谢莹:Lg-Flo1蛋白N端的诱导表达及活性研究论文

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本文主要研究内容

作者谢莹,李晓敏,蔡国林,陆健(2019)在《Lg-Flo1蛋白N端的诱导表达及活性研究》一文中研究指出:研究了Lg-Flo1蛋白N端的诱导表达条件及与甘露糖的结合活性。将构建的巴氏酵母Lg-FLO1基因N端序列的重组表达载体p ETFL1进行双酶切验证,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过菌落PCR鉴定阳性转化子,并进行诱导表达,利用SDS-PAGE检测不同诱导条件对目的蛋白N-Lg-Flo1表达的影响,并对目的蛋白进行变性溶解、纯化、复性及活性测定。结果表明,酶切证实重组表达载体含有N-Lg-FLO1基因片段;在LB培养基中的表达量高于TB培养基;和IPTG相比,乳糖诱导同样可以表达含量较高的目的蛋白且成本较低。以乳糖作为诱导剂,终质量浓度为0. 2 g/L,诱导温度37℃,诱导6 h,目的蛋白的表达量均高于30%;荧光光谱分析表明,复性后的N-Lg-Flo1蛋白具有与甘露糖结合的活性。该研究为大规模生产絮凝蛋白并以此为原料制备糖的特异性吸附剂奠定了基础。

Abstract

yan jiu le Lg-Flo1dan bai Nduan de you dao biao da tiao jian ji yu gan lou tang de jie ge huo xing 。jiang gou jian de ba shi jiao mu Lg-FLO1ji yin Nduan xu lie de chong zu biao da zai ti p ETFL1jin hang shuang mei qie yan zheng ,zhuai hua da chang gan jun BL21(DE3),tong guo jun la PCRjian ding yang xing zhuai hua zi ,bing jin hang you dao biao da ,li yong SDS-PAGEjian ce bu tong you dao tiao jian dui mu de dan bai N-Lg-Flo1biao da de ying xiang ,bing dui mu de dan bai jin hang bian xing rong jie 、chun hua 、fu xing ji huo xing ce ding 。jie guo biao ming ,mei qie zheng shi chong zu biao da zai ti han you N-Lg-FLO1ji yin pian duan ;zai LBpei yang ji zhong de biao da liang gao yu TBpei yang ji ;he IPTGxiang bi ,ru tang you dao tong yang ke yi biao da han liang jiao gao de mu de dan bai ju cheng ben jiao di 。yi ru tang zuo wei you dao ji ,zhong zhi liang nong du wei 0. 2 g/L,you dao wen du 37℃,you dao 6 h,mu de dan bai de biao da liang jun gao yu 30%;ying guang guang pu fen xi biao ming ,fu xing hou de N-Lg-Flo1dan bai ju you yu gan lou tang jie ge de huo xing 。gai yan jiu wei da gui mo sheng chan xu ning dan bai bing yi ci wei yuan liao zhi bei tang de te yi xing xi fu ji dian ding le ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自食品与发酵工业的谢莹,李晓敏,蔡国林,陆健,发表于刊物食品与发酵工业2019年18期论文,是一篇关于蛋白论文,诱导表达论文,乳糖论文,甘露糖结合论文,絮凝论文,食品与发酵工业2019年18期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自食品与发酵工业2019年18期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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