导读:本文包含了仿生培养论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:性别意识培养,仿生童装,童装设计,儿童
仿生培养论文文献综述
肖杰,高明君,戴宏钦[1]（2019）在《基于性别意识培养的仿生童装设计研究》一文中研究指出自"全面二孩"政策实施以来,我国儿童数量呈现出逐年上升的趋势,庞大的儿童人口为童装市场提供了强有力的保障。仿生童装具有娱乐、教育、益智等功能,服装是儿童的性别标识,合理的仿生设计可以引导儿童形成正确的性别角色观,促进儿童性别稳定性的形成。研究对象是0～6岁的儿童,首先对儿童的性别意识和身体发育规律进行分析;其次探究了仿生童装对儿童性别意识培养的影响;最后基于儿童性别意识培养,结合实例对仿生童装的色彩、图案、廓形设计进行了相关分析。(本文来源于《现代丝绸科学与技术》期刊2019年03期）
刘秉承[2]（2019）在《基于仿生策略的新型生物材料制备及其用于毛乳头细胞培养和毛囊重建的研究》一文中研究指出背景和目的组织工程与再生医学的发展让人们看到了秃发治疗的希望。现如今该领域面临两大挑战:(1)毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)是毛囊重建重要的种子细胞,但目前缺乏能兼顾细胞数量扩增与诱导能力维持的培养方法;(2)毛囊重建缺乏能精细化处理细胞与微环境关系的研究模型。要解决这些问题,都离不开新型生物材料所起的关键作用。近年来,仿生学在生物材料领域的运用极大的丰富了材料的实用性和功能性。仿生生物材料有多种实现形式,如直接选用模仿对象的功能性成分参与材料制备,或使用材料模拟出目标组织特定的结构或理化性能。综上所述,本实验将从两个方面进行研究(1)用仿生细胞膜包裹技术修饰具有类细胞外机制微结构的静电纺纳米纤维,探究其作为新型毛乳头细胞培养支架的可行性;(2)使用水凝胶微球和细胞成分作为功能构件,模块化构建具有仿生结构的大体积毛囊重建研究模型。上述研究以期为组织工程方向的秃发治疗研究提出一个新的综合性解决方案。方法1.细胞膜包裹纳米纤维支架材料的构建及生物功能性评价鼠DPCs作为细胞膜来源。使用静电纺丝和细胞膜包裹技术制备仿生DPCs培养支架材料。通过接触角测量、免疫印迹法、荧光表达等方法鉴定细胞膜包裹结果。使用细胞活死染色和CCK-8等方法对材料的生物相容性及DPCs的增殖表现做出评价。2.支架材料特性对DPCs生物学特性影响的研究我们使用SEM和共聚焦叁维重建等检测方法对DPCs进行形态学观察,通过对DPCs毛发诱导标记物进行基因表达分析、蛋白定性和定量表达和体内毛囊重建实验来探讨培养模型提供的细胞间交互模拟对DPCs生物学特性的影响,并根据结果进行相关机制的初步讨论。3.基于水凝胶微球模块化构建毛囊重建模型的研究使用生物相容性极好的明胶甲基丙烯酸酰氯(GelMA)作为制备水凝胶微球的原料。首先优化微球直径,微球细胞比例等参数。随后,通过悬滴法制备毛乳头细胞球,在transwell小室中依据毛囊及其微环境的结构特征,有序安排载细胞微球、毛乳头细胞球、新生鼠表皮细胞在空间上的分布,构建仿生化毛囊重建模型并进行体内验证。结果1.通过静电纺丝和细胞膜包裹技术,成功构建了仿生纳米纤维支架细胞培养模型,证实该模型有良好的生物相容性并支持DPCs增殖生长。2.仿生支架材料培养的DPCs表达与毛囊诱导能力相关特异性标记物ALP、β-catenin和Versican,且介导细胞间交互的N钙黏蛋白表达增强。经支架材料培养后的DPCs能在体内诱导毛囊再生。3.使用载细胞水凝胶微球、毛乳头细胞球和毛囊细胞作为功能构件,成功在体外构建出大体积含仿生真皮微环境的毛囊重建模型,并在移植裸鼠后实现毛囊再生。结论1.细胞膜包裹的纳米纤维支架材料是一种新型的DPCs培养模型。2.支架材料中仿生结构与细胞表面交互活性的协同作用可有效增强以非聚集性方式生长的DPCs的细胞间交互作用,使其恢复特异性标记物的表达以及诱导毛囊再生的能力,为组织工程毛囊提供了新的种子细胞培养工具。3.基于模块化的组织构建模式能有效恢复毛囊细胞与真皮微环境的位置关系,有助于构建细胞节省型的毛囊重建模型。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-05-17）
袁礼波,徐永清[3]（2019）在《软骨仿生环境下的培养在软骨组织工程中的研究进展》一文中研究指出关节软骨为透明软骨,富有弹性,摩擦因数小,能吸收关节间振荡,是维持关节功能的重要结构,临床上因多种原因导致的关节软骨缺损的发病率很高,由于关节软骨中无神经、血管,自愈能力较差,因此,关节软骨自身修复能力有限,即使是小的关节软骨损伤也可能导致关节软骨退行性病变~([1])。目前的治疗方法如软骨移植、微骨折等已经被广泛的应用于关节软骨的损伤修复~([2]),但是,研究结果显示,这些方法都存在一些技术上的局限性,均不能实现长期的软骨修复。此外,关节软(本文来源于《云南医药》期刊2019年01期）
张健,李波,程平言,向祖祥,胡峰[4]（2018）在《传统与仿生机制高温曲培养过程中生化指标的对比研究》一文中研究指出习酒公司酱香型白酒生产用的高温大曲主要是传统人工曲,近年来开始仿生机械制曲,为了验证仿生机制曲培养过程中的微生物与理化指标是否达到人工曲的标准,确保最终成品曲达到人工曲效果。通过实验对仿生机制曲和人工曲培养过程中微生物与理化指标进行跟踪检测,然后进行分析研究,得出两者之间的差异。根据实验结果表明,培养过程中不同发酵时间的微生物种类、数量基本相当,仿生机制曲不影响大曲微生物的生长;各理化指标数值接近,仿生机制曲理化指标达到人工曲标准,符合公司标准要求。仿生机制曲的开发应用对高温大曲的生化指标不会产生不利影响,符合公司的生产需求。(本文来源于《酿酒科技》期刊2018年09期）
王永振[5]（2018）在《软骨微组织体外培养及软骨微组织—仿生基质复合体体内体外培养的实验研究》一文中研究指出研究意义及背景:自体肋软骨由于其组织量大,取材相对方便,在临床上常用作一种理想的修复、填充、支持材料。既往软骨移植方式常为采用大块的软骨组织或拼接后的软骨支架来进行器官的再造或修复以及受区欠缺的填充,这种方式存在着软骨用量多且灵活性差、浪费严重、修复效果不足、雕刻复杂、细节刻画不足等缺点。有人提出将软骨移植过程中所用的软骨团块的体积减小,以达到精细塑形的目的。关节外科领域有学者发现这种移植方式不仅可以增加其应用灵活性,而且可以提升软骨细胞增殖迁移活性,可部分达到类似于组织工程修复的效果,还可规避组织工程的缺点。我们设计了软骨微组织体外培养、构建肋软骨微组织-仿生基质复合体并体外培养,肋软骨微组织-仿生基质复合体塑形后即刻体内培养叁部分实验予以探究。以明确肋软骨微组织-仿生基质复合体再生的具体过程及其机制,观察软骨微组织及上述复合体的生物学转归,以寻找一种可以提升移植软骨增殖活性,减少肋软骨采取量,提高自体肋软骨应用效率的方法,并提供实(试)验基础。研究目的:1.研究肋软骨微组织化后微组织体外培养细胞迁移及增殖情况,并探究软骨微组织的径长对软骨细胞迁移及增殖影响。2.构建软骨仿生基质,并形成软骨微组织-仿生基质复合体,在体外培养的过程中模拟软骨微组织体内移植后的局部环境,探究在这种条件下软骨微组织内软骨细胞的外迁及增殖活性。3.探究体内环境对软骨微组织-仿生基质复合体内细胞生物学特性的影响,探究复合体体内移植后的生物学转归。研究方法:1.采取小型猪肋软骨,用薄刃叁孔刀片切割粉碎成软骨微组织,过实验细胞筛,获得径长分别为<200um,200um～400um,400um～800um叁组软骨微组织。体外培养14天,在第3天、7天、14天大体及显微镜下观察并比较各组软骨微组织内细胞迁出及增殖情况。2.提取Ⅱ型胶原蛋白(COL-Ⅱ),并复合透明质酸(HA)及硫酸软骨素(CS),形成COLⅡ/HA/CS浓度为8/0.5/1.5mg/ml的仿生基质溶液,添加10×DMEM培养基形成含有DMEM培养基的仿生基质。将软骨微组织按与仿生基质溶液体积比1:1的比例混匀,孵育形成固体后体外培养14天,进行HE染色观察。3.采取小型猪肋软骨,形成软骨微组织,复合仿生基质形成固态软骨微组织-仿生基质复合体,在猪自体肋软骨采取术后4小时以内将上述复合体埋置入实验猪皮下。2月,4月后分两批取出所植入复合体,大体观察其生物学特性并做HE染色,观察其生物学转归。研究结果:1.肋软骨微组织化及软骨微组织径长对软骨细胞迁移及增殖影响的实验研究(1)薄刃刀片切割细胞筛过滤法形成的肋软骨微组织活性良好,部分软骨陷窝呈切开状态,陷窝内软骨细胞情况良好。(2)培养第 3 天、7 天、14 天,径长<200um,200um～400um,400um～800um叁组软骨微组织成活良好,软骨陷窝内软骨细胞成活良好。(3)培养第3天、7天、14天分别在40倍、100倍、200倍镜下观察径长<200um,200um～400um,400um～800um叁组软骨微组织,均未见细胞明显迁出及增殖。2.仿生基质的制备及其对软骨微组织软骨细胞迁移及增殖影响的实验研究(1)获得的固态仿生基质生物学特性良好,单纯仿生基质呈白色,加入DMEM培养基后形成的软骨微组织-仿生基质复合体呈淡粉色。仿生基质(复合体)具有类似鼻尖的硬度,弹性。(2)培养期观察软骨微组织-仿生基质复合体可见培养基清亮,肉眼观察复合体形态良好,形状及特性未见明显改变。排水法测量培养后软骨微组织-仿生基质复合体体积与培养前无明显差别。(3)镜下观察培养14天后的软骨微组织-仿生基质复合体HE切片示软骨微组织及软骨细胞在仿生基质中成活良好,软骨微组织外未见明显软骨细胞迁出,未见明显软骨细胞增殖。3.软骨微组织-仿生基质复合体自体即刻回植体内培养的实验研究(1)体内移植2月、4月后获取软骨微组织-仿生基质复合体,大体观察上述复合体形状不规则,在体内存在部分降解,随时间延长,其降解率提高。(2)大体观察移植后2月的软骨微组织-仿生基质复合体剖面可见局部存在不规则的软骨团块,质地及硬度较正常软骨稍差,各团块之间存在厚薄不均的纤维结缔组织。移植4月后复合体质地、硬度与正常软骨类似,其余同移植2月的复合体类似。(3)体内培养2月后的软骨微组织-仿生基质复合体HE切片示软骨微组织及软骨细胞存活良好,软骨仿生基质部分降解,未见明显的软骨细胞在软骨微组织外增殖。(4)体内培养4月后的软骨微组织-仿生基质复合体HE切片示软骨微组织及软骨细胞存活良好,软骨微组织间隙内存在大量纤维组织,间隙较内培养2月时明显缩短,仿生基质几乎不可见。100倍镜下观察,局部可见两种形式软骨微组织外增殖:1.以软骨微组织为中心的细胞簇样增殖,尚未见有大量的软骨基质分泌;2.软骨细胞散在增殖,伴基质分泌。研究结论:1.肋软骨微组织化及软骨微组织径长对软骨细胞迁移及增殖影响的实验研究(1)薄刃刀片切割细胞筛过滤法可切开软骨陷窝并形成活性良好的肋软骨微组织。(2)软骨微组织体外培养过程中微组织及其内的软骨细胞存活。(3)软骨微组织内的软骨细胞于培养14天内未见明显外迁及增殖。(4)软骨微组织的径长于组织内软骨细胞的迁移、增殖活性无明确关系。2.仿生基质的制备及其对软骨微组织软骨细胞迁移及增殖影响的实验研究(1)COL-Ⅱ/CS/HA所形成的肋软骨仿生基质生物相容性良好,组织及细胞在其内存活良好。(2)软骨微组织-仿生基质复合体体外培养14天体积无明显变化。(3)体外培养环境下,复合体内软骨细胞未见明确迁移与增殖;该仿生基质在体外培养环境下不能诱导软骨微组织内软骨细胞的迁移与增殖。3.软骨微组织=仿生基质复合体自体即刻回植体内培养的实验研究(1)软骨微组织-仿生基质复合体在体内有良好的生物相容性,仿生基质可被降解。(2)软骨微组织-仿生基质复合体内软骨组织成活良好,在体培养环境下纤维组织包裹成一整体。(3)皮肤下移植软骨微组织-仿生基质复合体的方式可以出现两种形式的细胞增殖:1.不伴基质分泌的以软骨微组织为中心的细胞簇样增殖;2.伴基质分泌的软骨细胞散在增殖。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2018-03-20）
穆睿,金磊[6]（2017）在《贴壁组织块反复消化法连续培养人牙髓干细胞及其附着纳米氧化锆仿生支架生长的实验研究》一文中研究指出目的:探讨一种经济、高效的贴壁组织块原代培养人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)的方法,提高原代hDPSCs培养过程中的效率和成功率。评价hDPSCs以纳米氧化锆仿生支架为载体附着和生长情况。方法:收集临床上拔除的新鲜、无龋、无牙髓炎和牙髓坏死的青年人(18-25周岁)恒牙,无菌分离牙髓组织,剪碎,用组织块贴壁反复消化法连续培养hDPSCs,有限稀释法克隆法纯化细胞,流式细胞仪(本文来源于《第十一次全国口腔修复学学术会议论文汇编》期刊2017-10-22）
张洋[7]（2017）在《仿生杂化水凝胶的制备及用于骨髓间充质干细胞体外3D培养的研究》一文中研究指出细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)对组织细胞起支持、保护、营养作用,对细胞的增殖、分化等生命活动有重要影响。水凝胶具有含水量高、优异的营养物质传输特性和类似于天然ECM的机械性能,是理想的细胞3D培养平台。合成类高分子水凝胶虽然具有良好的生物相容性、结构和性能可控等特点,但存在生物活性差的缺点,因而需要通过生物活性分子的修饰来改善其降解性能、促细胞生长和分化的生物活性。本论文分离提取兔骨髓间充质干细胞(RBMSC),构建PluronicF127温敏性水凝胶体系,并进一步模拟天然细胞外基质,设计合成胶原模拟多肽(CMP)、基质金属蛋白酶(MMP)降解肽,与多臂PEG构建仿生杂化水凝胶,将上述水凝胶体系用于RBMSC的3D培养并评价了水凝胶的细胞相容性及对细胞分化的影响,为发展新型生物活性水凝胶体系提供基础和依据。具体研究工作如下:1.PluronicF127水凝胶及其用于RBMSC的3D培养分离RBMSC并鉴定其具有多向分化潜性。制备了温敏性Pluronic F127水凝胶并确定了适宜的成胶条件,该水凝胶为多孔结构,机械强度较高,且随着水凝胶浓度增加,水凝胶的机械强度增强,溶液-凝胶相变温度降低。应用该水凝胶体系包埋RBMSC进行3D培养,具有较好的细胞相容性,但对细胞的分化没有显着影响,与该水凝胶体系的生物活性较差有关。2.胶原模拟多肽-PEG杂化水凝胶及其用于RBMSC的3D培养设计合成胶原模拟多肽(GPO)8-CG-RGDS,常温和变温圆二色谱显示,胶原模拟多肽能自发组装成类似天然胶原的叁螺旋构象,热变性温度约为49.4℃。通过胶原模拟多肽与4臂PEG-MAL偶联构建了一种仿生胶原模拟多肽-PEG杂化水凝胶,其机械强度适中,内部为多孔结构。RBMSC在杂化水凝胶中包载24h后,绝大部分干细胞保持存活状态,表明杂化水凝胶有良好的细胞相容性;对细胞相关基因表达的检测提示该杂化水凝胶构建的3D培养环境更有利于RBMSC的软骨分化。3.MMP降解肽-PEG杂化水凝胶及其用于RBMSC的3D培养设计合成两端含有半胱氨酸的MMP降解肽,以MMP降解肽作为交联剂与4臂PEG-MAL构建一种仿生MMP降解肽-PEG杂化水凝胶,成胶反应迅速,水凝胶的成胶前体溶液溶度浓度影响胶内部孔径结构和机械强度。应用杂化水凝胶包埋RBMSC进行3D培养,初步研究显示其细胞相容性良好,为进一步研究该水凝胶体系的细胞介导的降解性能及其对细胞的分化诱导作用提供基础。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2017-05-01）
梁玲玲,袁进,幸正茂,廖洪斐[8]（2017）在《压力仿生培养对兔角膜内皮细胞调控的研究》一文中研究指出目的探讨体外压力仿生培养系统下不同梯度压力对角膜内皮细胞形态和功能的调控作用。设计实验性研究。研究对象兔角膜内皮细胞。方法将体外培养的第一代兔角膜内皮细胞分为五组:A组为无压力常规培养(空白对照),B组为正常压力仿生培养(15 mmHg),C组为压力波动组,将压力设为15mmHg、25 mmHg、20 mmHg、10 mmHg,D组30 mmHg压力培养,E组50 mmHg压力培养。细胞均培养24h,免疫法鉴定原代角膜内皮细胞,HE染色和电镜观察细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞活性。主要指标角膜内皮细胞的形态、存活率。结果获取的所有细胞证实为角膜内皮细胞表型,无角膜上皮细胞及基质细胞污染。五组细胞分别培养24h后,经HE染色和电镜检测发现正常压力微环境培养的角膜内皮细胞排列紧密,六边形细胞居多,细胞表面微绒毛丰富,细胞核染色质丰富,而高压力培养的角膜内皮细胞活性差,细胞间隙加大。经流式细胞术分析显示,正常压力组、30 mmHg组、压力波动组、50 mmHg组的角膜内皮细胞培养24 h后细胞存活率分别为(98.16±0.45)%、(78.83±1.65)%、(70.2±3.54)%、(41.33±0.25)%(P=0.016)。高压力培养组中随着压力的升高和持续时间延长,细胞活性显着下降。结论正常压力微环境培养对角膜内皮细胞形态和功能具有正向调节作用,而高压力对角膜内皮细胞具有损伤性,并随时间延长而加重。(本文来源于《眼科》期刊2017年01期）
马亚会[9]（2016）在《仿生稳定微环境细胞培养芯片的设计与制作》一文中研究指出细胞体外培养是细胞研究的重要内容之一。微流控芯片通过对微通道网络中流体的控制可以模拟细胞在体环境,目前已经成为重要的细胞体外培养平台。芯片内的微环境对细胞的生长具有关键性的影响。利用微流控芯片进行细胞实验时需要向培养腔中注入培养液、药物溶液等,但是在进行细胞培养、药性分析、胞间作用分析等操作中,注入液体的扰动会使芯片培养腔内细胞生存微环境发生改变,进而影响药物分析的结果。设计一种能够抵抗外部液流扰动的微流控芯片在细胞药物分析上具有重要意义。对此,本文开展了如下研究：(1)研究双子叶植物网状脉序水分输运过程。双子叶植物的叶脉具有网状脉序结构,其叶脉水分输运系统遵循Murray定律。由于网孔结构的存在,叶肉细胞生长在一个浓度均一、压力平稳、液流稳定的微环境中。叶肉细胞生活在细脉包围的网孔中,水分和无机盐通过网孔导管侧壁上的纹孔进入叶肉细胞组织。当叶片表面受到伤害或者产生流量波动时,网孔结构抵抗外部扰动的能力与网孔的形状有关。本文通过改变边数来改变网孔的形状,随着网孔边数的增多,叶脉冗余度增大,叶片抵抗外部流量波动的能力逐渐增强,在边数n=8时,叶脉抵抗导管中流量波动的能力达到最强。(2)仿生芯片的设计与制作。仿生芯片包括流体通道层、盖片层和细胞进样层叁部分。根据网孔结构的冗余输运过程和细胞体外培养的要求,设计出正四边形、正五边形、正六边形、正七边形和正八边形5种不同形状的细胞培养腔结构。对芯片细胞培养腔内的微流场进行了数值模拟,证明仿生结构模型培养腔内具有小且均匀的液体流速,且能有效抵抗外部液流扰动。利用MEMS工艺制作出所设计的仿生芯片。(3)利用粒子速度测量的方法研究培养腔内微流体的运动特性。以聚苯乙烯微球作为示踪粒子,利用粒子测速技术测量简单的单通道结构和仿生结构培养腔内微流体的速度,并研究其速度分布规律。通过调整入口流速的方法模拟外部液流的扰动,研究不同形状培养腔内的微流体运动情况及抵抗干扰的能力,以此优化细胞培养腔的形状。利用所设计芯片进行PC12细胞的培养,观察细胞在普通培养瓶和仿生芯片中的生长状况,验证所设计的仿生芯片的实际功能。(本文来源于《大连理工大学》期刊2016-05-05）
杨延飞[10]（2016）在《包埋的脐血CD34~+细胞与仿生壁龛的动态共培养》一文中研究指出脐带血(Umbilical cord blood, UCB),由于富含造血干／祖细胞(Hematopoietic stem/progenitor cells, HSPCs)、具有良好的移植优势,被视为治疗人类疾病的宝贵生物资源,目前已应用于治疗恶性血液病、实体瘤、遗传性疾病等。然而,单份脐带血中HSPCs含量过低,限制了其在临床上的应用。因此,在体外利用工程化的手段扩增脐带血中的HSPCs,成为了解决该问题的重要途径。目前,传统的体外扩增方法主要存在两方面问题：1)造血干细胞易过早分化,失去干性；2)扩增的目的细胞易引入异体细胞或异源因子,导致移植的失败。研究发现,体内的骨髓微环境,可以使HSPCs永久的维持自我更新。基于此,本文将首先构建仿生成骨细胞壁龛,为HSPCs提供间接的支持；其次,制备性能优异的胶珠作为HSPCs的包埋基质,隔离异体细胞或大分子；最后,在动态条件下,利用仿生壁龛扩增包埋的脐血CD34+细胞,以期实现CD34+细胞的高效扩增。仿生成骨细胞壁龛的构建：首先,通过冷冻干燥和化学交联法,制备了不同比例的载HAp-CS/Gel支架。其次,通过扫描电镜观察支架的形貌,发现HAp的掺入并不改变支架的形貌,支架孔径为135-150μm,具有良好的贯通性；通过测定孔隙率、吸水率、接触角等,确定了HAp掺入比例为100：20时,复合支架具有优异的性能：孔隙率大于90%,吸水率为19.1,接触角由88.5。变为45.8。,支架的表面亲水性增加。同时,通过能谱分析和红外光谱分析得出,支架中的组成成分间会发生交联反应,HAp以团聚体或颗粒的形式,均匀分布在支架的孔壁上,为成骨细胞提供足够多的生长位点。最后,将成骨细胞接种在性能最优的复合支架上,构建仿生壁龛,通过荧光染色和SEM观察,发现细胞可均匀分布于支架表面,并具有良好的活性；通过MTT测试和碱性磷酸酶检测得出,成骨细胞可以在复合支架中维持良好的功能。CAG细胞包埋基质的制备：首先,通过简单的液滴法制备了具有“核壳”结构的海藻酸钙／明胶(Calcium alginate/gelatin, CAG)胶珠,胶珠内部分布着网状的孔道,宽度约为18 μm。其次,通过机械强度测试和扩散实验得出,胶珠在两周的动态搅拌下可以维持一定的强度,且具有一定的半透性能,可阻止大分子蛋白的通过。最后,通过成骨细胞的包埋实验,验证了胶珠具有较优的生物相容性,适宜作为细胞包埋基质。包埋的脐血 CD34+细胞与仿生壁龛的动态共培养：首先,采用免疫磁珠法,从脐带血中逐步分离出CD34+细胞,通过计数、流式分析得到,CD34+细胞活率较高约为93.2%,CD34阳性表达比例为90.24%,可作为培养的起始细胞。其次,用CAG胶珠包埋CD34+细胞,在动态转瓶中与仿生成骨细胞壁龛进行共培养,同时,设置两个静态的对照组,来研究动态环境和仿生壁龛对CD34+细胞的作用。通过计算包埋收获的CD34+细胞的增殖倍数、活率得出,第10天时,动态共培养条件下,CD34+细胞扩增24.2±2.3倍,并且可以维持84.1%的活率,而两个静态组中,特别是无仿生壁龛支持的情况下,细胞扩增缓慢,且只有约50%的活率。通过流式测定CD34表达率、集落形成单元计数,发现在叁组实验中,CD34的表达率都会下降,但动态实验组下降最慢,在10天时,CD34仍可维持80.3%的表达率；同时,动态实验组细胞的集落形成单元有明显的扩增,在第14天可以扩增11.7±2.5倍,而在静态组的扩增倍数则较低。以上结果,可以充分证明动态环境和仿生壁龛可以共同促进脐血CD34+细胞的增殖,并维持细胞的活性和干性。本文构建了一种新的扩增体系,即动态环境+仿生壁龛+包埋基质体系,来扩增脐血CD34+细胞。该体系不仅强化了营养物质或因子的传递,为CD34+细胞提供及时的营养,同时也通过仿生壁龛为CD34+细胞提供了类体内的微环境,使得CD34+细胞在实现扩增的同时,也可以维持一定的干性。基于基质的包埋隔离,扩增收获的CD34+细胞有望作为有效的移植体应用于临床。(本文来源于《大连理工大学》期刊2016-05-01）
仿生培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景和目的组织工程与再生医学的发展让人们看到了秃发治疗的希望。现如今该领域面临两大挑战:(1)毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)是毛囊重建重要的种子细胞,但目前缺乏能兼顾细胞数量扩增与诱导能力维持的培养方法;(2)毛囊重建缺乏能精细化处理细胞与微环境关系的研究模型。要解决这些问题,都离不开新型生物材料所起的关键作用。近年来,仿生学在生物材料领域的运用极大的丰富了材料的实用性和功能性。仿生生物材料有多种实现形式,如直接选用模仿对象的功能性成分参与材料制备,或使用材料模拟出目标组织特定的结构或理化性能。综上所述,本实验将从两个方面进行研究(1)用仿生细胞膜包裹技术修饰具有类细胞外机制微结构的静电纺纳米纤维,探究其作为新型毛乳头细胞培养支架的可行性;(2)使用水凝胶微球和细胞成分作为功能构件,模块化构建具有仿生结构的大体积毛囊重建研究模型。上述研究以期为组织工程方向的秃发治疗研究提出一个新的综合性解决方案。方法1.细胞膜包裹纳米纤维支架材料的构建及生物功能性评价鼠DPCs作为细胞膜来源。使用静电纺丝和细胞膜包裹技术制备仿生DPCs培养支架材料。通过接触角测量、免疫印迹法、荧光表达等方法鉴定细胞膜包裹结果。使用细胞活死染色和CCK-8等方法对材料的生物相容性及DPCs的增殖表现做出评价。2.支架材料特性对DPCs生物学特性影响的研究我们使用SEM和共聚焦叁维重建等检测方法对DPCs进行形态学观察,通过对DPCs毛发诱导标记物进行基因表达分析、蛋白定性和定量表达和体内毛囊重建实验来探讨培养模型提供的细胞间交互模拟对DPCs生物学特性的影响,并根据结果进行相关机制的初步讨论。3.基于水凝胶微球模块化构建毛囊重建模型的研究使用生物相容性极好的明胶甲基丙烯酸酰氯(GelMA)作为制备水凝胶微球的原料。首先优化微球直径,微球细胞比例等参数。随后,通过悬滴法制备毛乳头细胞球,在transwell小室中依据毛囊及其微环境的结构特征,有序安排载细胞微球、毛乳头细胞球、新生鼠表皮细胞在空间上的分布,构建仿生化毛囊重建模型并进行体内验证。结果1.通过静电纺丝和细胞膜包裹技术,成功构建了仿生纳米纤维支架细胞培养模型,证实该模型有良好的生物相容性并支持DPCs增殖生长。2.仿生支架材料培养的DPCs表达与毛囊诱导能力相关特异性标记物ALP、β-catenin和Versican,且介导细胞间交互的N钙黏蛋白表达增强。经支架材料培养后的DPCs能在体内诱导毛囊再生。3.使用载细胞水凝胶微球、毛乳头细胞球和毛囊细胞作为功能构件,成功在体外构建出大体积含仿生真皮微环境的毛囊重建模型,并在移植裸鼠后实现毛囊再生。结论1.细胞膜包裹的纳米纤维支架材料是一种新型的DPCs培养模型。2.支架材料中仿生结构与细胞表面交互活性的协同作用可有效增强以非聚集性方式生长的DPCs的细胞间交互作用,使其恢复特异性标记物的表达以及诱导毛囊再生的能力,为组织工程毛囊提供了新的种子细胞培养工具。3.基于模块化的组织构建模式能有效恢复毛囊细胞与真皮微环境的位置关系,有助于构建细胞节省型的毛囊重建模型。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
仿生培养论文参考文献
[1].肖杰,高明君,戴宏钦.基于性别意识培养的仿生童装设计研究[J].现代丝绸科学与技术.2019
[2].刘秉承.基于仿生策略的新型生物材料制备及其用于毛乳头细胞培养和毛囊重建的研究[D].南方医科大学.2019
[3].袁礼波,徐永清.软骨仿生环境下的培养在软骨组织工程中的研究进展[J].云南医药.2019
[4].张健,李波,程平言,向祖祥,胡峰.传统与仿生机制高温曲培养过程中生化指标的对比研究[J].酿酒科技.2018
[5].王永振.软骨微组织体外培养及软骨微组织—仿生基质复合体体内体外培养的实验研究[D].北京协和医学院.2018
[6].穆睿,金磊.贴壁组织块反复消化法连续培养人牙髓干细胞及其附着纳米氧化锆仿生支架生长的实验研究[C].第十一次全国口腔修复学学术会议论文汇编.2017
[7].张洋.仿生杂化水凝胶的制备及用于骨髓间充质干细胞体外3D培养的研究[D].北京协和医学院.2017
[8].梁玲玲,袁进,幸正茂,廖洪斐.压力仿生培养对兔角膜内皮细胞调控的研究[J].眼科.2017
[9].马亚会.仿生稳定微环境细胞培养芯片的设计与制作[D].大连理工大学.2016
[10].杨延飞.包埋的脐血CD34~+细胞与仿生壁龛的动态共培养[D].大连理工大学.2016