导读:本文包含了上皮根鞘论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:上皮根鞘,Vps4b,基因敲除小鼠,牙根发育
上皮根鞘论文文献综述
王莹莹[1]（2019）在《上皮根鞘在Vps4b基因敲除鼠牙根发育中的形态和增殖凋亡能力变化》一文中研究指出背景和目的上皮根鞘(Hertwig's epithelial root sheath,HERS)作为启动牙根的信号中心,在牙根发育中必不可少。牙根的正常生理过程与HERS完整的形成、适时的断裂及细胞增殖、凋亡密切相关。牙本质发育不良I型(Dentin dysplasia type I,DD-I)又称为根部牙本质发育不良,是一种牙根严重发育不良导致根短小、畸形的常染色体显性遗传病。细胞液泡分选蛋白4B(Vacuolar protein sorting 4B,VPS4B)是一种多功能蛋白,在调控细胞增殖凋亡、溶酶体降解、细胞内蛋白转运等过程中起重要作用。本课题组前期对一个DD-I家系外周血全基因组测序发现该家系致病基因为VPS4B;并且研究表明VPS4B可能是影响牙齿发育的重要基因,但是其在牙根发育过程中的具体作用不是很清楚。本实验通过Vps4b基因敲除小鼠模型,观察HERS在牙根发育过程中的形态变化,分析该基因突变对HERS细胞增殖、凋亡能力的影响,进而探讨该基因在牙根致畸中的可能作用。材料与方法将Vps4b基因敲除小鼠雌雄合笼交配,记录出生后(Postnatal,P)时间。分别于P5天、P9天、P11天、P15天、P19天引颈处死解剖分离下颌第一磨牙区下颌骨和小鼠尾巴。新生幼鼠的基因型使用PCR技术进行鉴定。将幼鼠下颌骨采用4%多聚甲醛溶液固定、10%EDTA脱钙、石蜡包埋,制备切片,使用苏木精-伊红(Haematoxylin and eosin,HE)染色的方法确定各组小鼠牙根发育时期,免疫组织化学方法对不同时期HERS细胞内细胞角蛋白14(Cytokeratin14,CK14)、增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)以及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)进行组织定位,对比野生小鼠和Vps4b基因敲除小鼠CK14、PCNA、Bcl-2蛋白表达的差异。结果PCR的检测结果显示子代小鼠基因型为正常型Vps4b~(+/+)和杂合型Vps4b~(+/-)两种。正常小鼠HE染色显示:小鼠P5天HERS形成,牙根发育开始;P9天HERS结构连续,根分叉结构形成;P11天HERS发生断裂;P15天根1/3开始形成;P19天牙根发达到生理性长度,HERS继续断裂,其末端保持完整。正常小鼠免疫组织化学染色结果:P5天,HERS形成双层细胞结构,HERS细胞PCNA阳性表达,Bcl-2无表达;P9天,HERS仍连续并继续延伸,HERS细胞PCNA强阳性表达,Bcl-2阳性表达;P11天,HERS开始发生断裂,HERS末端保持完整,牙颈部有少量细胞PCNA阳性表达,HERS末端部分PCNA强阳性表达,Bcl-2在HERS细胞中弱阳性表达;P15天,牙根表面很少见到PCNA阳性的HERS细胞,HERS末端PCNA仍强阳性表达,HERS细胞Bcl-2弱阳性表达;P19天,牙根发育基本完成,仅HERS末端PCNA阳性表达,Bcl-2阴性表达。Vps4b基因敲除后抗CK14蛋白显示HERS在P9天开始发生断裂,P15天以后HERS不连续,HERS细胞数量减少,并形成细胞簇附着在牙根表面;与正常小鼠相比,PCNA在HERS细胞中表达强度变弱(P<0.05),HERS细胞仅在P9天、P11天Bcl-2呈阳性表达并且表达强度减弱(P<0.05)。结论在Vps4b~(+/-)小鼠牙根发育过程中HERS的连续性过早中断,提示Vps4b基因的缺失影响HERS正常形态的形成。HERS细胞PCNA、Bcl-2的表达强度减弱,推测Vps4b可能通过调节HERS细胞的增殖、凋亡进而影响牙根的发育。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-05-01）
陈杰,郭维华,田卫东[2]（2014）在《牙囊和上皮根鞘细胞成无细胞牙骨质的机制》一文中研究指出无细胞牙骨质是锚定牙周纤维和牙根的重要组织结构,牙囊细胞(DFC)通过自身分化和上皮根鞘(ERS)通过上皮-间质转化(EMT)形成的成牙骨质细胞参与无细胞牙骨质形成。牙囊细胞体外移植后可形成纤维样和牙骨质样组织,而牙乳头和上皮根鞘可以诱导牙囊细胞从基因及其蛋白质水平高表达碱性磷酸酶、骨涎蛋白等无细胞牙骨质相关标志物。其中钙离子、骨形态发生蛋白、Wnt/β-连环蛋白通路等目前被认为是介导牙囊细胞成牙骨质分化的信号转导通路。目前发现,调控无机磷酸盐胞内外浓度的转运蛋白对无细胞牙骨质形成调节的敏感性更高。ERS亦可通过EMT形成间质细胞来参与牙周组织的发生。钙结合蛋白D28k、末端较小的同源异形盒-2等在无细胞牙骨质、ERS以及牙囊细胞表达差异都说明了ERS具有成牙骨质细胞特性。在此过程中,TGFβ激活下游蜗牛蛋白后,通过磷脂酰肌醇-3-激酶和蛋白激酶B信号转导通路来介导ERS的无细胞牙骨质分化过程。(本文来源于《国际口腔医学杂志》期刊2014年03期）
刘晓辉,苑芳,邱宜农,李璇[3]（2014）在《上皮根鞘结构对牙根发育的影响》一文中研究指出目的:研究上皮根鞘的结构对牙根发育的影响。方法:选择出生后(postnatal,PN)8d的SD大鼠,切取第一磨牙牙胚的颈部组织,用胶原酶和dispase酶消化,1组直接离心形成细胞团,另1组加用胰酶消化后,离心形成细胞团。将细胞团体外培养4h后,种植到母鼠肾被膜下,4周后取材观察。结果:胶原酶和dispase酶消化可将上皮根鞘解离成碎片,加用胰酶消化后,上皮根鞘被解离为单个细胞。含有上皮根鞘碎片的细胞团种植后形成牙根样结构,而含有上皮根鞘离散细胞的细胞团则形成管状牙本质和骨样牙本质块。结论:上皮根鞘的结构对其引导牙根发育具有重要作用。(本文来源于《上海口腔医学》期刊2014年02期）
陈峰,陈学玮,潘卫红[4]（2014）在《赫特维希上皮根鞘在生物性牙根构建中的作用研究进展》一文中研究指出牙根发育是以一系列外胚层及相关神经源性间充质之间的上皮间质相互作用为特征的,赫特维希上皮根鞘(Hertwig’s Epithelial Root Sheath,HERS)参与牙根的发育,并发挥重要作用,尤其在牙骨质发育过程中的作用越来越受到关注,近年来有不少关于HERS生物学特性和在牙根发育中作用的研究。本文就HERS的组织结构特点、其在根部牙骨质形成中的作用,以及它的转归种的作用作一综述。(本文来源于《中华老年口腔医学杂志》期刊2014年02期）
刘晓辉[5]（2012）在《上皮根鞘细胞表面超微结构及牙根发育中上皮根鞘增殖力的变化》一文中研究指出体外培养大鼠上皮根鞘细胞,扫描电镜观察。制备出生后5d、7～8d和15d的SD大鼠下颌磨牙石蜡切片,增殖细胞核抗原,检测免疫染色。结果:上皮根鞘细胞表面有许多微绒毛,细胞间连接紧密。牙根发育中上皮根鞘增殖力有序变化。结论:上皮根鞘细胞具有典型的上皮细胞表面结构特性。牙根发育中上皮根鞘有序断裂与其增殖力变化有关。(本文来源于《口腔生物医学》期刊2012年04期）
于西佼,唐开亮,杜毅[6]（2012）在《上皮根鞘在无细胞牙骨质和细胞牙骨质形成中的作用研究》一文中研究指出目的观察无细胞牙骨质和细胞牙骨质发育时上皮根鞘细胞的增殖、凋亡的表达,探讨上皮根鞘在非细胞牙骨质和细胞牙骨质形成不同作用。方法 TUNEL法检测牙根发育中上皮根鞘细胞凋亡的情况。比较非细胞和细胞牙骨质形成时上皮根鞘细胞和牙周膜细胞的凋亡阳性表达指数,取α=0.05水准。SP免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)。结果小鼠出生后第9天,无细胞牙骨质形成阶段,上皮根鞘细胞与牙周组织凋亡阳性表达指数未见显着性差异;出生后第19天,牙根根1/3为细胞牙骨质所覆盖,此时上皮根鞘细胞凋亡阳性表达指数高于牙周组织(P<0.05)。结论细胞凋亡调控上皮根鞘细胞的转归;上皮根鞘细胞在无细胞牙骨质和细胞牙骨质形成中的作用不尽相同。(本文来源于《中国实用医药》期刊2012年20期）
刘晓辉,苑芳,文玲英,金岩[7]（2011）在《上皮根鞘细胞表面超微结构及牙根发育中上皮根鞘增殖力的变化》一文中研究指出目的:观察体外培养的上皮根鞘细胞超微结构及牙根发育中上皮根鞘增殖力的变化。方法:体外培养大鼠上皮根鞘细胞,扫描电镜观察。制备出生后5 d、7~8 d和15 d的SD大鼠下颌磨牙石蜡切片,增殖细胞核抗原,检测免疫染色。结果:上皮根鞘细胞表面有许多微绒毛,细胞间连接紧密。牙根发育中上皮根鞘增殖力有序变化。结论:上皮根鞘细胞具有典型的上皮细胞表面结构特性。牙根发育中上皮根鞘有序断裂与其增殖力变化有关。(本文来源于《牙体牙髓牙周病学杂志》期刊2011年08期）
刘晓辉,苑芳,文玲英,金岩[8]（2010）在《大鼠磨牙上皮根鞘发育的组织学观察》一文中研究指出目的观察SD大鼠磨牙上皮根鞘的发育。方法选择出生后0、5、10、15、25 d的SD大鼠,制备大鼠下颌组织切片,抗角蛋白14免疫组化染色。结果 SD大鼠磨牙上皮根鞘在其出生后5 d时开始形成,出生后15 d时开始断裂,出生后25 d时大部分发生断裂,根尖处部分保持完整。结论大鼠磨牙上皮根鞘有序发生、生长和断裂,可作为研究人类牙根发育的动物模型。(本文来源于《口腔医学》期刊2010年10期）
刘晓辉,苑芳,文玲英,金岩[9]（2010）在《上皮根鞘细胞表达牙齿矿化相关蛋白mRNA的研究》一文中研究指出目的:检测上皮根鞘(epithelial root sheath,ERS)细胞表达牙齿矿化相关蛋白mRNA的情况。方法:分离大鼠磨牙牙胚,酶消化法培养上皮根鞘细胞,通过RT-PCR检测HERS细胞表达牙齿矿化相关蛋白mRNA的情况。结果:ERS细胞表达成釉蛋白(ameloblastin,AMBN)和骨钙素(osteocalcin,OCN)mR-NA,不表达釉原蛋白(amelogenin,AMGN)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein1,DMP1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP),骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA。结论:ERS细胞表达一些牙齿矿化相关蛋白,可能参与调控牙根形成。(本文来源于《牙体牙髓牙周病学杂志》期刊2010年07期）
白玉娣[10]（2008）在《大鼠切牙Apical bud和磨牙Hertwig’s上皮根鞘细胞生物学性质研究》一文中研究指出牙齿是由口腔上皮和神经嵴来源的外胚间充质相互作用而形成的。人类牙齿的发育,经历蕾状期、帽状期、钟状期、牙根发育和牙齿萌出期。人类的牙齿和啮齿类动物的磨牙在牙冠发育完成以后,成釉器内釉、外釉上皮细胞在颈环处增生,形成两层上皮结构,即Hertwig’s上皮根鞘(Hertwig’s epithelial root sheath,HERS),标志着牙根发育的启动。而啮齿类动物(如大鼠、小鼠)的切牙终生不发育形成典型牙根结构,且终生不断萌出。研究认为,在切牙的末端存在apical bud结构,其中有成体干细胞,后者不断缓慢分裂增生,分化为成釉细胞,形成釉质,使得切牙不断生长。那么HERS和apical bud这两种来源于成釉器的牙上皮细胞究竟有着怎样的生物学性质,它们之间又有怎样的差异而导致形成两种完全不同的发育模式呢?本课题的目的是研究这两种上皮细胞的生物学性质,寻找其间的差异,为牙根发育机制的研究提供实验依据。本课题采用组织学、免疫组织化学、细胞培养、RT-PCR、蛋白质组学和体内种植等技术方法进行了以下四部分实验研究,主要研究内容和结果如下:第一部分apical bud和HERS组织学研究实验一:采用组织学方法观察了出生后(postnatal, PN)0-10d SD大鼠切牙apical bud和磨牙HERS的组织学结构,结果发现:apical bud位于切牙胚唇侧末端,PN0d即已形成,为叁层细胞构成的上皮结构,含有内、外釉上皮,及其间的星网层细胞,星网层细胞含量非常丰富,使得apical bud成为球形结构深入末端牙乳头组织中。HERS在PN 7d SD大鼠磨牙胚颈部形成,为内、外釉上皮两层细胞构成,星网层细胞消失,而呈连续的扁平状结构。实验二:采用免疫组织化学方法观察了FGF10, Notch1, BMPs在apical bud和HERS组织中的表达。结果发现:FGF10在apical bud周围牙乳头细胞中表达,而HERS内侧牙乳头细胞表达阴性;Notch1表达于apical bud中;BMPs在HERS中表达。表明虽然有着共同的发育起源,但是一些特异的调控因子表达存在差异。提示牙根发育启动存在特异性的调控机制。实验叁:采用透射电镜方法,观察apical bud和HERS超微结构。结果:apical bud中部分细胞胞膜增厚,形成桥粒样细胞连接,部分细胞中间丝丰富,并呈类似黏液上皮样细胞形态。HERS两层上皮细胞整齐排列,内层为柱状或立方状细胞,细胞之间胞膜相嵌、融合,形成紧密连接。第二部分apical bud和HERS细胞生物学性质研究实验一:通过机械分离切牙胚颈部唇侧末端和磨牙胚颈部组织,酶消化法原代混合培养,10%FBS DMEM/F12培养液连续培养,差别胰酶消化法进行细胞纯化的方法,分别培养apical bud和HERS细胞。结果发现:在10%FBS DMEM/F12培养液中原代细胞生长状态良好,增殖迅速,经3次差别消化得到纯化的上皮细胞。免疫细胞化学实验证实得到的细胞为上皮细胞。实验二:通过MTT检测、流式细胞术、免疫细胞化学、茜素红染色和RT-PCR等方法对apical bud和HERS细胞一些生物学性质进行了初步研究。结果发现:apical bud细胞表达Amelogenin, Ameloblastin, Notch1,而HERS细胞表达BMP2,4。体外培养的apical bud细胞有矿化形成能力。第叁部分apical bud和HERS细胞差异蛋白质组学研究实验一:通过双向凝胶电泳实验对apical bud和HERS细胞蛋白表达谱进行研究和对比。结果发现:apical bud和HERS细胞差异表达蛋白有145个,相对于apical bud细胞,HERS细胞表达的蛋白新增36点,缺失23点,有68点表达上调,有18点下调。实验二:通过肽质量指纹谱方法对实验一得到的差异蛋白进行研究,结果:鉴定出10个蛋白质,其功能涉及细胞的氧化还原反应、酶活性等方面。第四部分apical bud和HERS细胞与牙乳头细胞团体内种植实验研究利用体外培养的apical bud和HERS细胞分别与切牙和磨牙胚牙乳头细胞重组后,细胞团种植于大鼠肾被膜下。结果发现:apical bud和切牙牙乳头细胞团形成组织结构规则的釉质和牙本质组织,HERS细胞与磨牙牙乳头细胞团形成了骨样牙本质样组织。表明apical bud和牙乳头细胞间可以相互诱导,分化出成釉细胞和成牙本质细胞,形成牙体组织,HERS细胞能够诱导牙乳头细胞分化为成牙本质细胞。(本文来源于《第四军医大学》期刊2008-06-30）
上皮根鞘论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
无细胞牙骨质是锚定牙周纤维和牙根的重要组织结构,牙囊细胞(DFC)通过自身分化和上皮根鞘(ERS)通过上皮-间质转化(EMT)形成的成牙骨质细胞参与无细胞牙骨质形成。牙囊细胞体外移植后可形成纤维样和牙骨质样组织,而牙乳头和上皮根鞘可以诱导牙囊细胞从基因及其蛋白质水平高表达碱性磷酸酶、骨涎蛋白等无细胞牙骨质相关标志物。其中钙离子、骨形态发生蛋白、Wnt/β-连环蛋白通路等目前被认为是介导牙囊细胞成牙骨质分化的信号转导通路。目前发现,调控无机磷酸盐胞内外浓度的转运蛋白对无细胞牙骨质形成调节的敏感性更高。ERS亦可通过EMT形成间质细胞来参与牙周组织的发生。钙结合蛋白D28k、末端较小的同源异形盒-2等在无细胞牙骨质、ERS以及牙囊细胞表达差异都说明了ERS具有成牙骨质细胞特性。在此过程中,TGFβ激活下游蜗牛蛋白后,通过磷脂酰肌醇-3-激酶和蛋白激酶B信号转导通路来介导ERS的无细胞牙骨质分化过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
上皮根鞘论文参考文献
[1].王莹莹.上皮根鞘在Vps4b基因敲除鼠牙根发育中的形态和增殖凋亡能力变化[D].郑州大学.2019
[2].陈杰,郭维华,田卫东.牙囊和上皮根鞘细胞成无细胞牙骨质的机制[J].国际口腔医学杂志.2014
[3].刘晓辉,苑芳,邱宜农,李璇.上皮根鞘结构对牙根发育的影响[J].上海口腔医学.2014
[4].陈峰,陈学玮,潘卫红.赫特维希上皮根鞘在生物性牙根构建中的作用研究进展[J].中华老年口腔医学杂志.2014
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[9].刘晓辉,苑芳,文玲英,金岩.上皮根鞘细胞表达牙齿矿化相关蛋白mRNA的研究[J].牙体牙髓牙周病学杂志.2010
[10].白玉娣.大鼠切牙Apicalbud和磨牙Hertwig’s上皮根鞘细胞生物学性质研究[D].第四军医大学.2008