导读:本文包含了菌体抗原论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:大肠埃希菌,弗劳地枸橼酸杆菌,沙门菌,菌体抗原
菌体抗原论文文献综述
张宽深,余央云[1](2012)在《两种菌与沙门菌菌体抗原交叉凝集报告》一文中研究指出大肠埃希菌与枸橼酸杆菌属、沙门菌属等,在O抗原上存在很多交叉反应[1]。但两种细菌恰好与沙门菌菌体抗原凝集却很少有人报道。在今年从业人员健康体检大便培养中检出一株大肠埃希菌和一株弗劳地枸橼酸杆菌,它们分别与沙门菌O15、O3,19抗原诊断血清发生凝集。现将试验结果报道如下。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2012年11期)
陈莹莹,金鑫,姜成国,娄安钢,姜丹丹[2](2012)在《气肿疽梭菌菌体抗原分析》一文中研究指出[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2012年17期)
李雪萍,陈学勤,钱利生[3](2009)在《肺炎嗜衣原体菌体抗原的制备及应用》一文中研究指出目的制备肺炎嗜衣原体(Chlamydophila pneumoniae,Cpn)菌体抗原,纯化后建立ELISA方法,用于血清Cpn抗体的检测。方法应用进口Cpn毒株感染Hep-2细胞,利用吖啶橙染色和直接免疫荧光染色判断Cpn感染细胞,制备Cpn抗原。用初步纯化的Cpn抗原建立ELISA方法检测人血清特异性抗体。结果吖啶橙染色和直接免疫荧光检测显示,Cpn成功感染Hep-2细胞。提取Cpn抗原,用ELISA检测84份病人血清特异抗体,阳性率为52.4%,ELISA试剂盒法的阳性率为51.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。用Cpn菌体抗原ELISA检测209份病人血清,阳性率59.3%(其中心血管疾病患者血清138份,阳性率58.0%;呼吸系统疾病患者血清71份,阳性率62.0%);检测84份健康者血清,阳性率2.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Cpn菌体抗原ELISA检测血清抗Cpn抗体可用于判断Cpn感染;病人血清Cpn抗体阳性表明,某些心血管和呼吸系统疾病患者的致病原因可能与肺炎嗜衣原体感染有关。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2009年07期)
吴彩艳,覃宗华,袁建丰,孙铭飞,余劲术[4](2009)在《鸭疫里默氏杆菌抗体检测的全菌体抗原间接ELISA方法的建立》一文中研究指出本研究建立了检测鸭疫里默氏杆菌(Rimerrlla anatipestifer,RA)抗体的全菌体抗原间接ELISA方法,最佳血清稀释倍数为1:100。以RA1的甲醛灭活全菌体为包被抗原,棋盘滴定法试验确定其最适抗原包被浓度为5×108CFU/mL。与全菌体裂解抗原和重组P25蛋白为包被抗原的间接ELISA方法相比较,叁者均可检测不同血清型RA标准阳性血清,结果符合性良好。用该方法检测雏鸭接种鸭疫里默氏杆菌蜂胶灭活疫苗后血清抗体水平的变化,发现免疫后10天抗体水平开始上升,二免后10天抗体水平达到峰值。(本文来源于《养禽与禽病防治》期刊2009年06期)
王贵明[5](2009)在《创伤弧菌消杀抗性及其菌体抗原、溶细胞毒素蛋白抗原主动免疫的动物实验研究》一文中研究指出研究背景和目的创伤弧菌(Vibrio vulnificus,Vv)是弧菌属第5群细菌,根据其生化特性、流行病学模式以及宿主范围将其分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个亚型,其中Ⅰ型Vv是导致人群创伤感染及原发性败血症的病原体。原发性创伤弧菌感染发病率呈逐年递增的趋势。目前世界上大部分沿海国家都有创伤弧菌感染的病例报告。我国国内1990年报道首例,随后沿海各地区每年都有散发病例报道,其病死率一直居高不下。对本病的认识不足,发病早期未能正确诊断,或误诊为药物超敏反应而使用大剂量激素,是造成高病死率的主要原因。创伤弧菌的感染途径有二:一是经口感染,二是通过皮肤伤口侵入。创伤弧菌感染一旦出现败血症,其死亡率高达50%以上。那么,我们能否采取措施避免接触到创伤弧菌呢?在不可避免接触到创伤弧菌的情况下,我们能否通过机体主动免疫的方法避免其感染乃至致病呢?为此,我们设计了本课题,试图通过体外及主动免疫动物实验来回答上述问题。方法1.创伤弧菌的生化特性及抗性研究:1.1取新鲜培养的创伤弧菌接种于弧菌属生化鉴定管及生化条培养24h后,目测或上机读取鉴定结果。1.2紫外线抗性:创伤弧菌ATCC27562、大肠杆菌ATCC25922悬液及平板在强度值达90μW/cm~2的紫外线照射不同时间后,培养并定量测试照射前后的活菌浓度,统计杀菌率,绘制照射前后灭活曲线(t-Δlg)。1.3 3种消毒剂抗性:戊二醛、过氧乙酸及乙醇以无菌去离子水1:2等比系列稀释至1:256后作用于创伤弧菌,培养24h观察细菌生长情况,确定其对创伤弧菌的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC);20g/L戊二醛、5g/L过氧乙酸及75%乙醇作用于创伤弧菌10s、20s、30s、60s、90s及120s,培养24h后观察细菌生长情况,确定其对创伤弧菌的最快杀菌时效。2.创伤弧菌主动免疫预防的动物实验研究2.1创伤弧菌溶细胞毒素的提取、纯化及鉴定重组大肠杆菌pET-32a-vvhA/E.coliBL21(DE3)恢复培养,行蓝白斑筛选,挑取白色菌斑进行PCR扩增并琼脂糖电泳验证目的基因存在。挑选阳性克隆并以最佳诱导条件进行诱导培养,离心收集细菌,超声破菌,离心后上清液经过His-Bind亲和层析方法纯化重组创伤弧菌溶细胞毒素(rVVC)并行SDS-PAGE电泳及Western-blot验证。纯化后的蛋白以透析法进行复性和浓缩。采用BCA(bicinchoninicacid)法进行蛋白定量,绘制标准曲线,计算出蛋白浓度。2.2创伤弧菌主动免疫预防的动物实验研究(1)实验动物及分组:SPF级BALB/c小鼠54只,雌雄不拘,随机分为创伤弧菌菌体抗原组(简称菌体抗原组)、溶细胞毒素蛋白抗原组(简称蛋白抗原组)、生理盐水对照组(简称对照组)各18只。(2)抗原制备:创伤弧菌菌体抗原,新鲜培养的创伤弧菌以0.3%甲醛灭活24h,无菌试验合格后4℃保存;创伤弧菌溶细胞毒素蛋白抗原,rVVC与完全弗氏佐剂/不完全弗氏佐剂等体积乳化制成。(3)免疫方案:小鼠皮下多点注射,创伤弧菌菌体抗原组小鼠接种菌体抗原:1×10~8个/只/次;溶细胞毒素蛋白抗原组小鼠接种蛋白抗原50μg/只/次;生理盐水对照组小鼠接种生理盐水:0.2ml/只/次,0d、首次免疫14d后每10d加强一次。(4)小鼠免疫学指标:免疫接种3-6次后,每组3只小鼠取外周血行流式细胞术检测小鼠外周血中淋巴细胞亚群比例;每组6只小鼠,取脾及胸腺,称重,MTT法检测脾淋巴细胞转化率;血清凝集试验及间接ELISA法检测特异性抗体及IgG效价。(5)创伤弧菌攻击试验:3组小鼠按上述方法免疫接种6次后,12只/组,75%酒精棉球消毒右下腹皮肤后腹腔注射新鲜培养创伤弧菌ATCC27562悬液,0.5ml/只,细菌浓度约为10~7-10~8cfu/ml。监测所有小鼠一般情况,包括呼吸、精神状态、毛发、体温等。小鼠死亡后立即解剖,存活小鼠于注射活菌后48h或10d断椎法处死,取其主要脏器及组织固定、石蜡包埋后按常规方法制片、HE染色,光镜下观察其病理变化。同时取心脏内血液或血凝块进行Vv分离培养及生化鉴定。结果1.创伤弧菌抗性实验1.1创伤弧菌ATCC27562生化特性符合创伤弧菌的生化鉴别特征,生化条鉴定结果:创伤弧菌%id=99.9(机读结果显示为“非常好的鉴定结果”)。1.2创伤弧菌紫外线抗性研究创伤弧菌ATCC27562在强度值达90μW/cm~2的紫外线照射,15min后定性培养为阴性,定量检测1min平均灭活对数值(LIV)悬液法为4.37±0.13、平板法为5.10±0.19,平均杀菌率悬液法为(99.99±0.01)%、平板法为(99.99±0.05)%,照射15min后无菌存活。1.3创伤弧菌对3种消毒剂抗性研究戊二醛对创伤弧菌的MIC为0.31g/L,MBC为10.00g/L;过氧乙酸对创伤弧菌的MIC为0.04g/L,MBC为0.31g/L;乙醇对创伤弧菌的MIC为4.69%,MBC为37.50%。20g/L戊二醛作用10s、5g/L过氧乙酸作用10s、75%乙醇作用60s均能有效杀灭创伤弧菌。2.创伤弧菌主动免疫预防动物实验2.1创伤弧菌溶细胞毒素的表达、提取、纯化及鉴定蓝白斑筛选LB平板上长有白色及蓝色的单克隆细菌斑,其中白色菌落为带重组质粒的细菌,即阳性克隆。挑取白色菌斑培养,进行质粒提取,并以其为模板进行PCR扩增vvhA基因,琼脂糖电泳获得相应大小目的条带(vvhA:1356bp)。SDS-PAGE电泳显示阳性克隆重组大肠杆菌pET-32a-vvhA/E.coliBL21(DE3)经IPTG诱导培养,能表达融合蛋白rVVC,在凝胶上70KD的位置可见相应蛋白条带。rVVC经透析复性、浓缩后,BCA法测定蛋白浓度为2.542mg/ml。Western-blot免疫印迹实验结果表明表达产物rVVC能与抗6×His组氨酸单克隆抗体特异结合。2.2小鼠免疫学指标(1)小鼠脾、胸腺重量检测结果蛋白抗原组小鼠脾重量较对照组为高(P=0.004),差异具有统计学意义;菌体抗原组小鼠脾重量与对照组比较,P=0.919,无统计学差异。菌体抗原组、蛋白抗原组与对照组小鼠胸腺重量比较差异均无统计学意义。(2)小鼠脾淋巴细胞转化率检测结果菌体抗原组小鼠ConA刺激的T淋巴细胞转化率、LPS刺激的B淋巴细胞转化率较对照组高(P=0.018、P=0.001),差异具有统计学意义,其Vv刺激的淋巴细胞转化率较对照组高,但差异不具有显着性(P=0.216);蛋白抗原组小鼠ConA刺激的T淋巴细胞转化率、LPS刺激的B淋巴细胞转化率及rVVC刺激的淋巴细胞转化率与对照组比较,差异均无显着性。(3)小鼠外周血淋巴细胞亚群检测结果叁组小鼠外周血的CD19~+ B淋巴细胞百分比差异具有统计学意义(P=0.03),菌体抗原组、蛋白抗原组均高于对照组。叁组小鼠外周血的CD4~+T细胞及CD8~+T细胞之百分比差异无统计学意义,CD4~+/CD8~+比值差异也无统计学意义。(4)血清凝集试验结果第3次免疫后,菌体抗原组与蛋白抗原组小鼠血清与菌体悬液混合,呈现流沙样阳性反应;对照组小鼠血清、生理盐水与菌体悬液混合均为阴性结果。(5)小鼠血清抗体IgG效价测定结果第5次加强免疫后,取小鼠血液行间接ELISA检测血清抗菌体/rVVC蛋白IgG效价,菌体抗原组血清抗菌体效价最高达1:25600,蛋白抗原组血清抗rVVC效价最高达1:25600。以各组血清最高稀释度取对数值1g行两独立样本t-检验,结果表明:菌体抗原组小鼠抗菌体IgG效价高于对照组,差异具有统计学意义;蛋白抗原组小鼠抗rVVC蛋白IgG效价高于对照组,差异具有统计学意义。(6)Western-blot检测结果将纯化复性后的rVVC经SDS-PAGE后,转移到PVDF膜上,以鼠抗rVVC血清为一抗进行Western-blot反应,结果显示rVVC能与免疫血清特异性结合,在相应大小处(约70KD)出现了特异性反应区带。2.3创伤弧菌攻击试验结果(1)小鼠一般情况生理盐水对照组注射菌液后36h内10只小鼠死亡,2只小鼠存活,存活率为16.7%;其中一只小鼠左后肢出现脓肿、破溃及溃疡形成,后肢活动明显受限。菌体抗原组及蛋白抗原组小鼠注射菌液后出现毛发竖立、进食减少、蜷缩少动等情况,但均较对照组为轻,48b内小鼠均存活,存活率为100%。菌体抗原组及蛋白抗原组小鼠48h存活率均高于对照组,差异具有统计学意义。对照组小鼠血培养为阳性,还原鉴定为创伤弧菌。菌体抗原组及蛋白抗原组小鼠注射菌液后48h血培养为阳性,10d培养为阴性。(2)病理改变生理盐水对照组死亡小鼠各脏器组织充血淤血病变严重,局部见中性粒细胞浸润;存活小鼠各组织基本正常,其中一只后肢皮肤溃疡形成、软组织呈蜂窝织炎改变。菌体抗原组及蛋白抗原组48h处死小鼠各脏器组织轻度淤血,可见炎细胞浸润;10d处死小鼠:蛋白抗原组肝组织局部细胞灶状、片状坏死,呈脓肿样改变;其余各组织基本正常。结论1创伤弧菌ATCC27562对紫外线敏感,属紫外线低度抗性菌;90μW/cm~2的紫外线能有效灭杀创伤弧菌ATCC27562,20g/L戊二醛、5g/L过氧乙酸、75%乙醇能将其迅速有效灭活。2创伤弧菌菌体抗原、创伤弧菌溶细胞毒素蛋白抗原能有效刺激、增强BALB/c小鼠特异性体液免疫功能,产生创伤弧菌菌体抗体及创伤弧菌溶细胞毒素蛋白抗体,使小鼠获得有效的免疫保护,可作为创伤弧菌的候选疫苗进一步研究。3致死量创伤弧菌侵犯BALB/c小鼠,小鼠体内创伤弧菌菌体抗体、溶细胞毒素蛋白抗体不能完全将其杀灭,能有效减轻其毒性作用,明显提高小鼠生存率,降低致残作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2009-04-10)
黄建林,冯智英,谢旭晶,余步云,古洁若[6](2009)在《灭活A组链球菌全菌体抗原诱导风湿性心脏炎的可行性》一文中研究指出【目的】探讨以Lewis大鼠为实验对象,用皮下注射灭活A组链球菌全菌体抗原的方法诱导风湿性心脏炎的可行性。【方法】复活并繁殖A组β溶血性链球菌,细菌用40g/L甲醛液灭活。实验大鼠分为3组:对照组(4只)、模型A组(8只)、模型B组(5只)。模型A组大鼠后足垫注射灭活A组链球菌全菌体抗原/完全弗氏佐剂(CFA)混合液。初次免疫后第1周腹部皮下再次注射上述抗原1次,第3周(第21天)解剖动物。模型B组大鼠初次免疫同模型A组,第1、2、3周腹部皮下重复接受注射上述抗原,第6周(第42天)解剖动物。对照组大鼠后足垫注射生理盐水/CFA混合液,第3周(第21天)解剖动物。观察动物的体质量、足关节炎症程度、抗心肌抗体IgG吸光度,以及心脏、肾脏、肺脏和足关节的病理组织切片。【结果】模型A组大鼠的抗心肌抗体IgG吸光度免疫前、免疫后第2周、第3周分别为0.13(S=0.03)、0.24(S=0.06)和0.27(S=0.03),提示HRAbIgG抗体浓度从免疫后第2周开始呈上升趋势。免疫后第3周,模型A组8只大鼠中有3只心肌间质出现少量的灶性炎症细胞浸润,未观察到心瓣膜炎症变化。模型B组大鼠5只大鼠中有4只心肌间质小血管旁出现较明显的灶性炎症细胞浸润,其中2只观察到心瓣膜炎症。【结论】以Lewis大鼠为对象,使用皮下注射灭活A组链球菌的方法,可以诱发大鼠发生心脏炎。(本文来源于《中山大学学报(医学科学版)》期刊2009年01期)
何啸,陈宗宁,邵荣标,王海燕,王荣堂[7](2008)在《菌体抗原“缺失”的宋内氏志贺菌研究》一文中研究指出目的:研究O抗原"缺失"的宋内氏志贺菌其它生物学性状的变化情况。方法:检测试验菌株的生化特性和对抗生素的敏感性,以及用多种批号的诊断血清进行凝集试验。结果:具有典型的宋内氏志贺菌的生化特性;与对照菌相比,有较高抗生素耐药性,对复方新诺明等多种抗生素耐药。与效期内的多批宋内氏志贺菌诊断血清不能产生凝集反应,而对照菌凝集良好。结论:该株宋内氏志贺菌的O抗原表达减弱,同时药敏谱也产生明显的改变。(本文来源于《南通大学学报(医学版)》期刊2008年04期)
邵荣标,陈宗宁,王海燕,王荣堂[8](2008)在《菌体抗原“缺失”的宋内志贺菌研究》一文中研究指出目的:研究O抗原"缺失"的宋内志贺菌其它生物学性状的变化情况。方法:检测试验菌株的生化特性和对抗生素的敏感性,以及用多种批号的诊断血清进行凝集试验。结果:具有典型的宋内志贺菌的生化特性;与对照菌相比,能够耐包括复方新诺明在内的多种抗生素;与有效期内的多批宋内志贺菌诊断血清不能产生凝集反应,而对照菌凝集良好。结论:该株宋内志贺菌的O抗原表达显着减少,同时药敏谱也产生明显的改变。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2008年06期)
张勇,吴鹏,张天聪,朱战波,崔玉东[9](2007)在《牛源大肠杆菌分离株菌体抗原及菌毛特性研究》一文中研究指出对一株牛源大肠杆菌JS株的菌体抗原及菌毛特性进行了研究。大肠杆菌JS株在Minca培养基上37℃培养18~24h,能够同时良好地表达菌毛抗原K99和F41。采用保温法和裂解法进行了菌毛提纯,取得了较好的效果。应用玻片凝集试验﹑抗D-甘露糖微量血凝试验(MRHA)进行菌毛特异性和粘附性研究。结果表明,K99、F41两种菌毛抗原不存在交叉凝集反应,其血凝谱能凝集牛﹑鸡的红细胞。(本文来源于《黑龙江八一农垦大学学报》期刊2007年03期)
赵娜,王安华,何玉龙,聂芬,袁芳艳[10](2006)在《应用噬菌体随机十二肽库筛选猪传染性胸膜肺炎菌体抗原模拟表位》一文中研究指出利用猪传染性胸膜肺炎灭活菌苗免疫日本大耳兔得到猪传染性胸膜肺炎抗血清,将血清用饱和硫酸铵粗提IgG后,经DEAE-sephadex-A50低压层析系统纯化,以此得到IgG作为配基包被酶标板,对噬菌体随机十二肽库进行3轮不同条件的富集筛选,通过改变筛选条件,噬菌体的回收率从5.76×10-5增加到了1.69×10-2,P/N值逐步提高;随机挑取10个噬菌斑进行扩增,用ELISA检测其免疫活性,结果有6个阳性克隆与纯化的IgG有较强的特异性结合能力;对筛选到的6个阳性克隆提取ssDNA进行测序,并分析其氨基酸序列,其中5个克隆所递呈的序列一致,用Blastp软件进行分析,2种类型的氨基酸序列之间无同源性,且未发现同源性50%以上的序列,提示该短肽可能模拟了猪传染性胸膜肺炎菌体的特异的抗原表位。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2006年04期)
菌体抗原论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
菌体抗原论文参考文献
[1].张宽深,余央云.两种菌与沙门菌菌体抗原交叉凝集报告[J].中国卫生检验杂志.2012
[2].陈莹莹,金鑫,姜成国,娄安钢,姜丹丹.气肿疽梭菌菌体抗原分析[J].安徽农业科学.2012
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