刘国强唐乃发（广州市越秀区儿童医院广东广州510115)
【中图分类号】R725【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)32-0144-02
【摘要】目的主要探讨CC16、胱抑素C与喘息性支气管炎的关系。方法收集自2008年1月至12月经我院儿科诊断为喘息性支气管炎的住院患者30例，对照组为胎龄、性别相匹配、同期在儿科诊治病人20例。抽取支气管肺发育不良喘息性支气管炎及对照组全血3ml，分离血清，标本搜集完整后一起用酶联免疫吸附(EIJSA)法检测血清CC16含量、颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)测定胱抑素C，数据资料用t检验分析。结果喘息性支气管炎组30例CystatinC平均值为1.64mg/L,对照组20例，平均值为2.12mg/L,CC16喘息性支气管炎组平均值为74μg/L,对照组20例，平均值为131μg/L,两组比较P<0.01。结论喘息性支气管炎中,CC16、CysC具有保护作用，半胱氨酸蛋白酶与其抑制物CysC之间否处于失衡状态，可以促发肺上皮细胞的凋亡，从而导致喘息性支气管炎。
【关键词】喘息性支气管炎CC16胱抑素C
喘息性支气管炎是婴幼儿常见的呼吸系统疾病，大多与呼吸道病毒感染有关。其临床表现与哮喘很相似，其中一部分喘息性支气管炎婴幼儿反复喘息发作，发展为哮喘。至今尚无一种确切方法可以预测哪些患儿会有持续性喘息。2008年7—12月，我们观察了喘息性支气管炎患儿血清CC16及胱抑素C的水平的变化，报告如下。
1对象和方法
1.1正常对照组20例，男11例，女9例，年龄8个月一6岁，平均3.4岁，无湿疹及变应性疾病家族史，无呼吸系统疾病史及肝、肾、心脏疾病史，近1个月无感染、未使用糖皮质激素。
1.2喘息性支气管炎组30例，男22例，女8例，年龄4个月一5.5岁，平均2.2岁，均符合喘息性支气管炎诊断标准，为我院儿科2008年1—12月住院患儿。
1.3标本收集抽取喘息性支气管炎及对照组全血2ml，分离血清，标本搜集完整后一起用颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)测定胱抑素C。酶联免疫吸附(EIJSA)法检测血清CC16含量：CC16酶免法试剂盒由上海德波生物技术有限公司提供(批号1724)。严格按照说明书进行试剂配制和步骤操作，最终根据标本的吸光度值在标准曲线上求CC16的含量。本实验由广州医学院生物化学实验室，检测使用日立公司生产的7170A全自动生化分析仪。
1.4统计学方法统计学方法用Excel2003建库，SPSS11.5软件包进行统计分析。各组数据用x-±s表示，资料用t检验，检验水准α=0.05。
1.5结果喘息性支气管炎组30例CystatinC平均值为1.64mg/L,对照组20例，平均值为2.12mg/L,CC16喘息性支气管炎组平均值为74μg/L,对照组20例，平均值为131μg/L,两组比较P<0.01。
2讨论
喘息性支气管炎泛指一组有喘息表现的急性支气管感染，是婴幼儿期的一种特殊类型的支气管炎，多种病毒和细菌感染均可引起，但发展为持续性哮喘的儿童主要为特应性个体。很多文献报道呼吸道感染是引起婴幼儿反复喘息及学龄前儿童哮喘发作的最常见因素，本研究结果显示喘息性支气管炎的患儿血清CC16含量较正常儿童组显著降低，CC16是Clara细胞分泌的一种主要功能蛋白，具有重要的内源性抗炎作用。其基因所在的区域与控制特异反应性有关，存在编码高亲和性IgE受体β单位的基因位点，提示CC16与哮喘的发生和气道高反应有关。Clara细胞的主要功能是作为支气管上皮损伤修复时的祖细胞。呼吸道Clara细胞的减少是血清CC16减少的主要原因。因此，血清CC16是检测Clara细胞损伤、评价肺上皮屏障通透性变化的外周标志，可反映肺-气屏障的完整性。喘息性支气管炎患儿呼吸道上皮细胞存在不同程度的损伤导致内源性抗炎功能减弱，提示儿童喘息性疾病存在Clara细胞数量的减少和功能的损害。CC16生成的减少引起致炎介质合成增多，加重已存在的气道高反应性和促进气道炎症，同时使CC16进一步下降，形成炎症的恶性循环。因此，CC16分泌减少和活性下降可能是发生喘息性支气管炎的重要因素之一。
细胞凋亡与炎症的发生、持续和消散的过程密切相关：炎症细胞的凋亡可促进炎症消散；而凋亡的延迟则可导致炎症细胞浸润及炎症的持续。近年来，半胱氨酸蛋白酶家族已成为当今研究细胞凋亡信号通路的中心环节。高氧诱导的早产鼠慢性肺疾病模型，3天后肺上皮细胞的凋亡数量开始增加，继之持续上升，21天达高峰。肺组织半胱氨酸蛋白酶-3mRNA水平与肺上皮细胞的凋亡呈指数明显的正相关。该结果提示高氧可能通过诱导肺组织半胱氨酸蛋白酶-3mRNA的过度表达，最终促发肺上皮细胞的凋亡，从而导致肺泡发育障碍在溶酶体内，组织蛋白酶B首先合成为38kDa的无活性的酶原形式，然后释放至胞浆。在病理状态下，各种原因所致的细胞损伤(如病原微生物、炎症因子、氧化应激等)，膜稳定性降低、通透性增高甚至破裂，组织蛋白酶可渗透到胞浆或组织间隙。降解细胞成分和细胞间质成分，包括层粘素、胶原纤维Ⅳ、纤维连接素等，目前已有证据表明，组织蛋白酶B通过促凋亡蛋白Bid触发线粒体释放细胞色素C，间接激活半胱氨酸蛋白酶家族成员引发凋亡，并认为Bid是组织蛋白酶B介导细胞凋亡的关键调节剂。
CysC是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族2中的一员。组织蛋白酶B是半胱氨酸蛋白酶中的一员，它在细胞内肽类和蛋白质代谢特别是胶原代谢中起重要作用。这种肽键内切酶的作用取决于酶活化位点上的氨基酸残端半胱氨酸的巯基[5]。CysC的一个生理学功能可能是调节半胱氨酸蛋白酶的活性。在生理条件下,CysC的重要功能是抑制内源性的半胱氨酸酶的活性,对于细胞内蛋白质的转换,骨胶原的降解,蛋白质前体的分离有重要作用,并且参与炎症过程以及一些神经性疾病。本次研究中喘息性支气管炎组胱抑素C低于正常对照组，有显著性差异，我们推测在喘息性支气管炎中,CysC具有保护作用，半胱氨酸蛋白酶与其抑制物CysC之间否处于失衡状态，最终促发肺上皮细胞的凋亡，由于谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸合成的三肽，其活性基团是巯基，对体内一些酶蛋白的巯基具有保护作用，同时因为对抗氧自由基而对喘息性支气管炎也具有保护作用，具体作用有待于进一步的证实。
因此，在喘息性支气管炎发病过程中，CC16及CysC均起着保护性作用，在今后的预防及治疗中，可以从CC16及CysC作进一步的探讨。
参考文献
[1]谢娟娟，李羚，等.喘息性疾病患儿血清Clara细胞分泌蛋白水平的观察[J].中华儿科杂志，45(3)：217-218.
[2]富建华，于凤英，薛辛东.caspase-3基因在高氧致早产鼠慢性肺疾病中的表达及其作用[J].中国医科大学学报,2007,36(6):628-630.
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