导读:本文包含了植物油体表达体系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:油体,油体蛋白,表达体系,植物生物反应器
植物油体表达体系论文文献综述
刘昱辉,贾士荣[1]（2003）在《植物油体表达体系的研究进展》一文中研究指出介绍了植物种子中油体和油体蛋白(oleosin)的结构特征及其编码基因的调控,阐述了用植物油体表达体系这一新型植物生物反应器生产目的蛋白的研究进展和前景。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2003年05期）
刘昱辉[2]（2001）在《植物油体表达体系的建立及Profilin2维管束特异表达启动子的区段缺失分析》一文中研究指出本论文的目的是：（1）建立在植物油体中表达外源蛋白的表达体系，以简化目的蛋白的分离纯化过程；（2）对维管束特异表达的Profilin2启动子进行区段分析，寻找控制维管束特异表达的区段和元件，为在抗维管束病害的基因工程中使抗病基因产物直接在维管束中特异表达并对病原体建立防御体系，以节省能量，同时增加转基因作物的安全性。 为建立油体表达体系，本论文进行了以下研究：（1）分离和克隆了油菜Oleosin基因的启动子及编码芝麻Oleosin蛋白的结构基因。（2）克隆了鲑鱼降钙素的突变基因msCT[Ser~6，des-Leu~(19)]，将其插在芝麻油体蛋白Oleosin基因的C端。据文献报道，鲑鱼降钙素（sCT）在治疗缺钙症等中有明显的疗效。（3）构建了由油菜Oleosin基因启动子驱动的Oleosin-Calcitonin融合蛋白植物表达载体，转化油菜和棉花，获得了转基因植株。转基因油菜经PCR检测，证明降钙素基因已整合到油菜基因组中。转基因棉花经PCR-Southern和Western检测，证明msCT基因在棉花中整合并在油体中表达。目前已得到T_2代转基因棉花株系44个，由于在田间对T_1、T_2代植株的叶片用高浓度（5000 ppm）的卡那霉素溶液涂抹，故筛选出的Kan~R株理论上应为高表达的个体。用植物油体表达体系在转基因棉籽油中表达鲑鱼降钙素，在文献中尚未见报道。 在Profilin2维管束特异表达启动子的区段分析中，根据Pfn全长启动子（Pfn1.7，-1667～-1bp）及其5’端4种不同长度（Pfn1.4、Pfn1.2、Pfn1.0、Pfn0.6）的缺失分析，检测gus基因在转基因伽蓝菜中的表达，可将Pfn全长启动子分成叁部分：区段A，-1667～-1380 bp，缺失该区段（Pfn1.4），由维管束特异表达变为组成型表达，由此推测在该区段内存在维管束特异表达的元件。区段B，-1153～-597bp，强烈抑制gus基因的表达，推测在该区段中存在负调控因子。区段C，-597～-1bp，即Pfn0.6，除在维管束中表达较强外，还在薄壁细胞中表达，故可认为该区段是Profilin2的基本启动子。进一步分析发现，Profilin2启动子在-1391～-1388 bp处及-565～-562bp处各有一个bZIP蛋白结合位点的核心序列ACGT（bZIP蛋白是植物中最丰富的一类转录因子）；-1647～-1640bp处有一个与控制菜豆苯丙氨酸氨裂合酶2（PAL2）维管束特异表达的序列AC-I（CCCACCTACC）相类似的序列（CCACCTAC）。为弄清ACGT及AC-I序列在Profilin2启动子中是否调控维管束的特异表达，我们又分别构建了P1（-1667～- 刃 县1403，含 AC－l）、PZ（如27一羽80，含 ACGT）、P3（－1667～羽80，含 ACGT和AC－1）、P4（－1667一1627，含AC－l）、PS（－1403一1376，含ACGT）等五个不同区段与80 hp CaMV35S最小启动子（P35Sm）连接的融合启动子，构建植物表达载体，转化烟草和伽蓝菜。在烟草短暂表达中，PZ（含ACGT）启动子的表达强度明显高于n（含AC0，推测bZIP蛋白结合序列ACGT在调控表达强度方面可能起更重要的作用。转基因烟草的稳定表达结果表明，P135Smfus构建物（含AC工序列）仅在茎、叶维管束中检测到GUS表达。鉴于355最小启动子在植物的所有发育阶段都不能表达，故说明AC．I作为一个顺式作用元件k七lementX 确能调控维管柬的特异表达。其余构建物因目前仅得到转基因的小芽，尚不能进行检测，故其对稳定表达的影响尚待进一步研究。据作者所知，这是首次对profilinZ启动子进行的区段缺失和基元序列分析。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2001-07-01）
植物油体表达体系论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本论文的目的是：（1）建立在植物油体中表达外源蛋白的表达体系，以简化目的蛋白的分离纯化过程；（2）对维管束特异表达的Profilin2启动子进行区段分析，寻找控制维管束特异表达的区段和元件，为在抗维管束病害的基因工程中使抗病基因产物直接在维管束中特异表达并对病原体建立防御体系，以节省能量，同时增加转基因作物的安全性。 为建立油体表达体系，本论文进行了以下研究：（1）分离和克隆了油菜Oleosin基因的启动子及编码芝麻Oleosin蛋白的结构基因。（2）克隆了鲑鱼降钙素的突变基因msCT[Ser~6，des-Leu~(19)]，将其插在芝麻油体蛋白Oleosin基因的C端。据文献报道，鲑鱼降钙素（sCT）在治疗缺钙症等中有明显的疗效。（3）构建了由油菜Oleosin基因启动子驱动的Oleosin-Calcitonin融合蛋白植物表达载体，转化油菜和棉花，获得了转基因植株。转基因油菜经PCR检测，证明降钙素基因已整合到油菜基因组中。转基因棉花经PCR-Southern和Western检测，证明msCT基因在棉花中整合并在油体中表达。目前已得到T_2代转基因棉花株系44个，由于在田间对T_1、T_2代植株的叶片用高浓度（5000 ppm）的卡那霉素溶液涂抹，故筛选出的Kan~R株理论上应为高表达的个体。用植物油体表达体系在转基因棉籽油中表达鲑鱼降钙素，在文献中尚未见报道。 在Profilin2维管束特异表达启动子的区段分析中，根据Pfn全长启动子（Pfn1.7，-1667～-1bp）及其5’端4种不同长度（Pfn1.4、Pfn1.2、Pfn1.0、Pfn0.6）的缺失分析，检测gus基因在转基因伽蓝菜中的表达，可将Pfn全长启动子分成叁部分：区段A，-1667～-1380 bp，缺失该区段（Pfn1.4），由维管束特异表达变为组成型表达，由此推测在该区段内存在维管束特异表达的元件。区段B，-1153～-597bp，强烈抑制gus基因的表达，推测在该区段中存在负调控因子。区段C，-597～-1bp，即Pfn0.6，除在维管束中表达较强外，还在薄壁细胞中表达，故可认为该区段是Profilin2的基本启动子。进一步分析发现，Profilin2启动子在-1391～-1388 bp处及-565～-562bp处各有一个bZIP蛋白结合位点的核心序列ACGT（bZIP蛋白是植物中最丰富的一类转录因子）；-1647～-1640bp处有一个与控制菜豆苯丙氨酸氨裂合酶2（PAL2）维管束特异表达的序列AC-I（CCCACCTACC）相类似的序列（CCACCTAC）。为弄清ACGT及AC-I序列在Profilin2启动子中是否调控维管束的特异表达，我们又分别构建了P1（-1667～- 刃 县1403，含 AC－l）、PZ（如27一羽80，含 ACGT）、P3（－1667～羽80，含 ACGT和AC－1）、P4（－1667一1627，含AC－l）、PS（－1403一1376，含ACGT）等五个不同区段与80 hp CaMV35S最小启动子（P35Sm）连接的融合启动子，构建植物表达载体，转化烟草和伽蓝菜。在烟草短暂表达中，PZ（含ACGT）启动子的表达强度明显高于n（含AC0，推测bZIP蛋白结合序列ACGT在调控表达强度方面可能起更重要的作用。转基因烟草的稳定表达结果表明，P135Smfus构建物（含AC工序列）仅在茎、叶维管束中检测到GUS表达。鉴于355最小启动子在植物的所有发育阶段都不能表达，故说明AC．I作为一个顺式作用元件k七lementX 确能调控维管柬的特异表达。其余构建物因目前仅得到转基因的小芽，尚不能进行检测，故其对稳定表达的影响尚待进一步研究。据作者所知，这是首次对profilinZ启动子进行的区段缺失和基元序列分析。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
植物油体表达体系论文参考文献
[1].刘昱辉,贾士荣.植物油体表达体系的研究进展[J].农业生物技术学报.2003
[2].刘昱辉.植物油体表达体系的建立及Profilin2维管束特异表达启动子的区段缺失分析[D].中国农业科学院.2001