导读:本文包含了鞭毛再生论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:杜氏盐藻,糖原合成酶激酶3,鞭毛再生
鞭毛再生论文文献综述
毛丽红,李庆华,韩康,王瑞莉,龚方华[1]（2013）在《杜氏盐藻糖原合成酶激酶3cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的功能》一文中研究指出目的:克隆杜氏盐藻糖原合成酶激酶3(GSK3)基因序列并探讨它在鞭毛再生中的作用。方法:根据杜氏盐藻转录组测序得到的GSK3的2个片段设计上下游引物,提取盐藻总RNA进行RT-PCR,以此为模板扩增2个片段之间的序列。采用3'RACE方法扩增杜氏盐藻GSK3基因3'端序列,通过杜氏盐藻消减杂交模板扩增得到5'端序列。采用pH休克法去除杜氏盐藻鞭毛,通过实时荧光定量PCR观察鞭毛再生过程中GSK3基因在转录水平上的变化。结果:获得一段长为2116bp的GSK3 cDNA片段,其中包含737bp的3'UTR和1158bp的开放阅读框。实时荧光定量PCR结果表明,GSK3的mRNA转录水平在鞭毛再生过程中明显升高。结论:杜氏盐藻GSK3基因与鞭毛再生密切相关。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2013年02期）
朱立强[2]（2013）在《杜氏盐藻kinesin家族蛋白dsKIF4 cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的作用》一文中研究指出纤毛／鞭毛作为引发多条信号通路活化的重要细胞器,在肿瘤的发生中发挥重要作用,而鞭毛组装和肿瘤发生的分子机制目前还不清楚。鞭毛内运输机制((Intraflagellar transport, IFT)是目前研究比较清楚的鞭毛组装／解聚机制,驱动蛋白kinesin和马达蛋白dynein是鞭毛内运输系统的动力蛋白,它们的异常严重导致鞭毛组装/解聚的异常。而驱动蛋白kinesin家族蛋白在鞭毛组装过程中在鞭毛再生中发挥着重要作用。有研究表明kinesin-2在鞭毛组装过程中与货物蛋白结合沿着微管将鞭毛组分运输至鞭毛顶端。目前kinesin家族蛋白其他成员在鞭毛再生过程中的相关报道还很少。杜氏盐藻(Dunaliella salina)是一种无细胞壁的单细胞真核绿藻,具有一对等长的鞭毛,长约13μm,具有典型的9+2结构。显微镜下即可观察到其鞭毛长度和运动性的变化。本课题组以无细胞壁具有双鞭毛的单细胞真核生物杜氏盐藻作为模式生物细胞器来研究纤毛在食管鳞癌发生中的作用。本研究的目的是扩增得到一个kinesin家族蛋白,并研究其在鞭毛再生过程中的作用。方法(1)通过设计简并引物扩增杜氏盐藻KIF4cDNA片段。(2)采用5’巢式PCR和3’巢式PCR扩增dsKIF4cDNA片段全长。(3)采用实时荧光定量PCR方法dsKIF4mRNA在鞭毛再生过程中的变化情况。(4)构建dsKIF4保守序列的原核表达载体,诱导His-dsKIF4蛋白的表达,经纯化后制备其抗体。(5)统计学分析：荧光定量PCR结果分析,采用2-ΔΔCt法对目的基因的表达量(mRNA相对丰度)进行分析,△△Ct=△Ct实验组-△Ct对照组,△Ct目的基因=Ct目的基因-Ct内参基因,每组实验做叁个平行,每个样品重复叁次。然后应用SPSS18.0软件进行分析,并采用t检验和方差分析。P<0.05表示具有统计学意义。结果(1)根据KIF蛋白的保守性设计一对简并引物扩增得到一个720bp的杜氏盐藻KIF4cDNA片段。(2)5'RACE和3'RACE分别得到一个1134bp和960bp的cDNA片段,经拼接后得到一个长度为2214bp的dsKIF4cDNA片段,编码734个氨基酸,与团藻的InvA Kinesin、衣藻的kinesin family protein以及人的KIF4C的同源性分别为56%,58%和42%。(3)实时荧光定量PCR显示dsKIF4基因在鞭毛再生过程中表达量显着增高(P<0.05)。(4)为了制备其抗体,我们选取包含马达结构域的476个氨基酸进行外源重组蛋白的表达。通过3mM IPTG37℃诱导3h得到分子量约为50kDa的重组蛋白,纯化后已制备其抗体。结论(1)本研究通过简并引物扩增得到一个长2214bp的杜氏盐藻kinesin家族蛋白KIF4的cDNA片段,编码734个氨基酸。(2)实时荧光定量PCR显示dsKIF4基因在鞭毛再生过程中表达量显着增高,说明其参与鞭毛的再生过程。(3)为了制备其抗体,我们选取包含马达结构域的476个氨基酸进行外源重组蛋白的表达。经表达纯化后已用于其抗体制备。(本文来源于《郑州大学》期刊2013-02-01）
鞭毛再生论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
纤毛／鞭毛作为引发多条信号通路活化的重要细胞器,在肿瘤的发生中发挥重要作用,而鞭毛组装和肿瘤发生的分子机制目前还不清楚。鞭毛内运输机制((Intraflagellar transport, IFT)是目前研究比较清楚的鞭毛组装／解聚机制,驱动蛋白kinesin和马达蛋白dynein是鞭毛内运输系统的动力蛋白,它们的异常严重导致鞭毛组装/解聚的异常。而驱动蛋白kinesin家族蛋白在鞭毛组装过程中在鞭毛再生中发挥着重要作用。有研究表明kinesin-2在鞭毛组装过程中与货物蛋白结合沿着微管将鞭毛组分运输至鞭毛顶端。目前kinesin家族蛋白其他成员在鞭毛再生过程中的相关报道还很少。杜氏盐藻(Dunaliella salina)是一种无细胞壁的单细胞真核绿藻,具有一对等长的鞭毛,长约13μm,具有典型的9+2结构。显微镜下即可观察到其鞭毛长度和运动性的变化。本课题组以无细胞壁具有双鞭毛的单细胞真核生物杜氏盐藻作为模式生物细胞器来研究纤毛在食管鳞癌发生中的作用。本研究的目的是扩增得到一个kinesin家族蛋白,并研究其在鞭毛再生过程中的作用。方法(1)通过设计简并引物扩增杜氏盐藻KIF4cDNA片段。(2)采用5’巢式PCR和3’巢式PCR扩增dsKIF4cDNA片段全长。(3)采用实时荧光定量PCR方法dsKIF4mRNA在鞭毛再生过程中的变化情况。(4)构建dsKIF4保守序列的原核表达载体,诱导His-dsKIF4蛋白的表达,经纯化后制备其抗体。(5)统计学分析：荧光定量PCR结果分析,采用2-ΔΔCt法对目的基因的表达量(mRNA相对丰度)进行分析,△△Ct=△Ct实验组-△Ct对照组,△Ct目的基因=Ct目的基因-Ct内参基因,每组实验做叁个平行,每个样品重复叁次。然后应用SPSS18.0软件进行分析,并采用t检验和方差分析。P<0.05表示具有统计学意义。结果(1)根据KIF蛋白的保守性设计一对简并引物扩增得到一个720bp的杜氏盐藻KIF4cDNA片段。(2)5'RACE和3'RACE分别得到一个1134bp和960bp的cDNA片段,经拼接后得到一个长度为2214bp的dsKIF4cDNA片段,编码734个氨基酸,与团藻的InvA Kinesin、衣藻的kinesin family protein以及人的KIF4C的同源性分别为56%,58%和42%。(3)实时荧光定量PCR显示dsKIF4基因在鞭毛再生过程中表达量显着增高(P<0.05)。(4)为了制备其抗体,我们选取包含马达结构域的476个氨基酸进行外源重组蛋白的表达。通过3mM IPTG37℃诱导3h得到分子量约为50kDa的重组蛋白,纯化后已制备其抗体。结论(1)本研究通过简并引物扩增得到一个长2214bp的杜氏盐藻kinesin家族蛋白KIF4的cDNA片段,编码734个氨基酸。(2)实时荧光定量PCR显示dsKIF4基因在鞭毛再生过程中表达量显着增高,说明其参与鞭毛的再生过程。(3)为了制备其抗体,我们选取包含马达结构域的476个氨基酸进行外源重组蛋白的表达。经表达纯化后已用于其抗体制备。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
鞭毛再生论文参考文献
[1].毛丽红,李庆华,韩康,王瑞莉,龚方华.杜氏盐藻糖原合成酶激酶3cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的功能[J].郑州大学学报(医学版).2013
[2].朱立强.杜氏盐藻kinesin家族蛋白dsKIF4cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的作用[D].郑州大学.2013