肖妍:PMA-qPCR方法检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌活菌的研究论文

肖妍:PMA-qPCR方法检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌活菌的研究论文

本文主要研究内容

作者肖妍,刘芸宏,高贵田,曹凡,马燕萍,赵武奇,雷玉山(2019)在《PMA-qPCR方法检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌活菌的研究》一文中研究指出:将叠氮溴化丙啶(PMA)与实时荧光定量(qPCR)相结合定量检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌(Psa)活菌的数量。通过优化PMA最佳浓度、暗孵育时间、曝光时间,确定PMA-qPCR区别溃疡菌活、死菌的最佳条件。结果表明,Psa经98.3℃沸水浴处理13min可完全致死,Psa死菌浓度为1×107 CFU/mL时PMA与死菌共价交联的最佳浓度为105μg/mL,最佳暗育时间为8min,最佳曝光时间为20min,在此条件下死菌DNA无扩增,而对活菌DNA扩增无影响;Psa质粒标准品建立的线性回归方程为Y=-3.220 4x+37.73,R2=0.995 5,最低可检出6.39×102拷贝/μL的溃疡菌;建立的PMA-qPCR方法最低可检出2.38×102拷贝/μL的溃疡菌;采用人工染菌枝条样品的最低检出限为6.30×104 CFU/mL,与菌落计数检测结果相符。

Abstract

jiang die dan xiu hua bing ding (PMA)yu shi shi ying guang ding liang (qPCR)xiang jie ge ding liang jian ce shan xi mi hou tao hui yang jun you shi bing yuan jun (Psa)huo jun de shu liang 。tong guo you hua PMAzui jia nong du 、an fu yo shi jian 、bao guang shi jian ,que ding PMA-qPCRou bie hui yang jun huo 、si jun de zui jia tiao jian 。jie guo biao ming ,Psajing 98.3℃fei shui yu chu li 13minke wan quan zhi si ,Psasi jun nong du wei 1×107 CFU/mLshi PMAyu si jun gong jia jiao lian de zui jia nong du wei 105μg/mL,zui jia an yo shi jian wei 8min,zui jia bao guang shi jian wei 20min,zai ci tiao jian xia si jun DNAmo kuo zeng ,er dui huo jun DNAkuo zeng mo ying xiang ;Psazhi li biao zhun pin jian li de xian xing hui gui fang cheng wei Y=-3.220 4x+37.73,R2=0.995 5,zui di ke jian chu 6.39×102kao bei /μLde hui yang jun ;jian li de PMA-qPCRfang fa zui di ke jian chu 2.38×102kao bei /μLde hui yang jun ;cai yong ren gong ran jun zhi tiao yang pin de zui di jian chu xian wei 6.30×104 CFU/mL,yu jun la ji shu jian ce jie guo xiang fu 。

论文参考文献

  • [1].陕西猕猴桃汁嗜酸耐热菌污染能力评测与多样性分析[J]. 张江波,刘兴华,岳田利,袁亚宏.  农业机械学报.2015(02)
  • [2].又到硕果累累时——膨化果蔬生产线将大有作为[J]. 谢春里.  农产品加工.2004(06)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自食品与机械的肖妍,刘芸宏,高贵田,曹凡,马燕萍,赵武奇,雷玉山,发表于刊物食品与机械2019年04期论文,是一篇关于猕猴桃溃疡菌论文,活菌检测论文,食品与机械2019年04期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自食品与机械2019年04期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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