导读:本文包含了锌转运蛋白基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:锌转运蛋白,单核苷酸多态性,聚合酶链式反应,膀胱癌
锌转运蛋白基因论文文献综述
刘丁维[1]（2018）在《中国北方汉族人群锌转运蛋白基因rs11077654多态性与膀胱癌的相关性分析》一文中研究指出背景和目的膀胱癌是指发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤。是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一。世界范围来看,膀胱癌发病率在男性中占全身恶性肿瘤的第8位,女性第25位。发病率随年龄增长而增加,高发年龄为50~70岁。男女发病比例为3:1。研究表明,锌离子转运蛋白对调节人细胞中维持正常细胞功能所必须的锌浓度至关重要。许多报道指出,锌离子的不平衡和锌转运蛋白的功能障碍对泌尿系统癌症的发展有影响。锌转运蛋白基因ZIP11中的四种变体(rs11871756,rs11077654,rs9913017,rs4969054)与膀胱癌风险显着相关。此外,锌转运蛋白基因ZIP11的变体rs11077654与膀胱癌患者的生存率显着相关。本研究是以人群为基础的病例对照研究,充分考虑了可能混杂因素的影响,分析了锌转运蛋白基因(ZIP11)rs11077654位点多态性与中国北方汉族人群膀胱癌的相关性,以期对该基因位点多态性与膀胱癌的关系做出正确、客观的评价。方法将来自中国北方汉族的研究对象分为膀胱癌组(139例)和健康对照组(168例),膀胱癌患者的诊断通过病理学检查,并且在组织学上证实为膀胱移行细胞癌,健康对照组经体格检查、影像学检查和实验室检查排除感染、炎症、肿瘤、自身免疫学疾病、胃肠道、肝脏及内分泌疾病。通过面对面的采访的方式收集人口的数据,所有人均签署知情同意书,采取所有研究对象EDTA抗凝静脉血5ml,所有标本均排除溶血、脂血,使用成品化试剂盒提取血样中的DNA,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction PCR)技术检测锌转运蛋白基因ZIP11 rs11077654位点SNPs,使用MassARRAY4.0分析质谱仪进行DNA测序,所得的结果经TYPER4.0软件分析,将所得的数据采用SPSS17.0软件进行统计学分析,以P<0.05作为具有统计学意义的临界值,以OR值和95%的可信区间(95%CI)显示相对危险度,来比较膀胱癌组和健康人群之间各指标的差异,分析其与膀胱癌的相关性。结果发现锌转运蛋白基因ZIP11 rs11077654位点存在叁种基因型:CC型、CA型和AA型;当以CC基因型作为参考时,CA基因型与膀胱癌风险无显着相关性(OR=1.355;95%CI=0.750-2.451;p=0.313),AA基因型与膀胱癌风险也无显着相关性(OR=1.169;95%CI=0.256-5.335;p=0.317)。考虑到rs11077654 C等位基因与膀胱癌的相关性,以及与CC基因型相比,CA基因型相对较少,于是我们将CA和AA基因型联合作为显性遗传模型,联合组与膀胱癌风险无显着相关性(OR=1.333;95%CI=0.758-2.343;p=0.317)。CA/AA基因型与低分化膀胱癌(OR=0.900;95%CI=0.411-1.973;p=0.793)或高分化膀胱癌(OR=0.67;95%CI=0.349-1.308;p=0.243)均无显着相关性,CA/AA基因型也与非肌层浸润性膀胱癌(OR=0.636;95%CI=0.334-1.213;p=0.167)或肌层浸润性膀胱癌(OR=1.100;95%CI=0.478–2.531;p=0.823)无显着相关性。结论不同地域的人群锌转运蛋白基因ZIP11变异存在一定差异,锌转运蛋白基因ZIP11变体rs11077654位点SNPs可能不是中国北方汉族人群膀胱癌发病的危险因素。(本文来源于《青岛大学》期刊2018-05-13）
苗瑞英[2]（2017）在《拟南芥编码锌转运蛋白ZNE1基因表达模式和生理功能研究》一文中研究指出锌(Zn)、铁(Fe)及钙(Ca)是维持植物正常生长发育所必需的元素,Zn和Fe是微量元素,Ca是大量元素。当Zn、Fe和Ca含量过高或过低时,都会影响植物的生长发育。因此越来越多的科研工作者关注植物体内Zn、Fe、Ca等离子的稳态调控机制。我们对拟南芥Zinc Nutrition Essentiall(ZNE1)基因缺失突变体进行纯合鉴定并获得两种纯合突变体,分别命名为znel-l和zne1-2。对这两种突变体进行表型分析发现,在高锌(150 μM Zn~(2+))、低铁(0.5μM Fe~(2+))、低钙(0mM Ca~(2+))培养条件下,突变体叶片发黄、根短,长势显着弱于野生型(Col-0),具有高锌敏感、低铁敏感和低钙敏感表型;随后将ZNE1基因互补zne1-1和zne1-2突变体后,突变体的表型恢复至野生型表型。为深入研究ZNE1基因是否影响植物对Zn、Fe、Ca等矿质元素的吸收和积累,通过电感耦合等离子体光谱仪(Inductively Coupled Plasma,ICP)对植物中Zn、Fe、Ca的总含量进行测定。结果显示,在用不同浓度的Zn~(2+)、Fe~(2+)、Ca~(2+)处理zne1与野生型Col-0植物的条件下,二者的Zn、Fe、Ca含量均无显着差异,表明Z1NE1基因不参与植物体Zn、Fe、Ca等矿质元素的吸收和积累,可能参与这些元素的分布。通过台盼蓝染色检测受损或死亡细胞,发现在高锌条件下znel-1、zne1-2和Col-0相比,成熟叶片叶脉呈现较深蓝色,山此推测可能维管束细胞周围的细胞因积累较多的Zn~(2+)而受损。我们利用GUS组织化学染色法研究ZNE1基因的表达模式,结果显示ZNE1在拟南芥的根和叶上均有表达。本研究发现ZNE1在拟南芥中系统性表达可能参与植物Zn~(2+)、Fe~(2+)、Ca~(2+)的稳态调控。基于ZNE1基因具有重要的生理功能,本研究为后续优化农作物Zn、Fe、Ca含量提供一定的理论基础。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2017-06-10）
韩亚超,谢贤安,范晓宁,普明宇,林会[3]（2016）在《紫云英丛枝菌根共生锌转运蛋白基因AsZIP2的克隆与表达调控》一文中研究指出土壤中锌的缺乏已成为农业中普遍存在的问题,会导致粮食的减产减质。ZIP家族蛋白质对农作物吸收Zn与Fe起着关键作用。本研究利用RACE技术从豆科植物紫云英中分离到一个全长的ZIP家族Zn转运基因,命名为AsZIP2;利用热不对称交错PCR与反向PCR方法获取了AsZIP2基因上游长度为1.6 kb的启动子序列。生物信息学分析表明AsZIP2基因编码339个氨基酸;预测的AsZIP2蛋白质含有保守的ZIP结构域并由9个跨膜结构域构成;序列比对与系统进化分析表明AsZIP2与蒺藜苜蓿及日本百脉根的Zn转运蛋白ZIP2的亲缘关系密切。利用RT-PCR与定量PCR方法检测紫云英AsZIP2基因在丛枝菌根中的表达,结果显示AM真菌的侵染强烈地抑制AsZIP2的表达。与已知的Mt ZIP2基因一致,施加Zn会诱导AsZIP2的表达。有趣地是,在低磷条件下,AsZIP2在根中的表达显着地增强。研究结果表明,AM真菌,Zn或Pi水平均影响Zn转运基因AsZIP2在根中的表达水平。对AsZIP2基因在分子特征与表达谱方面的初步研究将有利于进一步功能性鉴定该基因参与植物生长和发育。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2016年03期）
苏银霞,马艳,姚华,朱筠,王婷婷[4]（2016）在《维吾尔族2型糖尿病与锌转运蛋白-8基因单核苷酸多态性及其交互作用的相关性分析》一文中研究指出目的探讨锌转运蛋白-8基因(SLC30A8)的4个单核苷酸多态性(SNP)位点与维吾尔族T2DM的关联,以及SNP位点间交互作用对T2DM易感性的影响。方法选取维吾尔族T2DM患者(病例组)和健康体检者(对照组),各932名。通过体格及生化检查获得临床资料,并进行SLC30A8基因多态性检测。结果 SLC30A8基因的4个SNP中,rs13266634基因型频率、等位基因频率分布在调整协变量前后,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);rs13266634的风险等位基因为C[P<0.05,OR(95%CI):1.186(1.031~1.364)];SLC30A8基因模型分析显示,调整协变量后,两组rs13666334的加性模型[OR(95%CI):0.841(0.722~0.980)]、rs3802177的显性基因模型[OR(95%CI):0.621(0.338~0.995)]、rs3802177-rs13266634单倍型(T-T)[OR(95%CI):0.846(0.734~0.976)]比较,差异有统计学意义(P<0.05);广义多因子降维法(GMDR)分析显示,各SNP位点间协变量调整前后均无交互作用(P>0.05)。结论SLC30A8基因rs13666334、rs3802177与维吾尔族T2DM的易感性有关,且rs13666334位点的突变呈保护作用,其风险等位基因C有累加性,rs3802177-rs13266634单倍型(T-T)可能是维吾尔族T2DM的保护因素之一。(本文来源于《中国糖尿病杂志》期刊2016年01期）
张金艳[5]（2015）在《锌转运蛋白AsZNT1基因上游调控序列的功能鉴定》一文中研究指出随着人类自然活动的不断加强,各种重金属污染物通过多种途径进入到土壤中,由于难降解和不溶性使得重金属通过食物链传递,最终危害人类健康,目前重金属污染问题已成为全球亟待解决的问题之一。从研究角度和技术措施上来讲,生物修复的应用前景是很广阔的。生物修复包括很多方面,其中利用植物和微生物的共生作用来修复重金属污染的土壤成为当今的研究热点。丛枝菌根真菌在自然界中分布广泛,能与大多数的高等植物形成共生体系,不仅可以提高植物对多种营养元素的吸收,还能够增强宿主植物对非生物胁迫的抗逆性。而且菌根真菌是直接联系土壤和植物根系的一类,因此,研究和利用菌根真菌缓解重金属污染土壤对农业发展具有重要的指导意义。目前,从分子水平方面解释重金属的吸收转运调控机制还不清楚。本研究中,分析和鉴定了紫云英中ZIP家族的锌转运蛋白基因的5’端上游序列的功能,主要的研究成果如下:1.通过两轮反向PCR设计特异性引物,扩增到了As ZNT1基因上游1.8kb的启动子序列。通过PLACE和plant CARE软件预测了顺式元件及它们的位置,显示有几个重要的顺式元件存在于As ZNT1启动子的序列中,包括与磷调控相关的P1BS、与菌根和磷调控相关的34bp元件、可能参与菌根和锌调控的MYCS-like、ZRE-like元件。2.组织特异性表达实验表明,As ZNT1基因主要在分生组织区、生长区、幼嫩侧根发生处和成熟组织的中柱中表达,PAs ZNT1::GUS融合表达没有在根的表皮和皮层中发现,揭示了As ZNT1可能参与锌或其他金属离子的吸收转运。3.通过一系列的截短实验,检测到了与磷饥饿应答相关的元件P1BS,及一个新的串联重复序列34bp元件参与了As ZNT1基因的表达调控,而MYCS-like、ZRE-like不应答基因的调控。4.通过over-lap PCR构建特异性的缺失载体,进一步验证了已知的磷酸盐转运因子的顺式元件P1BS和新发现的34-bp元件是菌根真菌和外界锌浓度应答的调控元件,它们参与了As ZNT1基因的表达调控。(本文来源于《华中农业大学》期刊2015-06-01）
马晓晓[6]（2015）在《锌/镉超积累植物东南景天（Sedum alfredii Hance）两个锌转运蛋白基因的功能研究》一文中研究指出探明超积累植物对重金属超积累作用的生理生化过程和分子机理,不仅有利于植物修复技术的发展和推广应用,而且有助于丰富植物营养学理论,是当前国内外研究热点。超积累生态型东南景天(Sedum alfredii Hance)是我国原生的锌/镉超积累植物,对锌、镉具有很强的耐性和很高的积累量,对其超积累作用的分子机理研究,有望克隆具有自主知识产权的超积累作用相关基因。转运蛋白是一类位于膜上的运输蛋白,广泛参与金属元素的吸收、转运和区隔过程。其中锌铁调节转运蛋白(ZRT, IRT-like Protein, ZIP)广泛存在于细菌、真菌、动物、植物真核生物中,被认为在锌、铁、锰、镉、铜等金属元素的根系吸收、木质部长距离运输以及地上部稳态维持中发挥重要功能。基于转录组测序,本实验室已克隆得到多个超积累生态型东南景天的ZIP家族基因,但其功能尚不明晰。在上述基础上,本论文利用酵母功能互补、洋葱表皮定位、q-RT-PCR、转基因技术等分子生物学方法,系统探究了超积累东南景天中SaZIP2和SaZIP3基因的功能,取得的主要研究结果如下：1、使用醋酸锂酵母转化法,选用野生型DY1457和DY4743、锌镉敏感型突变体△zrc1、锌吸收缺陷型突变体ZHY3、锰吸收缺陷型突变体△smfl、铁吸收缺陷型突变体DDY4分别研究SaZIP2和SaZIP3基因对镉、锌、锰、铁的转运能力。转化SaZIP2和SaZIP3均使锌镉敏感型突变体△zrc1无法在含镉培养基上生长,而对酵母镉积累量没有影响,说明SaZIP2和SaZIP3在质膜而非液泡膜上转运镉；转化SaZIP2和SaZIP3均能恢复锌吸收缺陷型突变体ZHY3吸收锌的能力,且转化SaZIP2和SaZIP3后,突变体锌含量分别提高了63.7%和251.4%,说明SaZIP2和SaZIP3均能转运锌,且SaZIP3转运锌的能力大于SaZIP2;转化SaZIP3的锰吸收缺陷型突变体△smfl锰含量较对照提高了13.4%,但并末达到野生型酵母锰含量的水平,说明表达SaZIP3只在一定程度上恢复了突变体吸收锰的功能,而SaZIP2在酵母中不具备转运锰的能力；转化SaZIP2和SaZIP3更加减弱了铁吸收缺陷型突变体DDY4吸收铁的能力,但不影响突变体铁含量。上述酵母功能互补试验说明,SaZIP2和SaZIP3均能介导镉、锌和铁的转运,且SaZIP3能介导锰的转运。2、利用Gateway技术构建GFP融合载体,采用基因枪技术将其导入洋葱表皮细胞,暗培养16h后用激光共聚焦显微镜检测绿色荧光,SaZIP2-GFP融合载体表达产物在细胞质液泡以外的地方呈现点状分布,SaZIP3-GFP融合载体表达产物在细胞膜和细胞核膜上分布,暗示SaZIP2是分布在除液泡膜以外细胞器质膜上的转运蛋白,SaZIP3是分布在细胞质膜和细胞核膜上的转运蛋白。但SaZIP2究竟分布在何种细胞器质膜上,以及SaZIP3分布在核膜上的作用还有待进一步研究。3、采用营养液培养试验,利用q-RT-PCR比较分析了锌/镉处理下ZIP2和ZIP3在两种生态型东南景天(超积累生态型HE,非超积累生态型NHE)中的表达水平,及其与东南景天的锌、镉含量的关系。长时间缺锌处理会增加NHE和HE地上部、根部ZIP2和ZIP3的表达量,加锌处理则有抑制效果,说明ZIP2和ZIP3是高亲和的锌转运蛋白。5μM镉处理NHE24h和8d, SnZIP2基因在其地上部表达分别上调2倍和7倍,在根部表达分别下调25倍和4倍,说明SnZIP2在地上部能特异性转运锌,在根部还转运镉。HE只在100 μM镉处理8d的情况下,地上部SaZIP2表达量显着上调,说明SaZIP2在HE中非特异性吸收锌,还参与了镉从根部到地上部的转运。5μM镉处理NHE24h和8d, SnZIP3基因在其地上部表达分别上调近5倍和下调近4倍,在根部表达分别上调近6倍和近8倍,说明SnZIP3在NHE中是高亲和且特异性强的锌转运蛋白。镉处理对HE地上部SaZIP3表达有抑制作用,且随着镉浓度的增加,抑制程度加强,低浓度的镉处理对HE根部SaZIP3表达有促进作用,而高浓度的镉长时间处理有抑制作用,说明在HE中SaZIP3非特异性转运锌,还参与了根部镉吸收。4、通过农杆菌介导的方法将SaZIP2和SaZIP3基因过表达载体分别转入模式植物拟南芥中,采用平板和水培的方法观察转基因拟南芥的锌、镉耐性和积累量变化,以验证SaZIP2和SaZIP3基因的功能。过表达SaZIP2或SaZIP3的拟南芥同野生型(WT)在锌、镉处理下根系生长受抑制程度一致,根系长度明显变短,说明它们并不参与锌镉的区隔解毒过程,与它们并不定位在液泡膜上的研究结果相符。50μM ZnSO4处理拟南芥一周,转基因株系间地上部锌含量没有明显差异,均显着高于WT,是WT的90倍多,根部锌含量有同样的趋势,转基因株系根部锌含量相对WT增加25%以上,转基因株系锌转运系数是WT的7倍,说明SaZIP2和SaZIP3参与锌的吸收及向地上部的转运过程。过表达SaZIP2株系的镉转运系数最高,地上部和根部镉含量均高于WT,但差异不显着,过表达SaZIP3的株系地上部和根部镉含量分别是WT的1.5倍和3倍,显着高于WT,但镉转运系数最低,说明SaZIP2参与镉向地上部的转运过程,SaZIP3参与镉的吸收过程,这与前文酵母功能互补实验和镉处理时基因表达水平研究所得结论相符,即SaZIP2和SaZIP3特异性不强,除转运锌外,在镉的吸收及转运中也有重要作用。(本文来源于《浙江大学》期刊2015-05-01）
李林枫[7]（2014）在《载锌沸石对蛋鸡消化功能、金属沉积及锌转运蛋白基因表达的影响》一文中研究指出本研究以硫酸锌为对照,研究载锌沸石对蛋鸡消化功能、鸡蛋品质、金属元素沉积及锌转运蛋白基因表达的影响,为载锌沸石的合理应用、开发新的锌源提供参考依据。论文包括以下3个试验：试验一研究载锌沸石对蛋鸡养分消化率、消化酶活性和鸡蛋品质的影响。选用健康、体重相近的30周龄海兰褐蛋鸡450只,随机分成5组,每组6个重复,每重复15只鸡,日粮处理如下：(1)基础日粮+ZniSO4(对照组)；(2)基础日粮+0.11%载锌沸石；(3)基础日粮+0.23%载锌沸石；(4)基础日粮+0.34%载锌沸石；(5)基础日粮+0.46%载锌沸石,日粮中锌添加水平分别为80、20、40、60、80mg/kg。结果表明,与对照组相比,添加0.34%载锌沸石显着提高了粗蛋白和粗脂肪的表观消化率(P<0.05)；添加0.23%载锌沸石可显着提高十二指肠蔗糖酶活性(P<0.05)；添加0.46%载锌沸石能显着提高试验第4周蛋重(P<0.05)；添加载锌沸石对胰腺和十二指肠中淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶活性及蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋黄颜色和哈夫单位等鸡蛋品质没有显着影响(P>0.05)。试验二研究载锌沸石对蛋鸡组织中金属元素含量和肝脏含锌酶活性的影响。试验处理同试验一。结果表明,与对照组相比,添加0.34%载锌沸石能显着提高血液和肝脏中Zn、Fe含量(P<0.05)；添加0.46%载锌沸石可显着提高肝脏中Zn含量、血液中Fe含量以及胰腺中Zn、Ca含量(P<0.05)；添加0.23%载锌沸石可显着提高血液中Fe含量和肝脏AKP活性(P<0.05)；0.46%载锌沸石组胫骨和蛋黄中Zn含量、胰腺中Ca含量及肝脏AKP活性与0.11%载锌沸石组相比均有显着提高(P<0.05)。试验叁研究载锌沸石对蛋鸡胰腺和空肠中锌转运蛋白基因表达水平的影响。试验处理同试验一。结果表明,与对照组相比,0.23%载锌沸石组显着提高了空肠ZnT2基因相对表达量(P<0.05)；0.34%载锌沸石组能够显着提高胰腺ZnT1、ZnT2、ZnT5和MT-4基因相对表达量(P<0.05)；0.46%载锌沸石组能够显着提高胰腺MT-4和空肠ZnTl基因相对表达量(P<0.05)；载锌沸石对胰腺中的MTF-1、MT-3和空肠中的MTF-1基因表达水平无显着影响(P>0.05)。(本文来源于《南京农业大学》期刊2014-05-01）
沈杰[8]（2014）在《卡尼鄂拉蜂锌转运蛋白-7相似蛋白基因的克隆及差异表达分析》一文中研究指出本研究以卡尼鄂拉蜂Apis mellifera carnica为研究对象,采用基因克隆、原核表达、Real-time PCR等方法分析卡尼鄂拉蜂ZnT-7-like基因在原核表达系统中的表达情况,制备兔抗卡蜂ZnT-7-like多克隆抗体,并对该基因在卡蜂3、6、9、12、16日龄mRNA和蛋白表达差异进行分析,以期发现该基因在不同日龄卡尼鄂拉蜂咽下腺的差异表达规律,为其功能研究提供理论依据。同时构建含有EGFP报告基因的融合表达载体pEGFP-ZnT-7-like,实现该基因亚细胞水平的表达定位,并通过免疫组化技术研究该基因组织分布情况。主要研究结果如下：1.参考GenBank中意大利蜜蜂ZnT-7-like基因的mRNA序列设计引物,以咽下腺总RNA为模板进行反转录,以所获得的cDNA为模板扩增该基因全长序列,通过生物信息学手段对该基因核酸和蛋白序列进行分析。结果表明,克隆得到卡尼鄂拉蜂ZnT-7-1ike基因CDS序列与GenBank中的序列完全一致,表明在同一个蜜蜂种下不同的亚种之间该基因相当保守；ZnT-7-like蛋白二级结构预测表明该蛋白为a型蛋白；跨膜结构预测分析表明该蛋白有六个跨膜区域；对ZnT-7-like蛋白进行二硫键的预测,发现该蛋白可能含有两个二硫键,成键位点可能在50、75、308和315；进行聚类分析,表明该蛋白与同为膜翅目的小蜜蜂、欧洲熊蜂以及切叶蜂亲缘关系最近,与鳞翅目家蚕、哺乳动物人、小鼠、禽类原鸡以及斑马鱼及植物二穗短柄草亲缘性逐级递减。2.选择部分序列(273bp)为多肽免疫序列,将其亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,然后转化入表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导表达获得大小约为35kDa融合蛋白；纯化后免疫新西兰大白兔,制备其多克隆抗体,并用间接ELISA和蛋白免疫印迹技术检测抗体的效价及特异性,制备的多克隆抗体效价为1：64,000,具有很高的特异性。3.对ZnT-7-like基因在卡尼鄂拉蜂3,6,9,12和16日龄咽下腺表达水平进行实时荧光定量PCR检测,结果表明,该基因在卡尼鄂拉蜂5个日龄工蜂中的转录情况存在较大差异,其中3日龄表达量极显着高于其他日龄(P<0.01),12日龄表达量最低,其他日龄间表达量两两差异显着(P<0.05)或极显着(P<0.01)；对ZnT-7-like蛋白在卡尼鄂拉蜂3,6,9,12和16日龄咽下腺进行Western blot定量分析,结果表明,ZnT-7-like蛋白在卡尼鄂拉蜂5个日龄工蜂咽下腺中的蛋白表达与转录水平基本一致。4.本研究构建了真核表达载体pEGFP-ZnT-7-like,通过脂质体(LTX)介导基因转染DF-1细胞,观察基因表达产物的分布,并检测mRNA和融合蛋白在体外水平的表达。结果表明ZnT-7-like蛋白不含信号肽序列,融合蛋白在细胞质中表达,转染pEGFP-C1后荧光蛋白均匀分布于整个细胞。5.通过制备卡蜂咽下腺石蜡切片以及免疫组化分析,检测卡尼鄂拉蜂3、6、9、12、16日龄ZnT-7-like蛋白阳性面积率,结果表明切片中细胞核被染上蓝色,咽下腺ZnT-7-like蛋白呈现棕黄色,背景清晰。卡尼鄂拉蜂5个日龄咽下腺组织切片均呈ZnT-7-like蛋白免疫阳性,3日龄中的表达量极显着高于其他日龄(P<0.01),12日龄表达量最低,其他日龄间表达量两两差异极显着(P<0.01)。这与转录和Western blot水平差异性规律是一致的。(本文来源于《扬州大学》期刊2014-05-01）
沈杰,刘振国,沈芳,吉挺[9]（2013）在《卡尼鄂拉蜂锌转运蛋白-7相似蛋白(ZnT-7-like)的基因克隆、抗体制备及差异表达》一文中研究指出【目的】本研究旨在克隆卡尼鄂拉蜂Apis mellifera carnica锌转运蛋白-7相似蛋白(zinc transporter 7-like,ZnT-7-like)基因,制备ZnT-7-like多克隆抗体,了解该基因在卡尼鄂拉蜂王浆腺中不同时期的差异表达情况。【方法】运用RT-PCR法从卡尼鄂拉蜂王浆腺总RNA中扩增ZnT-7-like基因,进行生物信息学分析,为避开跨膜结构的干扰,选择克隆其部分序列(273 bp)作为多肽免疫序列。将其亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达获得融合蛋白,然后将融合蛋白纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,分别用间接ELISA和Western blot检测抗体的效价和特异性,最后采用实时荧光定量RT-PCR以及Western blot技术检测该基因在不同日龄成虫王浆腺中的相对表达量。【结果】克隆得到卡尼鄂拉蜂ZnT-7-like基因,大小为1 065 bp。SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白成功表达;制备的多克隆抗体效价高达1∶64 000,且具有很高的特异性。ZnT-7-like在卡尼鄂拉蜂5个日龄成虫中的转录情况存在较大差异,表现为3日龄成虫中的表达量极显着高于其他日龄(P<0.01),12日龄表达量最低,其他日龄间表达量两两差异显着(P<0.05)或极显着(P<0.01);ZnT-7-like蛋白表达与转录水平基本一致。【结论】成功克隆了卡尼鄂拉蜂ZnT-7-like基因,制备了兔抗蜂ZnT-7-like多克隆抗体,并在转录和翻译两个水平上测定了ZnT-7-like在卡尼鄂拉蜂王浆腺中不同时期的相对表达量。这些结果为深入研究卡尼鄂拉蜂ZnT-7-like基因的功能奠定了基础。(本文来源于《昆虫学报》期刊2013年10期）
王月影,臧猛,李宏基,郭豫杰,鲁维飞[10]（2012）在《猪锌转运蛋白基因的克隆及其在消化道组织中的分布》一文中研究指出slc30A编码的锌转运蛋白可将胞质锌排出细胞外或转入细胞器,从而降低胞浆锌的含量。本研究运用电子克隆设计引物,对猪(Sus scrofa)消化道组织中slc30A1~slc30A9进行克隆,将克隆的slc30A1~slc30A9序列及其编码蛋白的氨基酸序列与其他物种进行同源性比较,并对slc30A1~slc30A9在猪消化道组织中的分布进行研究。克隆结果表明,猪slc30A1~slc30A9均包含一个完整的开放阅读框架,长度为1044~2301bp,编码由348~767个氨基酸残基组成的ZnT(Zinc transporter)蛋白,GenBank登录号分别为:FJ374262.1、EU825192.2、FJ358706.1、EU835903.1、FJ230771.1、FJ237622.1、FJ237623.1、FJ588029和FJ164069.1,其中slc30A8为一个突变体;同源性分析比较发现,slc30A和ZnT蛋白氨基酸与其他种属的同源性分析结果基本一致,与牛(Bos taurus)和人(Homo sapieus)的同源性较高,与小鼠(Mus musculus)和大鼠(Rattusy norvegicus)的同源性较低,且不同异构体及其编码的蛋白也略有差异;组织分布结果表明,除slc30A8仅在回肠中有分布外,slc30A9分布最广,在食道、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠中均有分布,而slc30A1和slc30A6除了回肠,其余组织均有分布,其他几个异构体在回肠中也没有分布,而在食道、十二指肠、空肠、盲肠、结肠和直肠中有不同程度的分布。研究结果提示,slc30A在消化道中的分布具有组织特异性,可能与其在猪体内的功能密切相关。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2012年08期）
锌转运蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
锌(Zn)、铁(Fe)及钙(Ca)是维持植物正常生长发育所必需的元素,Zn和Fe是微量元素,Ca是大量元素。当Zn、Fe和Ca含量过高或过低时,都会影响植物的生长发育。因此越来越多的科研工作者关注植物体内Zn、Fe、Ca等离子的稳态调控机制。我们对拟南芥Zinc Nutrition Essentiall(ZNE1)基因缺失突变体进行纯合鉴定并获得两种纯合突变体,分别命名为znel-l和zne1-2。对这两种突变体进行表型分析发现,在高锌(150 μM Zn~(2+))、低铁(0.5μM Fe~(2+))、低钙(0mM Ca~(2+))培养条件下,突变体叶片发黄、根短,长势显着弱于野生型(Col-0),具有高锌敏感、低铁敏感和低钙敏感表型;随后将ZNE1基因互补zne1-1和zne1-2突变体后,突变体的表型恢复至野生型表型。为深入研究ZNE1基因是否影响植物对Zn、Fe、Ca等矿质元素的吸收和积累,通过电感耦合等离子体光谱仪(Inductively Coupled Plasma,ICP)对植物中Zn、Fe、Ca的总含量进行测定。结果显示,在用不同浓度的Zn~(2+)、Fe~(2+)、Ca~(2+)处理zne1与野生型Col-0植物的条件下,二者的Zn、Fe、Ca含量均无显着差异,表明Z1NE1基因不参与植物体Zn、Fe、Ca等矿质元素的吸收和积累,可能参与这些元素的分布。通过台盼蓝染色检测受损或死亡细胞,发现在高锌条件下znel-1、zne1-2和Col-0相比,成熟叶片叶脉呈现较深蓝色,山此推测可能维管束细胞周围的细胞因积累较多的Zn~(2+)而受损。我们利用GUS组织化学染色法研究ZNE1基因的表达模式,结果显示ZNE1在拟南芥的根和叶上均有表达。本研究发现ZNE1在拟南芥中系统性表达可能参与植物Zn~(2+)、Fe~(2+)、Ca~(2+)的稳态调控。基于ZNE1基因具有重要的生理功能,本研究为后续优化农作物Zn、Fe、Ca含量提供一定的理论基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
锌转运蛋白基因论文参考文献
[1].刘丁维.中国北方汉族人群锌转运蛋白基因rs11077654多态性与膀胱癌的相关性分析[D].青岛大学.2018
[2].苗瑞英.拟南芥编码锌转运蛋白ZNE1基因表达模式和生理功能研究[D].内蒙古大学.2017
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[5].张金艳.锌转运蛋白AsZNT1基因上游调控序列的功能鉴定[D].华中农业大学.2015
[6].马晓晓.锌/镉超积累植物东南景天（SedumalfrediiHance）两个锌转运蛋白基因的功能研究[D].浙江大学.2015
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[8].沈杰.卡尼鄂拉蜂锌转运蛋白-7相似蛋白基因的克隆及差异表达分析[D].扬州大学.2014
[9].沈杰,刘振国,沈芳,吉挺.卡尼鄂拉蜂锌转运蛋白-7相似蛋白(ZnT-7-like)的基因克隆、抗体制备及差异表达[J].昆虫学报.2013
[10].王月影,臧猛,李宏基,郭豫杰,鲁维飞.猪锌转运蛋白基因的克隆及其在消化道组织中的分布[J].农业生物技术学报.2012