委陵菜酸论文-劳玲玲,卢春远,黄权芳,林兴,韦锦斌

委陵菜酸论文-劳玲玲,卢春远,黄权芳,林兴,韦锦斌

导读:本文包含了委陵菜酸论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:委陵菜酸,肝星状细胞,细胞凋亡,转化生长因子-β(TGF-β),Smads信号通路

委陵菜酸论文文献综述

劳玲玲,卢春远,黄权芳,林兴,韦锦斌[1](2018)在《委陵菜酸对大鼠肝星状细胞的抑制作用及其机制分析》一文中研究指出目的:研究委陵菜酸(tormentic acid,TA)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化增殖及转化生长因子-β(TGF-β)/Smads信号通路的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:采用细胞活性毒性检测法(CCK-8)观察TA(0,50,60,70,80,90,100μmol·L-1)作用于HSC-T6细胞24 h时的增殖情况,计算半数抑制率(IC50)并筛选出最适浓度。取对数生长期的HSC-T6细胞,分为正常组,刺激组,TA高、中、低剂量(40,20,10μmol·L-1)组。利用姬姆萨染色液检测TA对细胞集落形成;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化;免疫组化法检测Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Smad4,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果:TA能够抑制HSC-T6细胞的增殖,呈剂量依赖性,IC50为81.71μmol·L-1;与正常组比较,TA呈剂量依赖性地抑制HSC-T6细胞集落的生成,同时,TA能明显地促进细胞凋亡和将细胞阻滞在G2期(P<0.05,P<0.01);此外,还能降低Col-Ⅲ,α-SMA,Smad4蛋白表达(P<0.05)。结论:委陵菜酸对肝星状细胞有明显的抑制作用,其机制可能与促进细胞凋亡、阻滞细胞周期,以及与阻断TGF-β/Smads通路有关。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2018年08期)

杨阳,马信龙,邢国胜,赵猛,贾浩波[2](2017)在《委陵菜酸通过激活PI3K/Akt信号通路抑制IL-1β引起的软骨细胞凋亡》一文中研究指出目的探讨委陵菜酸(Tormentic Acid,TA)对IL-1β引起的骨关节炎软骨细胞凋亡发挥的作用。方法从患有四期骨关节炎的10名患者获取软骨标本,按既往报道的步骤从软骨中提取软骨细胞。软骨细胞(1×10~4细胞/孔)接种于96孔板中并用不同浓度(2.5、5及10μM)的TA进行预处理2小时,而后再加入和不加入IL-1β10 ng/ml的条件下共同孵育24h。采用MTT法检测在IL-1β刺激下TA对软骨细胞的影响。使用全自动定量绘图酶标仪检测490nm时的吸光度。用ELISA试剂盒评估在IL-1β刺激下TA对软骨细胞凋亡的影响。用3'-半胱天冬酶比色测定试剂盒检测3'-半胱天冬酶活性。Western blot技术检测TA对IL-1β刺激下的软骨细胞内Bax及Bcl-2表达的影响。此外,我们检测PI3K/Akt通路是否参与TA对IL-1β引起的软骨细胞凋亡起到保护作用。结果 TA不影响软骨细胞活性;经IL-1β刺激后软骨细胞活性明显降低,而加入TA 2h后,发现细胞活性明显提高。TA可以显着抑制IL-1β引起的软骨细胞胱天蛋白酶-3的活化。IL-1β可以增加软骨细胞Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,当TA干预后,Bax的表达下调,而Bcl-2的表达上调。与对照组相比,IL-1β可以引起软骨细胞p-PI3K和p-Akt的表达显着降低,而TA干预2h可以显着增加p-PI3K和p-Akt的表达。结论 TA通过激活PI3K/Akt信号通路抑制IL-1β引起的软骨细胞凋亡。委陵菜酸可能成为治疗骨关节炎的一种潜在药物。(本文来源于《第二十四届中国中西医结合骨伤科学术年会论文汇编》期刊2017-09-21)

卢春远[3](2017)在《基于TGF-β/Smads、ERK信号通路探讨委陵菜酸抑制肝星状细胞的作用及其机制》一文中研究指出目的:肝纤维化是慢性肝损伤后的一种自我修复方式,其特征是细胞外基质(ECM)在肝内的大量沉积。研究表明,TGF-β/Smads和ERK信号通路存在共同的信号传导交汇点Smad4,它们在肿瘤的发生过程中可在多个层次发生串话(Cross-talk)而发挥重要、复杂的重要作用。但这两信号通路在肝纤维化发生过程中是否存在Cross-talk作用仍不清楚。深入揭示这两条通路在肝细胞内信号转导过程中的关系,寻找有效的信号通路调控靶点,对于有效控制肝纤维化的发生发展将具有重要的意义。委陵菜酸(Tormentic acid,TA)是从蔷薇科植物委陵菜(Potentilla chinensis Ser.)全草中分离得到一个活性成分。我们前期研究发现,TA对LPS/D-Gal N诱导的肝损伤有明显的保护作用,但其对慢性肝病尤其是肝纤维化的作用仍不清楚。因此,本实验首先采用sh RNA技术沉默Smad4基因的表达,探讨在肝纤维形成过程中TGF-β/Smads和ERK通路的Cross-talk作用。其次,研究TA对肝星状细胞的抑制作用,并以TGF-β/Smads、ERK信号通路为切入点探讨其作用机制。方法:1.TGF-β/Smads和ERK通路在肝星状细胞中的交互作用先通过对NCBI数据库的检索,获得大鼠Smad4基因m RNA序列,由软件辅助设计出叁条Smad4 sh RNA序列,同时合成非特异性序列作为阴性1对照。本实验构建以慢病毒为载体的Smad4 sh RNA,选择感染复数(MOI)值为10、20、30、40、50、60、70、80的病毒分别感染到大鼠肝星状细胞(HSC-T6),确定最佳的MOI值后,转染细胞,通过q RT-PCR法检测Smad4m RNA的水平,筛选出抑制率最高的RNAi序列作为后续实验。同时,采用嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞株。后续实验设叁个组:正常对照组(Control组)、转染空载体的阴性对照组(NC组)、沉默Smad4基因组(sh RNA-Smad4组)。CCK-8法检测24、48、72 h细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期;q RT-PCR法检测Smad4、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)、MAPK激酶2(MEK2)m RNA的水平;免疫细胞化学法检测I型胶原(Col-I)、III型胶原(Col-III)蛋白的表达;Western blot法检测Smad4、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达。2.委陵菜酸对HSC-T6细胞的作用采用CCK-8法检测委陵菜酸对HSC-T6细胞的半数抑制率(IC50),随后将细胞分为6组:正常对照组,PDGF-BB刺激组,抑制剂组(PD98059组),委陵菜酸高、中、低剂量组(TAH、TAM和TAL组)。利用姬姆萨染色液、AnnexinⅤ-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒和细胞周期检测试剂盒分别检测TA对细胞集落形成、凋亡及周期的影响;q RT-PCR法检测ERK2、MEK2 m RNA的水平;免疫细胞化学法检测Col-III蛋白的表达;Western blot法检测Smad4、α-SMA、c-Raf、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达。结果:1.TGF-β/Smads和ERK通路在HSCs中的交互作用(1)沉默Smad4基因对细胞增殖及周期的影响实验结果发现,当MOI值为30时,细胞的转染效率达到90%且细胞状态好,故选用其作为感染值。感染成功后,q RT-PCR结果显示,sh RNA序列为AGACAGAGCATCAAAGAAA对Smad4基因的抑制效率最高,为75.785%,可用其作为后续沉默Smad4基因的序列。细胞增殖结果显示,与NC组比较,sh RNA-Smad4组细胞在24、48及72 h生长缓慢。细胞周期结果显示,与NC组比较,sh RNA-Smad4组S期细胞数增多,表明细胞被阻滞于S期。(2)沉默Smad4基因对α-SMA及胶原形成的影响免疫细胞化学结果显示,sh RNA-Smad4组与NC组比较,可见阳性表达颗粒明显减少及棕色变浅,表明Col-I、Col-III蛋白的表达明显减少;Western blot结果显示,sh RNA-Smad4组α-SMA表达显着下降。(3)沉默Smad4基因对TGF-β/Smads、ERK信号通路的影响q RT-PCR结果显示,与NC组比较,sh RNA-Smad4组中,Smad4、ERK1、ERK2、MEK2 m RNA水平均降低;Western blot结果显示,与NC组比较,sh RNA-Smad4组Smad4蛋白表达明显降低;sh RNA-Smad4组p-ERK1/2与ERK1/2的比值稍下降。2.TA对肝星状细胞的抑制作用(1)TA对HSC-T6细胞IC50实验结果显示,TA能抑制HSC-T6细胞的增殖,且呈浓度依赖性。经SPSS17.0计算出TA对HSC-T6细胞作用24 h的IC50为81.71μM。(2)TA对细胞集落形成的影响实验结果显示,与正常对照组比较,PDGF-BB可促进HSC-T6细胞集落的形成。药物干预后,PD98059及TA高、中、低剂量组均能抑制HSC-T6细胞集落的生成,并且随着药物浓度的增加,抑制效果越明显。(3)TA对HSC-T6细胞凋亡及周期的影响细胞凋亡检测结果显示,与正常对照组比较,经PDGF-BB刺激后,HSC-T6细胞的总凋亡率有所下降,但差异无意义。与刺激组比较,PD98059及TA中、低剂量组总凋亡率未见明显改变。但经TA高剂量组干预后,其总凋亡率明显增加,表明TA可以促进HSC-T6细胞的凋亡(P<0.05)。细胞周期检测结果显示,与正常对照组比较,PDGF-BB对HSC-T6细胞周期影响无统计学差异,而TA高剂量作用后,明显将细胞阻滞在G2期(P<0.01)。(4)TA对HSC-T6细胞α-SMA及胶原形成的影响Western blot检测结果显示,与刺激组比较,TA高、中、低剂量均能明显降低α-SMA蛋白的表达(P<0.05)。细胞免疫化学实验结果显示,与刺激组比较,PD98059组中Col-Ⅲ蛋白的表达明显减少(P<0.01);在TA高剂量组中可见阳性表达颗粒明显减少及棕色变浅,表明TA高剂量对HSC-T6中Col-Ⅲ蛋白的表达有下调作用(P<0.05)。(5)TA对HSC-T6细胞TGF-β/Smads、ERK信号通路的影响q RT-PCR结果显示,与刺激组比较,TA高剂量组中ERK2和MEK2m RNA的水平下降(P<0.05)。Western blot结果显示,TA高剂量组中Smad4、c-Raf的表达降低(P<0.05)。与刺激组比较,PD98059组中p-ERK1/2与ERK1/2的比值显着降(P<0.01);经TA作用后,p-ERK1/2与ERK1/2的比值稍下降。结论:1.TGF-β/Smads信号通路的阻断会使ERK信号通路相关基因水平降低,提示TGF-β/Smads信号通路与ERK信号通路之间在肝星状细胞中存在交互作用。2.TA可明显抑制肝星状细胞的增殖和活化、促进其凋亡、降低胶原的生成,其机制可能与阻断TGF-β/Smads、ERK信号通路有关。(本文来源于《广西医科大学》期刊2017-05-01)

邓仕任,王鑫,梅晓丹,朱夏敏,夏林波[4](2016)在《HPLC测定委陵菜中委陵菜酸的含量》一文中研究指出目的:建立高效液相色谱测定委陵菜药材中委陵菜酸含量的方法,为委陵菜的合理质量控制提供依据。方法:采用Agilent XDB-C_(18)色谱柱(4.6×150mm,5μm),流动相乙腈-水(60∶40,V∶V),检测波长206nm。结果:委陵菜酸在0.104~1.04mg·mL~(-1)范围内线性关系良好,r=0.9997(n=6),加样回收率101.3%,RSD=1.87%(n=6);3批委陵菜药材中委陵菜酸的含量为0.25~0.46mg·g~(-1)。结论:委陵菜酸为委陵菜药材中的特征活性成分,所建立的含测方法操作简便,结果可靠,可作为委陵菜药材质量控制的指标性成分。(本文来源于《化学工程师》期刊2016年07期)

张晶,刘洋,李灵芝[5](2016)在《委陵菜酸药理活性研究现状》一文中研究指出19α-羟基乌苏烷型叁萜化合物委陵菜酸广泛存在于多种植物中,近年来有关委陵菜酸的药理活性研究也受到广泛关注。文章系统综述了委陵菜酸在抗氧化、肝脏保护、抗炎镇痛、抗菌、抗肿瘤、抗心脑血管系统疾病及糖尿病治疗等方面的研究进展。(本文来源于《武警后勤学院学报(医学版)》期刊2016年01期)

谭实美,梁春宏,韦玲,吕淑娟,黄权芳[6](2016)在《委陵菜酸对小鼠急性肝损伤保护作用》一文中研究指出目的观察委陵菜酸(TA)对脂多糖(LPS)/D-半乳糖胺(D-Gal N)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其可能机制。方法雄性C57BL/6小鼠90只,随机分为对照组、模型组、阳性对照组及委陵菜酸低、中、高剂量组,各组小鼠分别灌胃给予受试物,连续3 d,末次给予受试物8 h后,除对照组外,其余小鼠腹腔注射LPS/D-Gal N,1.5 h后眼球取血,6 h后处死小鼠,取肝脏,观察肝组织损伤程度;采用试剂盒测定小鼠血清中门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10水平;RT-PCR法检测TNF-α和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)基因表达;ELISA法测定NF-κB p65蛋白含量;Western blot法检测细胞色素C和Bcl-2含量;另外,取肝组织匀浆检测caspase-3、8、9活性。结果与对照组比较,模型组小鼠ALT、AST、TNF-α、NO含量[分别为(1 833.5±125.4)、(2 183.5±138.9)U/L、(656.8±64.7)pg/m L、(205.28±16.79)μmol/L]明显升高(P<0.05),肝脏中NF-κB p65表达[(228.9±14.2)pg/mg]升高、Bcl-2蛋白表达(0.18±0.03)下降、Caspase-3蛋白表达(275.3±14.7)升高(P<0.05);与模型组比较,委陵菜酸3 mg/kg组小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、NO含量[分别为(991.3±70.2)、(968.5±68.6)U/L、(226.5±35.9)pg/m L、(133.69±9.79)μmol/L]明显降低(P<0.05)、肝脏中NF-κB p65表达[(151.2±6.5)pg/mg]降低、Bcl-2蛋白表达(0.35±0.02)升高、caspase-3蛋白表达(156.3±5.9)下降(P<0.05)。结论委陵菜酸可保护LPS/D-Gal N诱导的小鼠急性肝损伤,其机制可能与抑制NF-κB信号通路减轻炎症反应、抑制凋亡蛋白表达、继而减少细胞凋亡有关。(本文来源于《中国公共卫生》期刊2016年08期)

白淑芳,刘占云,宋菲,高颖,刘岱琳[7](2012)在《HPLC法测定肠舒片中蔷薇酸和委陵菜酸》一文中研究指出目的建立肠舒片(固公果根)中蔷薇酸和委陵菜酸的测定方法。方法采用HPLC法测定,色谱柱为PhenomenexLuna Su C18柱;流动相为水-甲醇(32∶68);体积流量1.0 mL/min;检测波长204 nm;柱温30℃;进样量20μL。结果蔷薇酸和委陵菜酸的标准曲线回归方程分别为:Y=6×106X+75 636(R2=0.999 9),Y=6×106X+510 504(R2=0.999 9),蔷薇酸和委陵菜酸分别在8.24~82.4μg和16.0~160.0μg范围内线性关系良好,蔷薇酸和委陵菜酸的平均回收率分别为103.1%、100.9%。不同批次肠舒片中蔷薇酸质量分数范围为0.254~0.312 mg/g,委陵菜酸质量分数范围为0.572~0.663 mg/g。结论所用方法简便、准确,可用于不同批次肠舒片的质量控制。(本文来源于《中成药》期刊2012年02期)

宋菲,马荣,高颖,刘岱琳[8](2010)在《RP-HPLC法测定固公果中蔷薇酸和委陵菜酸》一文中研究指出目的:利用RP-HPLC方法测定彝族药物固公果中蔷薇酸、委陵菜酸的量。方法:采用UltimatexB-C18(美国Welch公司,150nm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-1.5%磷酸水溶液(33︰67)为流动相,体积流量1.0mL/min,检测波长210nm。结果:固公果中蔷薇酸与委陵菜酸能得到很好的分离。测定线性范围分别为:蔷薇酸77.4~774.3μg/mL,r=0.9999;委陵菜酸54.7~546.9μg/mL,r=0.9999。蔷薇酸平均回收率为102.5%(n=9),委陵菜酸平均回收率为103.7%(n=9)。结论:该法便捷、灵敏、准确,重复性好,可以控制该药材的质量。(本文来源于《药物评价研究》期刊2010年03期)

周和平[9](1990)在《委陵菜酸对离体大鼠胰岛的胰岛素分泌的影响》一文中研究指出曾有报道,Poterium ancistroides Deaf的地上部分在西班牙的Alicante地区被用于治疗糖尿病,具有降血糖的作用。从该植物中分离的委陵菜酸(tormentic acid)被认为是该植物降血糖的有效成分。作者以前曾报告过当委陵菜酸的剂量为30mg/kg时,降低正常大鼠与葡萄糖诱发的高血糖大鼠的血糖浓度,同时升高胰岛素浓度。本次研究报告(本文来源于《国外医药(植物药分册)》期刊1990年02期)

委陵菜酸论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨委陵菜酸(Tormentic Acid,TA)对IL-1β引起的骨关节炎软骨细胞凋亡发挥的作用。方法从患有四期骨关节炎的10名患者获取软骨标本,按既往报道的步骤从软骨中提取软骨细胞。软骨细胞(1×10~4细胞/孔)接种于96孔板中并用不同浓度(2.5、5及10μM)的TA进行预处理2小时,而后再加入和不加入IL-1β10 ng/ml的条件下共同孵育24h。采用MTT法检测在IL-1β刺激下TA对软骨细胞的影响。使用全自动定量绘图酶标仪检测490nm时的吸光度。用ELISA试剂盒评估在IL-1β刺激下TA对软骨细胞凋亡的影响。用3'-半胱天冬酶比色测定试剂盒检测3'-半胱天冬酶活性。Western blot技术检测TA对IL-1β刺激下的软骨细胞内Bax及Bcl-2表达的影响。此外,我们检测PI3K/Akt通路是否参与TA对IL-1β引起的软骨细胞凋亡起到保护作用。结果 TA不影响软骨细胞活性;经IL-1β刺激后软骨细胞活性明显降低,而加入TA 2h后,发现细胞活性明显提高。TA可以显着抑制IL-1β引起的软骨细胞胱天蛋白酶-3的活化。IL-1β可以增加软骨细胞Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,当TA干预后,Bax的表达下调,而Bcl-2的表达上调。与对照组相比,IL-1β可以引起软骨细胞p-PI3K和p-Akt的表达显着降低,而TA干预2h可以显着增加p-PI3K和p-Akt的表达。结论 TA通过激活PI3K/Akt信号通路抑制IL-1β引起的软骨细胞凋亡。委陵菜酸可能成为治疗骨关节炎的一种潜在药物。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

委陵菜酸论文参考文献

[1].劳玲玲,卢春远,黄权芳,林兴,韦锦斌.委陵菜酸对大鼠肝星状细胞的抑制作用及其机制分析[J].中国实验方剂学杂志.2018

[2].杨阳,马信龙,邢国胜,赵猛,贾浩波.委陵菜酸通过激活PI3K/Akt信号通路抑制IL-1β引起的软骨细胞凋亡[C].第二十四届中国中西医结合骨伤科学术年会论文汇编.2017

[3].卢春远.基于TGF-β/Smads、ERK信号通路探讨委陵菜酸抑制肝星状细胞的作用及其机制[D].广西医科大学.2017

[4].邓仕任,王鑫,梅晓丹,朱夏敏,夏林波.HPLC测定委陵菜中委陵菜酸的含量[J].化学工程师.2016

[5].张晶,刘洋,李灵芝.委陵菜酸药理活性研究现状[J].武警后勤学院学报(医学版).2016

[6].谭实美,梁春宏,韦玲,吕淑娟,黄权芳.委陵菜酸对小鼠急性肝损伤保护作用[J].中国公共卫生.2016

[7].白淑芳,刘占云,宋菲,高颖,刘岱琳.HPLC法测定肠舒片中蔷薇酸和委陵菜酸[J].中成药.2012

[8].宋菲,马荣,高颖,刘岱琳.RP-HPLC法测定固公果中蔷薇酸和委陵菜酸[J].药物评价研究.2010

[9].周和平.委陵菜酸对离体大鼠胰岛的胰岛素分泌的影响[J].国外医药(植物药分册).1990

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