制约我国牛胚胎工程产业化进程的主要问题及对策

制约我国牛胚胎工程产业化进程的主要问题及对策

一、制约我国牛胚胎工程产业化进程的主要问题及解决措施(论文文献综述)

孙伟[1](2021)在《奶牛种公牛培育及性别控制冷冻精液生产效率影响因素的研究》文中研究说明本研究针对我国奶牛养殖产业对优质种公牛培育和良种母牛快速扩繁的迫切需求,创新集成了奶牛育种关键技术体系、研制性别控制冷冻精液生产新技术与新产品,为解决高产奶牛扩繁速度慢的技术瓶颈问题,加快奶牛群体遗传改良进程提供了技术支撑。奶牛育种关键技术体系包括种用胚胎生产与胚胎移植(Embryo Transfer,ET)、青年公牛全基因组检测与遗传评估、生长发育、生产性能测定(Dairy Herd Improvement,DHI)及精液受精与受胎能力相关性分析。奶牛性控冷冻精液生产新技术主要围绕生产效率提升、产品质量改善与人工授精(Artificial Insemination,AI)关键技术开发。具体研究内容及结果如下:1、创新集成了高效的奶牛种用胚胎生产与ET关键技术流程,使每头供体牛平均生产体内胚胎6.6枚,比行业平均水平(5枚)高32.0%;冷冻胚胎移植受胎率为45.0-58.6%、产犊率为38.4-55.8%,均高于行业平均水平。2、利用全基因组检测结合奶牛DHI技术,集成了种公牛遗传-生产性能对比育种评价体系。不同月龄青年公牛生长发育关键指标,与行业标准相比,体重和睾丸周径均高于行业标准平均水平,并筛选出遗传品质优秀的种公牛154头,其中育种综合指数GTPI(General Total Performance Index)≥2600指数的种公牛35头、占比22.7%;AI配种的种母牛一、二和三胎次305天产奶量与商品母牛相比分别提升了823.0 kg、1374.5 kg和976.7 kg,表明全基因组检测遗传评估与生产性能实际表型值的显着关联性。3、体外受精(In vitro fertilization,IVF)与AI受胎率对比分析显示,同一头种公牛精液的IVF受精率与AI受胎率高度关联,证明IVF可作为新的繁殖性状评价指标纳入奶牛种公牛育种评价体系,据此把种公牛受精能力分为三个等级,分别是正常受精率(Normal fertility bulls:45-60%)、较高受精率(Higher fertility bulls:61-80%)、高受精率(Highest fertility bulls:>80%)。4、探究异种动物的精子(山羊、绵羊和鹿)对于奶牛X精子的受精推流效果表明,选择山羊精液受精推流最佳,在此基础上开发了奶牛性控冻精生产新技术,使奶牛性控冻精生产效率提升2倍以上、生产成本降低70%,并确定新产品的标准为:100万分离X精子混合100万山羊精子,该产品可以保持平均56.2%的AI情期受胎率和94.6%的性控准确率。5、添加抗氧化剂VE、SOD、CAT可以明显提升奶牛分离X精子的活力,特别是奶牛性控冻精的体外存活时间由原来的4-6 h延长到8-10 h,该产品的AI受胎率总体提升了5-10%,为奶牛性控冻精产业化推广应用提供了技术支撑。

史佳斌[2](2020)在《延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻保存的研究》文中研究指明延边黄牛是中国五大特色优良黄牛品种,但由于产业水平低,近几年牛源短缺的问题日益严重,难以满足市场需求。本文通过探究利用胚胎冷冻、胚胎移植等先进技术手段,来高效地扩繁良种,以求解决牛源问题。胚胎冷冻是利用特殊的低温保护措施和降温程序,实现胚胎在超低温下长期稳定保存,解冻后又能恢复正常的生理功能的一项技术。胚胎冷冻技术可以及时保存优质胚胎,避免胚胎的浪费。胚胎冷冻技术打破了胚胎移植在时间上和空间上的局限,有利于胚胎移植的推广应用,对加速良种家畜大规模繁育有着重大意义,是胚胎工程技术的重要部分。试验以延边黄牛OPU胚胎为研究对象,旨在探究适合延边黄牛产业应用的冷冻方法。得出以下结果:1:甘油浓度对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻的影响以甘油作为冷冻保护剂对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻时,甘油浓度为2.0 mol/L时,冷冻延边黄牛OPU胚胎的存活率和孵化率最高,分别为70.10±8.70%和36.56±3.34%。与 1.5 mol/L、2.5 mol/L 和 3.0 mol/L 组差异不显着(P>0.05),显着高于 0.5 mol/L 组和 1.0 mol/L 组(P<0.05)。0.5 mol/L 组和 1.0 mol/L 组的存活率和孵化率差异不显着(P<0.05),但二组显着低于其他四组(P<0.05)。2:乙二醇浓度对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻的影响以乙二醇作为冷冻保护剂对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻时,乙二醇浓度为1.5 mol/L时,冷冻延边黄牛OPU胚胎的存活率和孵化率最高,分别为61.52±7.84%和29.09±1.58%。与0.5 mol/L组差异显着(P<0.05),与1.0 mol/L组、2.0 mol/L组、2.5 mol/L组和3.0 mol/L组差异不显着(P>0.05)。3:冷冻保护剂种类对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻的影响对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻时,甘油(2.0 mol/L)与乙二醇(1.5 mol/L)为冷冻保护剂冷冻的胚胎存活率与孵化率两者之间差异不显着(P>0.05),但甘油的效果好于乙二醇。所以选用甘油作为延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻的冷冻保护剂。4:不同平衡时间对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻的影响以甘油(2.0 mol/L)作为冷冻保护剂,平衡时间为15 min时,冷冻胚胎的存活率和孵化率最高,分别为66.77±3.18%和36.56±3.34%。与5 min组和25 min组差异显着(P<0.05),与10 min组和20 min组差异不显着(P>0.05)。5:胚胎的不同发育阶段对延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻的影响以甘油作为冷冻保护剂冷冻延边黄牛OPU胚胎时,扩张囊胚的存活率(68.69±3.50%)及孵化率(37.37±7.00%)要高于早期囊胚的存活率(60.74±5.60%)及孵化率(31.85±8.98%),但两组之间差异不显着(P>0.05)。终上所述,试验结果表明使用2.0 mol/L浓度的甘油作为延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻保护剂最为理想;冷冻保护液中最佳平衡时间为15 min;冷冻延边黄牛OPU扩张囊胚的效果更好。

薛仰全[3](2013)在《动物胚胎移植技术发展概况及存在问题》文中指出动物胚胎移植实际是生产胚胎的供体和养育胚胎的受体分工合作繁殖后代的过程。其目的是使经济效益低、生产性能不高、不符合社会需要和人们生活需求的母畜作为受体生产出经济效益高、生产性能好、符合社会和人们需求的良种后代,以便迅速增加良种畜禽的数量,大大提高受体母畜的繁殖效率和经济效益。本文就国内外和甘肃省的胚胎移植技术发展概况进行阐述,并从胚胎移植推广应用角度分析了胚胎移植技术存在的主要问题。

薛仰全,孙俊峰,倪兴军[4](2013)在《对农区推广牛胚胎移植技术的几点认识》文中指出胚胎移植技术作为常规育种的重要手段,在推广工作中还存在许多问题。笔者就胚胎移植费用高与农户难以支付、胚移人员缺少与胚移操作难度大、牛改良需求与当前推广对象的确定、胚移队伍的职责确定与协作履职、受体牛繁育情况复杂与选择标准、胚胎移植技术推广难与前景广阔、胚移暴露的问题与产业化模式选择等问题进行了探讨分析。

王姝瑭[5](2012)在《云南ZK种业集团公司发展战略研究》文中研究指明云南ZK种业集团公司是一个以家畜胚胎生物技术为先导、以热带、亚热带牛羊胚胎工程产业化为核心、以市场为主导的生物良种产业的高新技术企业和龙头企业。其在发展上面临着许多问题,例如如何怎样充分发挥云南资源和区位优势,如何进一步提升和完善种质生产技术,如何构建较为完备的品种选育、扩繁推广和健康饲养技术体系等,这些都是ZK集团公司目前亟待解决的问题。本文则从企业战略管理理论出发,通过对ZK集团公司所处的宏观环境、行业环境、公司内部环境进行有效分析,提出了 ZK公司发展战略及保障措施,借此推动集团公司经营管理从传统走向现代、从种质生产走向集约、高效、优质、健康、环保、安全的活畜生产,实现集团公司跨越式、持续良性发展。在研究方法上,本文首先采用文献调查法,收集了大量与公司战略管理方面的书籍、期刊、硕博士论、电子资源。然后采用访谈法,通过设计访谈提纲,然后分别对公司内各个部门、各个层级的员工进行访谈,得到了ZK公司在宏观环境方面、行业环境方面、公司优势、劣势及内部环境方面的第一手资料。最后运用比较研究法,用ZK公司战略开发管理与国内外优秀的公司进行比较,提出了ZK公司发展战略及保障措施。本文分为八个章节:第一章的导论内容主要阐述了本文选题的背景、意义及研究方法,第二章为相关理论综述,主要介绍了战略理论、价值链理论和创新理论,为全文写作提供了基础理论和应用理论的论据支持。从第三章开始,本文正式进入企业层面,分析了公司所处的宏观环境、行业环境及公司内部优势、劣势,并进行了 SWOT综合分析。第四章针对公司所处的环境及自身优劣势设计了企业战略,具体包括科研战略、质量管理战略、市场营销战略和人才战略。第五章,主要阐述了战略实施的保障措施。第六章为结论及展望。

许文兵[6](2012)在《转基因克隆牛胚胎的玻璃化冷冻》文中提出转基因克隆技术是生命科学领域一项重大突破。目前,大多数研究是以体细胞核移植技术手段生产转基因动物。但是体细胞核移植的效率仍比较低,影响转基因克隆效率的因素有很多,并且都未研究透彻。胚胎冷冻保存是胚胎移植过程中重要的步骤之一,同时也是胚胎移植广泛推广应用的关键因素。冷冻优质胚胎可以加速良种家畜的繁殖速度,避免时间地域限制,可以进行世界范围内的应用。胚胎冷冻保存也可以解决随社会发展带来的生物物种资源急剧减少的问题,拯救濒危动物。本实验系统比较了程序化和玻璃化两种冷冻方法对转基因克隆牛胚胎的冷冻效果,比较了不同冷冻保护剂、不同时期的胚胎和不同承载载体对转基因克隆牛胚胎冷冻效果的影响。研究通过对冷冻复苏后胚胎的存活率、继续培养后孵化率、囊胚细胞数、细胞凋亡情况以及基因表达水平的检测来分析比较,从而选择出最适合冷冻转基因克隆牛胚胎的方法。为深入研究转基因克隆牛胚胎的冷冻保存提供技术依据,为提高转基因克隆动物生产效率打下基础。1、系统比较了程序化冷冻和玻璃化冷冻对转基因克隆牛胚胎冷冻效率的影响。实验结果显示:玻璃化冷冻复苏后的转基因克隆胚胎存活率显着高于程序化冷冻处理组(P<0.05),玻璃化冷冻解冻后胚胎经过继续培养第1—3天的孵化率也显着高于程序化冷冻组。进一步对囊胚细胞总数进行统计发现不同冷冻方法对囊胚细胞总数的影响差异不显着。但在囊胚细胞的凋亡率方面,程序化方法显着高于玻璃化处理组(P<0.05)。经过RT—PCR分析发现,玻璃化冷冻复苏后胚胎细胞的Bax基因的表达量明显低于程序化方法(P<0.05),而Oct4和Hsp70表达量则高于程序化处理组(P>0.05)。因此可知程序化冷冻和玻璃化冷冻都可支持转基因克隆胚胎的冷冻保存,但是玻璃化冷冻方法的效率显着高于程序化冷冻。2、对玻璃化冷冻转基因克隆胚胎过程中不同冷冻保护剂、不同时期胚胎和不同胚胎承载载体进行比较,进一步优化转基因克隆牛胚胎的玻璃化冷冻方法,提高转基因克隆牛胚胎的冷冻效率。实验结果显示:以乙二醇(EG)和二甲基亚砜(DMSO)混合作为冷冻保护剂进行冷冻,复苏后胚胎的存活率和第一天孵化率与乙二醇(EG)和二甲基亚砜(DMSO)单独处理组无显着差异,但混合处理组第二、三天的孵化率则显着高于EG和DMSO单独处理组。因此以EG和DMSO混合作为冷冻保护剂更有利于胚胎的后期发育。对2-细胞、8-细胞、桑葚胚、早期囊胚和囊胚时期的转基因克隆牛胚胎进行玻璃化冷冻,通过对解冻后胚胎存活率、孵化率、囊胚细胞数和凋亡率的综合比较,可知冷冻转基因克隆牛的早期囊胚效果最好。以不同的胚胎承载载体:玻璃细管、塑料细管和固体表面载杆对转基因克隆牛胚胎进行冷冻,结果显示以固体表面载杆为载体冷冻效果显着高于其他两组。因此,玻璃化冷冻以EG为冷冻保护剂,选择固体表面载杆为承载载体冷冻转基因克隆牛早期囊胚,可得到最佳效果。

刘鑫渝[7](2011)在《土地制度变迁视野下的哈萨克牧区社会 ——以新疆新源县为例》文中进行了进一步梳理本研究以建国后土地制度变迁为着眼点,探讨哈萨克牧区社会在土地变革中的土地实践。由于自然条件、生产资料的差异与技术手段选择的不同,中国游牧地区的土地实践与内地农村存在着较大差异。民主改革以前,牧区牧地公有,即为部落、氏族共有,但实质上草场所有权归部落贵族、头人所有。而牧业民主改革实行的是土地公有公营,牲畜私有私营。新疆草原的民族公有制延续了大约6年(1952~1958)。这6年中,牧民对自己的草牧场可以全面地行使占有、使用、收益和处分的权利。牧业互助组和初级合作化阶段未触动草原集体所有和牲畜家庭经营的根基,符合哈萨克族游牧社会互帮互助抵御自然灾害和外族侵略的传统,受到了牧民的普遍欢迎,起到了稳定社会秩序推动社会发展的作用。尽管牧业初级合作社是对互助组的替代,但在初期牧场集体所有,牲畜私有,牧民拥有比较充分的退出权,且退出的自由度与合作社的经营风险呈正相关。牧民不仅可以实施对合作社的监督,使管理者改善制度绩效,还可以参与对合作社的监督,对于社员来说,拥有较完整的退出权意味着有完整的剩余控制权和剩余索取权。初级社既成功地分割了部分私有产权,又通过给予社员较完善的退出权,有效化解初级社解散的风险。人民公社化实行草原全民所有,牲畜集体所有。变牲畜家庭个体经营为集体统一经营,加上国家控制商业和户籍制度对劳动力流动的限制,牧民没有退社自由,降低了劳动的机会成本以维持牲畜及畜产品生产的低成本,也迫使牧民放弃了可能的边际生产和可能取得的边际收益。牲畜及畜产品国家征购及诸如关闭集市、限制区域交换等一系列规则,剥夺了牧民对其产品——牧业剩余价值的支配权。草原集体所有和集体经营,牲畜集体所有,牧民不再是独立的经济单元。人民公社时期,国家权力全面侵入农村。对单个牧民来讲,草原和牲畜都是一种公共物品,他不拥有相对于其它成员的对土地和牲畜的排他性使用、转让、收益和处置权,牧民土地和牲畜产权都出现“残缺”。人民公社、大跃进、公共食堂、牧业学大寨、牧民定居是与土地制度相伴生的国家自上而下理性设计的社会改造工程。这些体现了控制与改善逻辑的社会工程通过重新设计力图使人民的生活变得更加简单与清晰,以便更加有效地对公共和私人领域进行治理。这些项目始于官僚知识分子、革命精英作为“立法者”的远大抱负和无限雄心,他们不仅主张“人为自然立法”,而且主张通过行动来对自然界或整个社会秩序进行彻底和理性的改造;而在这种雄心的背后,则是对持续的线性进步、科学知识发展、生产的扩大、社会秩序的理性设计以及对自然甚至人类本性的控制能力的超强自信。“致命的自负”注定要走向失败。即使失败了的项目也并非没有任何积极的成效。我们是各种现代化项目的受益者,改善的目的本意是良善的,关键在于如何改善。是把自然和社会改造为容易被国家识别和控制的清晰而又简单的对象,还是站在人民的角度关心和改善人民的福祉。国家将建基于农耕社会的土地制度实施于牧区是国家强力推行下的简单化实践。在这一实践中牧民成了没有性别、传统和价值、特定个性的异常抽象的可以互换的个体。这种简单化设计因为忽视了牧民的生存传统、地方性知识的重要性而遭遇失败。草原生态恶化与牧民生计两难困境成为新项目实施的挚肘。为了避免仍然存活着的“国家乌托邦”,需要在牧区现代化现实路径选择的实施中,关注地方性知识和传统文化、注重项目谨慎推进、规划要有弹性,利用互助传统建设“新公共性”,建立完善的牧民参与机制。

胡高博[8](2010)在《提高德系西门塔尔牛胚胎移植供体和受体利用率的研究》文中研究表明本研究通过对德系西门塔尔牛供体超排及受体移植效果诸多影响因素的实验与分析,试图建立一套高效的德系西门塔尔牛超排程序以及一套提高受体牛移植妊娠率的技术体系。实验一影响德系西门塔尔牛胚胎生产因素的比较分析本实验对75头德系西门塔尔牛进行胚胎生产试验,结果表明:自然发情、PG、埋植CIDR同期方式对供体牛进行超排处理,平均可用胚数分别为8.64±0.99,7.25±0.95,3.20±0.73,自然发情和PG间差异不显着(P>0.05),埋植CIDR与自然发情、PG间差异显着(P<0.05);春、夏、秋、冬季各组间平均可用胚差异不显着(P>0.05),冬季的可用胚数高于其他季节,冬季和夏季的可用胚率和B级胚方面差异显着(P<0.05);膘情中等及以上的跟膘情下等的比较可用胚数方面差异不显着(P>0.05),但膘情中等及以上的平均可用胚数比膘情下等的高2.85枚;超排前卵巢上只有黄体的与黄体卵泡同时存在的母牛平均可用胚间差异不显着(P>0.05),卵巢上只有黄体存在的比黄体卵泡同时存在的平均可用胚数要高3.09枚。实验二胚胎因素对胚胎移植妊娠率的比较分析为了探讨胚胎因素对胚胎移植妊娠率的影响,本实验对239头荷斯坦牛进行了移植。结果表明:冻胚与鲜胚之间移植妊娠率差异显着(P<0.05),鲜胚移植妊娠率比冻胚高18.72%;不同胚龄胚胎之间移植妊娠率差异不显着(P>0.05),但致密桑葚胚移植妊娠率达64.94%,高于早期囊胚和囊胚,囊胚移植妊娠率最低50.00%;不同胚胎级别间A级、C级胚移植妊娠率差异显着(P<0.05),A级比C级高33.99%,B级与A级、C级比较差异均不显着(P>0.05)。实验三受体因素对胚胎移植妊娠率的比较分析为了探讨受体牛因素对胚胎移植妊娠率的影响,本实验共移植受体239头。实验结果表明:受体牛卵巢上的黄体直径大小不同胚胎移植妊娠率无显着影响(P>0.05),但黄体直径≥1.0cm的比<1.0cm的移植妊娠率要高10.98%;胚胎移植左侧还是右侧移植妊娠率差异不显着(P>0.05),移植右侧比移植左侧妊娠率高11.60%。实验四季节、饲养方式对胚胎移植妊娠率的比较为了探讨移植季节对胚胎移植妊娠率的影响,本实验共移植受体239头,实验结果表明:不同移植季节对胚胎移植妊娠率差异不显着(P>0.05),但春秋季节移植妊娠率高于夏、冬季节,冬季最低45.56%。为了探讨饲养方式对胚胎移植妊娠率的影响,本实验共移植受体75头。实验结果表明:饲养方式不同对胚胎移植妊娠率差异不显着(P>0.05),舍饲的移植妊娠率要比放牧的移植妊娠率高21.9%。实验五操作人员技术水平对胚胎移植妊娠率的比较本实验对两位操作人员移植的92头受体牛进行统计分析。结果表明:操作人员的技术水平对胚胎移植妊娠率的影响差异不显着(P>0.05),但技术水平高的操作人员比技术水平低的操作人员移植妊娠率要高8.4%。

权富生[9](2010)在《山羊和绵羊超数排卵及规模化胚胎移植技术研究》文中研究表明提高山、绵羊体内胚胎生产的效率及胚胎移植后母羊妊娠率和胚胎成活率,对促进优良品种扩繁及良种推广具有重要意义。本研究以国内引进的优良肉羊品种波尔山羊、无角道塞特绵羊为对象,进行了有关胚胎移植关键技术及相关配套技术的研究。通过研究得到了以下结果:1.采用宁波FSH、中科院FSH和宁波+中科院FSH进行波尔山羊超排,三种优化后的超排方案分别回收总胚胎数为17.82±8.41枚、17.33±8.84枚和17.97±9.88枚,回收可用胚胎数分别为14.97±7.56枚、13.78±6.15枚和14.31±6.63枚。表明国产FSH只要超排方案设计合理,同样可以得到好的母羊超排反应和理想的胚胎产量。2.波尔山羊重复超排4次,当连续超排间隔为2个月时,第一次、第二次、第三次和第四次的有效反应供体比例分别为93.99%、80.00%、63.64%和50.00%,回收可用胚胎数分别为14.80±6.91枚、14.00±7.01枚,9.09±7.18枚和7.83±6.09枚。当超排时间间隔为1年时,供体母羊重复超排4次,有效供体利用率分别为95.00%、85.00%、81.25%和70.83%,回收可用胚胎数各重复超排次数之间差异不显着(P>0.05)。表明连续超排时间间隔为1年比较合理。3.根据波尔山羊母羊第一次超排反应,调整第二次重复超排处理FSH给药方案,可以使第一次超排无效供体70%以上成为有效供体,并且可以获得稳定的超排反应和胚胎产量。4.通过波尔山羊青年母羊体重和回收胚胎(卵)数及可用胚胎数的相关关系研究表明,青年母羊体质量>36kg时,可以回收到较高的总胚胎(卵)数及可用胚胎数。表明,波尔山羊青年母羊体质量和超排效果之间有密切的关系,青年母羊配种前良好的饲养,有利于繁殖潜能的发挥。5.无角道塞特绵羊超排研究结果表明,用加拿大FSH(剂量160-200mg/只)超排效果比较成功,可以回收到12.91±7.80枚胚胎/卵和8.64±7.99枚可用胚胎;经产羊的超排效果优于处女羊(P<0.05);连续超排和手术会降低总胚胎/卵回收数,但是对可用胚胎数无明显影响;用观察自然发情母羊超排,可以回收到较高的总胚胎/卵数(13.83±4.64枚)和可以胚胎数(12.00±5.76枚),显着高于诱导发情母羊和未知发情周期母羊超排后获得的总胚胎/卵数(7.00±4.92枚和5.94±3.38枚)和可用胚胎数(4.22±3.42枚和3.19±2.56枚)(P<0.05);超排处理母羊发情推迟24h获得的总胚胎/卵数和可用胚胎数(0.92±1.51枚和0.42±0.90枚)显着低于正常发情母羊(P<0.01);超排后黄体正常母羊获得的胚胎/卵数和可用胚胎数分别为8.83±5.75枚和6.66±5.41枚,显着高于黄体退化母羊(5.88±5.09枚和3.59±4.30枚)(P<0.01)。研究表明,在胚胎移植中,通过使用加拿大FSH(Fotropin V)再结合选择经产母羊、自然发情母羊进行超排处理,冲胚时选择按时发情母羊及黄体正常母羊,可以收获到理想的总胚胎/卵数和可用胚胎数。6.采用医用几丁糖对波尔山羊供体手术后防止粘连处理,第四次重复超排手术后粘连率为37.5%,极显着低于生理盐水冲洗对照组(100%)和右旋糖酐70+肝素处理组的粘连率(100%)。7.绵羊受体同期发情处理研究表明,在繁殖季节,同一同期处理方案处理不同品种,同期发情率和受体利用率品种间差异不显着(P>0.05)。非繁殖季节同羊和内蒙古细毛羊作受体处理后,同期发情率和受体利用率较低,选用小尾寒羊作受体比较理想。在非繁殖季节使用孕酮栓或配合PMSG诱导母羊受体同期发情效果优于PGF2α组和PGF2α+PMSG组。8.通过不同处理方法在不同季节同期发情处理山羊受体,结果表明,栓+PGF2α方法不论在繁殖季节还是在非繁殖季节,为比较理想的同期发情处理方法。在栓+PG2α用于同期发情处理时,配合使用FSH或PMSG,可以增加受体的有效黄体数量,但是对于胚胎移植后母羊的妊娠率及胚胎成羔率无影响。配合使用FSH或PMSG后,均可以缩短处理母羊撤栓到发情之间的时间,对母羊发情持续时间无影响。表明在春季使用20IU-30IU的FSH配合孕酮栓+PGF2α法,有利于受体利用率的提高。PMSG使用剂量以300IU为宜。9.改进国产麻醉剂速眠新肌肉注射为静脉麻醉绵羊受体或山羊受体,用药量大幅度减少。麻醉羊进入麻醉期时间短,麻醉效果确实,手术后母羊苏醒快,苏醒后0.5h可以恢复采食和反刍,苏醒后的2h可以完全恢复正常。表明采用速眠新麻醉剂进行静脉麻醉,用药量少,安全有效。10.通过供体运输、胚胎运输和受体运输进行异地鲜胚移植,主要研究结果,波尔山羊供体母羊在4h以内运输到采卵地点,对供体母羊的胚胎回收数量、胚胎移植后成活率及受体母羊妊娠率均无影响。胚胎在36.5℃运输2 h,对胚胎移植后成活率及受体母羊妊娠率无影响。但是运输温度为20℃时,胚胎移植后成活率下降到41.7%,受体母羊妊娠率下降到42.0%。受体运输后进行鲜胚移植,受体母羊的妊娠率下降到42.0%,胚胎成活率只有32.1%,明显低于供体运输和胚胎运输进行鲜胚移植。表明供体运输为不同畜牧场异地鲜胚移植的最好方法,新鲜胚胎保存在36.5℃短途运输或较长距离运输也可以得到比较理想的胚胎移植妊娠率和胚胎成羔率。11.通过调查和研究,总结的山、绵羊MOET规模化、商业化生产运行模式适合我国国情。本研究建立的山、绵羊胚胎移植效益评估模型和实例效益评估验证表明,该模型可以用于胚胎移植项目立项、项目实施效果评估等研究中。本论文开展的系列研究,对于完善山、绵羊胚胎移植技术体系建设,促进良种山、绵羊品种的快速扩繁和推广,具有重要的理论和实践指导意义。

禹学礼[10](2010)在《牛IVF胚胎培养与冷冻方法优化》文中提出牛IVF是动物繁殖生物技术领域的研究热点之一。近年来,国内外学者对此进行了大量研究,但由于一些关键技术尚不完善,使其总体生产效率不高,严重制约了该技术在生产中的应用。卵母细胞及胚胎的体外培养条件和冷冻方法不够完善是其主要的限制因素。因此,本课题拟通过对影响牛卵母细胞IVF后胚胎发育的培养条件和冷冻方法等相关因素之研究,优化卵母细胞和胚胎的培养条件和冷冻方法,建立一套更加有效、可操作性强的胚胎体外培养和冷冻体系,提高IVP胚胎的生产效率。1输卵管和颗粒细胞单层对牛体外受精胚胎发育的影响以屠宰场牛卵巢为实验材料,研究了输卵管细胞单层(OCM)和颗粒细胞单层(GCM)对牛卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)和体外培养(IVC)后胚胎发育能力的影响。实验1:从卵泡抽取卵丘卵母细胞复合体(COCs),并根据卵母细胞外面卵丘细胞的层数将其分为3级:1级(≥4层);2级(2~3层);3级(0~1层)。然后,分别进行在IVM和IVC培养液中添加GCM (1×106个/ml)与不添加的对比实验。结果显示:添加GCM对1级卵母细胞的卵裂率、6~8细胞发育率和囊胚率无明显影响(P>0.05);但添加GCM的2级、3级卵母细胞,受精后的卵裂率、6~8细胞发育率和囊胚率分别高于未添加组(P<0.05)。实验2:所有卵母细胞(包括COCs和裸卵)被随机分为3个组,在其IVM和IVC培养液中分别添加OCM、GCM或不添加体细胞(对照组)。结果显示:OCM和GCM组的卵裂率、6~8细胞发育率和囊胚率均高于对照组(P<0.05),而两实验组之间差异不显着。实验3:将取自每头牛的约20枚卵母细胞,分别置于不同大小的微滴(30μL,50μL,100μL和200μL)中培养、受精,结果表明,30μL和50μL组的囊胚发育率明显高于100μL和200μL组(P<0.05)。2卵泡及卵泡液对牛卵母细胞体外受精后发育的影响以屠宰场牛卵巢为材料,研究了卵泡大小和卵泡液对牛卵母细胞体外成熟、受精和培养后发育潜力的影响。实验1:按照卵泡大小将COCs分为4个实验组:>8 mm组、2~8 mm组、腔前卵泡(PF)卵母细胞组和混合(将前三种卵母细胞混合)组。结果表明,卵泡大小直接影响卵母细胞受精后的发育,同时,源自不同大小卵泡的卵母细胞混合培养,可以促进未成熟的腔前卵泡内卵母细胞的发育。实验2:将源自优势卵泡(>8 mm)、小卵泡(2~8 mm)和混合(所有卵泡液混合)的牛卵泡液(BFF),按照10%添加到成熟培养液中,3个实验组的卵裂率和囊胚率均高于没有添加BFF的对照组(P<0.05),但添加10%的优势卵泡液使卵母细胞和胚胎发生粘连,易于造成丢失。实验3:与未添加BFF的对照组相比,成熟培养液中分别加入10%、20%和40%的混合BFF,均可明显促进卵母细胞受精后的发育(P<0.05),但20%组和40%组出现卵母细胞间及胚胎间的粘连。因此,成熟培养液中添加10%的混合BFF较为适宜。3改进V形孔培养法对牛胚胎体外生产效果的影响研究目的在于探索三种不同培养方法对牛胚胎体外生产效果的影响。V形孔(WOW)培养微滴的制作方法是,在塑料培养皿的底部,相距1cm用加热的针头烫出V形孔,每个V形孔上覆盖一个20μL的培养微滴;改进的V形孔(mWOW)培养微滴制作方法与V形孔法基本相同,但V形孔间相距1mm,每15~20个V形孔上覆盖一个400μL的培养微滴。将卵母细胞和受精卵分别采用微滴(对照)、V形孔和改进的V形孔法进行体外培养,对照组每个微滴中植置入20~25枚卵母细胞或胚胎;二实验组每个V形孔中置入一个卵母细胞或胚胎。结果表明,mWOW组的卵裂率、囊胚率及第6d、7d、8d胚胎的总细胞数与微滴组差异不显着(P>0.05),但明显高于WOW组(P< 0.05);WOW组胚胎的孵化率低于mWOW组和对照组(P< 0.05),但mWOW组与对照组差异不显着(P>0.05)。此外,三组中第6d、7d、8d获得囊胚的总细胞数均呈现逐渐下降趋势。结论:以TCM-199为基础培养液,用改进的V形孔法可以完成牛胚胎体外生产的全过程,且比V形孔法培养的胚胎具有更强的发育能力和更好的质量。体外培养时,发育越快的胚胎质量越高。4牛未成熟卵母细胞冷冻方法研究通过对比冷冻保护剂浓度变化和不同玻璃化冷冻方法对卵母细胞冷冻效率的影响,探索牛未成熟卵母细胞的冷冻方法。实验1:将COCs分别在不同玻璃化冷冻液VS1 (10% EG + 10% DMSO)、VS2(20% EG + 20% DMSO)、VS3(25% EG + 25% DMSO)中存留30s或60s,体外成熟22h后,成熟率与对照组没有明显差异(P>0.05);但在VS3中存留60s时,成熟率明显下降(P<0.01)。说明当EG和DMSO浓度在冷冻液中各达到25%、作用时间增加到60s时,对卵母细胞有明显的毒性。实验2:在不同玻璃化冷冻液(VS1、VS2、VS3)中,采用OPS法冷冻COCs,解冻后再进行IVM、IVF和早期胚胎的IVC。结果表明,VS2组卵母细胞成熟率(67.9%)和囊胚率(5.4%)分别高于VS1组(61.1%; 0)和VS3组(63.6%; 3.6%)。实验3:分别采用细管法和开放式拉长细管(open pulled straw,OPS)法对未经成熟培养的卵丘卵母细胞复合体(COCs)进行玻璃化冷冻,解冻后再进行IVM、IVF和早期胚胎IVC。结果表明,细管组和OPS组的解冻后COCs正常率分别为59.4%±4.3和77.9%±4.1(P<0.01);成熟率分别为48.2%±5.3和66.0%±5.8(P<0.01);卵裂率分别为18.5%±2.0和32.8%±1.4(P<0.01);8-细胞阶段的成功率分别为14.8%±2.5和24.8%±1.5(P<0.01);桑椹胚发育率分别为0和5.3%±1.1,明显低于未经冷冻的鲜卵组(21.0%±3.8;P<0.01);囊胚发育率分别为0和4%±1.0,明显低于鲜卵组(P<0.01)。结论:以20%乙二醇和20%二甲基亚砜为冷冻保护剂,将室温下卵母细胞与冷冻液接触时间控制在30s以内,采用OPS法可以使未经成熟培养的牛COCs冷冻后获得桑椹胚和囊胚,但成功率低。5封闭式拉长细管法冷冻牛IVF胚胎研究本研究目的在于评价封闭式拉长细管(closed pulled straw,CPS)法对体外生产和体内获取牛胚胎的冷冻效果。在OPS玻璃化冷冻法的基础上,将其顶端热封以避免胚胎及冷冻液与液氮的直接接触,形成CPS玻璃化冷冻法。将体外生产或体内获取的牛桑椹胚和早期囊胚分别采用慢速冷冻法、OPS法和CPS法冷冻,解冻后对胚胎进行形态学鉴定,对形态正常胚胎分别进行体外培养24h和72h。结果表明:体外生产的牛胚胎,OPS组和CPS组的解冻后胚胎形态正常率分别为87.9%±5.2和85.4%±4.9,培养24h后的存活率分别为58.0%±6.8和56.3%±4.4,培养72h后的存活率分别为35.2%±6.0和34.9%±6.7,差异均不显着(P>0.05);但OPS和CPS法上述三项指标均显着高于慢速冷冻法(对照组,P<0.05)。体内获取胚胎的实验结果(实验2)与体外胚胎(实验1)基本一致。结论:CPS玻璃化冷冻法适用于体外生产和体内获取的牛胚胎冷冻。这种方法不仅可以降低胚胎被液氮污染的风险,而且保留了OPS玻璃化冷冻的优点。

二、制约我国牛胚胎工程产业化进程的主要问题及解决措施(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、制约我国牛胚胎工程产业化进程的主要问题及解决措施(论文提纲范文)

(1)奶牛种公牛培育及性别控制冷冻精液生产效率影响因素的研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述
    1.1 奶牛繁育技术研究进展
        1.1.1 人工输精技术
        1.1.2 MOET育种技术
        1.1.2.1 胚胎移植国内外应用情况
        1.1.2.2 胚胎移植技术存在的问题及解决方法
        1.1.2.3 胚胎移植技术前景
        1.1.3 活体采卵-体外受精技术
        1.1.3.1 体外受精技术的应用情况
        1.1.3.2 体外受精技术存在的问题
        1.1.3.3 体外受精技术的发展前景
        1.1.4 奶牛生产性能测定
    1.2 奶牛分子育种技术研究进展
        1.2.1 分子辅助标记
        1.2.2 全基因组选择
        1.2.2.1 全基因组关联研究
        1.2.2.2 全基因组选择技术
        1.2.2.3 基因组选择的应用
        1.2.3 动物体细胞克隆技术
        1.2.3.1 动物克隆操作技术
        1.2.3.2 动物克隆研究的生物学意义
        1.2.3.3 动物克隆技术的应用前景及存在的问题
    参考文献
第二章 影响种公牛培育的种用胚胎质量及受胎率相关因素研究
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 供体母牛选择
        2.2.2 实验材料
        2.2.2.1 仪器与设备
        2.2.2.2 主要试剂耗材
        2.2.3 实验方法
        2.2.3.1 试剂配制
        2.2.3.2 超数排卵处理
        2.2.3.3 供体牛人工授精
        2.2.3.4 牛胚胎采集和鉴定
        2.2.3.5 牛胚胎冷冻保存
        2.2.3.6 牛体外胚胎生产
        2.2.3.7 牛胚胎解冻和移植
        2.2.3.8 妊娠检查
        2.2.4 实验数据处理
    2.3 实验结果
        2.3.1 影响奶牛种用胚胎生产因素的研究
        2.3.1.1 奶牛不同性别X/Y冷冻精子体内胚胎生产效率的比较
        2.3.1.2 添加与未添加抗氧化剂性控冻精对体外性控胚胎生产效率的影响
        2.3.1.3 添加与未添加抗氧化剂对奶牛体内性控胚胎生产效率的影响
        2.3.2 奶牛种用胚胎移植效果的比较
        2.3.2.1 不同季节对牛胚胎移植效果的影响
        2.3.2.2 不同月龄受体母牛对胚胎移植效果比较
    2.4 讨论
第三章 全基因组选择技术及受精能力检测在奶牛育种中应用效果的研究
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 试剂
        3.2.2 仪器设备
        3.2.3 实验方法
        3.2.3.1 试剂的配制
        3.2.3.2 青年种公牛生长发育测定
        3.2.3.3 全基因组检测
        3.2.3.4 DHI测定方法
        3.2.4 实验数据处理
    3.3 实验结果
        3.3.1 种公牛全基因组检测及生长发育研究
        3.3.1.1 青年种公牛生长发育指标分析
        3.3.1.2 青年种公牛全基因组检测及遗传评估
        3.3.2 核心种母牛全基因组检测及其生产性能研究
        3.3.3 种公牛精液AI受胎率与IVF受精率相关性研究
        3.3.3.1 常规冷冻精液IVF受精率与AI受胎率的相关性分析
        3.3.3.2 性控冷冻精液IVF受精率与AI受胎率的相关性分析
        3.3.3.3 常规与性控冷冻精液AI受胎率与参配奶牛胎次的影响
        3.3.3.4 常规和性控冷冻精液IVF受精率与AI受胎率的相关性分析
    3.4 讨论
第四章 添加异种动物精液及抗氧化剂对奶牛性控冷冻精液生产效率和品质的影响
    4.1 引言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.1.1 药品试剂及耗材
        4.2.1.2 器材设备
        4.2.2 实验方法
        4.2.2.1 原精的准备
        4.2.2.2 染色处理
        4.2.2.3 精子分离操作
        4.2.2.4 精子分离平衡和冷冻保存
        4.2.2.5 产品质量检测
        4.2.2.6 输精时精液处理
        4.2.3 实验数据处理
    4.3 实验结果
        4.3.1 添加异种动物精液对奶牛性控冷冻精液生产效率及品质影响
        4.3.1.1 山羊、鹿和绵羊异种精子对牛精子辅助受精推流作用效果比较
        4.3.1.2 奶牛高效性控冷冻精液新产品与常规性控冻精受胎率及性别比例研究
        4.3.2 添加抗氧化剂对奶牛性控冻精品质的影响
        4.3.2.1 添加V_E对奶牛性控冷冻精液品质的影响
        4.3.2.2 添加SOD对奶牛性控冷冻精液品质的影响
        4.3.2.3 添加CAT对奶牛性控冷冻精液品质的影响
        4.3.3 奶牛性控冷冻精液关键技术指标与国内外育种同行企业比较
    4.4 讨论
结论
参考文献
致谢
攻读博士期间发表的论文

(2)延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻保存的研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 延边黄牛简介
        1.1.1 产地及特点
        1.1.2 延边黄牛产业现状分析
        1.1.3 延边黄牛现阶段发展对策
    1.2 活体采卵技术
        1.2.1 概述
        1.2.2 影响活体采卵技术的因素
    1.3 动物胚胎冷冻技术
        1.3.1 概述
        1.3.2 胚胎冷冻保存原理
    1.4 胚胎冷冻保存方法
    1.5 对细胞的保护作用及冷冻损伤机制
        1.5.1 对细胞的保护作用
        1.5.2 冷冻损伤机制
    1.6 冷冻胚胎解冻及冷冻保护剂的脱除
        1.6.1 冷冻胚胎解冻
        1.6.2 温度速率
        1.6.3 冷冻保护剂的脱除
    1.7 研究目的及意义
第二章 冷冻保护剂对胚胎冷冻的影响
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验药品和仪器
        2.1.3 药品的配制
        2.1.4 试验方法
    2.2 结果
        2.2.1 甘油浓度对冷冻胚胎的影响
        2.2.2 乙二醇浓度对冷冻胚胎的影响
        2.2.3 冷冻保护剂种类对冷冻胚胎的影响
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 冷冻前平衡时间对胚胎冷冻的影响
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验药品和仪器
        3.1.3 药品的配制
        3.1.4 试验方法
    3.2 结果
    3.3 讨论
    3.4 小结
第四章 胚胎发育阶段对胚胎冷冻的影响
    4.1
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验药品和仪器
        4.1.3 药品的配制
        4.1.4 试验方法
    4.2 结果
    4.3 讨论
    4.4 小结
第五章 结论
参考文献
致谢
附录A (攻读学位期间发表论文目录)
附录B

(3)动物胚胎移植技术发展概况及存在问题(论文提纲范文)

1国外胚胎移植技术发展概况
    1.1试验研究阶段
    1.2应用研究阶段
    1.3产业化发展阶段
2我国胚胎移植技术发展概况
    2.1试验研究阶段(20世纪70年代初~80年代中期)
    2.2发展提高阶段(20世纪80年代中期~90年代初)
    2.3推广应用阶段(20世纪90年代初期~21世纪初)
    2.4向产业化迈进阶段
3甘肃胚胎移植技术发展概况
    3.1应用研究阶段
    3.2规模推广阶段
    3.3商业运营阶段
4胚胎移植存在的问题
    4.1胚胎来源的问题
    4.2胚胎移植技术人员不足的问题
    4.3受体饲养管理水平低下的问题

(4)对农区推广牛胚胎移植技术的几点认识(论文提纲范文)

1 胚胎移植费用高, 农户难以支付
2 胚移人员缺少, 胚移操作难度大
3 牛改良需求与当前推广对象的确定问题
4 胚移队伍的职责确定与协作履职的问题
5 受体牛繁育情况复杂
6 胚胎移植技术推广难, 前景广阔
7 胚移暴露的问题与产业化模式选择问题

(5)云南ZK种业集团公司发展战略研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
1 绪论
    1.1 选题背景及意义
    1.2 国内外研究综述
    1.3 研究思路和方法
    1.4 研究内容及论文结构
        1.4.1 研究内容
        1.4.2 论文结构
2 文献综述
    2.1 企业战略管理理论
        2.1.1 战略规划学派与三安范式
        2.1.2 环境适应学派与逻辑改良主义
        2.1.3 产业组织学派与波特的战略思想
        2.1.4 资源基础学派与核心竞争力理论
    2.2 价值链理论
        2.2.1 关于价值链研究
        2.2.2 关于价值创造研究
        2.2.3 关于价值分配研究
    2.3 技术创新理论研究
        2.3.1 技术创新理论的概念
        2.3.2 创新理论学派及观点
3 经营环境分析
    3.1 宏观环境(PEST)分析
        3.1.1 政策环境分析
        3.1.2 经济环境分析
        3.1.3 技术环境分析
        3.1.4 自然环境分析
    3.2 行业环境分析
        3.2.1 行业市场现状
        3.2.2 市场前景预测
    3.3 ZK公司内部条件分析
        3.3.1 优势分析
        3.3.2 劣势分析
    3.4 SWOT综合分析
        3.4.1 机会分析
        3.4.2 挑战分析
        3.4.3 优势分析
        3.4.4 劣势分析
4 ZK公司战略设计
    4.1 公司发展沿革
    4.2 战略设计
        4.2.1 公司战略定位
        4.2.2 发展思路
        4.2.3 基本原则
        4.2.4 公司目标体系
    4.3 重点战略
        4.3.1 研究与开发战略
        4.3.2 质量战略
        4.3.3 市场营销战略
        4.3.4 人才开发战略
5 保障措施
    5.1 加强规范化管理
    5.2 完善战略实施控制
    5.3 强化人才开发
    5.4 完善激励机制
6 结论及展望
参考文献
致谢

(6)转基因克隆牛胚胎的玻璃化冷冻(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
第一章 哺乳动物卵母细胞及胚胎冷冻研究综述
    1.1 胚胎及卵母细胞冷冻的原理及其意义
        1.1.1 胚胎及卵母细胞冷冻的原理
        1.1.2 胚胎及卵母细胞冷冻的意义
    1.2 胚胎及卵母细胞冷冻的发展概况
        1.2.1 卵母细胞冷冻的发展
        1.2.2 胚胎冷冻的发展
    1.3 胚胎及卵母细胞冷冻的方法
        1.3.1 慢速冷冻
        1.3.2 快速冷冻
        1.3.3 玻璃化冷冻
    1.4 胚胎及卵母细胞冷冻保护剂的选择
        1.4.1 冷冻保护剂的原理
        1.4.2 冷冻保护剂选择原则
        1.4.3 渗透性冷冻保护剂
        1.4.4 非渗透性冷冻保护剂
        1.4.5 抗冻蛋白
第二章 转基因克隆动物研究概述
    2.1 转基因克隆研究历史
    2.2 国内外转基因研究现状
    2.3 动物转基因技术
        2.3.1 原核注射法
        2.3.2 精子载体法
        2.3.3 胚胎干细胞法
        2.3.4 病毒载体法
        2.3.5 体细胞核移植法
    2.4 转基因研究的实际应用与存在的问题
        2.4.1 转基因研究的实际应用
        2.4.2 转基因动物研究面临的问题
    2.5 转基因研究的前景与展望
第三章 转基因克隆牛胚胎的程序化与玻璃化冷冻
    3.1 试剂和仪器
        3.1.1 试剂
        3.1.2 液体
    3.2 方法
        3.2.1 转基因供体细胞的制备
        3.2.2 转基因克隆胚的构建及体外培养
        3.2.3 囊胚的冷冻与复苏
        3.2.4 解冻后囊胚细胞计数和凋亡染色
        3.2.5 基因表达水平检测
        3.2.6 实验设计
        3.2.7 数据统计与分析
    3.3 实验结果
        3.3.1 不同冷冻方法对复苏后胚胎存活率的影响
        3.3.2 不同冷冻方法对转基因克隆囊胚细胞数和细胞凋亡的影响
        3.3.3 不同冷冻方法对转基因克隆囊胚基因表达水平的影响
    3.4 讨论
        3.4.1 不同冷冻方法对复苏后胚胎存活率、孵化率的影响
        3.4.2 不同冷冻方法对囊胚细胞数和细胞凋亡的影响
        3.4.3 不同冷冻方法对囊胚基因表达水平的影响
    3.5 小结
第四章 转基因克隆牛胚胎玻璃化冷冻的优化
    4.1 试剂和材料
        4.1.1 试剂与仪器
    4.2 方法
        4.2.1 转基因供体细胞的制备
        4.2.2 转基因克隆胚的构建及体外培养
        4.2.3 实验设计
        4.2.4 解冻后囊胚细胞计数和凋亡染色
        4.2.5 数据统计与分析
    4.3 实验结果
        4.3.1 不同冷冻保护剂对转基因克隆胚胎冷冻的影响
        4.3.2 不同时期转基因克隆胚胎冷冻
        4.3.3 不同承载载体对转基因克隆胚胎冷冻的影响
    4.4 讨论
        4.4.1 不同冷冻保护剂对转基因克隆胚胎冷冻的影响
        4.4.2 不同时期转基因克隆胚胎的玻璃化冷冻
        4.4.3 不同载体对转基因克隆胚胎玻璃化冷冻的影响
    4.5 小结
结论
参考文献
致谢
个人简介

(7)土地制度变迁视野下的哈萨克牧区社会 ——以新疆新源县为例(论文提纲范文)

内容提要
中文摘要
Abstract
第1章 导论
    1.1 问题的缘起
    1.2 牧区社会研究的知识谱系
        1.2.1 关于游牧社会的研究
        1.2.2 土地制度变迁与乡村社会的研究
        1.2.3 研究的贡献与缺憾
    1.3 典型个案、研究方法与资料来源
        1.3.1 个案简介
        1.3.2 研究方法
        1.3.3 资料来源
第2章 本研究的理论资源、概念和分析框架
    2.1 牧区社会:边缘社会研究的切入点
        2.1.1 土地改革与牧区社会
        2.1.2 土地制度变迁:牧区社会研究的新视角
    2.2 相关理论资源
        2.2.1 詹姆斯·C·斯科特“国家的视角”与“失败的逻辑”
        2.2.2 F·A·哈耶克的“致命的自负”与“限制国家权力”
        2.2.3 何·彼特的“空制度”理论
        2.2.4 诺思的“制度及制度变迁”与“路径依赖”
    2.3 核心概念界定
        2.3.1 土地制度
        2.3.2 土地制度变迁
        2.3.3 牧区社会
    2.4 基本观点与基本思路
        2.4.1 本研究的基本观点
        2.4.2 本研究的基本思路
    2.5 论文结构
第3章 哈萨克族群背景与土地制度变迁的历史演进
    3.1 哈萨克族群的历史演进
        3.1.1 清代以降哈萨克族群的历史演进
        3.1.2 牧区民主改革时期的哈萨克族群
        3.1.3 合作化、人民公社时期的哈萨克族群
        3.1.4 草原承包时期的哈萨克族群
    3.2 哈萨克牧区土地制度变迁的历史演进
        3.2.1 清代以降哈萨克族群的土地制度
        3.2.2 民主改革时期的草原民族公有制
        3.2.3 合作化、人民公社时期哈萨克牧区的土地制度
        3.2.4 草原全民所有制与集体所有制共存时期
    3.3 本章小结
第4章 民主改革、合作化、人民公社时期的哈萨克牧区社会
    4.1 哈萨克牧区社会的民主改革
        4.1.1 新疆哈萨克牧区的民主改革
        4.1.2 新源县哈萨克牧区民主改革
        4.1.3 草原民族公有:关照地方性的土地实践
    4.2 牧业合作化时期的哈萨克牧区社会
        4.2.1 农业合作化的理论渊源
        4.2.2 畜牧业社会主义改造的理性设计
        4.2.3 畜牧业社会主义改造的进路
    4.3 牧业人民公社时期的哈萨克牧区社会
        4.3.1 大跃进和牧业人民公社:激进现代主义的牧区实践
        4.3.2 公共食堂:牧民生活方式的乌托邦实践
        4.3.3 阶级斗争:历史与传统的决裂
        4.3.4 牧业学大寨:激进现代化意识的表现
    4.4 本章小结
第5章 土地承包责任制下的哈萨克牧区社会
    5.1 牧业生产责任制下草原改革的时间序列
        5.1.1 家庭承包牧区实践的开端(1978-1984 年)
        5.1.2 家庭承包牧区实践的深化(1985-1991 年)
        5.1.3 从国家战略出发的产业调整(1992-2001 年)
        5.1.4 草原制度改革的战略转型期(2002 年以后)
    5.2 哈萨克牧区社会的草原产权制度及其变迁
        5.2.1 《草原法》符号化背景下的草原产权
        5.2.2 牧区草原产权制度
        5.2.3 新疆哈萨克牧区草原产权制度的变迁及启示
        5.2.4 草原可持续发展的制度与法律期望
    5.3 牧民定居:强制村庄化运动
        5.3.1 哈萨克游牧社会的终结
        5.3.2 哈萨克牧民定居的运作逻辑
        5.3.3 牧民定居模式的考量:以新源县为个案
        5.3.4 游牧定居的生态后果
    5.4 草原承包:草原生态保护与牧民生计的两难
        5.4.1 草原生态状况:忽略牧民生存逻辑的土地实践结果
        5.4.2 草原承包:草原生态退化根本原因
        5.4.3 草原管理制度对牧民生计的影响
        5.4.4 兼顾草原生态保护与牧民生计的相关措施
    5.5 哈萨克牧区社会的变迁与整合
        5.5.1 哈萨克牧区社会的结构分化
        5.5.2 哈萨克牧区的社会整合
        5.5.3 草原承包制后哈萨克牧区社会的变迁
    5.6 本章小结
第6章 实现牧区社会现代化发展的路径选择
    6.1 牧区现代化的现实路径
        6.1.1 哈萨克牧区现代化现状
        6.1.2 社会主义新牧村建设的现实路径
        6.1.3 社会主义新牧村建设状况
        6.1.4 社会主义新牧村建设的对策建议
    6.2 牧区现代化与哈萨克牧民的现代化
        6.2.1 新牧村建设与人的现代化
        6.2.2 哈萨克牧民的综合素质状况
        6.2.3 培养有文化、懂技术、会经营的新型牧民
        6.2.4 新牧村建设与农牧民权益保障
    6.3 新牧村建设与草原生态保护
        6.3.1 明晰草原产权与草原生态保护
        6.3.2 新牧区建设中草原生态保护的措施
    6.4 本章小结
结论
参考文献
攻读博士学位期间的相关学术成果

(8)提高德系西门塔尔牛胚胎移植供体和受体利用率的研究(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
一、文献综述
    前言
    1 西门塔尔牛及其在中国的育种现状
    2 母牛胚胎移植技术的研究进展
        2.1 国内外研究现状及分析
        2.1.1 国外胚胎移植发展状况
        2.1.2 我国胚胎移植发展状况
        2.2 胚胎移植的意义
    3 母牛胚胎移植过程的几个主要环节
        3.1 供体牛的选择
        3.1.1 遗传优势方面
        3.1.2 繁殖能力方面
        3.1.3 供体体质方面
        3.2 受体牛的选择
        3.3 同期发情
        3.3.1 同期发情的概念
        3.3.2 同期发情的机理
        3.3.3 同期发情的意义
        3.3.4 同期发情的方法
        3.4 供体牛的超数排卵
        3.4.1 超数排卵的概念
        3.4.2 超数排卵的机理
        3.4.3 超数排卵的意义
        3.4.4 超数排卵的方法
        3.5 供体牛的配种
        3.6 胚胎的采集
        3.6.1 采集的方法
        3.6.2 胚胎的分级
        3.7 胚胎移植
    4 胚胎移植的主要影响因素
        4.1 供、受体牛年龄的影响
        4.2 营养状况
        4.3 季节
        4.4 受体牛黄体质量
        4.5 操作人员技术水平
    5 超数排卵及胚胎移植技术在实际应用中存在的问题
        5.1 供体对超排药物的反应不稳定
        5.2 胚胎收集不完全
        5.3 供体超排后的再利用问题
        5.4 胚胎移植妊娠率有待提高
        5.5 胚胎移植技术相关的药品及器械
        5.6 胚胎来源
        5.7 技术人员
    6 本试验研究的目的与意义
二、试验研究
    实验一 供体牛的胚胎生产中超排影响因素分析及效果比较
        1 材料和方法
        1.1 试验时间、地点
        1.2 试验材料
        1.2.1 试验动物
        1.2.2 试验药品
        1.2.3 试验用品、仪器
        1.3 试验方法
        1.3.1 供体牛超排处理、配种
        1.3.2 供体牛冲胚
        1.3.3 胚胎鉴定、装管及冷冻
        1.4 数据处理
        2 试验结果与分析
        2.1 不同同期处理方法对供体牛胚胎生产及胚胎质量的影响
        2.2 季节对供体牛胚胎生产及质量的影响
        2.3 膘情对胚胎生产及胚胎质量的影响
        2.4 超排前卵巢状态对供体超排效果的影响
        3. 讨论
        3.1、不同同期处理方法对供体牛胚胎生产及胚胎质量的影响
        3.2 季节对供体牛胚胎生产及质量的影响
        3.3 膘情对胚胎生产及胚胎质量的影响
        3.4 超排前卵巢状态对供体超排效果的影响
        4. 结论
    实验二 胚胎因素对胚胎移植妊娠率的比较分析
        1 材料和方法
        1.1 试验时间、地点
        1.2 试验材料
        1.2.1 试验动物
        1.2.2 试验药品及器械
        1.3 试验方法
        1.3.1 受体牛同期发情
        1.3.2 胚胎解冻
        1.3.3 胚胎移植
        1.4 数据处理
        2 试验结果与分析
        2.1 鲜胚、冻胚对受体移植妊娠率的影响
        2.2 胚龄对移植受体移植妊娠率的影响
        2.3 胚胎级别对移植移植妊娠率的影响
        3. 讨论
        3.1 鲜胚、冻胚对受体移植妊娠率的影响
        3.2 胚龄对移植受体妊娠率的影响
        3.3 胚胎级别对移植受体妊娠率的影响
        4. 结论
    实验三 受体因素对胚胎移植妊娠率的比较分析
        1 材料和方法
        1.1 试验时间、地点
        1.2 试验材料
        1.2.1 试验动物
        1.2.2 试验药品及器械
        1.3 试验方法
        1.3.1 受体牛同期发情
        1.3.2 胚胎解冻
        1.3.3 胚胎移植
        1.4 数据处理
        2 试验结果与分析
        2.1 黄体大小对受体移植妊娠率的影响
        2.2 胚胎移植于左、右侧子宫角对受体移植妊娠率的影响
        3. 讨论
        3.1 黄体大小对受体移植妊娠率的影响
        3.2 胚胎移植于左、右侧子宫角对受体移植妊娠率的影响
        4. 结论
    实验四 季节、饲养方式对胚胎移植妊娠率的比较分析
        1 材料和方法
        1.1 试验时间、地点
        1.2 试验材料
        1.2.1 试验动物
        1.2.2 试验药品及器械
        1.3 试验方法
        1.3.1 受体牛同期发情
        1.3.2 胚胎解冻
        1.3.3 胚胎移植
        1.4 数据处理
        2 试验结果与分析
        2.1 季节对受体牛移植妊娠率的影响
        2.2 饲养方式对受体移植妊娠率的影响
        3. 讨论
        3.1 季节对受体牛移植妊娠率的影响
        3.2 饲养方式对受体移植受胎率的影响
        4. 结论
    实验五 操作人员技术水平对胚胎移植妊娠率的比较
        1 材料和方法
        1.1 试验时间、地点
        1.2 试验材料
        1.2.1 试验动物
        1.2.2 试验药品及器械
        1.3 试验方法
        1.3.1 受体牛同期发情
        1.3.2 胚胎解冻
        1.3.3 胚胎移植
        1.4 数据处理
        2 试验结果与分析
        2.1 操作人员技术水平对受体移植妊娠率的影响
        3. 讨论
        3.1 操作人员技术水平对受体移植妊娠率的影响
        4. 结论
参考文献
附图
附录
致谢
作者简历
硕士研究生学位论文导师评阅表

(9)山羊和绵羊超数排卵及规模化胚胎移植技术研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
文献综述
    第一章 山、绵羊超数排卵技术研究进展
        1.1 体内胚胎生产的背景
        1.2 体内胚胎生产的现状
        1.3 影响超排效果的外在因素
        1.4 促性腺激素的来源
        1.5 促性腺激素给药方案
        1.6 使用孕激素对超排变异的影响
        1.7 影响胚胎生产的内在原因
        1.8 卵巢因素对超排效果的影响
        1.9 卵巢优势卵泡的影响
        1.10 卵巢上存在黄体对超排效果的影响
        1.11 超排的卵巢起始点思想
        1.12 卵巢反应异常对超数排卵的影响
    第二章 提高山、绵羊胚胎移植妊娠率的研究进展
        2.1 胚胎因素
        2.1.1 供体对胚胎质量和移植妊娠率的影响
        2.2 受体因素
        2.2.1 供、受体的同期化程度
        2.2.2 受体的孕酮水平
        2.2.3 移植部位
        2.2.4 受体营养和年龄
        2.2.5 其他方面
        2.3 激素和细胞因子对于山、绵羊胚胎移植妊娠的影响
        2.4 我国山、绵羊胚胎移植目前存在的主要问题
        2.5 本研究的目的意义及主要研究内容
试验研究
    第三章 波尔山羊超数排卵技术研究
        3.1 材料与方法
        3.1.1 试验羊和超排处理方法
        3.1.2 数据处理方法
        3.2 研究结果
        3.2.1 试验一、国产促性腺激素FSH 超排波尔山羊研究结果
        3.2.2 试验二、不同激素重复超排波尔山羊方案研究结果
        3.2.3 试验三、波尔山羊青年母羊和成年母羊重复超排分析
        3.2.4 试验四、波尔山羊重复超排时间间隔对超排效果的影响研究结果
        3.2.5 试验五、波尔山羊重复超排FSH 用量调整后超排结果
        3.2.6 试验六、波尔山羊青年母羊体质量与超排关系分析
        3.3 讨论
        3.3.1 关于国产促性腺激素FSH 超排波尔山羊研究
        3.3.2 关于不同激素重复超排波尔山羊方案讨论
        3.3.3 关于波尔山羊青年母羊和成年母羊重复超排分析讨论
        3.3.4 关于波尔山羊重复超排间隔对超排效果的影响研究讨论
        3.3.5 关于波尔山羊重复超排FSH 用量调整的问题
        3.3.6 关于波尔山羊青年母羊体质量与超排关系分析讨论
        3.4 小结
    第四章 影响无角道塞特绵羊超数排卵因素分析
        4.1 材料与方法
        4.1.1 试验动物
        4.1.2 供体母羊超数排卵、配种及胚胎收集
        4.1.3 试验设计
        4.1.4 统计分析
        4.2 结果
        4.3 讨论
        4.4 小结
    第五章 山羊重复手术收集胚胎防止粘连方法比较
        5.1 试验材料和方法
        5.1.1 试验羊
        5.1.2 试验设计
        5.1.3 供体羊超排处理和配种
        5.1.4 母羊胚胎收集
        5.1.5 胚胎鉴定
        5.1.6 数据分析
        5.2 结果分析
        5.3 讨论与结论
    第六章 绵羊胚胎移植受体同期发情处理技术研究
        6.1 材料与方法
        6.1.1 试验羊及饲养
        6.1.2 试验药品及用量
        6.1.3 试验设计
        6.1.4 处理方法
        6.1.5 母羊发情鉴定
        6.1.6 受体利用
        6.1.7 资料统计
        6.2 结果
        6.2.1 繁殖季节受体同期发情处理不同方法效果
        6.2.2 非繁殖季节受体不同处理同期发情效果
        6.2.3 季节对受体同期发情处理的影响
        6.2.4 不同季节受体同期发情处理后发情分布
        6.3 讨论
        6.4 小结
    第七章 山羊同期发情处理与胚胎移植技术研究
        7.1 材料与方法
        7.1.1 试验羊
        7.1.2 试验设计和处理方法
        7.1.3 处理受体发情观察
        7.1.4 受体母羊胚胎移植及其妊娠检查
        7.1.5 数据分析
        7.2 结果分析
        7.2.1 试验一、山羊胚胎移植受体不同同期发情处理方法研究结果
        7.2.2 试验二、不同孕酮栓诱导山羊胚胎移植受体同期发情比较结果
        7.2.3 试验三、FSH 用于山羊受体同期发情处理研究结果
        7.2.4 试验四、PMSG 用于山羊同情发情处理研究结果
        7.3 讨论
        7.3.1 关于山羊胚胎移植受体不同同期发情处理方法研究
        7.3.2 关于不同孕酮栓诱导山羊胚胎移植受体同期发情比较
        7.3.3 关于FSH 用于山羊受体同期发情处理
        7.3.4 关于PMSG 用于山羊同情发情处理
        7.4 小结
    第八章 速眠新麻醉剂在绵羊和山羊胚胎移植中的应用研究
        8.1 材料与方法
        8.1.1 材料
        8.1.2 试验方法
        8.2 结果
        8.2.1 绵羊麻醉结果
        8.2.2 山羊麻醉结果
        8.3 讨论
        8.3.1 关于绵羊麻醉
        8.3.2 关于山羊麻醉
        8.4 小结
    第九章 波尔山羊供体和受体异地饲养鲜胚移植研究
        9.1 材料和方法
        9.1.1 供体和受体
        9.1.2 供体超数排卵和发情配种
        9.1.3 受体同期发情处理
        9.1.4 供体采集胚胎和胚胎检查
        9.1.5 试验设计
        9.1.6 数据处理
        9.2 试验结果
        9.2.1 试验一、运输供体进行胚胎移植
        9.2.2 试验二. 胚胎运输后移植
        9.2.3 试验三. 受体运输移植胚胎
        9.3 讨论和结论
        9.4 小结
    第十章 山、绵羊规模化胚胎移植的组织管理及效益评估
        10.1 山、绵羊规模化胚胎移植组织管理模式研究
        10.1.1 山、绵羊MOET 规模化、商业化生产运行模式
        10.1.2 山羊和绵羊规模化MOET 实施推广受体组织形式
        10.1.3 讨论和建议
        10.2 山、绵羊胚胎移植的成本分析及效益评估
        10.2.1 山、绵羊胚胎移植的成本分析
        10.2.2 山、绵羊MOET 效益分析
        10.2.3 结果分析和讨论
结论
创新之处和进一步研究的课题
参考文献
附录
缩略词
致谢
作者简介

(10)牛IVF胚胎培养与冷冻方法优化(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
前言
第一章 文献综述
    1.1 牛卵母细胞体外受精研究进展
        1.1.1 概况
        1.1.2 与体细胞共培养的研究进展
        1.1.3 胚胎培养中添加卵泡液的研究进展
        1.1.4 牛胚胎体外培养方法研究进展
    1.2 卵母细胞及胚胎冷冻方法研究进展
        1.2.1 发展概况
        1.2.2 冷冻原理
        1.2.3 冷冻保存的方法
第二章 输卵管和颗粒细胞单层对牛体外受精胚胎发育的影响
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 颗粒细胞对牛IVF 胚胎发育的影响
        2.2.2 输卵管和颗粒细胞单层对牛IVF 胚胎发育的影响
        2.2.3 培养微滴大小对IVF 胚胎发育的影响
    2.3 讨论
        2.3.1 颗粒细胞对牛IVF 胚胎发育的影响
        2.3.2 输卵管上皮细胞单层对牛IVF 胚胎发育的影响
        2.3.3 培养微滴大小对IVF 胚胎发育的影响
    2.4 结论
第三章 卵泡及卵泡液对牛卵母细胞体外受精后发育的影响
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 实验方法
        3.1.3 实验设计
        3.1.4 统计分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 卵泡大小对卵母细胞IVM、IVF、IVC 后发育潜力的影响
        3.2.2 牛卵泡液(BFF)对卵母细胞IVM、IVF、IVC 后发育潜力的影响
        3.2.3 BFF 浓度对牛卵母细胞IVM、IVF、IVC 后发育潜力的影响
    3.3 讨论
        3.3.1 卵泡大小对卵母细胞IVM、IVF、IVC 后发育潜力的影响
        3.3.2 牛卵泡液(BFF)对卵母细胞IVM、IVF、IVC 后发育潜力的影响
        3.3.3 BFF 浓度对牛卵母细胞IVM、IVF、IVC 后发育潜力的影响
    3.4 结论
第四章 改进V 形孔培养法对牛胚胎体外生产效果的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 实验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 不同培养法对牛IVF 胚胎发育的影响
        4.2.2 不同培养方法对囊胚总细胞数的影响
        4.2.3 不同培养方法对囊胚孵化率的影响
    4.3 讨论
        4.3.1 m WOW 法可以用于单个卵母细胞或胚胎的培养
        4.3.2 不同培养法对IVF 胚胎囊胚总细胞数及囊胚发育率的影响
        4.3.3 m WOW 法改进IVF 胚胎质量和发育率的原因
    4.4 结论
第五章 牛未成熟卵母细胞冷冻方法研究
    5.1 材料与方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
        5.1.3 统计分析
    5.2 结果与分析
        5.2.1 不同玻璃化冷冻液对牛COCs 的毒性实验
        5.2.2 不同玻璃化冷冻液对牛COCs 体外受精后发育能力的影响
        5.2.3 不同冷冻方法对牛COCs 体外受精后发育能力的影响
    5.3 讨论
        5.3.1 不同浓度玻璃化冷冻液对牛COCs 的毒性
        5.3.2 不同浓度玻璃化冷冻液对牛COCs 体外受精后发育能力的影响
        5.3.3 OPS 法比细管法更适于牛未成熟卵母细胞的冷冻
        5.3.4 虽然牛GV 期卵母细胞的冷冻效率很低,但仍值得做进一步尝试
    5.4 结论
第六章 封闭式拉长细管法冷冻牛 IVF 胚胎研究
    6.1 材料与方法
        6.1.1 材料
        6.1.2 方法
    6.2 结果与分析
        6.2.1 实验 1:三种不同冷冻方法对牛体外生产胚胎存活力的影响
        6.2.2 实验 2:三种不同冷冻方法对牛体内获得胚胎存活力的影响
    6.3 讨论
        6.3.1 CPS 法既可以减少液氮污染,又保留了 OPS 法快速降温的优点
        6.3.2 CPS 法的冷冻速率略低于 OPS 法
        6.3.3 体外生产的牛胚胎更适于采用玻璃化冷冻法
    6.4 结论
第七章 结论
参考文献
附录
缩略语
致谢
作者简介

四、制约我国牛胚胎工程产业化进程的主要问题及解决措施(论文参考文献)

  • [1]奶牛种公牛培育及性别控制冷冻精液生产效率影响因素的研究[D]. 孙伟. 内蒙古大学, 2021(10)
  • [2]延边黄牛OPU胚胎程序化冷冻保存的研究[D]. 史佳斌. 延边大学, 2020(05)
  • [3]动物胚胎移植技术发展概况及存在问题[J]. 薛仰全. 现代畜牧兽医, 2013(09)
  • [4]对农区推广牛胚胎移植技术的几点认识[J]. 薛仰全,孙俊峰,倪兴军. 当代畜牧, 2013(24)
  • [5]云南ZK种业集团公司发展战略研究[D]. 王姝瑭. 云南大学, 2012(06)
  • [6]转基因克隆牛胚胎的玻璃化冷冻[D]. 许文兵. 西北农林科技大学, 2012(01)
  • [7]土地制度变迁视野下的哈萨克牧区社会 ——以新疆新源县为例[D]. 刘鑫渝. 吉林大学, 2011(08)
  • [8]提高德系西门塔尔牛胚胎移植供体和受体利用率的研究[D]. 胡高博. 石河子大学, 2010(02)
  • [9]山羊和绵羊超数排卵及规模化胚胎移植技术研究[D]. 权富生. 西北农林科技大学, 2010(10)
  • [10]牛IVF胚胎培养与冷冻方法优化[D]. 禹学礼. 西北农林科技大学, 2010(10)

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制约我国牛胚胎工程产业化进程的主要问题及对策
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