导读:本文包含了定向酶解论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:漆酶,克隆表达,酶学性质,定向进化
定向酶解论文文献综述
张雪玲,陈小利,李荷[1]（2016）在《漆酶Lac1338的酶学特性测定及定向突变对其酶解染料影响》一文中研究指出为了获得表达量高、热稳定性好的漆酶,通过密码子优化合成漆酶基因lac1338、连接到pET-32a(+)载体上并在Escherichia coli BL21(DE3)中表达,获得HIS-Lac1338蛋白。酶学性质测定结果显示,以ABTS为底物时,HIS-Lac1338的比活力高达22.8 U/mg,Km和Vmax分别为567μmol/L和2.8 mmol/(L·min·g);HIS-Lac1338的最适反应温度为55℃,最适pH为6.0;在55℃以下保温2 h能保留50%的酶活性,在pH 4-8范围内孵育4 h仍保留50%以上的活性;HIS-Lac1338对Cu~(2+)抗性强,Ca~(2+)、Na~+、K~+对HIS-Lac1338有促进作用,而Co~(2+)、Fe~(2+)、Hg~(2+)、Ag~+等重金属离子对HIS-Lac1338有抑制作用。易错PCR方法得到的Lac1338的突变酶Lac16与HIS-Lac1338相比,对酸性紫7、溴酚蓝、考马斯亮蓝的降解率分别由10.9%、20%和25%提高到90.5%、67.8%和85%。结果表明,HIS-Lac1338具有较好的温度及pH稳定性,而通过易错PCR技术定向突变获得的突变酶Lac16的染料降解率大大提高。(本文来源于《生物技术通报》期刊2016年07期）
刘森轩[2]（2015）在《基于牛肉酶解和定向美拉德反应的烤牛肉风味物质形成》一文中研究指出传统烧烤肉制品因具有良好的色泽、香气和口感而受到国内外消费者的喜爱。但高温加工条件下肉制品极易产生杂环胺、3,4-苯并芘等对人体有致癌作用的有害物质。本试验以牛肉酶解液为底物,基于美拉德反应原理,研制在温和条件(120 ℃)下同时产生良好色泽和特殊烧烤风味的底物混合物。通过热力场干燥技术,制备出绿色、健康、安全、美味的烤牛肉制品。本文具体研究内容及结果如下:1.基于定向美拉德反应的底物混合物的制备首先通过L_(16)(4)~5正交试验获得牛肉酶解的最优条件:牛肉糜10 g,底物浓度30%左右,酶解温度50℃、pH6.5、m(风味蛋白酶):m(复合蛋白酶)=1:1、加酶量质量分数8%、酶解时间5 h;再以牛肉酶解液为底物,通过析因试验确定底物混合物的最优配比为:牛肉酶解液20 g,葡萄糖1.0 g、甘氨酸0.8 g、硫胺素0.3 g,于120 ℃、pH 7.5条件下反应90 min。气相色谱-质谱法分析结果表明,在该模型体系烤牛肉特征风味物质中,2-甲基-3-呋喃硫醇、2-甲基四氢噻吩-3-酮和双(2-甲基-3-呋喃基)二硫相对含量较高。该模型体系褐变程度高,吸光度最高为0.263,通过感官评定表明,其肉香纯正,烤牛肉风味浓郁。2.牛肉腌制条件及烤牛肉干燥工艺参数的优化试验选取盐、糖和香辛料的添加量作为腌制条件的考察因素,以感官评价为指标。试验结果表明:当盐的添加量为1.2%、盐糖比为1:0.4、香辛料的浓度为4%时(w/w,以原料肉重量为基准),产品咸度适中,口味佳,感官评分达到最高。L27(3)13正交试验结果表明:干燥条件下的烤牛肉加工工艺的最佳参数为第一阶段干燥温度90℃、时间25 min;第二阶段干燥温度130 ℃、时间50 min。该条件下制备出的产品硬度、弹性、咀嚼性和感官评价都是最优的。3.烤牛肉中杂环胺、3,4-苯并芘及挥发性风味物质的测定通过高效液相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法分别对传统烤牛肉和干燥条件下的烤牛肉中的杂环胺和3,4-苯并芘进行测定,结果表明:添加底物混合物及香辛料的烤牛肉中MeIQx、Trp-P-2、Trp-P-1、Northarman和Harman被检测到,其总量为38.628 μg/kg,显着低于传统烤牛肉样品中的杂环胺含量(112.048μg/kg)(p<0.05);3,4-苯并花含量为0.036 μg/kg,显着低于德国标准1 μg/kg(p<0.05);通过固相微萃取-气质联用法测定传统烤牛肉与干燥条件下的烤牛肉中的挥发性风味物质,前者检测出54种,后者检测出61种,包括烃类、醇类、醛类、酮类、酸类、酯类、酚类、呋喃类、噻吩类、噻唑类、吡啶类、唑啶类等,其中2-正丁基呋喃、2-戊基呋喃、四氢化-3-甲基-2-呋喃甲酸具有特征烤牛肉风味,虽然含量较少,但仍具有浓郁的烤牛肉香气。(本文来源于《南京农业大学》期刊2015-02-01）
蔡联辉[3]（2012）在《莲子蛋白构效关系及定向酶解改性制蛋白多肽》一文中研究指出莲子属于睡莲科食药两用植物莲的种子,其中以湖南产白莲为最佳。莲子富含蛋白质,氨基酸数量比例较为平衡,是一种优质植物蛋白资源。目前国内外对莲子蛋白的加工利用滞后,缺乏深度开发利用。所以,将其加工成高附加值的莲子蛋白及蛋白多肽产品具有重要的应用价值。盐提酸沉喷雾干燥工艺所得的莲子蛋白粉达到美国企业标准。该蛋白粉18种氨基酸,必需氨基酸总含量达到了36.0%,符合FAO/WTO标准。通过对其营养价值的评价,该莲子蛋白粉的营养品质高,喷雾干燥法可保持莲子蛋白的物化性质、营养品质和天然性。采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)对四种莲子蛋白组分进行二级结构分析。结果表明,清蛋白和球蛋白二级结构相似,用0.1 mol·L-1 NaCl溶液提取的球蛋白和清蛋白有序结构含量均在55%左右,而醇或碱提的醇溶蛋白和谷蛋白的仅为40%左右,盐提酸沉蛋白的二级结构有序性和稳定性高,醇或碱提蛋白的分子构象和结构稳定性差。莲子蛋白粉混合液经在800W微波预处理120s后,再用木瓜蛋白酶水解效果最好。以水解度指标,采用响应面法研究了底物浓度、pH、酶解温度及酶浓度四因素对木瓜蛋白酶水解微波预处理莲子蛋白粉的影响。优化的最佳工艺参数为底物浓度16.48g/L,pH 5.60,酶解温度55.28℃,酶浓度0.49g/L,此时蛋白水解度为34.90%。用微波预处理莲子蛋白做降解底物的水解度远远高于以预热处理莲子蛋白做降解底物的水解度,微波预处理的水解度相对于预热处理莲子蛋白的提高了7.47%。研究单底物蛋白、底物抑制和蛋白扩散过程的反应机理与动力学行为,构建木瓜蛋白酶水解莲子蛋白的扩散-反应动力学模型,得木瓜蛋白酶催化水解反应动力学参数。初始底物浓度在4.68～13.63 g·L-1范围内,木瓜蛋白酶水解莲子蛋白反应过程符合无底物抑制扩散-反应动力学模型。在1.3.63～27.26 g·L-1范围内,酶解反应过程符合底物抑制扩散-反应动力学模型。该动力学模型理论值与实验值基本吻合,实验拟合相对误差为3.17%(小于5%)。(本文来源于《湘潭大学》期刊2012-04-02）
彭莉娟,王伟,张赛赛,赵春江,冯凤琴[4]（2012）在《基于模拟酶切的酪蛋白定向酶解探究》一文中研究指出用模拟酶切软件peptidecutter提供的39种蛋白酶,对已知序列的酪蛋白进行模拟酶切,以生成的寡肽数量为指标建立酶解肽库,选择适用酶并进行真实条件下的酶解验证,获得最适用酶;以血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的抑制率和酪蛋白磷酸肽(CPP)的氮磷摩尔比来评价ACE抑制肽的活性及CPP的纯度,超滤分离酶解液获得高纯度的ACE抑制肽和CPP。结果表明:胰蛋白酶为最适用酶,超滤后ACE抑制肽的抑制活性及CPP的纯度显着升高(p<0.01),获得了高活性的ACE抑制肽和高纯度的CPP。(本文来源于《食品工业科技》期刊2012年03期）
张赛赛[5]（2011）在《牛乳酪蛋白活性肽构效关系研究及定向酶解初探》一文中研究指出本论文主要研究了酪蛋白来源的ACE抑制肽和酪蛋白磷酸肽的构效关系及初步探索了构效关系指导下酪蛋白的定向酶解。为了研究磷酸肽分子结构和持钙功能之间的关系,首先在酪蛋白磷酸肽核心结构的基础上设计合成了6条不同结构的磷酸肽,测定了其阻止磷酸钙沉淀的能力,模拟肠道环境下磷酸肽所持钙透过半透膜的能力以及磷酸肽的表观结合常数,并将合成的磷酸肽与纯化的商品磷酸肽进行了比较。结果表明,磷酸基的数量和位置均是磷酸肽的持钙能力的重要影响因素,在所有的合成磷酸肽中,含两个不连续的磷酸丝氨酰基的磷酸肽持钙效果最好且透过半透膜的能力最强。继而用药效团模型研究了ACE抑制肽的构效关系,首先搜集了文献报道的28条ACE抑制肽及其活性作为训练集生成药效团模型,得到的最优模型含有五个特征：一个阴离子中心(N),两个氢键受体(A1 and A2),两个疏水中心(H1 andH2),接着用该模型在肽库预测和筛选得到叁条新的具有较高ACE抑制活性的肽序列并委托合成该肽。对合成肽进行了活性检测,结果表明活性肽的半抑制浓度排序和预测结果一致。最后选择39种蛋白酶,用酶切软件peptidecutter对已知序列的酪蛋白进行模拟酶切,根据生成的寡肽数量筛选最适水解用酶并进行了酶解验证,确定了胰蛋白酶为最适用酶,在40℃,pH为7.5的酶解条件下,酪蛋白转化利用率达到90.32%。再通过超滤分离酶解液得到了分子量小于1k部分,其ACE抑制率从分离前的15.19%提高到了92.31%(测定浓度均为2.36 mg/m1),分子量大于1k部分富含磷酸肽,其N/P(mol/mol)从分离前的42.85降到了23.36。(本文来源于《浙江大学》期刊2011-01-01）
刘宝亮,曹桂萍[6]（2010）在《黑曲霉诱变产酶活性与稻壳中木聚糖定向酶解的研究》一文中研究指出采用紫外线照射诱变黑曲霉,筛选出低纤维素酶活的木聚糖酶高产菌株,研究了最优诱变条件,分析了诱变后黑曲霉产木聚糖酶的活性,测定了木聚糖酶对温度和pH值的稳定性。并初步探讨了木聚糖浓度、加酶量对酶解的影响。结果表明,最优诱变条件为:紫外照射功率40 W、照射距离28 cm、诱变时间2.5 min;黑曲霉产木聚糖酶的最适温度为50℃、最适pH值为4.2。木聚糖浓度对木聚糖的酶解没有影响,加酶量对木聚糖的酶解有一定影响;在木聚糖浓度为30 g.L-1、加酶量为2%~5%时,酶解效果较好。(本文来源于《化学与生物工程》期刊2010年06期）
常玮,施用晖,任建东,乐国伟[7]（2008）在《定向酶解大豆7S蛋白及其ACE抑制活性的研究》一文中研究指出以"活性肽搜寻与蛋白模拟水解数据库"为工具,选择胃蛋白酶+胰蛋白酶和碱性蛋白酶对大豆7S蛋白进行模拟水解,得出不同水平的ACE抑制肽肽段,并通过实验比较以上蛋白酶水解物ACE抑制活性的高低。模拟水解结果表明,胃蛋白酶+胰蛋白酶水解大豆7S蛋白得到较多的ACE抑制肽肽段,实验结果表明,碱性蛋白酶水解物ACE抑制活性最大,为73.0965%。(本文来源于《氨基酸和生物资源》期刊2008年02期）
常玮[8]（2008）在《定向酶解大豆蛋白及其ACE抑制肽研究》一文中研究指出通过SWISS-PROT, GSC等蛋白序列数据库网站的查询,获得大豆蛋白、大豆7S球蛋白及11S球蛋白的氨基酸序列,补充到蛋白质数据库,搜索近年来国内外发表的关于ACE抑制肽的文献,更新ACE抑制肽数据库,以及从酶命名数据库中搜索、完善了更多的蛋白酶到蛋白酶数据库,并利用Visual Basic在“定向酶解制备活性肽分析系统”中添加疏水性氨基酸含量计算程序、双酶水解程序、预测潜在活性肽程序和水解片段分子量计算程序。利用疏水性氨基酸含量计算程序分析大豆蛋白、大豆7S和11S球蛋白,初步筛选合适的蛋白质,再结合“定向酶解制备活性肽分析系统”模拟水解,以水解出的活性肽段相对较多的碱性蛋白酶以及胃蛋白酶+胰蛋白酶对大豆分离蛋白以及大豆7S球蛋白进行水解。实验比较碱性蛋白酶与胃蛋白酶+胰蛋白酶水解大豆分离蛋白与大豆7S球蛋白水解产物ACE抑制活性的大小,结果显示,碱性蛋白酶水解物ACE抑制活性较胃蛋白酶+胰蛋白酶高,大豆分离蛋白与大豆7S球蛋白水解产物的ACE抑制活性相当。以大豆7S球蛋白的碱性蛋白酶水解产物做分子量分布,其重均分子量分布与模拟水解产物的重均分子量进行相关性分析,结果线性关系显着,相关性较好。以75%乙醇为洗脱液,采用DA201-C型大孔吸附树脂对水解液进行疏水性氨基酸的富集,产物疏水性提高2.26%,富集产物以200 mg/mL的浓度,1.0 mL的上样量,0.25 mL/min的流速,0.02 mol/L HAc-NaAc缓冲液(pH 4.0)通过Sephadex G-15分离,所得活性最高组分经半制备RP-HPLC分离后得到高抑制率的单一活性组分,其抑制率达到96.57%,经LC/MS鉴定可知,从原料蛋白中分离出的ACE抑制肽氨基酸序列可能含有Phe-Ser(FS)、Tyr-Ile(YI)或Tyr-Leu(YL),其中Tyr-Leu在大豆7S球蛋白中所占比例为0.009396%。(本文来源于《江南大学》期刊2008-06-01）
任芳[9]（2002）在《我国胶原蛋白生产实现产业化》一文中研究指出本报讯 任芳报道 胶原蛋白是一种可广泛应用于生物医学材料、医药与医学领域、化妆品、食品工业、农业生物肥等领域的生物高分子化合物，目前，在国内已能批量生产。利用定向酶解技术可控降解生产动物胶原蛋白及下游产品，目前已实现规模化生产，四川铭让生物有限公司(本文来源于《经济日报》期刊2002-09-05）
赵林果,陈牧,余世袁[10]（2000）在《不同性质的木聚糖底物定向酶解制备木低聚糖的研究》一文中研究指出比较了在相同的条件下 ,含盐和不含盐的底物、含木素和不含木素的底物、聚合度和糖基比不同的底物在木聚糖酶的作用下 ,定向制备木低聚糖时的木低聚糖得率、木糖得率、总糖得率 ,阐明了氯化钠、木素的存在以及木聚糖支链、木聚糖聚合度的差异对实验结果的影响。从而为制定木聚糖和木低聚糖的最佳生产工艺提供理论依据。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2000年06期）
定向酶解论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
传统烧烤肉制品因具有良好的色泽、香气和口感而受到国内外消费者的喜爱。但高温加工条件下肉制品极易产生杂环胺、3,4-苯并芘等对人体有致癌作用的有害物质。本试验以牛肉酶解液为底物,基于美拉德反应原理,研制在温和条件(120 ℃)下同时产生良好色泽和特殊烧烤风味的底物混合物。通过热力场干燥技术,制备出绿色、健康、安全、美味的烤牛肉制品。本文具体研究内容及结果如下:1.基于定向美拉德反应的底物混合物的制备首先通过L_(16)(4)~5正交试验获得牛肉酶解的最优条件:牛肉糜10 g,底物浓度30%左右,酶解温度50℃、pH6.5、m(风味蛋白酶):m(复合蛋白酶)=1:1、加酶量质量分数8%、酶解时间5 h;再以牛肉酶解液为底物,通过析因试验确定底物混合物的最优配比为:牛肉酶解液20 g,葡萄糖1.0 g、甘氨酸0.8 g、硫胺素0.3 g,于120 ℃、pH 7.5条件下反应90 min。气相色谱-质谱法分析结果表明,在该模型体系烤牛肉特征风味物质中,2-甲基-3-呋喃硫醇、2-甲基四氢噻吩-3-酮和双(2-甲基-3-呋喃基)二硫相对含量较高。该模型体系褐变程度高,吸光度最高为0.263,通过感官评定表明,其肉香纯正,烤牛肉风味浓郁。2.牛肉腌制条件及烤牛肉干燥工艺参数的优化试验选取盐、糖和香辛料的添加量作为腌制条件的考察因素,以感官评价为指标。试验结果表明:当盐的添加量为1.2%、盐糖比为1:0.4、香辛料的浓度为4%时(w/w,以原料肉重量为基准),产品咸度适中,口味佳,感官评分达到最高。L27(3)13正交试验结果表明:干燥条件下的烤牛肉加工工艺的最佳参数为第一阶段干燥温度90℃、时间25 min;第二阶段干燥温度130 ℃、时间50 min。该条件下制备出的产品硬度、弹性、咀嚼性和感官评价都是最优的。3.烤牛肉中杂环胺、3,4-苯并芘及挥发性风味物质的测定通过高效液相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法分别对传统烤牛肉和干燥条件下的烤牛肉中的杂环胺和3,4-苯并芘进行测定,结果表明:添加底物混合物及香辛料的烤牛肉中MeIQx、Trp-P-2、Trp-P-1、Northarman和Harman被检测到,其总量为38.628 μg/kg,显着低于传统烤牛肉样品中的杂环胺含量(112.048μg/kg)(p<0.05);3,4-苯并花含量为0.036 μg/kg,显着低于德国标准1 μg/kg(p<0.05);通过固相微萃取-气质联用法测定传统烤牛肉与干燥条件下的烤牛肉中的挥发性风味物质,前者检测出54种,后者检测出61种,包括烃类、醇类、醛类、酮类、酸类、酯类、酚类、呋喃类、噻吩类、噻唑类、吡啶类、唑啶类等,其中2-正丁基呋喃、2-戊基呋喃、四氢化-3-甲基-2-呋喃甲酸具有特征烤牛肉风味,虽然含量较少,但仍具有浓郁的烤牛肉香气。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
定向酶解论文参考文献
[1].张雪玲,陈小利,李荷.漆酶Lac1338的酶学特性测定及定向突变对其酶解染料影响[J].生物技术通报.2016
[2].刘森轩.基于牛肉酶解和定向美拉德反应的烤牛肉风味物质形成[D].南京农业大学.2015
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[4].彭莉娟,王伟,张赛赛,赵春江,冯凤琴.基于模拟酶切的酪蛋白定向酶解探究[J].食品工业科技.2012
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[6].刘宝亮,曹桂萍.黑曲霉诱变产酶活性与稻壳中木聚糖定向酶解的研究[J].化学与生物工程.2010
[7].常玮,施用晖,任建东,乐国伟.定向酶解大豆7S蛋白及其ACE抑制活性的研究[J].氨基酸和生物资源.2008
[8].常玮.定向酶解大豆蛋白及其ACE抑制肽研究[D].江南大学.2008
[9].任芳.我国胶原蛋白生产实现产业化[N].经济日报.2002
[10].赵林果,陈牧,余世袁.不同性质的木聚糖底物定向酶解制备木低聚糖的研究[J].食品与发酵工业.2000