本文主要研究内容
作者沈小燕（2019）在《无偶斗星介（Cypridopsis vidua）三种渗透压调节相关基因在高盐环境中的表达模式》一文中研究指出：无偶斗星介(Cypridopsisvidua)是介形类中为数不多的全球分布物种之一,它对各种环境因子均具有较强的耐受性。众所周知,盐度是水生生物分布的主要限制性因素。无偶斗星介作为淡水种,其可分布于盐度为8‰左右的自然水体中,因此该物种成为研究水生动物渗透压调节的良好材料。本论文通过研究无偶斗星介三种渗透压调节相关基因表达量对高盐环境的响应,探讨了小型甲壳动物渗透压调节基因应对突发盐度升高时的分子响应机制。研究结果为深入了解广布种水生动物的适应性分布提供了理论依据。本研究首次克隆获得了参与无偶斗星介渗透压调节的V-type H+-ATPase B亚基基因(命名为CvVHA-B)和Na+/K+/2Cl-共转运蛋白基因(命名为CvNKCC),其中CvVHA-B基因的cDNA全长为2178bp,编码氨基酸498个;CvNKCC基因的cDNA全长为4001bp,编码氨基酸1055个。两条基因的分子系统学研究结果显示无偶斗星介和其他“泛甲壳动物”聚为一支,说明CvVHA-B和CvNKCC基因在“泛甲壳动物”的进化中均具有保守性。在上述工作基础上,本研究进一步应用改良后的整体原位杂交技术,对CvVHA-B和CvNKCC基因mRNA的表达位置进行了研究,初步确定无偶斗星介的内壳层是渗透压调节的主要功能部位。本研究的盐度梯度实验(0、4、8、12、16和20‰)确定了无偶斗星介于室内急性盐度胁迫条件下24h内可忍耐的高盐度为8‰。基于此,本研究采用实时荧光定量PCR方法探讨了在4‰和8‰盐度浓度条件下,Na+/K+-ATPaseα亚基基因(命名为CvNKA-α)、CvVHA-B和CvNKCC三种基因部分片段的mRNA表达量随时间的变化,结果发现:4‰盐度条件下三种基因的表达量与对照组(0‰)间无明显差别(P>0.05);8‰盐度条件下,三种基因表达量的变化表现出一定的时序性,即:CvNKA:α的表达量于3h时显著下降(P<0.05),随即CvVHA-B于12h时显著性下降(P<0.05),而CvNKCC则于24h时呈现显著性上升(P<0.05)。结合三种基因在动物盐度渗透压调节中的作用,本研究认为:在面对突发的高盐环境时,该物种可采用下调CvNKA-α和CvVHA-B的表达量及上调CvNKCC的表达量的一种分子策略来加以适应。这很好地解释了淡水种无偶斗星介能够分布于高达8‰的自然水体的原因。
Abstract
mo ou dou xing jie (Cypridopsisvidua)shi jie xing lei zhong wei shu bu duo de quan qiu fen bu wu chong zhi yi ,ta dui ge chong huan jing yin zi jun ju you jiao jiang de nai shou xing 。zhong suo zhou zhi ,yan du shi shui sheng sheng wu fen bu de zhu yao xian zhi xing yin su 。mo ou dou xing jie zuo wei dan shui chong ,ji ke fen bu yu yan du wei 8‰zuo you de zi ran shui ti zhong ,yin ci gai wu chong cheng wei yan jiu shui sheng dong wu shen tou ya diao jie de liang hao cai liao 。ben lun wen tong guo yan jiu mo ou dou xing jie san chong shen tou ya diao jie xiang guan ji yin biao da liang dui gao yan huan jing de xiang ying ,tan tao le xiao xing jia ke dong wu shen tou ya diao jie ji yin ying dui tu fa yan du sheng gao shi de fen zi xiang ying ji zhi 。yan jiu jie guo wei shen ru le jie an bu chong shui sheng dong wu de kuo ying xing fen bu di gong le li lun yi ju 。ben yan jiu shou ci ke long huo de le can yu mo ou dou xing jie shen tou ya diao jie de V-type H+-ATPase Bya ji ji yin (ming ming wei CvVHA-B)he Na+/K+/2Cl-gong zhuai yun dan bai ji yin (ming ming wei CvNKCC),ji zhong CvVHA-Bji yin de cDNAquan chang wei 2178bp,bian ma an ji suan 498ge ;CvNKCCji yin de cDNAquan chang wei 4001bp,bian ma an ji suan 1055ge 。liang tiao ji yin de fen zi ji tong xue yan jiu jie guo xian shi mo ou dou xing jie he ji ta “fan jia ke dong wu ”ju wei yi zhi ,shui ming CvVHA-Bhe CvNKCCji yin zai “fan jia ke dong wu ”de jin hua zhong jun ju you bao shou xing 。zai shang shu gong zuo ji chu shang ,ben yan jiu jin yi bu ying yong gai liang hou de zheng ti yuan wei za jiao ji shu ,dui CvVHA-Bhe CvNKCCji yin mRNAde biao da wei zhi jin hang le yan jiu ,chu bu que ding mo ou dou xing jie de nei ke ceng shi shen tou ya diao jie de zhu yao gong neng bu wei 。ben yan jiu de yan du ti du shi yan (0、4、8、12、16he 20‰)que ding le mo ou dou xing jie yu shi nei ji xing yan du xie pai tiao jian xia 24hnei ke ren nai de gao yan du wei 8‰。ji yu ci ,ben yan jiu cai yong shi shi ying guang ding liang PCRfang fa tan tao le zai 4‰he 8‰yan du nong du tiao jian xia ,Na+/K+-ATPaseαya ji ji yin (ming ming wei CvNKA-α)、CvVHA-Bhe CvNKCCsan chong ji yin bu fen pian duan de mRNAbiao da liang sui shi jian de bian hua ,jie guo fa xian :4‰yan du tiao jian xia san chong ji yin de biao da liang yu dui zhao zu (0‰)jian mo ming xian cha bie (P>0.05);8‰yan du tiao jian xia ,san chong ji yin biao da liang de bian hua biao xian chu yi ding de shi xu xing ,ji :CvNKA:αde biao da liang yu 3hshi xian zhe xia jiang (P<0.05),sui ji CvVHA-Byu 12hshi xian zhe xing xia jiang (P<0.05),er CvNKCCze yu 24hshi cheng xian xian zhe xing shang sheng (P<0.05)。jie ge san chong ji yin zai dong wu yan du shen tou ya diao jie zhong de zuo yong ,ben yan jiu ren wei :zai mian dui tu fa de gao yan huan jing shi ,gai wu chong ke cai yong xia diao CvNKA-αhe CvVHA-Bde biao da liang ji shang diao CvNKCCde biao da liang de yi chong fen zi ce lve lai jia yi kuo ying 。zhe hen hao de jie shi le dan shui chong mo ou dou xing jie neng gou fen bu yu gao da 8‰de zi ran shui ti de yuan yin 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自华东师范大学的沈小燕，发表于刊物华东师范大学2019-07-02论文，是一篇关于表达量论文,亚基基因论文,共转运蛋白基因论文,整体原位杂交论文,亚基基因论文,华东师范大学2019-07-02论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自华东师范大学2019-07-02论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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