本文主要研究内容
作者果冲（2019）在《带有β-tail的QueF-Like酶的表达及纯化研究》一文中研究指出：古细菌(Archara)又被称之为古生菌。它们与原核生物既有很多的相似之处,同时也拥有真核生物的某些特征。古菌分两大类,广古菌(Euryarchaeota)以及泉古菌(Crenarchaeota)。古嘌苷(Archaeosine,G+)是在古菌tRNA中被发现的一种高度修饰的核苷。经研究发现,在泉古菌中参与古嘌苷合成途径中的QueF-like酶与细菌的QueF酶具有同源性。人们在细菌中克隆了 QueF基因,并且通过对QueF的催化活性的研究,发现了 QueF具有腈类还原酶活性。而腈类还原酶具有良好的应用前景。因此研究来自泉古菌的QueF-like酶的活性也具有重要意义。根据报道,带有β-tail的融合蛋白可以在细菌中表达,与β折叠纤维化短肽混合时,可以共同诱导组装成纳米纤维结构,进而提高酶的催化效率及稳定性。所以本实验选取泉古菌Pvrobaculum calidifontis的QueF-like基因,在其C-端加上β-tail的编码序列,由大连的宝生物公司合成全序列。本研究通过基因重组技术,把已合成的全序列从pUC-19中切除,然后插入到载体pET-28a上,重新构建了重组表达载体pET-28a-QueF-Like-β-tail,然后在大肠杆菌中对带有β-tail的QueF-like酶蛋白进行了表达,并对其进行了纯化。SDS-PAGE电泳检测表示,目的蛋白已成功表达。此研究为后续的QueF-like酶的纳米纤维的组装打下了基础。
Abstract
gu xi jun (Archara)you bei chen zhi wei gu sheng jun 。ta men yu yuan he sheng wu ji you hen duo de xiang shi zhi chu ,tong shi ye yong you zhen he sheng wu de mou xie te zheng 。gu jun fen liang da lei ,an gu jun (Euryarchaeota)yi ji quan gu jun (Crenarchaeota)。gu piao gan (Archaeosine,G+)shi zai gu jun tRNAzhong bei fa xian de yi chong gao du xiu shi de he gan 。jing yan jiu fa xian ,zai quan gu jun zhong can yu gu piao gan ge cheng tu jing zhong de QueF-likemei yu xi jun de QueFmei ju you tong yuan xing 。ren men zai xi jun zhong ke long le QueFji yin ,bing ju tong guo dui QueFde cui hua huo xing de yan jiu ,fa xian le QueFju you jing lei hai yuan mei huo xing 。er jing lei hai yuan mei ju you liang hao de ying yong qian jing 。yin ci yan jiu lai zi quan gu jun de QueF-likemei de huo xing ye ju you chong yao yi yi 。gen ju bao dao ,dai you β-tailde rong ge dan bai ke yi zai xi jun zhong biao da ,yu βshe die qian wei hua duan tai hun ge shi ,ke yi gong tong you dao zu zhuang cheng na mi qian wei jie gou ,jin er di gao mei de cui hua xiao lv ji wen ding xing 。suo yi ben shi yan shua qu quan gu jun Pvrobaculum calidifontisde QueF-likeji yin ,zai ji C-duan jia shang β-tailde bian ma xu lie ,you da lian de bao sheng wu gong si ge cheng quan xu lie 。ben yan jiu tong guo ji yin chong zu ji shu ,ba yi ge cheng de quan xu lie cong pUC-19zhong qie chu ,ran hou cha ru dao zai ti pET-28ashang ,chong xin gou jian le chong zu biao da zai ti pET-28a-QueF-Like-β-tail,ran hou zai da chang gan jun zhong dui dai you β-tailde QueF-likemei dan bai jin hang le biao da ,bing dui ji jin hang le chun hua 。SDS-PAGEdian yong jian ce biao shi ,mu de dan bai yi cheng gong biao da 。ci yan jiu wei hou xu de QueF-likemei de na mi qian wei de zu zhuang da xia le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自内蒙古农业大学的果冲，发表于刊物内蒙古农业大学2019-10-08论文，是一篇关于古细菌论文,表达论文,纯化论文,内蒙古农业大学2019-10-08论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自内蒙古农业大学2019-10-08论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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