梁亭:稳定抑制TRPM2基因表达肺微血管内皮细胞系的构建与鉴定论文

梁亭:稳定抑制TRPM2基因表达肺微血管内皮细胞系的构建与鉴定论文

本文主要研究内容

作者梁亭,李佩瑶,罗强,王少华,李军,徐明举,张瑞华,徐彤(2019)在《稳定抑制TRPM2基因表达肺微血管内皮细胞系的构建与鉴定》一文中研究指出:应用短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC),对其M2型瞬时受体电位(TRPM2)基因进行干扰,以建立稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株。结果表明,正常PMVEC对胰酶的最大耐受浓度和嘌呤霉素最小致死剂量分别为0.4μg/mL和0.6μg/mL;然后加入0.6、2.0、4.0、8.0μg/mL嘌呤霉素筛选稳定抑制TRPM2表达的shRNA TRPM2 PMVEC株,结果在嘌呤霉素达到8μg/mL时该细胞株仍细胞生长良好; Semi-quantitative PCR和Western blot对获得阳性细胞株进行TRPM2基因和蛋白表达的检测显示, shRNA TRPM2阳性PMVEC的TRPM2基因和蛋白表达相对量显著低于阴性对照和正常对照组(P<0.01)。该研究通过shRNA慢病毒载体成功建立了稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株,为进一步开展TRPM2在流感病毒诱导肺微血管内皮细胞损伤的作用机制奠定了基础。

Abstract

ying yong duan fa ka RNA(shRNA)man bing du biao da zai ti gan ran xiao shu fei wei xie guan nei pi xi bao (PMVEC),dui ji M2xing shun shi shou ti dian wei (TRPM2)ji yin jin hang gan rao ,yi jian li wen ding shRNA TRPM2 PMVECxi bao zhu 。jie guo biao ming ,zheng chang PMVECdui yi mei de zui da nai shou nong du he piao ling mei su zui xiao zhi si ji liang fen bie wei 0.4μg/mLhe 0.6μg/mL;ran hou jia ru 0.6、2.0、4.0、8.0μg/mLpiao ling mei su shai shua wen ding yi zhi TRPM2biao da de shRNA TRPM2 PMVECzhu ,jie guo zai piao ling mei su da dao 8μg/mLshi gai xi bao zhu reng xi bao sheng chang liang hao ; Semi-quantitative PCRhe Western blotdui huo de yang xing xi bao zhu jin hang TRPM2ji yin he dan bai biao da de jian ce xian shi , shRNA TRPM2yang xing PMVECde TRPM2ji yin he dan bai biao da xiang dui liang xian zhe di yu yin xing dui zhao he zheng chang dui zhao zu (P<0.01)。gai yan jiu tong guo shRNAman bing du zai ti cheng gong jian li le wen ding shRNA TRPM2 PMVECxi bao zhu ,wei jin yi bu kai zhan TRPM2zai liu gan bing du you dao fei wei xie guan nei pi xi bao sun shang de zuo yong ji zhi dian ding le ji chu 。

论文参考文献

  • [1].新型慢病毒载体的构建及其在人骨髓间充质干细胞基因转导中的应用[J]. 卢晓芳,杜晶春,李磊,赖文玉,张秀明,李伟强,杨霞,项鹏.  中国组织工程研究与临床康复.2011(23)
  • [2].内皮抑素过表达慢病毒载体的构建及其鉴定[J]. 杨敏,王敏,李先平,谢益欣,李碰玲,张婷婷,宋欢,董智慧.  中国生物制品学杂志.2016(08)
  • [3].HIV-1缺损慢病毒载体的高滴度制备及其介导的高效基因转移[J]. 曾令兵,张林,孟彦,叶林柏.  微生物学报.2007(06)
  • [4].人hnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体的构建[J]. 刘瑶,石祥,方文.  贵州医科大学学报.2016(06)
  • [5].慢病毒载体及应用研究进展[J]. 张薇,赵志英,张坤.  包头医学院学报.2011(05)
  • [6].慢病毒载体法制备转基因动物研究进展[J]. 刘吉宏,李峰,郝子悦,李碧春,陈学进.  动物医学进展.2008(02)
  • [7].LMP1基因重组慢病毒载体的构建及表达性能鉴定[J]. 杨玉芳,丁彦青,梁丽,翁德胜.  中华实验和临床病毒学杂志.2006(03)
  • [8].慢病毒载体转录“通读”改进研究进展[J]. 何佳平,张敬之.  生物工程学报.2011(11)
  • [9].慢病毒载体的构建及优化[J]. 徐晓明,杨慧,王晓萍.  中国临床康复.2006(09)
  • [10].腺病毒介导慢病毒载体的细胞转染[J]. 黄晓武,张明,汤钊猷.  复旦学报(医学版).2004(06)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国细胞生物学学报的梁亭,李佩瑶,罗强,王少华,李军,徐明举,张瑞华,徐彤,发表于刊物中国细胞生物学学报2019年03期论文,是一篇关于型瞬时受体电位离子通道论文,慢病毒载体论文,中国细胞生物学学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国细胞生物学学报2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

    标签:;  ;  ;  

    梁亭:稳定抑制TRPM2基因表达肺微血管内皮细胞系的构建与鉴定论文
    下载Doc文档

    猜你喜欢