体细胞克隆胚胎论文-吴亚林,李继良,周伟良,董树仁,冯保亮

体细胞克隆胚胎论文-吴亚林,李继良,周伟良,董树仁,冯保亮

导读:本文包含了体细胞克隆胚胎论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:胚胎移植,猪,克隆效率,体细胞核移植

体细胞克隆胚胎论文文献综述

吴亚林,李继良,周伟良,董树仁,冯保亮[1](2019)在《猪体细胞克隆胚胎移植技术要点分析》一文中研究指出猪(Sus scrofa)胚胎移植技术作为转基因、基因编辑猪制备过程中的必备技术,对制备效率有着重要影响。本文对猪体细胞克隆胚胎移植过程中的关键技术环节:受体母猪选择、受体母猪发情与移植胚胎的同期性、胚胎移植操作方法、受体猪的麻醉方法、移植时间、移植胚胎的数量、受体手术后管理等方面的技术要点、操作经验以及研究进展做讨论分析,为猪体细胞克隆胚胎移植操作提供参考。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年06期)

罗肇博[2](2019)在《RepSox和LBH589联合处理对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响》一文中研究指出体细胞核移植胚胎在体外发育时,因为供体细胞核过低多能性及异常表观重编程而出现胚胎发育阻滞现象。继而导致体细胞克隆胚胎发育异常和哺乳动物体细胞核移植效率低下。目前关于同时提高胚胎发育的多能性和表观遗重编程能力少有研究。RepSox是在诱导多能干细胞中发现的一种可以促进细胞产生多能性的小分子化合物。本实验的目的是结合RepSox和组蛋白去乙酰化抑制剂处理猪体细胞克隆胚胎,提高胚胎发育多能性的同时又改善表观遗传修饰,从而提高猪体细胞克隆胚胎体外发育能力及克隆效率。通过分析早期胚胎体外发育能力筛选出最佳的去乙酰化抑制剂及RepSox的最佳处理浓度。通过检测早期胚胎不同发育时期多能性基因的表达情况,分析胚胎发育的全能性;通过免疫荧光染色检测早期胚胎乙酰化和甲基化水平,判断其表观重编程能力;并通过凋亡染色确定胚胎质量。本实验得到以下分析结果:1.50nmol/LLBH589处理24小时组体外发育能力显着高于5 μmoI/LM344处理6小时组、0.2μmol/L MGCD0103处理6小时组、2mmol/L VPA处理24小时组和对照组(P<0.05)。2.不同浓度RepSox处理猪体细胞克隆胚胎,12.5、25 μmol/L组2-细胞率、4-细胞率、囊胚率、囊胚平均细胞数和对照组没有显着性差异,但显着高于50、100μmol/L 处理组(P<0.05)。3.12.5 μmol/L RepSox和50 nmol/L LBH589共处理胚胎体外发育能力显着高于对照组,多能性基因NANOG、POU5FI、SOX2表达量在4-细胞期、囊胚期显着高于对照组和LBH589处理组,且共处理组表观重编程水平优于对照组和LBH589处理组。结论:RepSox和LBH589共处理可以提高猪体细胞克隆胚胎早期发育能力和胚胎质量,提高多能性基因的表达及表观重编程水平。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-18)

许卫华,李紫聪,吴珍芳,石俊松[3](2018)在《DNMT1基因干扰对猪体细胞克隆胚胎发育、基因转录和DNA甲基化的影响》一文中研究指出相对于体外受精胚胎,猪(Sus scrofa)体细胞克隆胚胎DNA甲基转移酶1(DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1, DNMT1)呈现延迟降解的现象。本研究通过向单细胞期重构胚胎注射抗DNMT1siRNA,记录胚胎卵裂率、囊胚发育率以及囊胚期细胞总数,并提取四细胞期和囊胚期胚胎总RNA和DNA,对发育重要相关基因mRNA水平和DNA甲基化水平进行检测。结果显示,虽然抑制DNMT1未能显着提高猪体细胞克隆胚胎体外发育性能(P>0.05),但50μmol/L干扰组囊胚发育率(30.43%)相对于阴性对照组(23.01%)和未注射组(25.74%)有上升的趋势(P=0.19);在基因转录方面,注射抗DNMT1 siRNA显着提高了四细胞期胚胎中POU结构域5类转录因子1 (POU domain, class 5, transcription factor 1,POU5F1)基因和囊胚中NANOG基因的表达水平(P<0.05),也显着上调了囊胚期DNMT1转录水平(P<0.05);在DNA甲基化方面,注射抗DNMT1 siRNA促进了四细胞期POU5F1基因5'-UTR区域DNA的去甲基化和降低了囊胚期整体甲基化水平;然而DNMT1的过度抑制破坏了非编码RNA H19基因印迹的DNA甲基化状态。本研究表明,温和抑制克隆胚胎中过高的DNMT1 mRNA水平,促进了多能基因的表达和DNA去甲基化重编程,该结果对研究DNMT1在早期胚胎生成过程中的作用机制提供了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2018年12期)

华再东,郭帅,肖红卫,任红艳,张立苹[4](2017)在《体内、外卵母细胞对猪体细胞克隆胚胎发育潜力的影响》一文中研究指出为探讨猪体内、外成熟卵母细胞对核移植重组胚胎发育能力的影响,试验通过激素促排获得体内成熟卵母细胞和收集废弃卵巢获取体外成熟的卵母细胞,分别构建核移植重组胚,比较其卵裂率、囊胚率及胚胎移植受孕情况。结果显示,PGC+PMSG+HCG组的平均排卵数(27.8枚/头)显着高于PGC+HCG(12.5枚/头)、PMSG+HCG(13.7枚/头)及自然发情组(11.5枚/头)(P<0.05),体内收集到的卵母细胞,可用于构建核移植重组胚的可用卵率均达到90%以上,与其他处理组差异不显着(P>0.05),说明通过激素处理可获得更多的可用卵母细胞,而且卵母细胞的质量没有显着差异;以体内和体外成熟卵母细胞作为核移植受体构建的克隆胚胎,二者的胚胎融合率(80.31%和79.29%)和卵裂率(90.40%和86.51%)差异均不显着(P>0.05),但来自体内成熟卵母细胞克隆的胚胎发育至囊胚期的比例显着升高(P<0.05);将体内、外成熟卵母细胞构建的核移植重组胚分别移植代孕母猪,头平均移植30或60枚时,体内成熟卵母构建的克隆胚胎移植出生仔猪10头,而体外培养卵母细胞构建的克隆胚胎均未着床受孕,表明通过激素促排获得的卵母细胞质量更好,能显着提高克隆胚胎的囊胚率,减少胚胎移植数量,提高代孕母猪的怀孕率。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2017年11期)

侯黎明[5](2016)在《组蛋白去乙酰化酶抑制剂Oxamflatin对猪体细胞克隆胚胎体外发育率的影响》一文中研究指出体细胞核移植技术(SCNT)是指将一个分化的体细胞与去核的卵母细胞融合形成一个重构胚胎,并发育产生与供体细胞遗传背景一致的克隆后代的技术。自1996年多利羊诞生以来,研究人员利用体细胞核移植技术已经成功克隆出很多哺乳动物后代,如小鼠、狗、猫、牛、猪等。但尽管该技术已经发展了近20年,但体细胞克隆效率还是很低(哺乳动物大约1%-5%),而且体细胞克隆后代常常出现一些异常的表型:表现为胚胎着床率低、胎儿流产率高,克隆动物体型过大并伴随各种器官发育缺陷的症状,也被称为大型胎儿综合症。但表型异常的克隆动物可以正常繁殖且后代表型都正常,说明克隆动物的异常表型是由异常的表观遗传修饰造成的而不是由于遗传物质的改变引起的。目前研究普遍认为体细胞核移植效率低的原因是卵母细胞对体细胞核不完全或异常的重编程导致的。体细胞核移植技术是一项很有应用前景的技术,不仅可以帮助我们了解体细胞重编程的机理,同时可以用于人的器官移植等医学研究。SCNT技术与基因编辑技术相结合,可以生产转基因猪,如抗病型猪,优良肉品质性状猪,环境友好型猪等。鉴于体细胞核移植重要的应用价值以及其较低的克隆效率,本研究围绕如何能提高猪的克隆效率这一基本问题展开,在提高其体外克隆效率的同时,在重编程的分子机理进行了进一步的探索,其主要结果如下所述:1.通过预实验我们发现,在猪合子培养基(PZM-3)中添用一定剂量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂Oxamflatin,能显着提高猪体外克隆胚胎囊胚形成率。然后我们优化了Oxamflatin的处理条件(不同的处理浓度和持续时间),发现用1μM的组蛋白去乙酰化酶抑制剂Oxamflatin处理激活后的重构胚胎15h,显着提高了其体外囊胚发育率(未处理组vs.处理组;10.3%vs.25.5%;p<0.05)。2.用1μM的Oxamflatin处理猪克隆胚胎15h显着降低了重构胚胎原核时期总的去乙酰化酶的活性,提高了克隆胚胎原核期,2细胞和4细胞时期,总的组蛋白H3K9和H4K5的乙酰化水平。我们检测了四种类型的猪的组蛋白去乙酰化酶(包括HDAC1-11,和Sirt1,2)在MII期卵母细胞和猪胎儿成纤维细胞中的mRNA表达水平,结果发现,HDAC1、2和3在MII期卵母细胞的相对表达量比胎儿成纤维细胞高,同时也相对比其他类型的组蛋白去乙酰化酶表达要高。Oxamflatin处理显着降低了重构胚胎原核时期HDAC1的表达,部分上解释了Oxamflatin处理介导的高乙酰化的组蛋白H3K9和H4K5水平。3.我们同时检测了一个非组蛋白α-tubulin蛋白的乙酰化水平,发现用1μM的Oxamflatin处理15h显着提高了猪重构胚胎的中间体和纺锤体在胚胎激活后的前两个有丝分裂细胞周期过程中乙酰化α-tubulin的水平,这可能是通过抑制HDAC6的表达所介导的。4.通过荧光定量PCR我们发现DNA甲基化转移酶1(DNMT1)在猪MII期卵母细胞中占主导,它的表达量相对于其同源基因DNMT2,DNMT3a和3b的表达量要高出50多倍。通过免疫荧光染色我们检测了猪克隆胚胎在2细胞和4细胞时期总的5-mC和5-hmC水平,结果表明,猪SCNT胚胎从2细胞到4细胞时期,总的5-mC和5-hmC水平逐渐降低。用1μM的Oxamflatin处理猪重构胚胎15h显着地降低了猪克隆胚胎2细胞时期总的DNA甲基化水平,同时降低了DNMT1在2细胞时期的表达。5.用1μM的Oxamflatin处理猪重构胚胎15h显着提高了多潜能基因POU5F1在猪克隆胚胎囊胚阶段的表达,这可能是通过降低POU5F1启动子区域DNA甲基化水平引起的。但是,Oxamflatin处理并没有改变猪卫星DNA序列的甲基化水平。6.低剂量的Oxamflatin处理没有抑制猪胎儿成纤维细胞的生长状态,Oxamflatin处理同样导致了猪胎儿成纤维细胞较高的组蛋白H3K9、H4K5和非组蛋白α-tubulin的乙酰化水平,同时Oxamflatin处理在一定程度上降低了猪胎儿成纤维细胞总的DNA甲基化水平。但是用Oxamflatin预处理的猪胎儿成纤维细胞作为核供体细胞,并没有提高重构胚胎的体外囊胚发育率。这表明,Oxamflatin不是通过抑制供体细胞组蛋白去乙酰化酶的活性,而是通过抑制卵母细胞组蛋白去乙酰化酶的活性,从而导致了较高的猪体细胞克隆效率。通过本研究我们对组蛋白去乙酰化酶抑制剂Oxamflatin提高克隆效率的分子机制有了初步的认识,这对今后我们更好的理解体细胞核移植重编程机理有一定的参考价值。(本文来源于《华中农业大学》期刊2016-12-01)

唐红,张宾,张译元,郭延华,王立民[6](2016)在《供体细胞对绵羊转基因体细胞克隆胚胎体外发育影响的研究》一文中研究指出研究比较了转入不同外源基因、转同一基因的不同细胞克隆、供体细胞的培养代数及冷冻对转基因体细胞克隆羊重构胚体外发育的影响,旨在为进一步探寻建立供体细胞个性化准备方案,为提高动物克隆效率提供参考。结果表明,转不同外源基因的供体细胞对转基因体细胞克隆羊重构胚体外发育无影响;转同一基因的不同细胞克隆对转基因体细胞克隆羊重构胚体外发育有一定影响,且转TERT基因的不同克隆间的重构胚的融合率及囊胚率差异显着(P<0.05)。随着供体细胞培养代数的增加,重构胚体外发育的桑葚胚率及囊胚率无显着影响,但融合率随着培养代数的增加有上升趋势,且差异显着(P<0.05);供体细胞冷冻可促进其融合率、桑葚胚率及囊胚率。研究结果表明,供体细胞的不同克隆、培养代数、冷冻等因素对转基因效率有一定的影响。(本文来源于《家畜生态学报》期刊2016年10期)

王旭霞,靳宇洲,左振瑞,刘志国[7](2017)在《用Ala-Gln二肽替换Gln可提高猪体细胞克隆胚胎发育能力》一文中研究指出猪(Sus scrofa)的卵母细胞体外成熟培养以及胚胎体外培养是猪体外受精、体细胞克隆以及胚胎干细胞分离的重要基础。优化卵母细胞以及胚胎的体外培养条件,是提高猪卵母细胞体外成熟效率和胚胎体外发育能力的重要方面。本研究比较了分别添加丙氨酰-谷氨酰胺(alanyl-glutamine,Ala-Gln)和谷氨酰胺(glutamine,Gln)的卵母细胞成熟培养液、胚胎培养液(porcine zygote medium-3,PZM-3)对猪卵母细胞成熟、孤雌激活胚胎和体细胞克隆胚胎发育的影响。实验结果表明,丙氨酰-谷氨酰胺对猪卵母细胞第一极体可见率无明显提升作用,但可以提高猪孤雌胚胎的囊胚率和囊胚细胞数,同时能显着提高猪体细胞克隆胚胎的分裂率和囊胚率。本研究为优化胚胎体外培养条件、提高猪体细胞克隆效率提供了一种新的方法。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2017年01期)

周荣,罗绿花,麦然标,余婉娴,贺晓燕[8](2016)在《Vc对猪体细胞克隆胚胎体外及体内发育的影响》一文中研究指出[目的]提高克隆猪的大批量生产效率,优化体外与体内培养体系。[方法]将所获得的猪体细胞克隆胚胎用含不同Vc浓度的培养液培养,比较体外囊胚发育力和囊胚细胞数,筛选出合适的培养浓度,然后用此浓度培养后的胚胎进行体内手术移植,统计克隆猪的分娩率和产仔情况。[结果]克隆胚胎在激活后用40μg/m L Vc处理22 h,体外培养未显着增加囊胚率,但显着提高了囊胚细胞数。体内移植结果显示,添加Vc未提高妊娠率,但增加了窝均总仔数,克隆效率差异显着。[结论]Vc处理有利于增强体细胞克隆胚的体内和体外发育能力。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2016年23期)

代小丽[9](2016)在《SUV39H1/H2基因表达抑制对猪体细胞克隆胚胎发育潜能影响的初步研究》一文中研究指出体细胞克隆效率主要取决于供体细胞核是否被完全重编程,而供体细胞重编程涉及去除表观遗传标记,将其逆转为未分化的状态,获得可重新分化成各种类型细胞的能力[1]。组蛋白3第9位赖氨酸叁甲基化(H3K9me3)依赖的异染色质是体细胞发生完全重编程的重大障碍[2]。花斑抑制因子同源物(suppressor of variegation3-9 homologl/2, SUV39H1/2)基因编码特异性催化H3K9me3形成的组蛋白甲基化转移酶,促进染色质浓缩形成异染色质,调控基因转录。为了探究SUV39H1/H2基因在体细胞重编程过程中的作用,本研究采用RNA干扰(RNAi)技术抑制德保猪耳成纤维细胞SUV39H1/H2基因表达,并以之为核供体,探究对猪体细胞核移植早期胚胎发育潜能的影响。以探索提高克隆胚胎发育潜能及克隆动物生产效率新途径。一、 SUV39H1/H2基因表达载体构建及其shRNA干扰效率验证1.为了获得具有显着抑制SUV39H1/H2基因表达的shRNA片段,本试验首先克隆获得德保猪SUV39H1基因第二外显子和SUV39H2基因完整的ORF序列,分别构建其真核表达载体并在293T细胞中表达;SUV39H1基因第二外显子序列与野猪SUV39H1基因具有100%同源性,且在牛、绵羊、马等物种中保持较高的序列同源性;SUV39H2基因编码的氨基酸序列与牛、人和黑猩猩相比,同源性分别为97%、96%和96%,说明SUV39H2蛋白在不同物种之间表现出较高的保守性。2.根据文献报道的SUV39H1/H2基因siRNA序列,分别构建其相应的pSicoR-GFP-shRNA'慢病毒表达载体。将靶基因表达载体与相应的干扰载体按照1:3的质量比共转染293T细胞,采用qRT-PCR方法分析比较shRNA的干扰效率。结果显示,SUV39H1-shRNA1/2对SUV39H1基因的抑制效果显着(P<0.05),分别为65.08%、40.11%。SUV39H2-shRNA1/2对SUV39H2基因的抑制效果亦显着(P<0.05),分别是39.29%、93.59%。选择SUV39H1-shRNA1和SUV39H2-shRNA2进行后续研究。二、 SUV39H1/H2基因表达抑制对猪成纤维细胞生长的影响为了探究SUV39H1/H2基因表达抑制对猪成纤维细胞生长的影响,利用脂质体法分别包装SUV39H1/H2基因shRNA慢病毒,将两种病毒以滴度比为1:1混合,以不同MOI值(300/600/1200)的病毒感染德保猪耳成纤维细胞,测定各组细胞的生长曲线;收集MOI 600病毒感染组细胞,采用qRT-PCR方法分析相关基因的表达。结果显示,与未处理组相比,MOI 300和600病毒感染可以明显促进细胞生长(P<0.05);MOI 1200组细胞生长受到抑制,在对数生长期,细胞增殖速度也较另外两个感染组缓慢。qRT-PCR检测结果显示,在MOI 600病毒感染组细胞中,SUV39H1/H2基因的抑制程度分别为64.18%、59.28%,G9A、HDAC1、 DNMT1基因的表达显着降低(P<0.05),HAT1基因表达显着升高(P<0.05)。细胞周期相关基因CyclinA2、CyclinB、PCNA的表达显着升高(P<0.05),CyclinD1、CyclinD2基因的表达显着降低(P<0.05)。叁、SUV39H1/H2基因表达抑制对猪体细胞克隆胚胎发育的影响1.利用免疫组化方法分析了H3K9me3在猪早期胚胎中的表达模式。结果显示,猪孤雌激活和核移植早期发育胚胎(PA和SCNT)的各个时期均能检测到H3K9me3表达,但表达趋势不同。H3K9me3水平在PA胚胎1-细胞期至8-细胞期升高,8-细胞期达到最高水平,之后又下降;SCNT胚胎H3K9me3的水平除了在2-细胞期至4-细胞期有所下降以外,在1-细胞期至桑椹胚期总体呈升高趋势,桑椹胚期至囊胚期下降。2.采用qRT-PCR方法分析调控H3K9me3表达相关酶基因在猪早期胚胎中的表达模式。结果发现,SCNT组胚胎的SUV39H1/H2、KDM4D基因表达水平均高于PA组,且在2-细胞期胚胎的表达水平均极显着升高(P<0.01);SCNT组的SETDB1基因表达水平在2-细胞期胚胎与PA组差异不显着(P>0.05),在4-细胞期至囊胚期胚胎显着高于PA组(P<0.05)。3.以MOI 300和600的病毒感染猪成纤维细胞,挑选表达绿色荧光蛋白的细胞进行核移植试验,统计胚胎分裂率、囊胚率、囊胚平均细胞总数。结果显示,与未处理组相比,SUV39H1/H2基因表达抑制能够显着提高猪核移植胚胎的分裂率、囊胚率和囊胚平均细胞总数(P<0.05)。比较两个病毒感染组结果发现,随着SUV39H1/H2基因表达抑制程度的增加,表达绿色荧光的细胞数目增多,核移植胚胎的囊胚率显着升高(P<0.05),胚胎分裂率、囊胚平均细胞总数没有显着变化(P>0.05)。以上研究结构表明,在一定程度上,抑制SUV39H1/H2基因的表达能够促进德保猪耳成纤维细胞的生长,提高猪核移植胚胎分裂率和囊胚率,增加囊胚平均细胞总数。(本文来源于《广西大学》期刊2016-06-01)

周荣,罗绿花,石俊松,李紫聪,王青来[10](2015)在《胚胎培养液中能量底物对猪体细胞克隆胚胎体外培养的影响》一文中研究指出如何根据猪胚胎发育的不同阶段合理使用不同成分的培养液,建立高效的体细胞克隆胚胎体外培养体系。本研究把所获得的猪体细胞克隆胚胎用不同的培养液培养,比较体外囊胚发育力和囊胚细胞数。结果表明:PZM-3比NCSU-23更适用于克隆胚胎的培养;培养前4d使用PZM-3,后2d更换含有葡萄糖的NCSU-23,可以提高胚胎的囊胚细胞数。说明胚胎在不同发育阶段对能量底物的需求不同,合理利用可以有效提高胚胎发育力。(本文来源于《广东畜牧兽医科技》期刊2015年05期)

体细胞克隆胚胎论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

体细胞核移植胚胎在体外发育时,因为供体细胞核过低多能性及异常表观重编程而出现胚胎发育阻滞现象。继而导致体细胞克隆胚胎发育异常和哺乳动物体细胞核移植效率低下。目前关于同时提高胚胎发育的多能性和表观遗重编程能力少有研究。RepSox是在诱导多能干细胞中发现的一种可以促进细胞产生多能性的小分子化合物。本实验的目的是结合RepSox和组蛋白去乙酰化抑制剂处理猪体细胞克隆胚胎,提高胚胎发育多能性的同时又改善表观遗传修饰,从而提高猪体细胞克隆胚胎体外发育能力及克隆效率。通过分析早期胚胎体外发育能力筛选出最佳的去乙酰化抑制剂及RepSox的最佳处理浓度。通过检测早期胚胎不同发育时期多能性基因的表达情况,分析胚胎发育的全能性;通过免疫荧光染色检测早期胚胎乙酰化和甲基化水平,判断其表观重编程能力;并通过凋亡染色确定胚胎质量。本实验得到以下分析结果:1.50nmol/LLBH589处理24小时组体外发育能力显着高于5 μmoI/LM344处理6小时组、0.2μmol/L MGCD0103处理6小时组、2mmol/L VPA处理24小时组和对照组(P<0.05)。2.不同浓度RepSox处理猪体细胞克隆胚胎,12.5、25 μmol/L组2-细胞率、4-细胞率、囊胚率、囊胚平均细胞数和对照组没有显着性差异,但显着高于50、100μmol/L 处理组(P<0.05)。3.12.5 μmol/L RepSox和50 nmol/L LBH589共处理胚胎体外发育能力显着高于对照组,多能性基因NANOG、POU5FI、SOX2表达量在4-细胞期、囊胚期显着高于对照组和LBH589处理组,且共处理组表观重编程水平优于对照组和LBH589处理组。结论:RepSox和LBH589共处理可以提高猪体细胞克隆胚胎早期发育能力和胚胎质量,提高多能性基因的表达及表观重编程水平。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

体细胞克隆胚胎论文参考文献

[1].吴亚林,李继良,周伟良,董树仁,冯保亮.猪体细胞克隆胚胎移植技术要点分析[J].农业生物技术学报.2019

[2].罗肇博.RepSox和LBH589联合处理对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响[D].延边大学.2019

[3].许卫华,李紫聪,吴珍芳,石俊松.DNMT1基因干扰对猪体细胞克隆胚胎发育、基因转录和DNA甲基化的影响[J].农业生物技术学报.2018

[4].华再东,郭帅,肖红卫,任红艳,张立苹.体内、外卵母细胞对猪体细胞克隆胚胎发育潜力的影响[J].中国畜牧兽医.2017

[5].侯黎明.组蛋白去乙酰化酶抑制剂Oxamflatin对猪体细胞克隆胚胎体外发育率的影响[D].华中农业大学.2016

[6].唐红,张宾,张译元,郭延华,王立民.供体细胞对绵羊转基因体细胞克隆胚胎体外发育影响的研究[J].家畜生态学报.2016

[7].王旭霞,靳宇洲,左振瑞,刘志国.用Ala-Gln二肽替换Gln可提高猪体细胞克隆胚胎发育能力[J].农业生物技术学报.2017

[8].周荣,罗绿花,麦然标,余婉娴,贺晓燕.Vc对猪体细胞克隆胚胎体外及体内发育的影响[J].安徽农业科学.2016

[9].代小丽.SUV39H1/H2基因表达抑制对猪体细胞克隆胚胎发育潜能影响的初步研究[D].广西大学.2016

[10].周荣,罗绿花,石俊松,李紫聪,王青来.胚胎培养液中能量底物对猪体细胞克隆胚胎体外培养的影响[J].广东畜牧兽医科技.2015

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