导读:本文包含了脂动激素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:粘虫,脂动激素基因,克隆,表达模式
脂动激素论文文献综述
解幸承,张蕾,程云霞,罗礼智,仵均祥[1]（2018）在《粘虫脂动激素基因MsepAKH1的克隆与成虫期表达模式分析》一文中研究指出为明确脂动激素基因AKH在粘虫Mythimna separata(Walker)能源代谢过程中的作用,采用RT-PCR和RACE技术克隆得到粘虫脂动激素基因MsepAKH1的cDNA全长,并通过实时荧光定量PCR技术测定该基因在成虫期的组织与发育阶段表达模式。结果表明,粘虫脂动激素基因MsepAKH1的cDNA序列全长为449 bp,GenBank登录号为KP979739.1,开放阅读框为207 bp,编码68个氨基酸,具有昆虫脂动激素基因家族典型的结构特征;预测该基因编码的MsepAKH1蛋白分子量为7.61 kD,等电点为8.46,MsepAKH1的氨基酸序列与烟草天蛾Manduca sexta、二化螟Chilo suppressalis、小菜蛾Plutella xylostella、棉铃虫Helicoverpa armigera、家蚕Bombyx mori的AKH氨基酸序列同源性较高。MsepAKH1基因在粘虫初羽化雌蛾不同组织间的表达量差异显着,主要在头部和飞行肌内表达,分别约为同日龄雌蛾脂肪体内表达量的15.4倍与8.1倍,在脂肪体、卵巢与中肠内的表达量显着降低。对不同日龄雌蛾头部和飞行肌内的表达量检测发现,在7日龄雌蛾头部和3日龄雌蛾飞行肌内的表达量分别显着高于其它日龄雌蛾相同组织中的表达量,分别约为初羽化雌蛾相同组织表达量的2.4倍与1.6倍。表明MsepAKH1基因的表达因粘虫雌蛾组织与日龄间的不同而呈现动态变化。(本文来源于《植物保护学报》期刊2018年03期）
解幸承[2]（2016）在《粘虫脂动激素基因的克隆与成虫期表达模式分析》一文中研究指出粘虫Mythimna separata(Walker)是一种典型的季节性远距离迁飞害虫,也是严重威胁我国粮食作物生产安全的重大害虫,广泛分布于亚洲和澳洲的多个国家和地区,每年在我国南北往返迁飞危害。近年来,由于农田生态系统变化以及粘虫的环境适应能力增强,粘虫在我国的发生危害呈现加重趋势,尤其是2012和2013年在全国范围暴发成灾。粘虫的远距离迁飞习性是其防治较为困难的主要原因,而能源物质代谢则构成了迁飞动力的能量基础。脂动激素(Adipokinetic Hormone,AKH)是一类主要由昆虫的心侧体腺细胞合成、储存并释放到血淋巴的神经肽,在能源物质代谢、飞行与生殖、逆境生理及免疫反应等方面具有重要的调控作用。粘虫的飞行肌具有善于飞行的构造,糖类和脂类为粘虫的飞行能源物质,但有关粘虫能源代谢调控的分子机制尚未见报道。本文以粘虫雌蛾为研究对象,采用RT-PCR和RACE技术对粘虫脂动激素基因进行了全长克隆,并通过实时荧光定量PCR技术分析了相应的表达模式。主要研究结果如下:1、采用RT-PCR和RACE技术扩增获得了2个粘虫脂动激素基因的cDNA序列全长,分别被命名为MsepAKH1(GenBank登录号:KP979739.1)与MsepAKH2(GenBank登录号:KX096711.1)。粘虫脂动激素基因MsepAKH1的cDNA序列全长为449 bp,其中开放阅读框为207 bp,编码68个氨基酸,预测的蛋白分子量为7.61 kDa,理论等电点为8.46。粘虫脂动激素基因MsepAKH2的cDNA序列全长为668 bp,包含216 bp的开放阅读框,编码71个氨基酸,预测的蛋白分子量为7.78 kDa,理论等电点为6.13。蛋白保守区分析发现,MsepAKH1与MsepAKH2均含有典型的脂动激素基因家族蛋白结构域,即在成熟肽的第4位、第8位、第9位分别为苯丙氨酸、色氨酸、甘氨酸残基。2、采用生物信息学软件进行序列比对和进化树构建。结果表明,MsepAKH1和烟草天蛾MsexAKH、棉铃虫HarmAKH1、二化螟CsupAKH1、小菜蛾PxylAKH1具有较高的氨基酸序列一致性,均达53%以上,与烟草天蛾MsexAKH的序列一致性最高达56.9%。MsepAKH2和棉铃虫HarmAKH2、小菜蛾PxylAKH2、二化螟CsupAKH2、家蚕BmorAKH2的氨基酸序列一致性较高,均达45%以上,尤其是与棉铃虫HarmAKH2的一致性高达83.1%。进化树分析结果与氨基酸序列比对结果基本一致,这也在一定程度上反映了亲缘关系的远近。3、采用实时荧光定量PCR技术分析了粘虫雌蛾脂动激素基因MsepAKH1和MsepAKH2的时空表达模式。结果表明,MsepAKH1在初羽化雌蛾不同组织间的表达量差异显着,以头部和飞行肌内表达为主,在脂肪体、卵巢与中肠内的表达量显着降低。对不同日龄雌蛾头部和飞行肌内的MsepAKH1表达量检测发现,在7日龄头部和3日龄飞行肌内的表达量分别显着高于其他日龄相同组织的表达量。初羽化雌蛾MsepAKH2的组织表达模式与MsepAKH1相同,但对其不同发育阶段表达分析发现,在7日龄头部的表达量最高,在5日龄飞行肌内的表达量显着高于其他日龄相同组织的表达量。本研究首次克隆得到2个粘虫脂动激素基因的cDNA全长序列,并从mRNA水平明确了MsepAKH1和MsepAKH2在粘虫雌蛾不同组织及发育阶段的表达量差异显着。本研究有助于阐明粘虫飞行能源物质调动的分子机制,不仅丰富了粘虫的迁飞行为发生与调控机制理论,还可为进一步深入研究粘虫脂动激素基因的具体功能奠定基础,以期为建立以昆虫神经肽为靶标的粘虫遗传防治体系提供参考,从而实现粘虫的可持续控制。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2016-05-01）
黄海山[3]（2010）在《家蚕脂动激素受体信号转导机制研究》一文中研究指出脂动激素受体(AKHR)是一类典型的G蛋白偶联受体,介导了昆虫体内的脂类及糖类代谢调控,AKHR的功能缺失会导致昆虫体内脂肪的积累及血淋巴糖浓度的升高,因此认为昆虫AKHR/脂动激素(AKH)系统是一个很好的研究人类脂类、糖类代谢紊乱的模型。之前的研究表明,AKH可以结合脂肪体上的受体,经Gs蛋白激活腺苷酸环化酶,导致胞内cAMP浓度的增加；另一方面激活磷脂酶C,进而诱导胞内Ca2＋水平的升高。但是有关信号转导的具体机制我们仍不清楚。为了弄清AKHR的信号转导机制,我们从家蚕脂肪体中克隆得到了家蚕AKHR,并且在HEK293(人胚肾293)细胞上检测了受体的功能。我们的结果表明,AKHR受到配体刺激后,会导致胞内Ca2+和cAMP水平的提高,随后丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路被激活,并且在高浓度AKH刺激下,AKHR会从细胞膜上内吞到细胞质中。我们通过cAMP、MAPK及内吞(internalization)的检测,功能性证明了AKH2和AKH3也是AKHR的配体,其中AKH2(EC50=11.7±1.6 nM)与AKH1(EC50=6.4±1.9 nM)活性相当,但是AKH3(EC50=1.07±0.33μM)活性较弱,这表明家蚕体内可能存在其它与AKH3亲和力较强的受体,来参与糖脂类代谢调控。弄清AKHR介导的信号通路将有助于了解AKH/AKHR在调控糖平衡和能量调动中分子机制中的作用。MAPK是重要的细胞调控因子,调控许多重要的生理过程如细胞的生长、发育、生殖、死亡、代谢等。胞外信号调节激酶(ERK1/2)是MAPK的核心成员,我们发现AKH介导的信号通路能够激活ERK1/2,但其机制尚不明了。为了弄清其激活途径,我们构建了稳定表达AKHR的HEK293细胞株,结果发现PKA抑制剂H89、PKC抑制剂Go6983和GF109203X、及钙离子螯合剂EGTA和BAPTA-AM均能抑制AKH介导的ERK1/2途径,因此我们认为cAMP/PKA与PKC/Ca2+共同参与了MAPK信号通路的激活,但有趣的是,高浓度PLC抑制剂U73122、ET-18-OCH3与PLD抑制剂FIPI均不能明显降低AKH介导的ERK1/2的磷酸化。所以我们推断,可能是膜上的某些Ca2+通道在这一过程中起到了重要的作用。另外我们通过siRNA干扰与受体突变手段证明了G蛋白偶联受体信号通路重要的调节因子arrestin在AKH介导的ERK1/2通路中无显着调控作用。内吞是G蛋白偶联受体(GPCR)信号转导重要的调控途径,当受体受到其激动剂刺激后,会从膜上迁移到细胞质中,使膜上的受体总量减少,由此来调节信号强度。各种GPCR之间的内吞机制也不尽相同,因此研究AKHR的内吞机制对于我们了解AKHR的信号转导机制是十分重要的。AKHR在受到AKH(100nM)刺激后,会迅速内吞,在30min时即可接近峰值,且依赖配体浓度。蔗糖实验与siRNA实验结果表明,AKH诱导的内吞是网格蛋白依赖型,且arrestin3、GRK2和GRK5共同参与了这一过程。回膜实验结果证实受体内吞2 h后,也仅有50%内吞的受体回膜,这可能说明内吞后的部分受体可能会被降解。G蛋白偶联受体一旦被配体激活,就开始信号转导,同时由于C端被磷酸化后,P-Arrestin蛋白就结合到磷酸化的C端,从而引起受体内吞、失敏。因此了解家蚕脂动激素受体的构效机制对其信号转导机制有重要的意义。我们用overlap PCR的方法构建了AKHR的四个C端部分缺失体分别为AKHR (△385-405), AKHR(△364-384), AKHR (△343-363), AKHR (△322-342) FACS(细胞流式仪检测)结果表明AKHR(△322-342)在膜上的表达仅相当于野生型的5%；cAMP检测发现AKHR(△364-384)活性略高,AKHR(△322-342)较低；共聚焦显微镜照片及内吞定量实验表明AKHR(△343-363)的内吞明显受到抑制,这说明343-363区域内含有某些与内吞有关的位点或功能域,另外AKHR(△322-342)的表达主要定位在内质网中,仅有部分分布在膜上,说明322-342区域内有能够影响受体表达的功能域存在。以上结果表明,我们基本摸清了家蚕脂动激素受体的信号转导机制,但相关的实验及细节还有待于进一步研究,如内源性脂动激素受体信号转导与异源表达信号转导的差异等。虽然如此,这些结果也将为我们研究AKH/AKHR信号通路在家蚕滞育、发育和生殖中的生理作用提供理论基础,并能推动我们对人类肥胖或糖尿病等脂类、糖类等代谢疾病的深入认识。(本文来源于《浙江大学》期刊2010-05-01）
脂动激素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
粘虫Mythimna separata(Walker)是一种典型的季节性远距离迁飞害虫,也是严重威胁我国粮食作物生产安全的重大害虫,广泛分布于亚洲和澳洲的多个国家和地区,每年在我国南北往返迁飞危害。近年来,由于农田生态系统变化以及粘虫的环境适应能力增强,粘虫在我国的发生危害呈现加重趋势,尤其是2012和2013年在全国范围暴发成灾。粘虫的远距离迁飞习性是其防治较为困难的主要原因,而能源物质代谢则构成了迁飞动力的能量基础。脂动激素(Adipokinetic Hormone,AKH)是一类主要由昆虫的心侧体腺细胞合成、储存并释放到血淋巴的神经肽,在能源物质代谢、飞行与生殖、逆境生理及免疫反应等方面具有重要的调控作用。粘虫的飞行肌具有善于飞行的构造,糖类和脂类为粘虫的飞行能源物质,但有关粘虫能源代谢调控的分子机制尚未见报道。本文以粘虫雌蛾为研究对象,采用RT-PCR和RACE技术对粘虫脂动激素基因进行了全长克隆,并通过实时荧光定量PCR技术分析了相应的表达模式。主要研究结果如下:1、采用RT-PCR和RACE技术扩增获得了2个粘虫脂动激素基因的cDNA序列全长,分别被命名为MsepAKH1(GenBank登录号:KP979739.1)与MsepAKH2(GenBank登录号:KX096711.1)。粘虫脂动激素基因MsepAKH1的cDNA序列全长为449 bp,其中开放阅读框为207 bp,编码68个氨基酸,预测的蛋白分子量为7.61 kDa,理论等电点为8.46。粘虫脂动激素基因MsepAKH2的cDNA序列全长为668 bp,包含216 bp的开放阅读框,编码71个氨基酸,预测的蛋白分子量为7.78 kDa,理论等电点为6.13。蛋白保守区分析发现,MsepAKH1与MsepAKH2均含有典型的脂动激素基因家族蛋白结构域,即在成熟肽的第4位、第8位、第9位分别为苯丙氨酸、色氨酸、甘氨酸残基。2、采用生物信息学软件进行序列比对和进化树构建。结果表明,MsepAKH1和烟草天蛾MsexAKH、棉铃虫HarmAKH1、二化螟CsupAKH1、小菜蛾PxylAKH1具有较高的氨基酸序列一致性,均达53%以上,与烟草天蛾MsexAKH的序列一致性最高达56.9%。MsepAKH2和棉铃虫HarmAKH2、小菜蛾PxylAKH2、二化螟CsupAKH2、家蚕BmorAKH2的氨基酸序列一致性较高,均达45%以上,尤其是与棉铃虫HarmAKH2的一致性高达83.1%。进化树分析结果与氨基酸序列比对结果基本一致,这也在一定程度上反映了亲缘关系的远近。3、采用实时荧光定量PCR技术分析了粘虫雌蛾脂动激素基因MsepAKH1和MsepAKH2的时空表达模式。结果表明,MsepAKH1在初羽化雌蛾不同组织间的表达量差异显着,以头部和飞行肌内表达为主,在脂肪体、卵巢与中肠内的表达量显着降低。对不同日龄雌蛾头部和飞行肌内的MsepAKH1表达量检测发现,在7日龄头部和3日龄飞行肌内的表达量分别显着高于其他日龄相同组织的表达量。初羽化雌蛾MsepAKH2的组织表达模式与MsepAKH1相同,但对其不同发育阶段表达分析发现,在7日龄头部的表达量最高,在5日龄飞行肌内的表达量显着高于其他日龄相同组织的表达量。本研究首次克隆得到2个粘虫脂动激素基因的cDNA全长序列,并从mRNA水平明确了MsepAKH1和MsepAKH2在粘虫雌蛾不同组织及发育阶段的表达量差异显着。本研究有助于阐明粘虫飞行能源物质调动的分子机制,不仅丰富了粘虫的迁飞行为发生与调控机制理论,还可为进一步深入研究粘虫脂动激素基因的具体功能奠定基础,以期为建立以昆虫神经肽为靶标的粘虫遗传防治体系提供参考,从而实现粘虫的可持续控制。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂动激素论文参考文献
[1].解幸承,张蕾,程云霞,罗礼智,仵均祥.粘虫脂动激素基因MsepAKH1的克隆与成虫期表达模式分析[J].植物保护学报.2018
[2].解幸承.粘虫脂动激素基因的克隆与成虫期表达模式分析[D].西北农林科技大学.2016
[3].黄海山.家蚕脂动激素受体信号转导机制研究[D].浙江大学.2010