有轻微下降,在叁阴性乳腺癌中重要的EMT转录因子snail显着下降。然而单独敲除PIPKIγ_i2的4T1细胞并没有引起相一致的EMT的标记物改变。同时,在敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2的MDA-MB-231细胞中snail的表达也是如此。在乳腺癌细胞中相比与其他E盒结合锌指蛋白(Zinc finger binding homeobox 1,ZEB)和Twist家族,snail在乳腺癌细胞的转移中起到更加显着的作用。过表达snail或者敲低snail在接种乳腺癌细胞的小鼠中分别可增加或减少小鼠的肺部转移灶的数量。因此,PIPKIγ_i2虽然是肿瘤细胞迁移和增殖所必需的,但是在叁阴性乳腺癌肿瘤转移的过程中这些特征并不是起到决定性的。肿瘤细胞的转移涉及到多方面的因素,在本研究中,主要检测了缺氧、巨噬细胞浸润、肿瘤内血管生成以及上皮细胞向间质细胞转化相关标记物。由以上结果,我们推测PIPKIγ_i2的敲除并不足以抑制肿瘤的转移,可能有PIPKIγ的亚型协同作用来抑制肿瘤细胞的转移。结论:(1)敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2均可以降低人类叁阴性乳腺癌MDA-MB-231和鼠源叁阴性乳腺癌细胞4T1的增殖速率和迁移能力,并且AKT与ERK1/2的磷酸化降低,示pan-PIPKIγ和PIPKIγ_i2可能通过调节AKT与ERK1/2两条信号通路来影响肿瘤细胞的增殖与迁移的。(2)敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2均可以降低鼠源叁阴性乳腺癌细胞4T1的侵袭能力,并且MMP9的表达在敲低pan-PIPKIγ和PIPKI_i2的4T1细胞中均减少。(3)在接种分别表达shNC,sh PIPKIγ,sh PIPKIγ_i2的4T1细胞的荷瘤小鼠中,敲低pan-PIPKIγ相比于对照组可降低肿瘤增长速率和肺部转移,而仅敲低PIPKIγ_i2的肿瘤相比于对照组无变化。(4)仅敲低PIPKIγ_i2的肿瘤增长速率和肺部转移程度并未改善的机制,与肿瘤微环境和肿瘤细胞本身的EMT程度有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
磷酸酰肌醇激酶论文参考文献
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