本文主要研究内容
作者周丹蕾(2019)在《胞红蛋白的巯基修饰与光谱检测》一文中研究指出:胞红蛋白(Cygb)是珠蛋白家族中一个近期发现的血红素蛋白,含有血红素辅基,能在卟啉环的铁原子上可逆地结合氧分子,在储存和传递氧中起着重要作用,其C38和C83处含有半胱氨酸。对Cygb上半胱氨酸进行修饰可影响其结合氧的功能。用化学试剂4,4’-二吡啶二硫(4-PDS)、 N-乙基马来酰亚胺(NEM)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和二硫苏糖醇(DTT)对纯化的胞红蛋白进行修饰,以分别生成胞红蛋白分子内二硫键(Cygb-SS)、胞红蛋白硫醚键(Cygb-SC)、分子间二硫键(Cygb-SSG)及胞红蛋白自由巯基(Cygb-SH)。修饰效果用4,4’-二吡啶基二硫(4-PDS)光谱法进行检测,该方法通过测量修饰的胞红蛋白中自由巯基的含量来计算修饰率。在Cygb-SS和Cygb-SC样品中检测到巯基浓度比样品浓度的十分之一还低,说明胞红蛋白上的自由巯基已被4-PDS和NEM所占据; Cygb-SSG样品中检测到巯基浓度与蛋白浓度相当,说明Cygb分子中有一个巯基参加了反应,由于Cygb空间位阻的存在,另一个巯基没有改变仍以自由状态存在; Cygb-SH样品中巯基浓度是蛋白浓度的两倍说明一个Cygb分子中含有两个自由巯基。通过分别检测这四种Cygb中自由巯基的含量便可知道其修饰产率。结果表明上述化学试剂均成功地修饰了胞红蛋白,修饰率达到90%以上。将4-PDS光谱法用于检测胞红蛋白化学修饰效果,通过测半胱氨酸巯基浓度验证了该方法的可行性。综上说明4-PDS光谱检测法准确可靠,是对经典Ellman试剂法的补充,更适用于吸收峰在410~420 nm的化合物巯基含量测定。
Abstract
bao gong dan bai (Cygb)shi zhu dan bai jia zu zhong yi ge jin ji fa xian de xie gong su dan bai ,han you xie gong su fu ji ,neng zai bu lin huan de tie yuan zi shang ke ni de jie ge yang fen zi ,zai chu cun he chuan di yang zhong qi zhao chong yao zuo yong ,ji C38he C83chu han you ban guang an suan 。dui Cygbshang ban guang an suan jin hang xiu shi ke ying xiang ji jie ge yang de gong neng 。yong hua xue shi ji 4,4’-er bi ding er liu (4-PDS)、 N-yi ji ma lai xian ya an (NEM)、yang hua xing gu guang gan tai (GSSG)he er liu su tang chun (DTT)dui chun hua de bao gong dan bai jin hang xiu shi ,yi fen bie sheng cheng bao gong dan bai fen zi nei er liu jian (Cygb-SS)、bao gong dan bai liu mi jian (Cygb-SC)、fen zi jian er liu jian (Cygb-SSG)ji bao gong dan bai zi you qiu ji (Cygb-SH)。xiu shi xiao guo yong 4,4’-er bi ding ji er liu (4-PDS)guang pu fa jin hang jian ce ,gai fang fa tong guo ce liang xiu shi de bao gong dan bai zhong zi you qiu ji de han liang lai ji suan xiu shi lv 。zai Cygb-SShe Cygb-SCyang pin zhong jian ce dao qiu ji nong du bi yang pin nong du de shi fen zhi yi hai di ,shui ming bao gong dan bai shang de zi you qiu ji yi bei 4-PDShe NEMsuo zhan ju ; Cygb-SSGyang pin zhong jian ce dao qiu ji nong du yu dan bai nong du xiang dang ,shui ming Cygbfen zi zhong you yi ge qiu ji can jia le fan ying ,you yu Cygbkong jian wei zu de cun zai ,ling yi ge qiu ji mei you gai bian reng yi zi you zhuang tai cun zai ; Cygb-SHyang pin zhong qiu ji nong du shi dan bai nong du de liang bei shui ming yi ge Cygbfen zi zhong han you liang ge zi you qiu ji 。tong guo fen bie jian ce zhe si chong Cygbzhong zi you qiu ji de han liang bian ke zhi dao ji xiu shi chan lv 。jie guo biao ming shang shu hua xue shi ji jun cheng gong de xiu shi le bao gong dan bai ,xiu shi lv da dao 90%yi shang 。jiang 4-PDSguang pu fa yong yu jian ce bao gong dan bai hua xue xiu shi xiao guo ,tong guo ce ban guang an suan qiu ji nong du yan zheng le gai fang fa de ke hang xing 。zeng shang shui ming 4-PDSguang pu jian ce fa zhun que ke kao ,shi dui jing dian Ellmanshi ji fa de bu chong ,geng kuo yong yu xi shou feng zai 410~420 nmde hua ge wu qiu ji han liang ce ding 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自光谱学与光谱分析的周丹蕾,发表于刊物光谱学与光谱分析2019年09期论文,是一篇关于胞红蛋白论文,化学修饰论文,光谱检测论文,光谱学与光谱分析2019年09期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自光谱学与光谱分析2019年09期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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