蛋白提纯论文-孙礼瑞,林洪,李振兴,赵金霞,林航

蛋白提纯论文-孙礼瑞,林洪,李振兴,赵金霞,林航

导读:本文包含了蛋白提纯论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:鱼过敏原,小清蛋白亚型,牙鲆,纯化

蛋白提纯论文文献综述

孙礼瑞,林洪,李振兴,赵金霞,林航[1](2019)在《牙鲆(Paralichthys olivaceus)中不同亚型小清蛋白的提纯与鉴定》一文中研究指出以牙鲆(Paralichthys olivaceus)为研究对象,以Tris、甘氨酸和二硫苏糖醇的混合溶液为提取液,加入不同量的硫酸铵分级纯化小清蛋白,应用免疫印迹法、酶联免疫法及质谱法进行鉴定。最终提纯得到3种不同分子质量的蛋白(PVⅠ、PVⅡ和PVⅢ),所得蛋白纯度大于90%,血清学实验证明其与小清蛋白特异性IgG及IgE抗体均有结合能力,质谱鉴定得到PVII和PVIII分子质量分别为12 151 Da和11 645 Da,pI值分别为5.14和4.69。该方法满足牙鲆小清蛋白提取纯化要求,得到的3种蛋白是牙鲆小清蛋白的不同亚型,且均具有过敏原性。(本文来源于《食品科学》期刊2019年12期)

盛晶梦,张发宇,袁梦媛,汪家权[2](2016)在《粉末活性炭吸附-双水相萃取法提纯藻蓝蛋白工艺研究》一文中研究指出采取粉末活性炭吸附-双水相萃取的工艺方法,以巢湖新鲜蓝藻藻泥为原料提纯藻蓝蛋白,在考虑煤质粉末活性炭添加量的基础上,探究粉末活性炭纯化藻蓝蛋白的效果。通过单因素和正交试验,确定粉末活性炭吸附-双水相萃取法纯化藻蓝蛋白的最优工艺条件:PEG分子量为4 000做高聚物,PEG浓度为4%,磷酸钾盐浓度为16%,体系p H为7.0。验证试验结果表明,经过优化工艺纯化后藻蓝蛋白纯度可达到3.461 7,组合工艺回收率为63%。与传统方法相比,该工艺具有设备小、成本低、周期短等特点。(本文来源于《环境工程技术学报》期刊2016年05期)

盛晶梦[3](2016)在《高效提纯巢湖蓝藻藻蓝蛋白工艺研究》一文中研究指出藻蓝蛋白是一种重要的藻胆蛋白,具有抗氧化性、抗癌性等特性,在发达国家中被广泛用作天然色素、医药保健品和制作荧光探针。本研究以巢湖新鲜蓝藻藻泥为原料,通过冻融破壁的方法破碎藻细胞,获得藻蓝蛋白粗提液,然后用粉末活性炭吸附法粗提藻蓝蛋白,并在此基础上分别通过双水相萃取法和多步盐析法纯化藻蓝蛋白,以探寻高效提纯藻蓝蛋白的最佳工艺。在粉末活性炭吸附法粗提藻蓝蛋白的实验研究中,首先对适合用于藻蓝蛋白纯化的粉末活性炭进行了种类、粒径的筛选,接着对粉末活性炭的温度、添加量、处理时间、pH值等条件进行了研究,最终确定了粉末活性炭吸附法粗提藻蓝蛋白的最佳处理条件,即煤质粉末活性炭,400~500目,温度25℃,添加量100g/L,吸附时间10min,溶液pH值为7.0。在双水相萃取藻蓝蛋白的实验研究中,以粉末活性炭吸附法处理后的藻蓝蛋白溶液为原料,分别用常见高聚物与盐配成的20种高聚物-盐双水相体系进行萃取,分析处理结果选出最佳的双水相体系;然后,通过单因素和正交实验,确定双水相萃取法纯化藻蓝蛋白的最优工艺条件为:PEG 4000做高聚物,磷酸钾做成相盐,PEG质量浓度为4%,磷酸钾质量浓度为16%,体系pH值为7.0。在多步盐析纯化藻蓝蛋白的实验研究中,以粉末活性炭吸附法处理后的藻蓝蛋白溶液为原料,通过多步盐析单因素实验研究硫酸铵浓度和盐析次数对藻蓝蛋白纯化效果的影响;然后,以一至四步盐析硫酸铵浓度为影响因素,通过正交实验研究四步盐析法纯化藻蓝蛋白的最优工艺条件。实验结果表明:四步盐析最佳硫酸铵物质的量浓度依次为1.0mol/L、2.0mol/L、1.2mol/L、2.0mol/L。条件优化后进行验证试验,藻蓝蛋白的纯度可达到国际公认的荧光试剂级标准(4.0)。(本文来源于《合肥工业大学》期刊2016-03-01)

王德明[4](2014)在《人血白蛋白的分离及提纯研究进展》一文中研究指出改进白蛋白工艺,加强产品稳定性及治疗对确保患者生命健康具有重要的意义,同时也节省企业资源,提高企业经济效益。目前国内血液制品发展面临较大的挑战,不仅受原材料血浆供应紧张的影响,同时缺乏自身产品多样性,因此对白蛋白分离及提纯工艺进行分析,提高人血白蛋白产品纯度,获得有效的血液制品是当前血液制品生产的重点及难点。本文将综述人血白蛋白分离及提纯的相关工艺要求,旨在为人血白蛋白的制备提供指导。(本文来源于《生物技术世界》期刊2014年11期)

张琪,程显好,郭文娟,刘凤红,王朝霞[5](2014)在《亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白的提纯及性质》一文中研究指出【目的】探讨锌离子诱导亚香棒虫草(Cordyceps hawkesii)菌丝体金属硫蛋白的产生及性质。【方法】亚香棒虫草菌丝体以18 g/L Zn2+在10 L发酵罐中诱导培养64 h后收集菌丝体,产率为每升发酵液收集12.2 g菌丝体(干重),细胞破碎取上清液通过2次凝胶柱层析,冷冻干燥得到亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白纯品。利用考马斯亮蓝法(Bradford法)进行含量测定,用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT含量,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分别测得巯基含量和结合锌原子数,用电喷雾质谱仪测得分子量,全自动氨基酸分析仪测氨基酸组成。通过对羟基自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率试验探讨亚香棒虫草金属硫蛋白的抗氧化活性。【结果】发酵终点金属硫蛋白产量为15.3 mg/g菌丝体湿重。金属硫蛋白的分子量为7 680 Da,每分子蛋白质含有18个巯基、结合4个Zn原子。氨基酸组成分析结果显示,每分子蛋白质共含60个氨基酸,其中含有15个半胱氨酸,且含有组氨酸和芳香族氨基酸。亚香棒虫草金属硫蛋白的抗氧化活性稍强于谷胱甘肽,弱于动物金属硫蛋白。【结论】亚香棒虫草在Zn2+胁迫下能够大量合成金属硫蛋白,且其金属硫蛋白的性质与哺乳动物金属硫蛋白有相似性。(本文来源于《微生物学通报》期刊2014年06期)

王秋岑[6](2013)在《不同食性鱼类胰蛋白酶的提纯、性质及蛋白消化力的比较研究》一文中研究指出胰蛋白酶是鱼类消化道中主要的碱性蛋白水解酶之一,属丝氨酸蛋白酶类,多存在于鱼类肝胰脏和幽门垂中,以酶原形式分泌,进入消化道后在肠激酶和Ca2+的作用下,去除激活肽后成为有活性的胰蛋白酶。鱼类的食性可分为草食性、肉食性和杂食性。本实验分别选取叁种食性鱼类中常见的草鱼、青鱼和鲫鱼作代表,对其胰蛋白酶进行分离提纯,比较不同食性鱼类胰蛋白酶在催化性质上的差异,并采用蛋白消化率和酶解动力学相结合的方法,对胰蛋白酶纯化酶液在离体条件下的酶解消化力进行较全面的研究,为研制和开发不同食性鱼类配合饲料、提高饲料蛋白的利用率提供一定的理论基础。1、不同食性鱼类胰蛋白酶的分离纯化草鱼、鲫鱼、青鱼胰蛋白酶的分离纯化主要通过粗提液的提取、硫酸铵分级沉淀、亲和层析和SDS-PAGE测定分子量四步进行。结果显示,分别使用40%-80%、30%-70%、20%-60%的硫酸铵溶液可收集到大部分草鱼、鲫鱼、青鱼的胰蛋白酶。亲和层析洗脱时均使用pH3.0的洗脱液得到较好的洗脱峰,经测定具有胰蛋白酶活性。SDS-PAGE电泳均只得到单一条带,测定得草鱼、鲫鱼、青鱼胰蛋白酶相对分子量分别为27.3KDa、26.7KDa、42.1KDa。草鱼、鲫鱼、青鱼胰蛋白的最终酶纯化倍数分别为122.25、130.46和128.39,最终产率分别为14.64%、16.63%和17.65%。2、不同食性鱼类胰蛋白酶部分性质的比较研究以BAPNA作为水解底物,测得草鱼、鲫鱼、青鱼胰蛋白酶的米氏常数Km值分别为0.030mol·L-1.0.036mol·L-1、0.027mol·L-1。以TAME作为底物,测得草鱼和鲫鱼的胰蛋白酶的最适pH为8.5,而青鱼的为9.0。草鱼和鲫鱼胰蛋白酶在pH6.0-10.0范围内相对较稳定,而青鱼的在pH7.0-10.0范围内稳定性较高。叁种鱼胰蛋白酶的最适温度均在40℃左右,在20-50℃其胰蛋白酶活性相对较稳定。Na+、Ca2+两种离子对这叁种不同食性鱼类胰蛋白酶活性都没有明显的影响,K+对其均有抑制作用,而Mg2+对其都具有激活作用,但激活强度随着Mg2+浓度的增加而变弱。EDTA对其均具有较强的抑制作用。3、不同食性鱼类胰蛋白酶消化能力的比较研究在离体环境中测定草鱼、鲫鱼、青鱼胰蛋白酶纯化酶液对牛血清白蛋白、酪蛋白、豆粕、棉粕、菜粕、鱼粉和麦麸的酶解动力学和离体消化率,并对其进行比较。草鱼胰蛋白酶纯化酶液酶解这七种蛋白质样品生成氨基酸的速率表现为酪蛋白>菜粕>棉粕>鱼粉>牛血清白蛋白>豆粕>麦麸,鲫鱼的为酪蛋白>菜粕>牛血清白蛋白>鱼粉>豆粕>棉粕>麦麸,而青鱼的为酪蛋白>鱼粉>棉粕>菜粕>豆粕>牛血清白蛋白>麦麸,以上测定结果均表现为差异显着(P<0.05)。青鱼胰蛋白酶对鱼粉酶解后产生氨基酸的速率要明显高于菜粕和豆粕的,而草鱼的胰蛋白酶对菜粕和棉粕的酶解能力要明显高于鱼粉的。由此看来,草食性鱼类的胰蛋白酶对植物性蛋白的消化力较强,而肉食性鱼类的胰蛋白酶对动物性蛋白的消化力较强。(本文来源于《南昌大学》期刊2013-05-30)

苗兰兰[7](2013)在《产金属硫蛋白菌株的诱变育种及蛋白的分离提纯》一文中研究指出本文意在诱变育种出高产金属硫蛋白酿酒酵母菌株,并对其羟自由基清除能力进行对比研究,为日后金属硫蛋白在清除自由基与促排重金属方面的应用提供了理论支持,同时也为大规模生产金属硫蛋白打下了基础。本文以酿酒酵母31206为出发菌株,采用紫外、微波及NTG叁重复合诱变,经过初筛、复筛、再复筛的方法筛选出金属硫蛋白产量较高的一株菌,经15代稳定性遗传表明该突变株稳定性较好,均保持在90%以上。总蛋白含量的测定用考马斯亮蓝G-250法,金属硫蛋白含量的检测用酶联免疫分析法(ELISA法),巯基活性的检测用简化巯基试剂(DTNB法)。诱变后总蛋白含量由原来的44.6mg/g菌体提高到170.2mg/g菌体,金属硫蛋白含量由原来38.3ng/L提高到163.4ng/L,巯基活性由原来的0.029μmol提高到0.146μmol。对突变株N-8菌株生产Cu-MT的摇瓶发酵条件进行优化,最佳条件为:选择CuCl2为诱导MT试剂,活化培养时间为24h,诱导培养pH为6.5,摇床转速为140r/min,接种量为1mL/50mL培养液,装液量为50mL/250mL叁角瓶,诱导培养温度为30℃,诱导培养时间为48h。选取诱导剂浓度,诱导培养时间,诱导培养温度,诱导培养pH四个因素进行响应面实验,求得最佳提取方案为:诱导剂浓度为0.7mmol/L,诱导培养时间为62h,诱导培养pH6.4,诱导培养温度为30℃。在此提取的条件下,测得金属硫蛋白产量为170.91ng/L。通过Sephadex-100凝胶柱分离出粗Cu-MT、DEAE-52离子柱层析分离粗MT叁个亚型:MT-Ⅰ,MT-Ⅱ,MT-Ⅲ,后Sephadex-25凝胶柱对蛋白组分进行脱盐,冷冻干燥得到MT纯品。通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得MT-Ⅰ,MT-Ⅱ,MT-Ⅲ分子量为7254。实验证实,对比抗坏血酸,金属硫蛋白各个亚型具有很强的羟基清除能力。(本文来源于《黑龙江八一农垦大学》期刊2013-04-01)

王巍,谢波,刘芳,吴观生,刘师宏[8](2013)在《九州虫草中金属硫蛋白的诱导、提纯及性质研究》一文中研究指出目的以生物发酵工程为手段,探寻一种经济,高效,简易的金属硫蛋白生产工艺,并用正交试验法优选出最适的生产提取条件及验证所提取的金属硫蛋白性质。方法以经过基因工程改良的九州虫草真菌为菌种,采用液态深层发酵增殖菌丝体并用ZnSO4刺激诱导其合成金属硫蛋白,后经细胞破碎,粗提取和层析等步骤,得到锌金属硫蛋白,同时初步研究硫酸锌诱导虫草金属硫蛋白的最佳条件,提纯后所得金属硫蛋白的相对分子质量,巯基含量及金属锌的含量。结果较传统动物肝脏提取方法,九州虫草菌株发酵法可快速高效的制得金属硫蛋白,发酵过程中培养基中锌原子浓度达15 g.L-1时金属硫蛋白达到最高产率,可达10.86 mg.g-1菌丝体(湿重)。该种锌金属硫蛋白分子量约为7 kD,每分子金属硫蛋白含有由21个半胱氨酸和7个锌原子。结论通过蛋白柱层析图谱,紫外光扫描图谱分析,证明所提取蛋白符合金属硫蛋白的相应特征。(本文来源于《安徽医药》期刊2013年03期)

吕九云,孟洋,王媛,叶臣君,张泽力[9](2013)在《犬红细胞膜糖蛋白的提纯与鉴定》一文中研究指出为了研究犬的血型,首先从红细胞膜表面抗原即犬红细胞膜血型糖蛋白入手,试验采用低渗溶血法制备犬红细胞的鬼影细胞,进而制备兔抗犬的红细胞多克隆抗体进行细胞凝集检测,再经SDS-PAGE和蛋白质免疫印记分析蛋白条带。结果表明:试验所得犬细胞膜糖蛋白与国际上测得的部分犬血型糖蛋白分子质量相符。说明此种提纯方法可用于研究犬的红细胞膜表面糖蛋白。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2013年01期)

张杰,李洋,韩小贤,何义萍,赵亚娟[10](2012)在《燕麦蛋白的碱法提取工艺及其提纯研究》一文中研究指出为提高燕麦蛋白的提取率,采用正交试验对碱提酸沉法提取燕麦蛋白的工艺进行优化,确定其最佳提取工艺条件为料液比1∶13(m∶V),浸提液pH值10.5,浸提温度45℃,搅拌时间1.7h。该条件下燕麦蛋白提取率可达68.46%。经石油醚提纯后燕麦蛋白纯度可达86.35%,有效提高了燕麦蛋白的提取率。(本文来源于《食品与机械》期刊2012年04期)

蛋白提纯论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

采取粉末活性炭吸附-双水相萃取的工艺方法,以巢湖新鲜蓝藻藻泥为原料提纯藻蓝蛋白,在考虑煤质粉末活性炭添加量的基础上,探究粉末活性炭纯化藻蓝蛋白的效果。通过单因素和正交试验,确定粉末活性炭吸附-双水相萃取法纯化藻蓝蛋白的最优工艺条件:PEG分子量为4 000做高聚物,PEG浓度为4%,磷酸钾盐浓度为16%,体系p H为7.0。验证试验结果表明,经过优化工艺纯化后藻蓝蛋白纯度可达到3.461 7,组合工艺回收率为63%。与传统方法相比,该工艺具有设备小、成本低、周期短等特点。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

蛋白提纯论文参考文献

[1].孙礼瑞,林洪,李振兴,赵金霞,林航.牙鲆(Paralichthysolivaceus)中不同亚型小清蛋白的提纯与鉴定[J].食品科学.2019

[2].盛晶梦,张发宇,袁梦媛,汪家权.粉末活性炭吸附-双水相萃取法提纯藻蓝蛋白工艺研究[J].环境工程技术学报.2016

[3].盛晶梦.高效提纯巢湖蓝藻藻蓝蛋白工艺研究[D].合肥工业大学.2016

[4].王德明.人血白蛋白的分离及提纯研究进展[J].生物技术世界.2014

[5].张琪,程显好,郭文娟,刘凤红,王朝霞.亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白的提纯及性质[J].微生物学通报.2014

[6].王秋岑.不同食性鱼类胰蛋白酶的提纯、性质及蛋白消化力的比较研究[D].南昌大学.2013

[7].苗兰兰.产金属硫蛋白菌株的诱变育种及蛋白的分离提纯[D].黑龙江八一农垦大学.2013

[8].王巍,谢波,刘芳,吴观生,刘师宏.九州虫草中金属硫蛋白的诱导、提纯及性质研究[J].安徽医药.2013

[9].吕九云,孟洋,王媛,叶臣君,张泽力.犬红细胞膜糖蛋白的提纯与鉴定[J].黑龙江畜牧兽医.2013

[10].张杰,李洋,韩小贤,何义萍,赵亚娟.燕麦蛋白的碱法提取工艺及其提纯研究[J].食品与机械.2012

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