本文主要研究内容
作者梁亭,李佩瑶,罗强,王少华,李军,徐明举,张瑞华,徐彤(2019)在《稳定抑制TRPM2基因表达肺微血管内皮细胞系的构建与鉴定》一文中研究指出:应用短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC),对其M2型瞬时受体电位(TRPM2)基因进行干扰,以建立稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株。结果表明,正常PMVEC对胰酶的最大耐受浓度和嘌呤霉素最小致死剂量分别为0.4μg/mL和0.6μg/mL;然后加入0.6、2.0、4.0、8.0μg/mL嘌呤霉素筛选稳定抑制TRPM2表达的shRNA TRPM2 PMVEC株,结果在嘌呤霉素达到8μg/mL时该细胞株仍细胞生长良好; Semi-quantitative PCR和Western blot对获得阳性细胞株进行TRPM2基因和蛋白表达的检测显示, shRNA TRPM2阳性PMVEC的TRPM2基因和蛋白表达相对量显著低于阴性对照和正常对照组(P<0.01)。该研究通过shRNA慢病毒载体成功建立了稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株,为进一步开展TRPM2在流感病毒诱导肺微血管内皮细胞损伤的作用机制奠定了基础。
Abstract
ying yong duan fa ka RNA(shRNA)man bing du biao da zai ti gan ran xiao shu fei wei xie guan nei pi xi bao (PMVEC),dui ji M2xing shun shi shou ti dian wei (TRPM2)ji yin jin hang gan rao ,yi jian li wen ding shRNA TRPM2 PMVECxi bao zhu 。jie guo biao ming ,zheng chang PMVECdui yi mei de zui da nai shou nong du he piao ling mei su zui xiao zhi si ji liang fen bie wei 0.4μg/mLhe 0.6μg/mL;ran hou jia ru 0.6、2.0、4.0、8.0μg/mLpiao ling mei su shai shua wen ding yi zhi TRPM2biao da de shRNA TRPM2 PMVECzhu ,jie guo zai piao ling mei su da dao 8μg/mLshi gai xi bao zhu reng xi bao sheng chang liang hao ; Semi-quantitative PCRhe Western blotdui huo de yang xing xi bao zhu jin hang TRPM2ji yin he dan bai biao da de jian ce xian shi , shRNA TRPM2yang xing PMVECde TRPM2ji yin he dan bai biao da xiang dui liang xian zhe di yu yin xing dui zhao he zheng chang dui zhao zu (P<0.01)。gai yan jiu tong guo shRNAman bing du zai ti cheng gong jian li le wen ding shRNA TRPM2 PMVECxi bao zhu ,wei jin yi bu kai zhan TRPM2zai liu gan bing du you dao fei wei xie guan nei pi xi bao sun shang de zuo yong ji zhi dian ding le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国细胞生物学学报的梁亭,李佩瑶,罗强,王少华,李军,徐明举,张瑞华,徐彤,发表于刊物中国细胞生物学学报2019年03期论文,是一篇关于型瞬时受体电位离子通道论文,慢病毒载体论文,中国细胞生物学学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国细胞生物学学报2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。