亚细胞学论文-丁晓东

亚细胞学论文-丁晓东

导读:本文包含了亚细胞学论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:APR3,溶酶体全膜蛋白,亚细胞定位,细胞凋亡

亚细胞学论文文献综述

丁晓东[1](2014)在《APR3蛋白的亚细胞学定位及其在细胞凋亡和自噬中的作用》一文中研究指出目的:明确凋亡相关蛋白3(apoptosis related protein 3,APR3)的亚细胞学定位,并探讨其在细胞凋亡和自噬中的作用。方法:采用生物信息学方法对APR3蛋白的信号肽、跨膜区、糖基化情况进行预测,并采用Real-time PCR和Western blot检测APR3在小鼠各器官组织及多种细胞株中的表达。利用Percoll法蔗糖密度梯度离心技术获得小鼠肝脏组织溶酶体组份,并进行Western blot分析,检测APR3蛋白与溶酶体膜标记蛋白LAMP1在各亚细胞组份及溶酶体中的丰度;采用免疫荧光共聚焦方法探讨APR3与LAMP1或溶酶体示踪剂Lyso-Tracker Red共同定位情况,以及构建的APR3蛋白真核表达载体(pFUGW-APR3)表达的外源性APR3蛋白的亚细胞定位特征。APR3表达载体(pFUGW-APR3)和沉默载体(pLL3.7-APR3)转染NIH 3T3细胞,采用CCK-8和xCELLigence活细胞计数法、碘化丙啶染色细胞流式细胞术等,检测APR3对细胞增殖活力、细胞周期、细胞溶酶体膜通透性、溶酶体腔pH、溶酶体腔多种酸性水解酶活性(如组织蛋白酶、酸性磷酸酶、酸性脂酶和β-半乳糖苷酶等)等的影响;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用透射电镜技术检测细胞形态的变化;采用Western blot法检测APR3对凋亡相关蛋白BAX、BAD、BCL-2和cleaved caspase 3表达的影响,以及自噬相关标记蛋白Beclin1和Map1LC3B表达的影响;利用小剂量Rapamycin刺激后,观察APR3蛋白对phos-mTOR和p62蛋白表达的影响。结果:生物信息学预测结果显示APR3是一个含有信号肽、单重跨膜的糖基化蛋白,Real-time PCR和Western blot检测发现其在多种组织器官和细胞株中均有表达,其中在小鼠脾脏、肾脏、肝脏、肺、脂肪组织和部分肿瘤细胞株中具有相对较高的表达。对亚细胞器组份的Western blot检测发现APR3蛋白与LAMP1蛋白表达具有高度的重迭,免疫荧光双染色结果也显示APR3和LAMP1具有相同的细胞学定位特征,并且与溶酶体示踪剂Lyso-Tracker Red具有相同的细胞器定位;NIH 3T3细胞转染外源表达质粒后免疫荧光染色显示外源性APR3与Lyso-Tracker Red具有相同的细胞器定位,并且出现部分定位失真现象,即在细胞膜中亦出现表达。NIH 3T3细胞株中外源性APR3蛋白过表达降低细胞的增殖活力,细胞出现细胞周期阻滞,阻滞于G1/S期,同时伴细胞周期蛋白cyclin D1表达下降,细胞凋亡促进因子BAX、BAD和cleaved caspase 3表达升高,凋亡抑制因子BCL-2表达下调,自噬相关标记蛋白Beclin-1和Map1LC3B表达增加;外源性APR3蛋白过表达还使细胞溶酶体膜通透性增加,溶酶体腔pH降低,溶酶体腔组织蛋白酶B、酸性磷酸酶、酸性脂酶和β-半乳糖苷酶活性增加;与此相反,APR3基因沉默则使溶酶体膜通透性显着下降,溶酶体腔pH升高,但不影响溶酶体腔相关酶活性;小剂量Rapamycin使APR3过表达细胞凋亡和自噬相关标记蛋白的表达发生进一步变化(BAX升高、BCL-2下降、Beclin 1和Map1LC3B表达增加),伴随着Phos-mTOR和p62蛋白表达的进一步下降。结论:APR3蛋白是一个定位于溶酶体膜的全膜蛋白;APR3蛋白过表达导致细胞增殖活力下降,cyclin D1表达下降和细胞周期阻滞(G1/S期),细胞凋亡与自噬增多,并对Rapamycin的敏感性增加。(本文来源于《上海交通大学》期刊2014-04-30)

郑易之,赵耕春,高扬,佟德娟,张晓萍[2](1996)在《发育大豆子叶细胞中酸性磷酸酶的亚细胞学定位》一文中研究指出本实验采用电镜细胞化学技术,观察了酸性磷酸酶在发育中大豆子叶细胞内的亚细胞学分布。酸性磷酸酶除分布在细胞核内的部分染色质上,内质网膜上,质体胞质小泡和胞质中,主要积累于蛋白体内。酸性磷酸酶在不同蛋白体内分布有所不同:1)在一部分蛋白体中,酸性磷酸酶均匀散布于蛋白质基质上;2)在另一部分蛋白体内,酸性磷酸酶成簇沉积于其中;3)还有一部分蛋白体,其中央为致密区,边缘为疏松区,酶在边缘疏松区的含量明显高于中央致密区中酶的量。(本文来源于《大豆科学》期刊1996年02期)

刘玉兰,李定国,陆汉明,蒋祖明,徐芹芳[3](1996)在《钙拮抗剂治疗肝纤维化的亚细胞学研究》一文中研究指出目的 从亚细胞水平评价钙拮抗剂(Ca-A)抗鼠肝纤维化的作用。 方法 用40%CCl_4 0.5ml/只,SC,1次/3d,共15次,诱发Wistar大鼠肝纤维化。用不同剂量的4种Ca-A汉防已甲素(Tet)、维拉帕米(Ver)、硝苯啶(Nif)及脑益嗪(Cin)分别进行早、晚期治疗。分离制备线粒体及其内膜,检测单胺氧化酶(MAO)、N-乙酰β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活性和线粒体内膜表层及脂双层中心处的流动性。 结果 小剂量Tet能明显降低早期和晚期MAO及NAG活性,并增加线粒体内膜表层及脂双层中心处的流动性,与CCl_4造型组比较差异显着(P<0.05-0.01)。其它3种Ca-A的效果不尽一致。 结论 小剂量Tet具有良好的抗肝纤维化作用。(本文来源于《新消化病学杂志》期刊1996年01期)

J.B.Gomez,G.F.J.Moir,吴继林,郝秉中[4](1981)在《巴西橡胶乳管的亚细胞学》一文中研究指出序言本专题论文评述一些有关橡胶树乳管的研究,这些研究证明胶乳是活的原生质,并详细地揭示了它的复杂的超微结构。本文不仅评述马来西亚橡胶研究和发展局资助的实验室的成就,也论述在这方面作出了主要贡献的其它机构的研究。然而,马来西亚的橡胶研究机构在这一领域进行了大量而有成效的工作。使用电子显微镜研究橡胶树乳管发轫(本文来源于《热带作物译丛》期刊1981年01期)

亚细胞学论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本实验采用电镜细胞化学技术,观察了酸性磷酸酶在发育中大豆子叶细胞内的亚细胞学分布。酸性磷酸酶除分布在细胞核内的部分染色质上,内质网膜上,质体胞质小泡和胞质中,主要积累于蛋白体内。酸性磷酸酶在不同蛋白体内分布有所不同:1)在一部分蛋白体中,酸性磷酸酶均匀散布于蛋白质基质上;2)在另一部分蛋白体内,酸性磷酸酶成簇沉积于其中;3)还有一部分蛋白体,其中央为致密区,边缘为疏松区,酶在边缘疏松区的含量明显高于中央致密区中酶的量。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

亚细胞学论文参考文献

[1].丁晓东.APR3蛋白的亚细胞学定位及其在细胞凋亡和自噬中的作用[D].上海交通大学.2014

[2].郑易之,赵耕春,高扬,佟德娟,张晓萍.发育大豆子叶细胞中酸性磷酸酶的亚细胞学定位[J].大豆科学.1996

[3].刘玉兰,李定国,陆汉明,蒋祖明,徐芹芳.钙拮抗剂治疗肝纤维化的亚细胞学研究[J].新消化病学杂志.1996

[4].J.B.Gomez,G.F.J.Moir,吴继林,郝秉中.巴西橡胶乳管的亚细胞学[J].热带作物译丛.1981

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