尿道瘢痕成纤维细胞论文-林文

尿道瘢痕成纤维细胞论文-林文

导读:本文包含了尿道瘢痕成纤维细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:法舒地尔,Rho激酶抑制剂,尿道成纤维细胞,p-MLC

尿道瘢痕成纤维细胞论文文献综述

林文[1](2014)在《法舒地尔对尿道瘢痕成纤维细胞细胞外基质合成的作用及机制》一文中研究指出目的本研究通过Rho激酶抑制剂—法舒地尔对TGF-β1体外刺激下尿道成纤维细胞的增殖、细胞外基质合成以及参与尿道疤痕收缩的细胞骨架运动相关蛋白,如α-肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化肌球蛋白轻链(myosin light chain phosphorylation,p-MLC)、 LIM激酶1(LIM kinase, LIMK-1)、磷酸化丝切蛋白(Cofilinphosphorylation,p-Cofilin),以及I和III胶原蛋白的影响,进一步揭示尿道瘢痕发病机理,为各种纤维化疾病的发病机制提供新的理论和方法。方法取原代人尿道瘢痕成纤维细胞进行培养。实验分成8个组,培养液中分别加入TGF-β1(10ng/ml),法舒地尔(12.5μmol/L,25μmol/L,50μmol/L),TGF-β1(10ng/ml)+法舒地尔(12.5μmol/L,25μmol/L,50μmol/L)以及正常对照组。用MTT比色法检测细胞活力;用流式细胞仪检测细胞的凋亡率;用Western-blot检测各组α-SMA、p-MLC、LIMK-1、p-Cofilin,以及I和III胶原蛋白的表达。结果TGF-β1能显着增加尿道成纤维细胞活力,能诱导α-SMA、p-MLC、LIMK-1、p-Cofilin,以及I和III胶原蛋白的表达,且随TGF-β1浓度的升高其诱导作用呈逐渐增强趋势。随着法舒地尔干预浓度增加,尿道成纤维细胞活力减弱;α-SMA、p-MLC、LIMK-1、p-Cofilin,以及I和III胶原蛋白的表达下降;流式细胞仪检测显示在无TGF-β1作用下,较高浓度法舒地尔组早期凋亡率高于对照组(P<0.05);而加入TGF-β1作用下,法舒地尔对尿道成纤维细胞早期凋亡有明显的浓度依赖性。结论法舒地尔可能通过Rho/Rock信号通路抑制TGF-β1诱导的人尿道成纤维细胞的增殖、转化和分泌细胞外基质(ECM)等生物学行为,并诱导其早期凋亡。使细胞骨架运动相关蛋白α-SMA、p-MLC、LIMK-1、p-Cofilin表达下降,且成剂量依赖性。(本文来源于《福建医科大学》期刊2014-06-01)

孟凡伟,刘玉强,史本康,徐祗顺[2](2011)在《干扰素-α2b对尿道瘢痕成纤维细胞生物学的影响》一文中研究指出目的探讨人重组干扰素-α2b(IFN-α2b)对尿道瘢痕成纤维细胞生长及其胶原合成的影响。方法建立尿道瘢痕成纤维细胞的体外培养模型,采用流式细胞术检测IFN-α2b(浓度分别为0、100、500、1 000 IU/mL,n=6)对其细胞周期的影响;采用羟脯氨酸比色法检测对其胶原合成量的影响。结果加入IFN-α2b 72 h后检测,随着加入IFN-α2b浓度的增加,①S-G2-M期细胞百分数降低(P<0.05);②尿道瘢痕成纤维细胞的胶原含量显着降低(P<0.05)。结论 IFN-α2b是成纤维细胞负性调节因子,降低胶原合成,可有效抑制尿道瘢痕形成。(本文来源于《山东大学学报(医学版)》期刊2011年12期)

马志国[3](2011)在《二氢青蒿素对抑制人尿道瘢痕成纤维细胞增殖的实验研究》一文中研究指出目的:尿道损伤及尿道手术后尿道狭窄发生率较高。至今,临床上尚无切实有效的方法治疗尿道狭窄,始终不能摆脱狭窄-扩张/手术-再狭窄的诊治怪圈,给患者带来极大的痛苦。尿道瘢痕组织是尿道创伤修复过程的产物,没有瘢痕就不会有创面的愈合。但是瘢痕一旦过度生长,就会产生尿道狭窄。目前研究发现:狭窄的尿道组织存在典型的瘢痕过度增生改变。但对引起尿道瘢痕过度增生的影响因素不是很明确,因而缺乏有效的措施阻止尿道狭窄的发生。在对皮肤创面瘢痕形成的研究中发现:创面愈合过程中成纤维细胞表现出强烈的增殖能力以及胶原大量分泌、沉积,所以认为成纤维细胞过度表达及胶原的异常分泌是瘢痕产生的根本原因。成纤维细胞是最主要的修复细胞。青蒿素是我国有自主知识产权的药物,我国正对该药进行大力开发和研究。近年发现青蒿素有较好的抑制瘢痕成纤维细胞增殖作用。本课题旨在通过对二氢青蒿素干预后抑制人尿道瘢痕成纤维细胞增殖的研究,以揭示二氢青蒿素抑制人尿道瘢痕成纤维细胞增殖的机制,为人尿道瘢痕防治开辟新路,为临床预防和治疗尿道瘢痕狭窄提供理论依据。方法:1.采用组织块贴壁法进行尿道瘢痕成纤维细胞的原代培养,使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基,37℃,5%CO2,饱和湿度下培养;描述其生长曲线、分裂指数、形态及波形蛋白表达。2.采用MTT法测定二氢青蒿素对尿道瘢痕成纤维细胞的IC50,采用TUNEL法检测二氢青蒿素作用后尿道瘢痕成纤维细胞凋亡情况,同时采用比色法测定caspase-3、8和9在二氢青蒿素作用后的活化情况,以判断二氢青蒿素作用后是否导致尿道瘢痕成纤维细胞中的caspase活化,并了解是通过哪条通路促进凋亡。结果:1.尿道瘢痕成纤维细胞培养成功率75%(6/8);50~66天可传第一代,以后每5~10天可传一代,传代后生长良好;细胞为长梭形,波形蛋白表达阳性。2.二氢青蒿素对尿道瘢痕成纤维细胞的IC50为145μmol/L。通过TUNEL法检测到145μmol/L二氢青蒿素作用于尿道瘢痕成纤维细胞后可以见到明显的凋亡细胞。通过比色法检测到caspase-9和caspase-3活化,而caspase-8没有活化。结论:1.组织块贴必法培养出的尿道瘢痕成纤维细胞可用作体外实验研究,并为进一步实验提供了物质基础。2.一定浓度的二氢青蒿素能够促进尿道瘢痕成纤维细胞凋亡,并通过活化caspase-9后,再活化caspase-3,而启动凋亡程序。(本文来源于《河北大学》期刊2011-12-01)

孟凡伟[4](2007)在《1.IFN-α2b对尿道瘢痕成纤维细胞生物学活性的影响 2.表现为LUTS的良性前列腺增生症钬激光治疗暨对性功能影响的评价》一文中研究指出背景尿道狭窄是泌尿外科常见疾病,多见于男性。病因上分为叁类:1.先天性尿道狭窄,包括尿道粘膜横膈、尿道瓣膜形成、精阜增生、尿道外口狭窄;2.炎症性尿道狭窄,包括尿道结核、淋病、包茎继发感染或长期留置导尿管可导致非特异性炎症性尿道狭窄;3.外伤性尿道狭窄,由骨盆骨折、骑跨伤、会阴部踢伤等;医源性尿道狭窄,由尿道内器械操作造成,多位于前尿道阴囊阴茎交界处至球膜部尿道之间。目前随着腔内泌尿外科的发展,医源性尿道狭窄的发病率日益增加。尿道损伤部位修复过程中,会经历炎症反应、成纤维细胞增生、基质合成和降解几个过程。而瘢痕组织过度增生则会造成尿道狭窄。尿道瘢痕病理显示尿道狭窄与胶原及其它细胞外基质过度沉积有关。尿道狭窄的治疗有尿道扩张,尿道内冷刀、激光内切开,内支架应用,开放性手术切除狭窄段。尿道扩张、激光、内支架、内切开术、开放性手术的成功率分别为60%,50%,56%,40%和90%,开放性手术要求精细、甚至复杂。临床最常用的方法仍是尿道扩张,但是它的低成功率和高复发率使人们一直在寻求一种新的更有效治疗方法。成纤维细胞在组织的创伤修复中起着重要的作用。1993年,Baskin等成功培养了胎牛的尿道成纤维细胞,确定了尿道成纤维细胞的培养条件、方法、细胞鉴定以及基质成分的测定。目前发现成纤维细胞在肉芽形成、伤口收缩、基质合成、伤口修复、瘢痕形成等方面起着重要作用,可合成Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型胶原,并且可合成纤维连结蛋白(FN),是尿道狭窄发生、发展的重要因素。细胞因子是多种细胞分泌的能调节细胞生长分化、免疫功能、参与炎症发生和创伤愈合的小分子多肽的统称,包括白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子,生长因子等等,组成了相互作用、相互影响的多维网络系统,被认为是继神经介质、激素后,体内第叁大类调节分子,形成神经-内分泌-免疫系统轴心,调节人体的生理活动。TGF-β是已确定的成纤维细胞的强效趋化因子,可以通过旁分泌和自分泌直接或间接、单独或协同、同时或不同时相作用于炎症及修复细胞,产生细胞的趋化性迁移、增生分化、细胞外基质合成及分泌三类重要的生物学效应。TGF-β可直接作用于成纤维细胞对细胞外基质的蛋白合成,Appleton发现体外低浓度的TGF-β即可刺激成纤维细胞合成大量胶原基质;并作用于单核-巨噬细胞、内皮细胞和肥大细胞等,通过这些细胞对成纤维细胞的影响而发挥作用。同时TGF-β还可以增强如纤维结合蛋白及其受体、各类胶原和蛋白酶抑制剂等基因表达,增强结缔组织的收缩。在创面愈合细胞基质的形成和重塑阶段,TGF-β在胶原的合成和降解以及结缔组织取代肉芽组织的过程也起着重要的调节作用。干扰素(interferon,IFN)于1957年被英国伦敦国立医学研究所的AlickIsaacs和Jean Lindenman发现,20世纪60年代后期对人IFN及其临床应用的研究证实:IFN至少有20多种生理功能。作为一类具有抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节等多种生物活性的细胞因子,近来发现干扰素对人体正常皮肤成纤维细胞以及硬皮病皮肤组织成纤维细胞等都具有肯定的胶原合成抑制作用,显示了在纤维化疾病治疗方面的可能前景,Berman于1989年首先报告局部注射IFN-α2b治疗1例瘢痕疙瘩取得良效。以后陆续又有应用IFN治疗肥厚性瘢痕和硬皮病等真皮纤维化疾病取得一定效果的报告。而IFN-α2b能否抑制尿道瘢痕成纤维细胞胶原合成至今尚未见报道,在本研究中,我们将探索IFN-α2b对尿道瘢痕成纤维细胞生物活性的影响。目的:本实验首先进行尿道瘢痕成纤维细胞原代培养及鉴定,通过传代,建立尿道瘢痕成纤维细胞系。观察IFN-α2b对尿道瘢痕成纤维细胞生物学活性的影响,并探讨其作用机制,为临床上应用IFN-α2b治疗尿道狭窄提供实验及理论依据。方法:切取尿道瘢痕通过组织块法进行原代培养,用波形蛋白单克隆抗体进行免疫组化染色鉴定,镜下观察成纤维细胞的生长形态并进行传代、保存。不同剂量IFN-α2b(0 IU/ml,100 IU/ml,500 IU/ml,1000 IU/ml)干预培养成纤维细胞72h,收集细胞及上清液,四甲基偶氮唑蓝(Methylthiazolyl tetrazoliumbromide,MTT)比色法测定检测细胞OD值、显微镜观察细胞形态结构、流式细胞仪(Flow Cytometer,FCM)检测细胞周期,羟脯氨酸比色法检测成纤维细胞培养上清液胶原含量。采用普通逆转录聚合酶链反应(Reverse-transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测TGF-β1、Ⅰ及Ⅲ型胶原mRNA的基因表达水平的变化。结果:尿道瘢痕成纤维细胞为贴壁生长型细胞,在倒置显微镜下观察,呈放射状生长,而后逐渐融合成片,细胞呈梭形或不规则多角形,胞质向外伸出2~3个长短不一的突起,细胞界限清楚,生长排列较规律,多呈放射状、编织状或漩涡状走行,5~7天可传代1次。波形蛋白阳性表达。随着IFN-α2b浓度的增加,尿道瘢痕成纤维细胞表现为1、OD值均下降(p<0.01),IFN-α2b的浓度与OD值改变存在剂量-效应关系;2、细胞形态结构上差异不明显;3、处于G0+G1期的细胞数百分比上升,S期和G2+M期的细胞数百分比都下降(p<0.01);4、~3H-脯氨酸掺入量逐渐减少(p<0.01);5、TGF-β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA呈明显下调(p<0.01)。结论:1、IFN-α2b可在细胞水平呈剂量依赖性抑制尿道瘢痕成纤维细胞增殖,并在分子水平呈剂量依赖性抑制其TGF-β1、Ⅰ及Ⅲ型胶原mRNA的表达。2、IFN-α2b可多环节抑制胶原合成和分泌。3、在抑制尿道瘢痕形成有着广阔的应用前景。背景下尿路症状(lower urinary tract symptoms,LUTS)是临床常见征候群。老年男性多见,多数是由于前列腺良性增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)造成。随着泌尿外科腔内手术的开展,医源性尿道狭窄也越来也多,更多的后尿道狭窄的年轻患者也表现为下尿路综合征。近来,有研究指出由前列腺增生导致的下尿路综合征可伴有勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)。有严重下尿路梗阻的患者44.2%发生过不成功的性生活,而中度梗阻的患者则有13.1%出现。更多的资料显示,下尿路梗阻导致的性功能障碍可包括射精障碍、性欲下降、满意度降低。越来越多的临床资料显示,前列腺的各种治疗方法均或多或少的对性功能产生一定的影响。其对性功能的影响主要包括勃起功能的下降,射精功能的下降,逆行射精,射精量减少,勃起或射精疼痛不适,性欲改变等。欧洲的一项统计资料表明开放前列腺摘除术、经尿道前列腺电切术(Transurethral resection ofprostate,TURP)、经尿道前列腺切开术(Transurethral incision of prostate,TUIP)术后勃起功能障碍发生率分别为15.6%,13.6%和4.6%。药物治疗对性功能的影响与手术比较相对较小。我们认为评价一项前列腺手术的临床疗效必须包括其对性功能的影响,人们在选择前列腺的治疗方式时,也应该综合考虑各种治疗方法对性功能的影响,尤其在我国人口老龄化进程不断加速和生活质量日益提高的今天,更具现实意义。钬激光前列腺剜除术(Ho:YAG laser enucleation of the prostate,HOLEP)是一项新发展起来的应用于泌尿外科的腔内技术。HOLEP可以安全有效地快速消除尿路梗阻症状,具有出血少、住院时间短、留置尿管时间短等优势。但作为泌尿外科应用的一种新技术,目前国内外关于HOLEP对术后患者性功能的影响尚未见报道,我们特做了以下的研究来探讨老年男性BPH患者下尿路梗阻症状与性功能的相关性,评估HOLEP对老年男性性功能的影响。目的:探讨老年男性BPH患者下尿路梗阻症状与性功能的相关性,评估HOLEP对老年男性性功能的影响。方法:选择自2004年1月至2006年9月行钬激光前列腺剜除术108例BPH患者,平均年龄69.2(54~82)。分别于术前、术后6个月进行随访,随访内容包括:一般情况(患者年龄、有无慢性病、前列腺体积),国际前列腺症状评分表(IPSS),性功能调查问卷(包括性欲、勃起硬度、射精量、射精疼痛或不适感及对性生活的满意度)。分别对患者术前及术后6个月的性功能进行评估,以临床客观指标及病人满意度为评判标准。结果:患者年龄同LUTS呈正相关,r=0.313,(p<0.01)。患者年龄与IIEF呈负相关,r=-0.478,(p<0.01)。而LUTS与患者IIEF呈负相关,r=-0.669,(P<0.01)。术前55%患者对性欲满意,HOLEP术后6个月57%满意,23.5%的患者术前后均无性欲。术前37%的患者对勃起满意,术后6个月为40%。术前30%患者对性生活满意,术后6个月32%满意,而术前阳痿率为33%,术后6个月则升至35%。术后有正常性生活的患者70%出现逆向射精,精液量减少、不粘稠。结论:1.随着年龄增长,男性患者LUTS发生率升高,性功能下降。2.钬激光治疗前列腺增生不会影响患者性功能,但易造成逆向射精和精液量减少。(本文来源于《山东大学》期刊2007-05-17)

黄翔,申吉泓,李虹,王坤杰,魏大鹏[5](2002)在《尿道瘢痕成纤维细胞培养及药物对其生长的影响》一文中研究指出目的 探讨丹参和川芎嗪对尿道瘢痕成纤维细胞生长的影响。方法 建立尿道瘢痕成纤维细胞的体外培养 ,并以此为模型研究丹参和川芎嗪对其生长的影响及其作用机理。结果  1丹参和川芎嗪能使尿道瘢痕成纤维细胞形态发生明显改变 ,细胞由梭形变为椭圆形。 2丹参和川芎嗪均可抑制尿道瘢痕成纤维细胞的增殖 ,当抑制率为 5 0 %时 ,药物浓度分别为 2 .5 mg/ m l和 75μg/ ml。其机制与药物抑制细胞分裂密切相关 ,而并非是使细胞产生坏死和降解。结论 丹参和川芎嗪可望成为有效的瘢痕抑制剂 ,在尿道瘢痕狭窄的治疗中发挥作用(本文来源于《华西医科大学学报》期刊2002年02期)

尿道瘢痕成纤维细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨人重组干扰素-α2b(IFN-α2b)对尿道瘢痕成纤维细胞生长及其胶原合成的影响。方法建立尿道瘢痕成纤维细胞的体外培养模型,采用流式细胞术检测IFN-α2b(浓度分别为0、100、500、1 000 IU/mL,n=6)对其细胞周期的影响;采用羟脯氨酸比色法检测对其胶原合成量的影响。结果加入IFN-α2b 72 h后检测,随着加入IFN-α2b浓度的增加,①S-G2-M期细胞百分数降低(P<0.05);②尿道瘢痕成纤维细胞的胶原含量显着降低(P<0.05)。结论 IFN-α2b是成纤维细胞负性调节因子,降低胶原合成,可有效抑制尿道瘢痕形成。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

尿道瘢痕成纤维细胞论文参考文献

[1].林文.法舒地尔对尿道瘢痕成纤维细胞细胞外基质合成的作用及机制[D].福建医科大学.2014

[2].孟凡伟,刘玉强,史本康,徐祗顺.干扰素-α2b对尿道瘢痕成纤维细胞生物学的影响[J].山东大学学报(医学版).2011

[3].马志国.二氢青蒿素对抑制人尿道瘢痕成纤维细胞增殖的实验研究[D].河北大学.2011

[4].孟凡伟.1.IFN-α2b对尿道瘢痕成纤维细胞生物学活性的影响2.表现为LUTS的良性前列腺增生症钬激光治疗暨对性功能影响的评价[D].山东大学.2007

[5].黄翔,申吉泓,李虹,王坤杰,魏大鹏.尿道瘢痕成纤维细胞培养及药物对其生长的影响[J].华西医科大学学报.2002

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