一、“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展(论文文献综述)
王金雷[1](2012)在《基于Fosmid文库和PCR筛选技术的蜘蛛包卵丝蛋白基因克隆及分析》文中进行了进一步梳理蜘蛛丝具有多样的分子结构及生物生态学功能,同时还具有强度高、弹性好、初始模量大、断裂能大、可生物降解、生物相容性好、保湿性好、轻盈等其它合成高性能纤维所无法比拟的优良机械性能及特性,因而,在纺织、航天航空、生物医学以及军事等领域具有广泛的潜在应用前景。然而,蜘蛛具有种内残食性且蛛丝产量较低,因而,采用大规模饲养蜘蛛以获取蛛丝的方法是不可取的,目前以基因工程的方法获取蛛丝蛋白是首选策略。研究表明包卵丝的韧性极其优越,因此,本实验通过构建大腹园蛛基因组Fosmid文库以钓取包卵丝蛋白全长编码基因,从而为后续仿生蛛丝的研究奠定基础。包卵丝蛋白主要分为葡萄状丝蛋白和管状腺丝蛋白,本实验主要围绕这两种蛋白开展研究:1.成功分离葡萄状腺体及管状腺体并获取其高质量总RNA,并通过巢式PCR技术获取悦目金蛛葡萄状腺丝和管状腺丝部分cDNA序列,并对其的分子机制进行了探索与讨论,初步阐释了包卵丝蛋白的结构模式和进化演变,为包卵丝全长基因的克隆及仿生研究提供了前期研究基础;2.通过3’-RACE的方法成功获取大腹园蛛葡萄状丝CTR序列及两个完整的重复单元,为AcSp1编码基因的结构解析提供了参考,并为进一步研究蛛丝蛋白基因结构特点及人工仿生蜘蛛丝奠定了理论基础;3.建立了适于提取大腹园蛛HMW-gDNA的方法—改进的CTAB法,并在此基础上,成功构建了无偏向性的A. ventricosus Fosmid基因组文库,对30-40 Kb的外源片段经过补平磷酸化、连入pCC2FOSTM载体、lambda噬菌体包装蛋白进行体外包装、转染EPI300TM-T1R E.coli,成功共构建了A. ventricosus Fosmid基因组文库。5次包装滴定度处于6.0×104-1.1×105之间,共产生约2.99×105个文库克隆,覆盖A. ventricosus全基因组约5倍;4.建立了基因组文库的PCR逐级筛选系统:该方法基于384-well plate构建Fosmid基因组文库的板混合池、行混合池和列混合池,利用特异性引物对混合池进行筛选以确定阳性克隆的精确位置,该方法既保留了常规PCR文库筛选方法的简捷经济的特点,又弥补了筛选周期长、工作量大等缺点。通过本实验研究,成功获取了悦目金蛛(Argiope amoena)和大腹园蛛(Araneus ventricosus)包卵丝蛋白编码基因,并成功构建了大腹园蛛基因组Fosmid文库并建立适于基因组文库的PCR逐级筛选系统,为后续的筛选工作奠定了基础。
李豫珍[2](2009)在《聚酯弹性体的合成和天然橡胶的改性研究》文中指出本论文分为高分子聚酯弹性体的合成及天然橡胶的改性两个部分,聚酯弹性体的合成是采用两步合成法合成聚(癸二酸-1,2-丙二醇-丙三醇);天然橡胶弹性体的改性是通过改变2-(4-吗菲啉基硫代)苯并噻唑(NOBS)与硫磺(S)的质量比来改变天然橡胶的硫化程度,得到NOBS与S质量比-溶胀度-抗压模量的关系曲线,为硫化橡胶的进一步改性提供理论依据。第一部分是合成聚(癸二酸-1,2-丙二醇-丙三醇)弹性体,癸二酸与1,2-丙二醇先发生酯化得到以羧基为端基的低聚体,然后以丙三醇为交联剂,进一步酯化得到三维空间网状结构的弹性体,并通过改变原料中癸二酸,1,2-丙二醇和丙三醇的摩尔比例制备一系列聚酯弹性体。差示扫描量热法和X射线衍射的分析结果表明,癸二酸,1,2-丙二醇和丙三醇的摩尔比例为3/2/1和3/1.5/1的弹性体玻璃化转变温度分别为-38.6℃和-32.6℃,为无定型态。由动态接触角和体外降解性能测试可得,弹性体呈现亲水性,且随着原料配比中癸二酸量的增大,弹性体在磷酸盐缓冲液(pH=7.4)中的降解速率加快,癸二酸,1,2-丙二醇和丙三醇的摩尔比例为6:3:2的弹性体降解速率最快,在51.3h内失重率达11.98%。力学性能测试表明,随着原料配比中癸二酸量的增大,弹性体的压缩杨氏模量逐渐增加,依次为0.38MPa,0.56MPa,0.66MPa。第二部分是通过硫化的方式对天然橡胶进行改性研究。实验中通过改变NOBS与S质量比,得到不同交联密度的硫化橡胶。溶胀实验表明,随着NOBS/S比值的增加,溶胀度逐渐增大,依次为1.17,1.55,2.39,3.25,3.32。力学性能分析表明,溶胀前与溶胀后橡胶抗压模量随着NOBS与S比值的增大均逐渐降低,溶胀前抗压模量依次为5.52MPa,3.87MPa,2.90MPa,2.11MPa,1.56MPa,溶胀后为0.73MPa,0.43MPa,0.15MPa,0.09MPa,0.04Mpa,溶胀后橡胶的力学性能明显下降。
刁均艳[3](2008)在《虎纹捕鸟蛛丝的结构与性能及其静电纺再生加工》文中研究指明蜘蛛丝纤维是自然界力学性能最优良的天然蛋白质纤维,蜘蛛丝还具有生物可降解性、生物相容性等性能。虎纹捕鸟蛛是一种可人工养殖的蜘蛛,其所产的丝纤维具有良好的潜在应用价值,但天然蜘蛛丝较杂乱难以直接利用,需将其再生加工为可直接使用的产品形式,静电纺就提供了一种简单易行的制备片状蜘蛛丝纤维制品的方法。本文以虎纹捕鸟蛛丝和大腹园蛛牵引丝为研究对象,主要进行了以下几方面的研究:虎纹捕鸟蛛丝的基本结构和性能:测定与分析了虎纹捕鸟蛛丝的基本结构与性能,并与大腹园蛛牵引丝作比较。虎纹捕鸟蛛丝纤维的表面光滑,直径是已知蛛丝中最小的,在水等溶剂中几乎不收缩;其氨基酸组成中,丙氨酸、丝氨酸的含量比大腹园蛛牵引丝多,且含有较多的极性氨基酸,但甘氨酸的含量比大腹园蛛牵引丝少;虎纹捕鸟蛛丝纤维的分子构象具有显着的β-折叠结构特征,同时也有α-螺旋和无规卷曲分子的存在;结晶度大于大腹园蛛牵引丝;耐热性也优于大腹园蛛牵引丝。天然蜘蛛丝的溶解性能:以虎纹捕鸟蛛丝和大腹园蛛牵引丝为对象,研究了不同溶剂体系下这两种不同类属蜘蛛丝的溶解性能,以期找到一种溶解效果好、价廉、低毒的溶剂。大腹园蛛丝在9MLiBr、99%六氟异丙醇(HFIP)以及88%甲酸里的溶解率均超过90%,而虎纹捕鸟蛛丝的溶解能力小于前者,在上述3种溶剂中的溶解率分别是10.3%、74.9%和57.7%。再生蜘蛛丝蛋白的分子结构:用SDS凝胶电泳测定了大腹园蛛牵引丝/甲酸溶液的分子量分布,发现其分子量分布较宽,在50300KDa之间;用红外光谱对再生蜘蛛丝蛋白膜的分子结构分析发现,由两种蛛丝在不同溶剂里溶解后所得的再生蜘蛛丝蛋白膜中,都含有α-螺旋/无规卷曲分子和β-折叠结构的分子,并且HFIP和LiBr的作用基本相似,而以甲酸为溶剂时,再生大腹园蛛牵引丝蛋白膜中,β-折叠分子的特征吸收峰明显增强。经过再生加工后,蜘蛛丝蛋白的β-折叠分子结构有所弱化。静电纺再生蜘蛛丝的结构与性能:用静电纺丝的方法得到了再生虎纹捕鸟蛛丝和大腹园蛛牵引丝纤维构成的非织造织物。将虎纹捕鸟蛛丝和大腹园蛛牵引丝分别溶解在HFIP、HFIP和甲酸的混合溶剂中,制得用于静电纺丝的再生蜘蛛丝蛋白溶液,并在一定的条件下进行静电纺丝。分别用扫描电镜、傅立叶红外光谱仪(FTIR)、X-射线衍射仪、热分析仪(TG-DTA)以及Instron强力仪测试了它们的外观形态、二级结构、结晶结构、热性能以及力学性能。静电纺再生虎纹捕鸟蛛丝纤维在水中具有良好的形态稳定性。静电纺再生大腹园蛛牵引丝纤维遇水则发生严重的收缩,对其用乙醇处理后,在水中的形态稳定性得到了改善,处理前后的纤维的分子构象并无改变,纤维的结晶度、耐热性能以及断裂强度均较原样有较大的改善。本文还初步探索了静电纺再生虎纹捕鸟蛛丝纤维的细胞相容性,研究发现该材料与大鼠间充质干细胞具有良好的细胞相容性。
黄晶星[4](2008)在《RGD-拖丝蛋白基因的构建及其在毕赤酵母中的分泌表达》文中认为蜘蛛丝,特别是机械性能优异的拖丝,作为高性能生物材料的研究已引起人们的关注。本室已在大肠杆菌系统中成功表达了含有细胞粘附肽RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)的重组蜘蛛拖丝蛋白。本文在此基础上,重新设计了RGD-拖丝蛋白单体,以毕赤酵母偏好的密码子合成拖丝蛋白基因单体,同时在单体序列的末端,设计了两组限制性酶切位点,用于基因单体的克隆与多聚化。将基因单体克隆入载体pBluescript SKⅡ,测序鉴定重组质粒。通过“头尾相接”的策略构建拖丝蛋白多聚体基因,依次构建2聚体、4聚体、8聚体、16聚体以及32聚体RGD-重组拖丝蛋白基因工程菌。选择高聚合度的16聚体与32聚体拖丝蛋白基因,分别克隆到酵母穿梭型表达载体pPIC9K,重组表达载体命名为YNSR16与YNSR32。线性化后电击转化毕赤酵母宿主菌GS115,通过浓度梯度的YPD-G418平板,筛选多拷贝插入的重组菌。对筛选出的重组菌,通过引物(a-factor与3’AOX)进行PCR鉴定,结果显示目的基因已正确整合入GS115基因组中。表明毕赤酵母重组菌的构建在基因水平上达到预期目的。以16聚体毕赤酵母重组菌的表达产物为分析对象,进行SDS-PAGE分析,通过银染显色,结果显示,16聚体毕赤酵母重组菌分泌表达分子量约47KD的RGD-重组拖丝蛋白,这与理论值相符。在此基础上,摸索建立了毕赤酵母重组菌摇瓶表达的方法,初步确定了诱导表达的条件:培养基pH值为6.0,培养温度为30℃,诱导剂甲醇浓度为1.5%(V/V);诱导时间为96h。以16聚体与32聚体毕赤酵母重组菌为对象,研究了目的基因性质与整合位点对重组拖丝蛋白表达的影响。16聚体与32聚体拖丝蛋白基因为高度重复性序列,GC含量较高,其mRNA易形成复杂的二级结构,不利于重组拖丝蛋白的高效表达;目的基因可整合于毕赤酵母基因组的不同位点,最终确定目的基因整合于宿主菌基因组的组氨酸脱氢酶基因位点,有利于重组拖丝蛋白的表达。
阮超然[5](2007)在《高分子量RGD-蛛丝蛋白重组体构建、高密度发酵及纯化》文中指出蜘蛛丝既轻又坚韧,是自然界综合性能优良的天然蛋白质纤维之一,因其具有良好的生物相容性和可降解性在生物医学领域具有潜在的应用前景。精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(RGD)是许多粘附蛋白的高度保守氨基酸序列,生物材料表面结合RGD肽有助于细胞在材料上的粘附、迁移和增殖。本室先前运用基因工程的方法,将具有特定信号识别功能的RGD三肽模体与蛛丝蛋白基因重组,构建了具有RGD三肽编码子和蛛丝蛋白基因16多聚体的克隆重组子pDSR16,首次生物合成RGD三肽和蛛丝蛋白16多聚体(pNSR16)。但在利用16多聚体重组蛛丝蛋白作原料制备生物材料的研究中,观察到因其与天然蛛丝蛋白在分子量上的差距较大,影响了材料性能的表征。因此,在本室已经构建的RGD-蜘蛛拖丝蛋白基因16多聚体基础上,通过首尾相连、倍加等方法进一步多聚化,得到RGD-蜘蛛拖丝蛋白基因32和164多聚体,分别将这两种多聚体与原核高效表达载体pET-30a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,得到的32多聚体表达重组子命名为pNSR32,64多聚体表达重组子命名为pNSR64。通过酶切、琼脂糖电泳鉴定及对目的片断的测序均与理论值相符。将32和64多聚体基因序列登陆GenBank,序列号分别为DQ469929和DQ837297。重组体pNSR32和pNSR64经IPTG诱导表达,SDS-PAGE图谱显示表达产物分子量分别为102KD和196.6KD,与天然蛛丝蛋白分子量接近并与理论值相吻合。高分子量的蛛丝蛋白在原核生物成功实现高效表达,在国内外尚未见报道。在此基础上,对pNSR32工程菌进行高密度发酵条件摸索并建立了简单高效的目的蛋白纯化工艺。
刘庆生,段亚峰[6](2005)在《蜘蛛丝的结构性能与研究现状》文中进行了进一步梳理结合蜘蛛丝研究的历史与研究现状,阐述了中国大腹圆蜘蛛牵引丝、框丝及包卵丝等天然蜘蛛丝的聚集态结构和形态结构,对比分析了蜘蛛丝的物理、力学及机械性能,介绍了利用基因工程技术人工生产蜘蛛丝的主要方法和途径。
许箐[7](2005)在《再生蜘蛛丝的成丝方法及其结构与性能》文中研究表明蜘蛛丝是一种轻质的具有高强度和高弹性的蛋白质纤维,因此可应用于纺织服装、纤维增强复合材料等领域。此外,蜘蛛丝具有的生物相容性还使其能应用于生物医学领域。近来已经用基因移植的方法成功地合成了人造蜘蛛丝蛋白,从而使蜘蛛丝蛋白质纤维的工业化生产成为可能。目前生产人造蜘蛛丝的最大障碍是还需要找到一种合适的纺丝方法使这种丝蛋白成为具有接近于天然蜘蛛丝的材料。静电纺丝技术的发展为人造蜘蛛丝的纺制提供了一种简单可行的方法。 本文以大腹圆蛛牵引丝和包卵丝为研究对象,在分析了再生蜘蛛丝溶液的成丝性能的基础上,研究了静电纺再生牵引丝和包卵丝纤维膜的性能。主要内容如下: 研究了不同溶剂体系和工艺条件下的再生牵引丝溶液和膜的性能,以期找到一种合适的纺丝溶液。SDS凝胶电泳的结果显示以溴化锂(LiBr)为溶剂的再生牵引丝溶液比以六氟异丙醇(HFIP)为溶剂的溶液有更宽的分子量分布;用拉曼光谱研究了由溴化锂为溶剂得到的再生牵引丝膜,发现其分子构象包含α-螺旋、β-折叠和无规卷曲三种结构;用傅立叶红外光谱(FTIR)研究了以HFIP为溶剂的牵引丝膜,发现其构象以α-螺旋和无规卷曲为主;拉曼光谱显示成膜温度对以溴化锂为溶剂的再生蜘蛛丝膜的分子结构影响不大;实验显示以HFIP为溶剂的再生牵引丝溶液较LiBr溶剂体系下有更好的成丝性能。 用静电纺丝的方法得到了再生牵引丝和包卵丝的纤维膜(ERDSF和ERESF)。牵引丝和包卵丝都溶解在HFIP中作为静电纺的溶液。分别用扫描电镜、X-射线衍射、FTIR、差示扫描量热法(DSC)和电子纤维强力仪测试了ERDSF和ERESF的形态,结晶结构,二级结构、热性能和力学性能。研究了电场强度和喷丝口到接收屏距离对纤维形态的影响。发现静电纺的牵引丝和包卵丝比天然蜘蛛丝的结晶度高得多;ERDSF和ERESF都包含α-螺旋,β-折叠和无规卷盐的分子结构;ERDSF和ERESF具有与天然蜘蛛牵引丝和包卵丝相似的耐热性能;ERDSF比ERESF具有更优异的力学性能,放置一周后这两种纤维膜的断裂强度都下降,断裂伸长的变化则不明显。 用甲醇处理ERDSF和ERESF以改善其性能,X-射线衍射的结果显示经甲醇处理后的ERDSF和ERESF的结晶度都大为增加;FTIR的结果表明这两种膜材料经甲
许箐,潘志娟[8](2005)在《蜘蛛丝蛋白的人工合成及人造蜘蛛丝》文中认为蜘蛛丝是一种天然的高性能蛋白质纤维,由于其优异的力学性能而引起广泛的关注。随着生物技术的发展,人工合成蜘蛛丝蛋白已成为可能,并且可以用湿法纺丝技术将人工合成蜘蛛丝蛋白纺制成人造蜘蛛丝。通过改进纺丝工艺以及纺丝后处理方法可以改善人造蜘蛛丝的力学性能。本文对蜘蛛丝蛋白的人工合成以及蜘蛛丝蛋白的纺丝方法作一个综述。
何兰芝,陈莉萍,王学梅[9](2004)在《二十一世纪新型纤维——蜘蛛丝》文中研究表明介绍了蜘蛛丝的形成、结构性能,利用生物技术开发蜘蛛丝的几种途径及应用前景。
王晓玉,柳增善,任洪林[10](2002)在《“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展》文中研究指明 0 引言 蜘蛛丝是由蜘蛛丝腺体分泌的蛋白质遇空气凝结而成,蜘蛛从受精卵孵出到死亡,终生都分泌蜘蛛丝,它是自然选择留给蜘蛛的一种生存、繁衍的工具,离开了蛛丝,蜘蛛也就无法在这个世上存在,所以蜘蛛丝特别是拖丝又被称为蜘蛛的“命绳”,生物进化赋予了这种生物蛋白丝,有着其他现有的任何纤维无可比拟的力学特性,被誉为“生物钢蛋白”,由于其特殊的性质,所以蜘蛛丝受到人们越来越多的广泛关注。
二、“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展(论文提纲范文)
(1)基于Fosmid文库和PCR筛选技术的蜘蛛包卵丝蛋白基因克隆及分析(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表 |
技术路线图 |
第1章 绪论 |
1.1 前言 |
1.2 蜘蛛丝的分类及功能 |
1.3 蜘蛛纺丝过程的探究 |
1.4 蜘蛛丝的分子结构及性能 |
1.5 蜘蛛丝的研究进展及前景 |
1.6 课题的研究背景及意义 |
第2章 悦目金蛛包卵丝蛋白分子机制初探 |
2.1 前言 |
2.2 材料 |
2.3 方法 |
2.4 结果 |
2.5 讨论 |
第3章 包卵丝蛋白CTR序列的克隆及分析 |
3.1 前言 |
3.2 材料 |
3.3 方法 |
3.4 结果 |
3.5 讨论 |
第4章 大腹园蛛基因组Fosmid文库的构建及筛选系统的建立 |
4.1 前言 |
4.2 材料 |
4.3 方法 |
4.4 结果 |
4.5 讨论 |
第5章 结论 |
5.1 结论 |
5.2 创新点 |
5.3 展望 |
参考文献 |
硕士期间发表论文和参加科研情况说明 |
致谢 |
附录一 |
附录二 |
(2)聚酯弹性体的合成和天然橡胶的改性研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 绪论 |
1.1 前言 |
1.2 弹性体材料的研究现状 |
1.2.1 传统弹性体材料 |
1.2.2 新型弹性体材料 |
1.2.2.1 脂肪族聚酯弹性体 |
1.2.2.2 聚肽弹性体 |
1.2.2.3 聚醚酯弹性体 |
1.3 弹性体材料的应用 |
1.3.1 在人造组织器官方面的应用 |
1.3.2 在组织工程支架方面的应用 |
1.3.3 在疾病鉴定方面的应用 |
1.3.4 在其它领域的应用 |
1.4 课题的提出与研究思路 |
第二章 聚酯弹性体的合成、表征及性能分析 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 实验原料及仪器 |
2.2.1.1 主要原料与试剂 |
2.2.1.2 主要仪器及设备 |
2.2.2 实验过程 |
2.2.2.1 低聚体的合成 |
2.2.2.2 弹性体的合成 |
2.2.2.3 弹性体的成型 |
2.2.3 聚酯弹性体的性能分析及测试 |
2.2.3.1 低聚体酸值测试 |
2.2.3.2 红外光谱(FTIR)分析 |
2.2.3.3 X射线光电子能谱(XPS)分析 |
2.2.3.4 溶胶/凝胶含量测试 |
2.2.3.5 X-射线衍射(XRD)分析 |
2.2.3.6 差示扫描量热法(DSC)分析 |
2.2.3.7 亲水性测试 |
2.2.3.8 体外降解性能测试 |
2.2.3.9 力学性能测试 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 低聚体酸值分析 |
2.3.2 红外光谱(FTIR)分析 |
2.3.3 X射线光电子能谱(XPS)分析 |
2.3.4 溶胶/凝胶含量测试 |
2.3.5 X-射线衍射(XRD)分析 |
2.3.6 差示扫描量热仪(DSC)分析 |
2.3.7 弹性体表面亲水性分析 |
2.3.8 弹性体的体外降解性能测试 |
2.3.9 弹性体的力学性能测试 |
2.4 本章小结 |
第三章 天然橡胶的改性 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 实验原料及实验仪器 |
3.2.2 实验过程 |
3.2.3 硫化橡胶的性能测试 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 硫化橡胶的溶胀性能分析 |
3.3.2 硫化橡胶的力学性能分析 |
3.4 本章小结 |
第四章 全文结论 |
参考文献 |
致谢 |
(3)虎纹捕鸟蛛丝的结构与性能及其静电纺再生加工(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 天然蜘蛛丝纤维的概况 |
1.1.1 概况 |
1.1.2 蜘蛛丝的超收缩性能 |
1.1.3 蜘蛛丝的生物相容性 |
1.2 人造蜘蛛丝纤维的概况 |
1.2.1 蜘蛛丝蛋白的人工合成 |
1.2.2 人造蜘蛛丝纤维的研究现状 |
1.3 蜘蛛丝蛋白溶液的静电纺丝 |
1.3.1 静电纺丝的基本原理 |
1.3.2 蜘蛛丝蛋白溶液的静电纺丝 |
1.4 本课题的研究目的和内容 |
第二章 虎纹捕鸟蛛丝的基本结构与性能 |
2.1 实验材料 |
2.2 实验方法 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 氨基酸组成 |
2.3.2 分子构象 |
2.3.3 结晶度 |
2.3.4 形态结构 |
2.3.5 收缩性 |
2.3.6 热稳定性 |
2.4 本章结论 |
第三章 蜘蛛丝的溶解性能与再生蜘蛛丝蛋白的结构 |
3.1 两种不同类属蜘蛛丝的溶解性能 |
3.1.1 实验材料与方法 |
3.1.2 结果与分析 |
3.2 大腹园蛛丝蛋白溶液的分子量 |
3.2.1 实验 |
3.2.2 结果与分析 |
3.3 再生蜘蛛丝蛋白的分子构象 |
3.3.1 实验 |
3.3.2 结果与分析 |
3.4 本章结论 |
第四章 静电纺再生蜘蛛丝蛋白纤维的结构与性能 |
4.1 静电纺虎纹捕鸟蛛丝纤维的结构与性能 |
4.1.1 实验材料 |
4.1.2 实验方法 |
4.1.3 结果与分析 |
4.2 静电纺大腹园蛛牵引丝的结构与性能 |
4.2.1 实验材料与实验方法 |
4.2.2 结果与分析 |
4.3 本章结论 |
第五章 静电纺再生蜘蛛丝的后处理及细胞相容性 |
5.1 静电纺OHSH 和AVSHF 纤维毡的后处理 |
5.1.1 静电纺OHSH 和AVSHF 纤维毡的稳定性 |
5.1.2 静电纺 AVSHF 纤维毡的乙醇处理 |
5.2 静电纺虎纹捕鸟蛛丝纤维的细胞相容性 |
5.2.1 实验 |
5.2.2 结果与分析 |
5.3 本章结论 |
第六章 结论与展望 |
6.1 结论 |
6.2 展望 |
参考文献 |
攻读学位期间公开发表的论文 |
致谢 |
(4)RGD-拖丝蛋白基因的构建及其在毕赤酵母中的分泌表达(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
中文文摘 |
第1章 绪论 |
1.1 课题背景 |
1.2 蜘蛛丝的研究进展 |
1.2.1 蜘蛛丝的来源 |
1.2.2 蜘蛛丝的组成与结构 |
1.2.3 蜘蛛丝的性能 |
1.2.4 蜘蛛丝的人工合成研究 |
1.2.5 蜘蛛丝的应用前景 |
1.3 巴斯德毕赤酵母表达系统 |
1.3.1 毕赤酵母的表达菌株 |
1.3.2 毕赤酵母的表达载体 |
1.3.3 外源基因的转化与整合 |
1.3.4 高拷贝转化菌株的筛选 |
1.3.5 外源蛋白的翻译后修饰 |
1.3.6 影响外源基因表达的因素及其优化策略 |
1.3.7 毕赤酵母表达重组蛛丝蛋白 |
1.4 研究的主要内容、目的与意义 |
1.4.1 主要内容 |
1.4.2 目的 |
1.4.3 意义 |
第2章 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 菌株与载体 |
2.1.2 工具酶及试剂盒 |
2.1.3 主要药品 |
2.1.4 主要仪器 |
2.1.5 培养基及常用溶液 |
2.2 方法 |
2.2.1 蛛丝蛋白基因单体的设计与寡核苷酸片断的合成 |
2.2.2 蛛丝蛋白基因单体的获得、鉴定与克隆 |
2.2.3 RGD-蛛丝蛋白基因单体的多聚化 |
2.2.4 RGD-蛛丝蛋白基因多聚体重组表达质粒的构建 |
2.2.5 含RGD-蛛丝蛋白基因的毕赤酵母重组菌的构建 |
2.2.6 毕赤酵母重组菌的分泌表达 |
第3章 结果与分析 |
3.1 RGD-蛛丝蛋白基因单体的构建 |
3.2 RGD-蛛丝蛋白基因单体的克隆 |
3.3 RGD-蛛丝蛋白基因多聚体的构建 |
3.4 重组表达载体的构建 |
3.5 毕赤酵母重组菌的构建 |
3.5.1 重组表达载体的线性化 |
3.5.2 线性化重组表达载体的电击转化 |
3.5.3 多拷贝插入毕赤酵母重组菌的筛选 |
3.5.4 多拷贝插入毕赤酵母重组菌的PCR鉴定 |
3.6 表达产物的SDS-PAGE的检测 |
第4章 讨论 |
4.1 蛛丝蛋白基因单体的设计 |
4.2 蛛丝蛋白基因单体的合成与克隆 |
4.3 蛛丝蛋白基因单体的多聚化与重组表达载体的构建 |
4.4 电击转化与整合 |
4.5 重组拖丝蛋白的分泌表达 |
4.5.1 拖丝蛋白多聚体基因的结构 |
4.5.2 整合位点的影响 |
4.5.3 多聚体基因拷贝数的影响 |
4.5.4 表达产物的检测 |
结论 |
附录 |
参考文献 |
(5)高分子量RGD-蛛丝蛋白重组体构建、高密度发酵及纯化(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
中文文摘 |
目录 |
第1章 绪论 |
1.1 蜘蛛丝的研究进展 |
1.1.1 蜘蛛丝纤维的来源及组成 |
1.1.2 蜘蛛丝的性能 |
1.1.3 蜘蛛丝基因工程研究进展 |
1.1.4 蜘蛛丝的应用 |
1.2 基因工程菌高密度发酵研究进展 |
1.2.1 原核表达系统的研究进展 |
1.2.2 高密度发酵研究进展 |
1.2.3 大肠杆菌外源基因的表达 |
1.2.4 宿主和载体 |
1.2.5 目的基因的表达及调控 |
1.3 研究的目的、内容与意义 |
1.3.1 研究目的 |
1.3.2 研究的内容 |
1.3.3 研究的意义 |
第2章 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 主要仪器 |
2.1.2 主要药品 |
2.1.3 菌株和载体 |
2.1.4 软件 |
2.1.5 常用培养基和缓冲液 |
2.2 方法 |
2.2.1 pSDR32和pSDR64重组子的构建 |
2.2.2 pNSR32及pNSR64重组表达工程菌的构建 |
2.2.3 pNSR32和pNSR64基因工程菌的摇瓶表达 |
2.2.4 pNSR32基因工程菌的高密度发酵 |
2.2.5 RGD-蛛丝蛋白32聚体的纯化方法 |
第3章 结果与分析 |
3.1 pSDR32和pSDR64重组子的构建及鉴定 |
3.2 pNSR32和pNSR64基因工程菌的构建及鉴定 |
3.3 pNSR32和pNSR64重组蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定 |
3.4 pNSR32基因工程菌分批补料高密度发酵 |
3.5 pNSR32重组蛋白的分离与纯化条件摸索 |
第4章 讨论 |
4.1 高分子量 RGD-蛛丝蛋白重组体构建 |
4.2 高密度发酵条件的摸索 |
4.3 对重组蛋白的纯化工艺进行摸索 |
结论 |
参考文献 |
附录 |
攻读硕士学位期间承担的科研任务与主要成果 |
个人简历 |
(7)再生蜘蛛丝的成丝方法及其结构与性能(论文提纲范文)
第一章 绪论 |
第一节 蜘蛛丝的研究进展 |
第二节 静电纺丝的原理及进展 |
第三节 本课题的研究目的和研究内容 |
参考文献 |
第二章 再生蜘蛛丝的纺丝溶液 |
第一节 不同溶剂体系下蜘蛛丝蛋白质溶液的分子量 |
第二节 不同溶剂体系下蜘蛛丝蛋白的分子构象 |
第三节 不同工艺条件下蜘蛛丝蛋白的分子构象 |
第四节 纺丝溶液的成丝特征 |
本章结论 |
参考文献 |
第三章 再生蜘蛛丝的静电纺丝 |
第一节 纺丝工艺条件对再生蜘蛛丝的影响 |
第二节 静电纺蜘蛛丝的结晶结构 |
第三节 静电纺蜘蛛丝的二级结构 |
第四节 静电纺蜘蛛丝的热性能 |
第五节 静电纺蜘蛛丝的力学性能 |
本章结论 |
参考文献 |
第四章 静电纺蜘蛛丝的后处理 |
第一节 静电纺蜘蛛丝的结构稳定性 |
第二节 甲醇处理后ERDSF和ERESF的结晶结构 |
第三节 甲醇处理后ERDSF和ERESF的二级结构 |
第四节 甲醇处理后ERDSF和ERESF的热性能 |
第五节 甲醇处理后ERDSF和ERESF的力学性能 |
本章结论 |
参考文献 |
第五章 结论 |
攻读学位期间发表和已投稿的论文 |
致谢 |
(8)蜘蛛丝蛋白的人工合成及人造蜘蛛丝(论文提纲范文)
1 蜘蛛丝蛋白的人工合成 |
2 人造蜘蛛丝的纺制 |
2.1 纺丝液配制 |
2.1.1 再生蜘蛛丝蛋白溶液 |
2.1.2 由基因工程产生的蜘蛛丝蛋白溶液 |
2.2 纺丝方法以及纺丝工艺对丝纤维性能的影响 |
2.2.1 再生丝蛋白溶液的纺丝[12, 14, 15] |
2.2.2 由基因技术得到的丝蛋白溶液的纺丝[6, 13] |
3 展望 |
(10)“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展(论文提纲范文)
0引言 |
1 蜘蛛丝腺体及其分泌的蜘蛛丝的特性 |
2 蜘蛛丝的应用及前景 |
3 蜘蛛丝蛋白基因及丝蛋白结构研究现状 |
4蜘蛛丝蛋白基因和人工合成蛛丝蛋白基因表达的研究现状 |
四、“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展(论文参考文献)
- [1]基于Fosmid文库和PCR筛选技术的蜘蛛包卵丝蛋白基因克隆及分析[D]. 王金雷. 东华大学, 2012(07)
- [2]聚酯弹性体的合成和天然橡胶的改性研究[D]. 李豫珍. 天津大学, 2009(S2)
- [3]虎纹捕鸟蛛丝的结构与性能及其静电纺再生加工[D]. 刁均艳. 苏州大学, 2008(11)
- [4]RGD-拖丝蛋白基因的构建及其在毕赤酵母中的分泌表达[D]. 黄晶星. 福建师范大学, 2008(01)
- [5]高分子量RGD-蛛丝蛋白重组体构建、高密度发酵及纯化[D]. 阮超然. 福建师范大学, 2007(06)
- [6]蜘蛛丝的结构性能与研究现状[J]. 刘庆生,段亚峰. 四川丝绸, 2005(02)
- [7]再生蜘蛛丝的成丝方法及其结构与性能[D]. 许箐. 苏州大学, 2005(05)
- [8]蜘蛛丝蛋白的人工合成及人造蜘蛛丝[J]. 许箐,潘志娟. 苏州大学学报(工科版), 2005(01)
- [9]二十一世纪新型纤维——蜘蛛丝[J]. 何兰芝,陈莉萍,王学梅. 甘肃科技, 2004(11)
- [10]“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展[J]. 王晓玉,柳增善,任洪林. 第四军医大学学报, 2002(S1)