本文主要研究内容
作者王帝,李振玲,宋远见,刘志安(2019)在《c-Jun氨基末端激酶3结构域突变质粒的构建、鉴定与转染》一文中研究指出:为构建c-Jun氨基末端激酶3 (c-Jun N-terminal kinase3,JNK3)的p VP16-eGFP-Myc-JNK3活化环(activation-loop,A-loop)结构域突变型重组质粒,通过A-loop突变型JNK3的c DNA序列以及p VP16-eGFP-Myc的酶切位点设计引物,PCR扩增目的基因,使用限制性内切酶Mlu I与Xba I将基因克隆到p VP16-eGFP-Myc真核表达载体中,构建p VP16-eGFP-Myc-JNK3(A-loop)结构域突变型重组质粒。转化后,通过双酶切鉴定与DNA测序判断是否成功构建重组质粒,使用Trans IntroTMEL Transfection Reagent转染人胚肾(human emborynic kidney,HEK) 293T细胞,通过荧光显微镜下观察融合蛋白表达情况。结果表明:构建p VP16-eGFP-Myc-JNK3 (A-loop)结构域突变型重组质粒,双酶切鉴定和测序结果显示构建成功; p VP16-eGFP-MycJNK3 (A-loop)成功转染HEK293T细胞且表达。鼠源JNK3结构域突变型质粒构建成功,对进一步研究JNK3结构域在相关疾病的作用和机制提供实验工具。
Abstract
wei gou jian c-Junan ji mo duan ji mei 3 (c-Jun N-terminal kinase3,JNK3)de p VP16-eGFP-Myc-JNK3huo hua huan (activation-loop,A-loop)jie gou yu tu bian xing chong zu zhi li ,tong guo A-looptu bian xing JNK3de c DNAxu lie yi ji p VP16-eGFP-Mycde mei qie wei dian she ji yin wu ,PCRkuo zeng mu de ji yin ,shi yong xian zhi xing nei qie mei Mlu Iyu Xba Ijiang ji yin ke long dao p VP16-eGFP-Myczhen he biao da zai ti zhong ,gou jian p VP16-eGFP-Myc-JNK3(A-loop)jie gou yu tu bian xing chong zu zhi li 。zhuai hua hou ,tong guo shuang mei qie jian ding yu DNAce xu pan duan shi fou cheng gong gou jian chong zu zhi li ,shi yong Trans IntroTMEL Transfection Reagentzhuai ran ren pei shen (human emborynic kidney,HEK) 293Txi bao ,tong guo ying guang xian wei jing xia guan cha rong ge dan bai biao da qing kuang 。jie guo biao ming :gou jian p VP16-eGFP-Myc-JNK3 (A-loop)jie gou yu tu bian xing chong zu zhi li ,shuang mei qie jian ding he ce xu jie guo xian shi gou jian cheng gong ; p VP16-eGFP-MycJNK3 (A-loop)cheng gong zhuai ran HEK293Txi bao ju biao da 。shu yuan JNK3jie gou yu tu bian xing zhi li gou jian cheng gong ,dui jin yi bu yan jiu JNK3jie gou yu zai xiang guan ji bing de zuo yong he ji zhi di gong shi yan gong ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自科学技术与工程的王帝,李振玲,宋远见,刘志安,发表于刊物科学技术与工程2019年26期论文,是一篇关于氨基末端激酶论文,活化环论文,真核表达质粒论文,结构域论文,突变论文,科学技术与工程2019年26期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自科学技术与工程2019年26期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
标签:氨基末端激酶论文; 活化环论文; 真核表达质粒论文; 结构域论文; 突变论文; 科学技术与工程2019年26期论文;