导读:本文包含了假鳃鳉论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:衰老相关的分泌表型,老化,白藜芦醇,贡氏假鳃鳉
假鳃鳉论文文献综述
刘珊[1]（2018）在《白藜芦醇通过SIRT1/NF-κB途径抑制贡氏假鳃鳉肠道衰老相关的分泌表型》一文中研究指出随着动物年龄的增长,衰老细胞在各种组织中积累,分泌一系列炎症细胞因子、趋化因子、生长因子和蛋白酶,称为衰老相关的分泌表型(senescence associated secretory phenotype),简称SASP。衰老细胞还发生了细胞周期阻滞,增殖潜力、衰老相关的?-半乳糖苷酶活性不可逆的丢失。许多SASP的组分会影响周围细胞和它们的微环境,SASP在细胞衰老、个体老化和衰老相关的疾病之间也许有作用。白藜芦醇,一种SIRT1的激活剂,具有抗衰老、抗炎症、抗氧化、抗自由基等多种药理学作用。贡氏假鳃鳉是一种生长在东非的硬骨鱼,具有寿命较短、繁殖速度快等优点,已经成为一种新兴的研究衰老的动物模型。我们实验室之前的研究显示白藜芦醇饲喂后显着延长了贡氏假鳃鳉的寿命~([1,2])。以前的研究发现NF-?B是SASP的重要调节者,RelA/p65是NF-?B的亚基,I?B?是NF-?B的抑制蛋白,I?B?磷酸化后激活NF-κB。有研究表明,SIRT1通过去乙酰化RelA/p65的K310位点来抑制NF-κB的转录~([3])。本实验利用一年生的贡氏假鳃鳉作为研究对象,总共144尾鱼,当鱼饲养至性成熟(4月龄)时,随机分成两组,对照组和处理组各72尾:实验组喂食添加白藜芦醇的食物(200?g/g食物),对照组喂食不添加白藜芦醇的食物,待鱼长到6、9和12月龄时冰上处死取材。在此叁个不同的年龄阶段,为了检测贡氏假鳃鳉肠道的老化情况,我们对SA-?-gal的活性进行了检测。为了探究老化对贡氏假鳃鳉肠道SASP的影响以及白藜芦醇对SASP抑制作用的具体机制,我们分别使用了ELISA、qPCR、免疫组化、免疫印记、免疫沉淀和免疫共沉淀等方法进行检测。实验结果显示:1.随贡氏假鳃鳉的衰老,肠道的?-半乳糖苷酶活性呈现上升的趋势,而白藜芦醇饲喂后降低了?-半乳糖苷酶的活性。2.为了探究老化以及白藜芦醇对贡氏假鳃鳉肠道SASP的影响,我们用qPCR、ELISA的方法检测了SASP相关分泌因子的变化,发现随鱼的衰老,肠道中促炎细胞因子IL-8和TNF?的水平逐渐增加,抗炎细胞因子IL-10的水平逐渐减少,而白藜芦醇饲喂后显着逆转了这些细胞因子变化。3.我们用qPCR和免疫组化的方法检测了贡氏假鳃鳉肠道中SIRT1的水平,发现随鱼的衰老,肠道中SIRT1的mRNA和蛋白表达水平都逐渐下降,而白藜芦醇饲喂后SIRT1的表达显着上升。4.我们用qPCR的方法检测了贡氏假鳃鳉肠道中NF-?B的表达,结果显示,随鱼的衰老,NF-?B的mRNA表达水平显着上升,而白藜芦醇饲喂后显着降低了NF-?B的表达。用9和12月龄的鱼进行免疫印迹实验,发现随鱼的衰老,RelA/p65和p-I?B?的蛋白水平显着增加,而白藜芦醇饲喂后显着减少了RelA/p65和p-I?B?的表达。我们提取9月龄鱼肠道的蛋白,沉淀等量的RelA/p65蛋白,用Ac-Lys抗体检测RelA/p65的乙酰化程度,发现白藜芦醇减少了RelA/p65的乙酰化水平。免疫印迹检测SIRT1的表达,发现白藜芦醇增加了SIRT1和RelA/p65复合物的形成,进而抑制了NF-?B的活性,最终抑制了SASP。5.用免疫组化的方法检测细胞增殖标志物PCNA和用免疫印迹的方法检测干细胞标志物LGR5,发现随鱼的衰老,肠道上皮细胞和肠道干细胞的数量都显着下降,而饲喂白藜芦醇后显着逆转了上述情况。总之,白藜芦醇激活SIRT1,通过减少p-I?B?和Ac-RelA/p65,进而抑制了NF-?B的活性,降低了SASP相关的促炎细胞因子IL-8和TNF?的水平,增加了抗炎细胞因子IL-10的水平,从而抑制了SASP。白藜芦醇也增加了肠道上皮细胞和肠道干细胞的增殖。最终白藜芦醇逆转了衰老相关的?-半乳糖苷酶活性随衰老进程呈现上升的趋势,延缓了肠道的衰老,延长了贡氏假鳃鳉寿命。(本文来源于《山东师范大学》期刊2018-06-01）
刘亭亭[2]（2017）在《白藜芦醇通过SIRT1介导的翻译后修饰抑制假鳃鳉肝脏肿瘤发生的机理》一文中研究指出肝癌是世界上致死率较高的疾病之一。肝癌的发生是一个多分子介导的过程。现阶段,多项研究致力于探究肝癌发生的分子机理。除了体外不同的癌细胞系之外,在体内水平上常用来研究肝脏肿瘤发生的动物模型有大鼠、小鼠和斑马鱼等等。科研工作者在药物诱导的大鼠、异种移植癌细胞的裸鼠及转基因的小鼠和斑马鱼中探究肝癌发生的分子机理。然而,由于这些动物寿命较长,利用它们进行自发肿瘤方面的研究还比较少。贡氏假鳃鳉(Nothobranchius guentheri)的平均寿命为12个月,是一种常用来研究衰老的短寿命的脊椎动物模型。我们之前的研究揭示贡氏假鳃鳉肌肉中氧化损伤的水平和皮肤中β半乳糖苷酶的活性随老化逐渐升高。近些年来在贡氏、弗氏和高氏假鳃鳉中的研究表明假鳃鳉正在成为一种研究自发肿瘤的动物模型。但是这些研究只是探究了不同组织器官在不同发育时期的肿瘤发生率,具体的分子机理尚不清楚。因此本文将利用贡氏假鳃鳉探究肝脏自发肿瘤发生的分子机理。白藜芦醇是一种存在于多种植物中的多酚类化合物。在不同细胞和生物体中,白藜芦醇均可发挥抗氧化、抗炎症、抗衰老和抗肿瘤的作用。SIRT1是一种组蛋白依赖的去乙酰化酶,作为SIRT1的活化剂,白藜芦醇可通过SIRT1发挥其抗氧化、抗衰老和抗肿瘤的作用。然而,有关白藜芦醇抗癌症的研究主要是在体外癌细胞、药物诱导癌症的大鼠、异种移植癌细胞的裸鼠或转基因的动物模型中进行的,利用它对自发肿瘤发生机理的研究还比较少见。因此,本文中利用一年生的贡氏假鳃鳉作为实验对象,总共362条鱼(对照组和处理组各181条鱼),用来探究白藜芦醇对老化诱导的肝脏自发肿瘤的影响及其分子机理。由于贡氏假鳃鳉的平均寿命是12个月,这里我们分别选取6、9和12月龄的鱼代表青年、中年和老年。待贡氏假鳃鳉生长至性成熟时,我们随机地将其分为白藜芦醇处理组和对照组。实验组的鱼从4月龄开始喂食白藜芦醇,每天每条鱼约进食25μg的白藜芦醇,直至这些鱼生长至6、9和12月龄。在此叁个不同的年龄阶段,我们分别通过实时定量PCR、免疫印迹、免疫组化和免疫共沉淀等方法检测各组鱼的相对肝重、血清肝脏标志酶的活性、肝脏肿瘤的发生率、自发肿瘤的大小和恶化程度、细胞增殖和细胞凋亡以及SIRT1、PCNA、K-Ras、PI3K、p-AKT、Fox O1、Fox O3a、Ac-Fox O1、p-Fox O3a、DLC1、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3/7/9等蛋白的表达。我们的研究结果表明:1.白藜芦醇长期处理降低了相对肝重和血清肝脏标志酶的活性。与6月龄相比,贡氏假鳃鳉的肝重和相对肝重在9和12月龄显着升高;白藜芦醇在这两个阶段降低了肝重和相对肝重;白藜芦醇对两组鱼的体重并没有显着性的影响。与6月龄相比,9和12月龄血清中AST和ALT的活性显着升高,白藜芦醇缓解了这两种肝脏血清标志酶随老化的升高趋势。2.白藜芦醇降低了肝脏自发肿瘤的形成和生长。6月龄的贡氏假鳃鳉肝脏组织结构正常,并未出现自发肿瘤。贡氏假鳃鳉生长至9月龄时出现自发肿瘤。通过对30条9月龄和20条12月龄贡氏假鳃鳉肝脏组织进行切片,我们发现随着老化的进程,自发肿瘤的发生率逐渐升高,9月龄对照组的肿瘤发生率为86.67%,12月龄时接近100%;白藜芦醇处理后显着降低了肿瘤发生,9和12月龄肝脏中肿瘤的发生率分别降至60%和80%。白藜芦醇还抑制了自发肿瘤的生长,减小了肿瘤的体积,延缓了肿瘤的恶化程度。在肝脏自发肿瘤中,突变p53染色呈阳性,这表明贡氏假鳃鳉肝脏中的这些肿瘤结节为恶性肿瘤;白藜芦醇长期处理降低了突变p53的蛋白水平。3.白藜芦醇提高了肝脏中SIRT1的表达。利用叁个不同发育阶段的贡氏假鳃鳉,我们首次发现,肝脏中SIRT1的表达在老化的过程中逐渐下降。白藜芦醇处理会缓解年龄诱导的SIRT1的下降趋势,在6、9和12月龄时都显着提高了SIRT1的表达水平。对照组鱼的肝脏部分肿瘤结节中SIRT1表达水平下降;而白藜芦醇处理后,肿瘤结节中SIRT1的表达有所提升。这表明在贡氏假鳃鳉中SIRT1可以作为一种抑癌因子。4.白藜芦醇通过SIRT1介导的翻译后修饰抑制K-Ras/PI3K/AKT途径降低肝脏肿瘤中的细胞增殖。在9和12月龄时,通过对增殖标志PCNA的检测,我们发现白藜芦醇抑制了贡氏假鳃鳉肝脏自发肿瘤中的细胞增殖。在此两个阶段,白藜芦醇还降低了K-Ras、PI3K和p-AKT的蛋白水平。贡氏假鳃鳉肝脏中两种内源性蛋白SIRT1和K-Ras相互作用,形成蛋白复合体。在12月龄时,白藜芦醇还通过SIRT1去乙酰化酶降低肝脏中K-Ras的乙酰化水平。因此我们推测,白藜芦醇是通过上调SIRT1的表达来降低K-Ras的乙酰化水平,下调K-Ras/PI3K/AKT信号通路,进而抑制肝脏自发肿瘤中的细胞增殖。白藜芦醇通过SIRT1及其介导的翻译后修饰抑制细胞增殖来降低自发肿瘤的形成和生长。5.白藜芦醇通过SIRT1调节Fox Os和DLC1介导的信号通路促进肝脏自发肿瘤中的细胞凋亡。在6月龄时,两组鱼的肝细胞基本不发生凋亡。在9和12月龄时,对照组细胞凋亡比率分别是0.216%和1.497%,处理组凋亡细胞的比率分别是1.630%和3.965%;在9和12月龄时,白藜芦醇显着提高了肝脏组织中细胞凋亡的比率。在12月龄时,白藜芦醇处理组肝脏细胞的凋亡主要发生在自发肿瘤处;而在对照组中,肿瘤部位的肝细胞并未发生细胞凋亡。在12月龄时,白藜芦醇降低了贡氏假鳃鳉肝脏中Fox O1和Fox O3a的表达,也降低了Fox Os的翻译后修饰(Ac-Fox O1和p-Fox O3a)水平。在9和12月龄时,白藜芦醇显着提高了DLC1的表达。在贡氏假鳃鳉肝脏中,内源性的DLC1与SIRT1相互结合形成蛋白复合体,而且白藜芦醇促进这两种蛋白的结合。在9月龄时,白藜芦醇降低了DLC1的磷酸化水平。在12月龄时,白藜芦醇显着上调了促凋亡蛋白(Bax和cleaved caspase-3,7,9)的表达,下调了抗凋亡蛋白Bcl-2的水平。我们推测在贡氏假鳃鳉中,白藜芦醇可通过SIRT1介导的翻译后修饰调节Ac-Fox O1和p-Fox O3a的表达水平,通过提高DLC1的表达及其与SIRT1的相互作用,上调促凋亡蛋白的水平,进而诱导肝脏自发肿瘤中的细胞凋亡。总之,在6月龄时贡氏假鳃鳉的肝脏中并未出现自发肿瘤,而我们在9月龄的贡氏假鳃鳉肝脏中发现了自发肿瘤,且此发生率在12月龄接近100%。贡氏假鳃鳉中年龄依赖的肿瘤发生率的升高趋势,可能是由于SIRT1表达随年龄下降导致的。白藜芦醇长期处理提高了SIRT1的表达并降低了肝脏中自发肿瘤生长。白藜芦醇通过SIRT1介导的翻译后修饰调节K-Ras/PI3K/AKT信号途径进而抑制肝脏自发肿瘤的增殖。白藜芦醇通过SIRT1调节Fox Os的翻译后修饰,上调SIRT1与DLC1的相互结合,改变Bcl-2家族蛋白的表达水平,进而在贡氏假鳃鳉的肝脏自发肿瘤中促进细胞凋亡。在贡氏假鳃鳉中,白藜芦醇长期喂食处理通过SIRT1介导的翻译后修饰抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡来降低肝脏中自发肿瘤的形成和生长。我们的这些结果表明SIRT1在抑制自发肿瘤形成和发展过程中的重要作用,也证实了一年生的贡氏假鳃鳉的确是一种可用于自发肿瘤相关研究的良好的脊椎动物模型以及白藜芦醇可以作为一种潜在的天然药物来治疗肝脏自发肿瘤。(本文来源于《山东师范大学》期刊2017-05-16）
李凤林[3]（2017）在《二甲双胍抵抗线粒体氧化损伤延缓贡氏假鳃鳉衰老的机理研究》一文中研究指出衰老是一个复杂的生理过程,衰老过程中常常会伴随机体功能的下降,并发生许多衰老相关的疾病。随着对衰老研究的深入,发现了一些衰老的生物标记,比如基因的不稳定、线粒体功能紊乱以及氧化应激等。根据氧化应激理论,活性氧(ROS)水平的升高会对一些生物大分子以及线粒体造成损伤,从而引起衰老。假鳃鳉(Nothobranchius)是一种生长在东非的硬骨鱼,具有寿命短、繁殖速度快等优点,正在成为一种衰老研究的新兴动物模型。二甲双胍(Metformin)是从山羊豆中发现的胍类物质衍生而来,是目前使用最广的Ⅱ型糖尿病的治疗药物,在很多模式动物中具有延缓衰老延长寿命的作用,能够调节代谢以及线粒体的功能。在细胞中已经证实二甲双胍能够激活AMPK和SIRT1,而AMPK能够通过磷酸化PGC-1α与FoxO3a来发挥促进线粒体生物发生、下调ROS水平并维持氧化还原平衡的作用;SIRT1是一种去乙酰化酶,与衰老相关,能够去乙酰化PGC-1α与FoxO3a。我们实验室先前的研究发现二甲双胍能够延长贡氏假鳃鳉(N.guentheri)的寿命并减少肝脏脂褐素的累积。因此,本论文利用贡氏假鳃鳉来进一步研究其中的机理。我们通过对肝脏组织结构和超微结构、肝脏线粒体膜电位、氧化应激指标以及相关蛋白表达的检测,来探究二甲双胍是否通过抵抗氧化损伤来延缓贡氏假鳃鳉的衰老。在本文中,待贡氏假鳃鳉生长至3月龄时,将130条鱼随机分为两组:实验组喂食添加二甲双胍(2mg/g)的食物,对照组喂食不添加二甲双胍的食物,等到6、9和12月龄(青年、中年和老年)时冰上处死取材,进行实验。我们的实验结果如下:1.与6月龄相比,9月龄贡氏假鳃鳉肝脏组织结构出现了肝细胞形态改变、细胞板排列紊乱以及肝血窦减少的现象,等到12月龄,则出现细胞核变大、炎性细胞浸润和肝细胞空泡化的现象,二甲双胍处理减缓了贡氏假鳃鳉肝脏组织结构随年龄增加的衰退;9月龄贡氏假鳃鳉肝脏超微结构出现了线粒体数量减少,脂滴增加等现象,二甲双胍处理则改善了9月龄肝脏超微结构。2.随着衰老的进程,贡氏假鳃鳉肝脏线粒体膜电位显着下降,体内ROS水平、蛋白氧化和脂质过氧化程度明显升高;经过二甲双胍长期饲喂,肝脏线粒体膜电位显着升高,氧化应激程度降低。3.对12月龄贡氏假鳃鳉肝脏中AMPK、SIRT1、PGC-1α和Fox O3a蛋白表达的免疫组化染色分析,结果显示:二甲双胍处理上调了老年贡氏假鳃鳉肝脏中氧化应激相关蛋白的表达。总之,二甲双胍减缓了贡氏假鳃鳉的肝脏结构随年龄增加的衰退,上调了肝脏线粒体膜电位,降低了体内的氧化应激水平,同时上调氧化应激相关蛋白的表达。结合之前我们实验室的实验结果,我们推测二甲双胍可能是通过对AMPK、SIRT1、PGC-1α和Fox O3a等蛋白表达的调节来抵抗线粒体氧化损伤从而延缓贡氏假鳃鳉的衰老。(本文来源于《山东师范大学》期刊2017-05-16）
段楚楚,刘守胜,张士璀,汲广东[4]（2016）在《BPI/LBP,Nramp和IL-8基因在不同月龄以及LPS刺激后贡氏假鳃鳉鱼体中的表达模式》一文中研究指出衰老引起免疫系统退化,但这种影响对不同组织是否相同并不清楚.本研究通过检测抗菌相关基因(包括免疫效应分子BPI/LBP和Nramp以及调控因子IL-8)在不同月龄的一年生贡氏假鳃鳉不同组织中mRNA的表达水平,发现这叁种基因均呈现与月龄和器官组织相关的异质性表达模式.与成龄鱼相比,老龄鱼的肝组织中叁种抗菌基因均有升高.在受到LPS刺激后,在老龄贡氏假鳃鳉的肝脏中抗菌免疫反应较弱,即对老龄鱼肝脏而言,衰老会系统地削弱肝脏的免疫反应能力.(本文来源于《鲁东大学学报(自然科学版)》期刊2016年04期）
周洋[5]（2016）在《贡氏假鳃鳉GDF11基因的克隆、表达和生物信息学分析》一文中研究指出近年来,人口老龄化在发达国家正在逐年加深,甚至在发展中国家如中国等亦如此。老年人的身体素质较差,一些年龄相关的疾病如癌症、老年痴呆症等的发病率会增加。因此,为了实现预防和治疗年龄相关的疾病,达到延迟衰老、延长寿命的目的,关于衰老机制的研究越来越成为当今生命科学关注的热点和面临的主要挑战之一。决定寿命长短的因素是复杂多样,涉及到机体复杂的调控过程。生长分化因子11(GDF11)是TGF-β超家族一员,早先发现它在胚胎肌肉发育和中轴骨骼模式形成中起重要作用。新近,GDF11被鉴定为抗衰老因子,具有返老还童作用。近几年,一年生淡水卵生贡氏假鳃鳉越来越受到衰老研究者的青睐,相对于果蝇、秀丽隐杆线虫等无脊椎动物,在组织解剖学上更可满足脊椎动物研究的需要；而由于其寿命较短,相比小鼠、斑马鱼等多年生脊椎动物,假鳃鳉更适合用于衰老研究。并且本实验室具有饲养贡氏假鳃鳉的实验条件。本文首先成功分离克隆出贡氏假鳃鳉GDF11基因,并对此进行生物信息学分析。分析结果表明,该序列最大开放阅读框为1170bp,编码390个氨基酸。贡氏假鳃鳉GDF11基因具有氨基端的信号肽、中间的TGF-β前肽和羧基端的TGF-β成熟肽。贡氏假鳃鳉GDF11基因与其它脊椎GDF11基因组结构基本一致,并且羧基端的TGF-β成熟肽十分保守。同源分析结果说明,贡氏假鳃鳉GDF11蛋白与其他物种具有较高的相似性,与金头鳉GDF11序列相同率高达97.2%,与其他硬骨鱼物种相同率也很高。贡氏假鳃鳉GDF11与人、鼠、野猪、家兔、密西西比鳄、热带爪蟾相同率分别为71.2%、71.2%、70.4%、71.2%、79.3%、72.9%,相同率较高。接着,我们对GDF11基因在贡氏假鳃鳉中的组织分布和时空表达进行了检测。在6月龄和9月龄贡氏假鳃鳉中,GDF11基因在脑组织中表达量很高,肝组织次之,心脏、鳃、肾、皮肤、肠、性腺和肌肉组织少量表达。6月龄和9月龄的贡氏假鳃鳉GDF11在脑组织和肌肉中的表达量没有显着性差异。6月龄和9月龄的贡氏假鳃鳉GDF11在鳃、肾、肝、肠、心和精巢等组织中的表达量具有极显着性差异,在皮肤、卵巢等组织中表达量具有显着性差异。综上所述,本文研究了贡氏假鳃鳉GDF11基因的克隆、鉴定。通过对GDF11序列、蛋白结构域及叁维结构等方面的分析,与人等哺乳动物GDF11相似,具有较好的保守性。贡氏假鳃鳉GDF11在不同组织的表达分布广泛,在脑组织的表达量最高。贡氏假鳃鳉GDF11在不同时空的表达的研究表明,该基因除在脑组织和肌肉的表达量没有显着性差异外,表达量随着月龄的增长而减少。本实验为基于贡氏假鳃鳉为模型的GDF11抗衰老分子机制探索奠定了基础。(本文来源于《青岛科技大学》期刊2016-06-01）
宋太玉[6]（2016）在《白藜芦醇对贡氏假鳃鳉免疫器官、淋巴细胞及免疫因子增龄性的影响》一文中研究指出通常情况下,人体的免疫力随着年龄的增长而降低。具体表现为:人体对病原微生物的抵抗力下降、对疫苗的应答能力降低、易患各种感染性疾病和自身免疫疾病等。研究增龄过程中免疫力下降的机制,对于提升老年人生活质量,实现健康的老龄化以及减轻老年人带来的社会负担都具有重要意义。在进化过程中,鱼类最早出现的免疫系统与人类类似的免疫系统,已经具备基于T淋巴细胞、B淋巴细胞和IgM抗体的适应性免疫系统。假鳃鳉属(Nothobranchius)是源于非洲大陆的一年生硬骨鱼,具有生命周期短、生长速度快、便于大规模饲养和繁殖的生物学特点,成为了新兴的抗衰老研究的模式生物。基于此,我们利用这种一年生硬骨鱼进行免疫系统增龄性的研究。白藜芦醇(Resveratrol)是一种天然多酚类化合物。已有多项研究证实,白藜芦醇可以提高白虾等多种动物的免疫反应。我们实验室之前的研究表明,长期白藜芦醇处理能够延长贡氏假鳃鳉(Nothobranchius guentheri)寿命,提高抗氧化酶在肝脏中的活性。然而,白藜芦醇对贡氏假鳃鳉增龄过程中免疫系统的影响还不清楚。本文通过对相关指标的检测,探究白藜芦醇对贡氏假鳃鳉增龄过程中免疫系统的影响。在贡氏假鳃鳉3月龄时,将其分为实验组和对照组,实验组鱼开始长期饲喂白藜芦醇,对照组则饲喂不添加白藜芦醇的食物。分别取3、6和9月龄的贡氏假鳃鳉在冰上处死并取材,探究白藜芦醇对贡氏假鳃鳉免疫器官、淋巴细胞以及免疫因子的影响。结果显示:1.随着年龄的增长,贡氏假鳃鳉肾脏指数呈下降的趋势而脾脏指数呈现明显的升高,白藜芦醇处理能够提高肾脏指数、降低脾脏指数。从肾脏组织结构上看,2.5和4月龄肾小管和肾间质中各种细胞排列紧密,造血组织丰富;9月龄和11月龄肾脏中,肾小管和集合小管管壁增厚,管腔变窄,肾间质发生纤维化,造血组织明显减少。从脾脏组织结构上看,2.5和4月龄脾脏结缔组织少,淋巴细胞数量多,造血组织丰富;9月龄和11月龄脾脏中,淋巴细胞大量减少,部分淋巴细胞细胞核明显增大,而结缔组织显着增多,纤维组织丰富。实验组中,长期白藜芦醇处理显着延缓了以上几种变化。2.贡氏假鳃鳉血细胞包含红细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核(巨噬)细胞和血栓细胞,其形态结构与斑马鱼血细胞类似。随着年龄的增长,贡氏假鳃鳉外周血淋巴细胞显着减少,而中性粒细胞和血栓细胞数量变化不明显,长期用白藜芦醇处理能显着提高9月龄贡氏假鳃鳉外周血淋巴细胞数量。3.为了探究白藜芦醇对贡氏假鳃鳉非特异性免疫相关酶活性的影响,我们在生化水平上检测了血清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶以及肾脏中溶菌酶和过氧化氢酶的活性。结果显示,随增龄,四种酶活性均显着降低,而长期白藜芦醇处理能显着提高碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、溶菌酶以及过氧化氢酶的活性。4.为了探究白藜芦醇对贡氏假鳃鳉免疫因子的影响,我们检测了一氧化氮合酶的活性以及一氧化氮和环氧合酶-2水平。结果显示,随增龄,诱导型一氧化氮合酶的活性显着升高,环氧合酶-2的水平也明显上调。长期白藜芦醇处理后显着抑制了并降低了环氧合酶-2水平,但对贡氏假鳃鳉肾脏中总一氧化氮合酶的活性以及一氧化氮水平的影响不明显。总之,白藜芦醇在组织结构上延缓了贡氏假鳃鳉免疫器官的增龄性变化,提高了淋巴细胞数量和非特异性免疫相关酶活性并调节了诱导型一氧化氮合酶的活性和环氧合酶-2的水平。综合以上实验结果,我们推测白藜芦醇能够延缓贡氏假鳃鳉免疫系统增龄性变化。(本文来源于《山东师范大学》期刊2016-04-25）
刘照军[7]（2016）在《贡氏假鳃鳉糖尿病模型的构建及二甲双胍对其器官病理改变的影响》一文中研究指出研究背景:糖尿病的发病率越来越高,且有年轻化的趋势,主要是由于不良的生活习惯,人们摄取大量的高糖高脂饮食,加之生活节奏的加快,缺少锻炼和休息。糖尿病可以分为1型糖尿病和2型糖尿病,其表现都是血糖浓度升高。由于血糖的升高继而导致血管和神经的损害,对肝脏、肾脏、眼等器官都能造成损害。二甲双胍是一种常用的治疗糖尿病的非胰岛素药物,对于胰岛素抗性的2型糖尿病有着很好的疗效,并且具有降低体重的作用。相对于其他治疗糖尿病的药物其副作用较小,很少出现乳酸中毒的现象。贡氏假鳃鳉是一种一年生的热带淡水鱼,主要生活在东非坦桑尼亚,现在世界各地都有养殖,具有生命周期短、繁殖能力强、易于养殖的特点,是一种很好的实验模式生物。建立糖尿病模型对于糖尿病的研究和治疗有着十分重要的意义,而贡氏假鳃鳉可以很容易的诱导出高血糖的糖尿病模型。研究目的:本文通过建立贡氏假鳃鳉的糖尿病模型,以研究二甲双胍对贡氏假鳃鳉糖尿病的作用。实验方法:将32条成年鱼随机分为对照组和实验组,每组16条。实验组用2%的葡萄糖水溶液隔天浸泡一个月后,检测其血糖浓度,确定构建了糖尿病模型。将66条3月龄的贡氏假鳃鳉随机分为3组,分别为对照组、加糖组和加糖加药组,每组有22条(9雄,13雌)。对照组饲养于清水中,喂食普通食物;加糖组隔天饲养在2%的葡萄糖水溶液中,喂食普通食物;加糖加药组饲养条件同加糖组,但是喂食添加了二甲双胍的食物(2 mg/g食物),总共处理1个月。实验结束之后对各组体长体重进行统计;对血液中的葡萄糖、甘油叁酯和胆固醇浓度进行测量;对肝脏中的总SOD和MDA进行检测;观察了肝脏、肾脏切片的组织形态变化;对眼球视网膜内核层INL和内网层IPL的厚度进行统计。实验结果:用2%的葡萄糖水溶液浸泡16条成年鱼一个月后,其血糖浓度明显高于对照组(p<0.01),说明贡氏假鳃鳉糖尿病模型构建成功。66条3月龄的贡氏假鳃鳉随机分为3组,检测其生化指标和受累器官的组织学形态变化,结果显示:相对于对照组,糖尿病模型组血液中的血糖、胆固醇和甘油叁酯明显升高,而喂食二甲双胍的加糖加药组血液中的血糖、胆固醇和甘油叁酯基本恢复到正常水平;糖尿病模型组血液中高密度脂蛋白胆固醇与对照组相比没有明显变化,低密度脂蛋白胆固醇检测值降低,而二甲双胍处理组高密度脂蛋白胆固醇降低,低密度脂蛋白胆固醇检测值降低明显,二甲双胍处理组在葡萄糖、甘油叁酯和胆固醇这3个指标上都表现出向对照组恢复的趋势;肝组织中的SOD活性在糖尿病模型组中显着下降,在二甲双胍处理组则明显增高;MDA在糖尿病模型组中显着增高,加入二甲双胍后则下降;糖尿病模型组视网膜内核层(INL)和内网层(IPL)厚度升高,与对照组相比差异显着,二甲双胍处理后,INL厚度升高,IPL厚度降低,与模型组之间差异显着。肝肾组织切片在糖尿病模型组中发生了显着的病理变化,喂食二甲双胍起到了保护作用。结论:用浸泡法建立了贡氏假鳃鳉的糖尿病模型;相对于对照组,糖尿病模型组的贡氏假鳃鳉血液中血糖、甘油叁酯和胆固醇明显升高,肝脏中SOD活性显着下降,MDA含量显着增高,肝脏和肾脏组织结构出现明显病理变化,视网膜内核层(INL)和内网层(IPL)厚度升高。喂食二甲双胍后,除了没有改善视网膜内核层在糖尿病模型中的增厚,在其他几个指标上都表现出了不同程度的改善作用。(本文来源于《山东师范大学》期刊2016-03-28）
常晴云[8]（2014）在《晚发型低温可以延缓老龄贡氏假鳃鳉的衰老》一文中研究指出当今，人口老龄化（大致指65岁以上人口比例）在世界范围内出现，包括许多发达国家如美国、日本及西欧各国人口老龄化逐年加深，甚至在发展中国家如中国也呈现相同趋势。老年人的身体素质下降，因此自然而然一些年龄相关性疾病的发病率急剧增加，如癌症、老龄痴呆症（Alzheimer disease,AD）、骨质疏松症、白内障、II型糖尿病等。为了实现预防并治愈年龄相关疾病，达到延缓衰老、延长寿命的目的，机体和细胞衰老机制的研究成为当代生命科学领域关注的一个焦点，也是面临的主要挑战之一。寿命的决定因素是多方面的，涉及到复杂的调控过程。近年来，两种不同的阐述衰老机制的学说得到学术界普遍认同。一种指出细胞氧化磷酸化作用的副产物活性氧自由基（ROS）的积累造成细胞内多种生物大分子的损伤而导致细胞衰老，另一种机制指出胰岛素/胰岛素样生长因子1（IGF-1）信号转导通路（IIS）解除机体对食物摄入敏感性的调控，最终引发细胞衰老。通过降低生活环境的温度（TR）来调节衰老进程并延长寿命已经在许多生物中得到证实，如线虫、果蝇和鱼类，但其作用的确切机制却知之甚少。本实验选用一年生鱼类贡氏假鳃鳉这一衰老研究的模式生物，对9月龄（老龄）体格健壮的雄性贡氏假鳃鳉低温(22±1oC)处理一个月，对照组雄性贡氏假鳃鳉于26±1oC处理一个月，每天观察各温度组中贡氏假鳃鳉的生长发育和存活状况并进行相关数据的记录工作，同时研究各温度组贡氏假鳃鳉中衰老标记物积累水平、抗氧化酶活性和衰老相关调控基因的表达变化以揭示低温对贡氏假鳃鳉的衰老的影响。研究结果清楚的证实晚发型低温（由26±1oC降到22±1oC），使得老龄贡氏假鳃鳉的平均寿命和最大寿命分别延长了5.2周和3周。实验结果还表明晚发型低温对老龄贡氏假鳃鳉的衰老进程影响显着，可以明显减少组织衰老标志物如上皮组织中的SA-β-Gal（衰老特异性β-半乳糖苷酶）和肝脏中的LF（脂褐素）的积累，降低骨骼肌中蛋白质氧化作用和脂质过氧化作用。此外，晚发型低温可以增强老龄贡氏假鳃鳉抗氧化酶系如过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性。利用实时定量PCR（Real-time Quantity PCR）技术和蛋白质免疫印迹（Western blot）技术研究晚发型低温对涉及细胞新陈代谢和基因调控以及热休克反应的代表性基因表达量的影响。分析结果表明，晚发型低温可以增强sirt1(沉默信息调节因子2相关酶1)和foxO（叉头盒转录因子O亚家族）表达量。然而，hsp70（热休克蛋白70）和hsf-1（热休克调节因子1）的表达量却与温度没有任何直接的关系。综上得知，晚发型TR是一种简便的非体内介入干预手段，通过抗氧化系统和IIS信号通路的共同作用，可以延缓老龄鱼类的衰老进程，延长其寿命。同时，本实验为ROS衰老机制和IIS衰老机制提供了一定的证据，也为探索延长寿命的基础研究及药物开发提供了一定线索和依据。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2014-06-02）
刘亭亭[9]（2014）在《白藜芦醇对贡氏假鳃鳉活性氧和氧化损伤的影响》一文中研究指出衰老的过程就是生物体生理功能不断退化的过程，在老化的进程中，伴随着多种衰老相关疾病的发生，如骨质疏松、心血管疾病、关节炎、动脉粥样硬化、老年痴呆症与恶性肿瘤等等。在当今社会，随着人们生活质量的逐步提高和医疗卫生条件的不断改善，已经有越来越多的人开始关注怎样延缓衰老和延长寿命。因此，对于衰老相关疾病的预防以及有关抗衰老的研究具有重要的意义。白藜芦醇是一种主要来源于葡萄的天然多酚类化合物。现阶段已经有很多的实验研究证实，白藜芦醇能够延长酵母、线虫、果蝇等多种模式生物的寿命。假鳃鳉（Nothobranchius）是一种一年生的硬骨鱼类，表现出生命周期较短、生长加速、便于大规模饲养和繁殖的生物学特点，并且许多研究还表明贡氏假鳃鳉在行为学和组织学水平上表达衰老相关的的生物标记。所以，假鳃鳉属的鱼类正在成为一种新兴的脊椎动物模型，我们可以利用这种一年生的硬骨鱼进行衰老与抗衰老方面的研究。我们实验室之前的研究表明，白藜芦醇长期处理贡氏假鳃鳉（Nothobranchiusguenther），能够将其平均寿命与最大寿命分别延长19%与28%；Genade等人的实验也证实，白藜芦醇能够在贡氏假鳃鳉中发挥延长寿命的作用。然而，具体的作用机理，现在还不清楚。本文通过对氧化应激相关指标的检测，来探究白藜芦醇是否通过改变氧化应激来延长贡氏假鳃鳉的寿命。贡氏假鳃鳉生长至16周龄时，将其分为实验组和对照组，实验组开始长期喂食添加白藜芦醇的食物，对照组喂食不添加白藜芦醇的食物，直至取材或至实验用鱼自然死亡。观察白藜芦醇对贡氏假鳃鳉衰老进程和寿命的影响，检测氧化应激相关指标的变化，探究白藜芦醇对贡氏假鳃鳉寿命的作用机理。实验结果发现：1.白藜芦醇能够将贡氏假鳃鳉的平均寿命延长17.34%，最大寿命延长17.66%。可能是由于白藜芦醇使用的药物剂量和雌雄个体之间的差别，对不同性别的贡氏假鳃鳉来说，白藜芦醇虽然都能够延长平均寿命和最大寿命，但是它对雄性贡氏假鳃鳉延长寿命的作用更为明显，故我们选择雄性贡氏假鳃鳉作为实验对象用于后续机理的探究。2.为了探究白藜芦醇对贡氏假鳃鳉氧化状态的影响，我们在生化水平上检测了氧化应激相关的指标如活性氧（Reactive oxygen species，ROS）和叁种抗氧化酶。结果表明，随着老化的进程，在6、9和12月龄（分别对应青年、中年和老年）的贡氏假鳃鳉中，ROS水平逐渐升高，而抗氧化酶活性随衰老进程呈现下降趋势；长期饲喂白藜芦醇以后，贡氏假鳃鳉体内的叁种抗氧化酶——过氧化氢酶（catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）的活性显着升高，ROS水平显着下降。3.活性氧水平的改变会影响体内大分子的氧化损伤。对应于6、9和12月龄ROS水平的变化，在生化水平上和组织切片水平上，我们检测了贡氏假鳃鳉中氧化损伤和脂褐素积累的变化，发现随着衰老的进程，体内蛋白氧化、脂质过氧化和脂褐素的积累逐渐升高；白藜芦醇饲喂后显着降低了老化诱导的氧化损伤和脂褐素积累量的升高趋势。表明白藜芦醇处理缓解了贡氏假鳃鳉体内的氧化应激。总之，白藜芦醇延长了贡氏假鳃鳉的寿命，还缓解了氧化应激相关指标的变化。综合这些实验结果，我们推测白藜芦醇可能是通过降低贡氏假鳃鳉的氧化应激来发挥其延长寿命的作用。(本文来源于《山东师范大学》期刊2014-04-03）
齐赫[10]（2013）在《二甲双胍对贡氏假鳃鳉寿命、行为学、代谢及组织学衰老指标的影响》一文中研究指出在现代社会中，癌症、骨质疏松和Ⅱ型糖尿病等衰老相关疾病的发病率在老年个体中日益增加，对社会造成的经济学负担愈来愈重。全世界范围内每天都有数以万计的人死于衰老相关疾病，有数百万的人忍受着衰老带来的体弱和残疾。因此，研究衰老相关进程，预防和治疗衰老相关疾病成为当前的重要研究方向。研究延缓衰老进程的药物对于改善和提高人类生活质量具有很重要的意义。热量限制是目前研究比较多的用于干预衰老的方法，研究显示热量限制能够延长酵母、果蝇、线虫、小鼠、大鼠和狗的寿命，提高了灵长类的存活率，在人类中短期的热量限制降低了糖尿病和动脉粥样硬化的发病率，表明热量限制的作用在进化上可能是保守的。这些结果提示热量限制也许能够在人类中延长寿命。二甲双胍是一种口服双胍类抗糖尿病药物，它是治疗Ⅱ型糖尿病的首要选择，尤其是在肾功能正常的超重和肥胖病人中。二甲双胍还被用于治疗多囊卵巢综合症以及其他与胰岛素抗性有关的疾病，二甲双胍通过抑制肝脏的糖异生来发挥作用。研究显示，二甲双胍可以模拟热量限制的作用，通过与热量限制相关的方式在模式动物中延长寿命。因为需要严格控制饮食才能实现热量限制，所以大部分的研究集中在啮齿类和非人灵长类中。因此，利用二甲双胍在不需要热量限制的前提下激活相似的代谢和压力信号通路是非常有研究价值的。假鳃鳉属表现出加速的衰老，并且在组织学和行为学上表达衰老生物学标记。同时，包括p66Shc和MTP在内的脊椎动物衰老相关基因，都可以在假鳃鳉属中通过同源克隆获得。较短的寿命和相对容易饲养的特点使得假鳃鳉属成为研究衰老的良好模型。本文利用二甲双胍长期处理贡氏假鳃鳉，研究二甲双胍对贡氏假鳃鳉寿命及衰老的影响，二甲双胍对贡氏假鳃鳉行为学、代谢、及组织学指标的影响，讨论了二甲双胍发挥作用的相关机制。我们的研究发现二甲双胍处理延长了贡氏假鳃鳉的平均寿命，但对最大寿命的影响不是很明显。在雄性贡氏假鳃鳉中平均寿命延长了34.7%，而对雌性个体平均寿命的影响却不明显。这可能是因为药物剂量不合适以及雌雄之间激素水平不一致引起的。二甲双胍的处理影响了贡氏假鳃鳉的发育，二甲双胍减轻了贡氏假鳃鳉的体重，减少了体长。在行为学方面，我们做了叁个实验。在类旷场实验中，二甲双胍处理组的平均运动速度要高于对照组，运动时间也比对照组要长；在躲避实验中，二甲双胍处理组躲避能力更强；在条件位置偏爱实验中，二甲双胍处理组在颜色偏爱的条件形成中更有优势，将这种视觉条件刺激普遍化的能力更强。二甲双胍处理组与对照组相比，在新的环境中的运动频率和持续时间更快更长，对于有害条件刺激的反应更快，躲避反射的形成能力更强，在新的条件刺激下条件反射形成和条件反射普遍化的能力更强。这表明二甲双胍改善了衰老引起的认知、学习、记忆和运动能力的衰退。在代谢方面，我们从尾静脉取血，检测了二甲双胍处理组与对照组贡氏假鳃鳉血清中胆固醇和甘油叁脂的水平，发现二甲双胍降低了血清中胆固醇和甘油叁脂的水平，说明二甲双胍处理延缓了因年龄增长引起的胆固醇和甘油叁脂水平的升高。在组织学方面，我们检测了肝脏中脂褐素的含量，发现二甲双胍降低了肝脏中脂褐素的积累；在皮肤中利用X-Gal染色观察β-半乳糖苷酶的表达，发现二甲双胍延缓了皮肤中β-半乳糖苷酶的活性的升高；在脑组织中利用Fluoro-Jade B染色观察脑组织中的神经元的衰退，发现二甲双胍延缓了脑组织中的神经退行性病变，表明二甲双胍延缓了因年龄增长引起的脂质积累以及二甲双胍具有一定的抗氧化、延缓复制衰老和神经保护作用。(本文来源于《山东师范大学》期刊2013-05-26）
假鳃鳉论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
肝癌是世界上致死率较高的疾病之一。肝癌的发生是一个多分子介导的过程。现阶段,多项研究致力于探究肝癌发生的分子机理。除了体外不同的癌细胞系之外,在体内水平上常用来研究肝脏肿瘤发生的动物模型有大鼠、小鼠和斑马鱼等等。科研工作者在药物诱导的大鼠、异种移植癌细胞的裸鼠及转基因的小鼠和斑马鱼中探究肝癌发生的分子机理。然而,由于这些动物寿命较长,利用它们进行自发肿瘤方面的研究还比较少。贡氏假鳃鳉(Nothobranchius guentheri)的平均寿命为12个月,是一种常用来研究衰老的短寿命的脊椎动物模型。我们之前的研究揭示贡氏假鳃鳉肌肉中氧化损伤的水平和皮肤中β半乳糖苷酶的活性随老化逐渐升高。近些年来在贡氏、弗氏和高氏假鳃鳉中的研究表明假鳃鳉正在成为一种研究自发肿瘤的动物模型。但是这些研究只是探究了不同组织器官在不同发育时期的肿瘤发生率,具体的分子机理尚不清楚。因此本文将利用贡氏假鳃鳉探究肝脏自发肿瘤发生的分子机理。白藜芦醇是一种存在于多种植物中的多酚类化合物。在不同细胞和生物体中,白藜芦醇均可发挥抗氧化、抗炎症、抗衰老和抗肿瘤的作用。SIRT1是一种组蛋白依赖的去乙酰化酶,作为SIRT1的活化剂,白藜芦醇可通过SIRT1发挥其抗氧化、抗衰老和抗肿瘤的作用。然而,有关白藜芦醇抗癌症的研究主要是在体外癌细胞、药物诱导癌症的大鼠、异种移植癌细胞的裸鼠或转基因的动物模型中进行的,利用它对自发肿瘤发生机理的研究还比较少见。因此,本文中利用一年生的贡氏假鳃鳉作为实验对象,总共362条鱼(对照组和处理组各181条鱼),用来探究白藜芦醇对老化诱导的肝脏自发肿瘤的影响及其分子机理。由于贡氏假鳃鳉的平均寿命是12个月,这里我们分别选取6、9和12月龄的鱼代表青年、中年和老年。待贡氏假鳃鳉生长至性成熟时,我们随机地将其分为白藜芦醇处理组和对照组。实验组的鱼从4月龄开始喂食白藜芦醇,每天每条鱼约进食25μg的白藜芦醇,直至这些鱼生长至6、9和12月龄。在此叁个不同的年龄阶段,我们分别通过实时定量PCR、免疫印迹、免疫组化和免疫共沉淀等方法检测各组鱼的相对肝重、血清肝脏标志酶的活性、肝脏肿瘤的发生率、自发肿瘤的大小和恶化程度、细胞增殖和细胞凋亡以及SIRT1、PCNA、K-Ras、PI3K、p-AKT、Fox O1、Fox O3a、Ac-Fox O1、p-Fox O3a、DLC1、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3/7/9等蛋白的表达。我们的研究结果表明:1.白藜芦醇长期处理降低了相对肝重和血清肝脏标志酶的活性。与6月龄相比,贡氏假鳃鳉的肝重和相对肝重在9和12月龄显着升高;白藜芦醇在这两个阶段降低了肝重和相对肝重;白藜芦醇对两组鱼的体重并没有显着性的影响。与6月龄相比,9和12月龄血清中AST和ALT的活性显着升高,白藜芦醇缓解了这两种肝脏血清标志酶随老化的升高趋势。2.白藜芦醇降低了肝脏自发肿瘤的形成和生长。6月龄的贡氏假鳃鳉肝脏组织结构正常,并未出现自发肿瘤。贡氏假鳃鳉生长至9月龄时出现自发肿瘤。通过对30条9月龄和20条12月龄贡氏假鳃鳉肝脏组织进行切片,我们发现随着老化的进程,自发肿瘤的发生率逐渐升高,9月龄对照组的肿瘤发生率为86.67%,12月龄时接近100%;白藜芦醇处理后显着降低了肿瘤发生,9和12月龄肝脏中肿瘤的发生率分别降至60%和80%。白藜芦醇还抑制了自发肿瘤的生长,减小了肿瘤的体积,延缓了肿瘤的恶化程度。在肝脏自发肿瘤中,突变p53染色呈阳性,这表明贡氏假鳃鳉肝脏中的这些肿瘤结节为恶性肿瘤;白藜芦醇长期处理降低了突变p53的蛋白水平。3.白藜芦醇提高了肝脏中SIRT1的表达。利用叁个不同发育阶段的贡氏假鳃鳉,我们首次发现,肝脏中SIRT1的表达在老化的过程中逐渐下降。白藜芦醇处理会缓解年龄诱导的SIRT1的下降趋势,在6、9和12月龄时都显着提高了SIRT1的表达水平。对照组鱼的肝脏部分肿瘤结节中SIRT1表达水平下降;而白藜芦醇处理后,肿瘤结节中SIRT1的表达有所提升。这表明在贡氏假鳃鳉中SIRT1可以作为一种抑癌因子。4.白藜芦醇通过SIRT1介导的翻译后修饰抑制K-Ras/PI3K/AKT途径降低肝脏肿瘤中的细胞增殖。在9和12月龄时,通过对增殖标志PCNA的检测,我们发现白藜芦醇抑制了贡氏假鳃鳉肝脏自发肿瘤中的细胞增殖。在此两个阶段,白藜芦醇还降低了K-Ras、PI3K和p-AKT的蛋白水平。贡氏假鳃鳉肝脏中两种内源性蛋白SIRT1和K-Ras相互作用,形成蛋白复合体。在12月龄时,白藜芦醇还通过SIRT1去乙酰化酶降低肝脏中K-Ras的乙酰化水平。因此我们推测,白藜芦醇是通过上调SIRT1的表达来降低K-Ras的乙酰化水平,下调K-Ras/PI3K/AKT信号通路,进而抑制肝脏自发肿瘤中的细胞增殖。白藜芦醇通过SIRT1及其介导的翻译后修饰抑制细胞增殖来降低自发肿瘤的形成和生长。5.白藜芦醇通过SIRT1调节Fox Os和DLC1介导的信号通路促进肝脏自发肿瘤中的细胞凋亡。在6月龄时,两组鱼的肝细胞基本不发生凋亡。在9和12月龄时,对照组细胞凋亡比率分别是0.216%和1.497%,处理组凋亡细胞的比率分别是1.630%和3.965%;在9和12月龄时,白藜芦醇显着提高了肝脏组织中细胞凋亡的比率。在12月龄时,白藜芦醇处理组肝脏细胞的凋亡主要发生在自发肿瘤处;而在对照组中,肿瘤部位的肝细胞并未发生细胞凋亡。在12月龄时,白藜芦醇降低了贡氏假鳃鳉肝脏中Fox O1和Fox O3a的表达,也降低了Fox Os的翻译后修饰(Ac-Fox O1和p-Fox O3a)水平。在9和12月龄时,白藜芦醇显着提高了DLC1的表达。在贡氏假鳃鳉肝脏中,内源性的DLC1与SIRT1相互结合形成蛋白复合体,而且白藜芦醇促进这两种蛋白的结合。在9月龄时,白藜芦醇降低了DLC1的磷酸化水平。在12月龄时,白藜芦醇显着上调了促凋亡蛋白(Bax和cleaved caspase-3,7,9)的表达,下调了抗凋亡蛋白Bcl-2的水平。我们推测在贡氏假鳃鳉中,白藜芦醇可通过SIRT1介导的翻译后修饰调节Ac-Fox O1和p-Fox O3a的表达水平,通过提高DLC1的表达及其与SIRT1的相互作用,上调促凋亡蛋白的水平,进而诱导肝脏自发肿瘤中的细胞凋亡。总之,在6月龄时贡氏假鳃鳉的肝脏中并未出现自发肿瘤,而我们在9月龄的贡氏假鳃鳉肝脏中发现了自发肿瘤,且此发生率在12月龄接近100%。贡氏假鳃鳉中年龄依赖的肿瘤发生率的升高趋势,可能是由于SIRT1表达随年龄下降导致的。白藜芦醇长期处理提高了SIRT1的表达并降低了肝脏中自发肿瘤生长。白藜芦醇通过SIRT1介导的翻译后修饰调节K-Ras/PI3K/AKT信号途径进而抑制肝脏自发肿瘤的增殖。白藜芦醇通过SIRT1调节Fox Os的翻译后修饰,上调SIRT1与DLC1的相互结合,改变Bcl-2家族蛋白的表达水平,进而在贡氏假鳃鳉的肝脏自发肿瘤中促进细胞凋亡。在贡氏假鳃鳉中,白藜芦醇长期喂食处理通过SIRT1介导的翻译后修饰抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡来降低肝脏中自发肿瘤的形成和生长。我们的这些结果表明SIRT1在抑制自发肿瘤形成和发展过程中的重要作用,也证实了一年生的贡氏假鳃鳉的确是一种可用于自发肿瘤相关研究的良好的脊椎动物模型以及白藜芦醇可以作为一种潜在的天然药物来治疗肝脏自发肿瘤。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
假鳃鳉论文参考文献
[1].刘珊.白藜芦醇通过SIRT1/NF-κB途径抑制贡氏假鳃鳉肠道衰老相关的分泌表型[D].山东师范大学.2018
[2].刘亭亭.白藜芦醇通过SIRT1介导的翻译后修饰抑制假鳃鳉肝脏肿瘤发生的机理[D].山东师范大学.2017
[3].李凤林.二甲双胍抵抗线粒体氧化损伤延缓贡氏假鳃鳉衰老的机理研究[D].山东师范大学.2017
[4].段楚楚,刘守胜,张士璀,汲广东.BPI/LBP,Nramp和IL-8基因在不同月龄以及LPS刺激后贡氏假鳃鳉鱼体中的表达模式[J].鲁东大学学报(自然科学版).2016
[5].周洋.贡氏假鳃鳉GDF11基因的克隆、表达和生物信息学分析[D].青岛科技大学.2016
[6].宋太玉.白藜芦醇对贡氏假鳃鳉免疫器官、淋巴细胞及免疫因子增龄性的影响[D].山东师范大学.2016
[7].刘照军.贡氏假鳃鳉糖尿病模型的构建及二甲双胍对其器官病理改变的影响[D].山东师范大学.2016
[8].常晴云.晚发型低温可以延缓老龄贡氏假鳃鳉的衰老[D].中国海洋大学.2014
[9].刘亭亭.白藜芦醇对贡氏假鳃鳉活性氧和氧化损伤的影响[D].山东师范大学.2014
[10].齐赫.二甲双胍对贡氏假鳃鳉寿命、行为学、代谢及组织学衰老指标的影响[D].山东师范大学.2013