导读:本文包含了蛋白分子伴侣论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:嗜热四膜虫,核定位,组蛋白分子伴侣,核分裂
蛋白分子伴侣论文文献综述
连荫杰,郝惠娟,陈虹宇,薄涛,许静[1]（2019）在《嗜热四膜虫组蛋白分子伴侣的鉴定与功能分析》一文中研究指出核小体是真核生物中染色质的基本结构和功能单位,由DNA与组蛋白八聚体构成。组蛋白的储存、转运及翻译后修饰由组蛋白分子伴侣协助完成的。四膜虫细胞具有核的二态性,包括生殖系的小核和体细胞的大核。功能不同的大小核为研究组蛋白靶向转运提供了良好的模式体系。本研究鉴定了嗜热四膜虫不同的组蛋白分子伴侣,组蛋白H3分子伴侣Nrp1,组蛋白H2A-H2B的分子伴侣Pob3,染色质组装因子Caf1复合物。不同的组蛋白分子伴侣在大核和小核均有定位,蛋白亲和纯化和质谱分析鉴定了不同的相互作用因子。基因敲减分析发现突变体细胞生长期出现小核不均等分裂,大核无丝分裂异常,逐出体增多;在有性生殖时期,出现小核拉伸异常和配子核无法选择,突变体细胞无法完成正常的有性生殖进程。表明不同组蛋白分子伴侣的正常表达对于四膜虫的有性生殖过程中细胞核的减数分裂是必需的。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议暨学会成立四十周年论文集》期刊2019-10-24）
王石,高素素,刘小缦,张修国[2]（2019）在《新西兰匍柄霉(Stemphylium eturmiunum)组蛋白分子伴侣ASF1调控有性发育的功能研究》一文中研究指出新西兰匍柄霉(Stemphylium eturmiunum)是一种重要的丝状真菌,是能够进行有性生殖的少数匍柄霉属真菌之一。前人研究表明,asf1在DNA复制、DNA损伤修复和基因转录激活等生物学过程具有重要作用。然而关于asf1在生物发育方面的功能还鲜有报道。(1)本研究通过农杆菌介导的遗传转化方法将asf1基因从新西兰匍柄霉野生型基因组中敲除,得到asf1基因的缺失突变体,并对突变体进行了回补实验,获得asf1基因的回补转化子;asf1缺失突变体表型发生变化,asf1基因的回补转化子的表型基本与野生型一致。(2)为了验证asf1基因功能的保守性,将asf1基因转入大孢粪壳菌(Sordaria macrospora)asf1基因缺失突变体中,并获得asf1基因异源转化子,转化子表现出有性型特征,与野生型表型一致。(3)对匍柄霉野生型和asf1基因缺失突变体的转录组进行测序并分析,并初步界定了6个关键调控基因,分别为04320(脯氨酸脱氢酶)、10206(尿囊酸透性酶)、01950(热激蛋白)、03521(GTP结合蛋白gtr1)、10302(胆碱脱氢酶)和02026(转录调控因子)。将这6个关键调控基因沉默,得到单基因的沉默突变体,突变体表型发生变化。(4)对初步界定的6个关键调控基因,与ASF1、组蛋白H3和H4酵母双杂交实验和pull down实验,最后获得ASF1互作蛋白02026(转录调控因子)、03521(GTP结合蛋白gtr1),组蛋白H4互作蛋白02026(转录调控因子)、04320(脯氨酸脱氢酶)、03521(GTP结合蛋白gtr1)、10302(胆碱脱氢酶)、01950(热激蛋白)。为了确定ASF1、组蛋白H3和H4与6个基因的互作情况,本研究正在做CO-IP实验,做进一步互作验证。通过转录组分析界定6个关键调控基因对新西兰匍柄霉典型种有性或无性发育的调控作用,还需要深入研究。研究asf1基因通过介导组蛋白的组装与解凝对其它基因的表达进行调控,进而对新西兰匍柄霉的有性及无性发育产生非常重要的影响,为深入研究匍柄霉属真菌的有性及无性发育提供了理论指导。(本文来源于《多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要》期刊2019-08-03）
李路[3]（2019）在《中华绒螯蟹精子发生过程中组蛋白H1及其变体和分子伴侣的表达特征》一文中研究指出中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)隶属节肢动物门(Arthropod)、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、方蟹科(Grapsidae),是我国重要的经济蟹类之一。雄性中华绒螯蟹精子核为非浓缩核,染色质不同于一般动物精子核的致密结构,且形成机制未知。组蛋白作为核小体的重要组成部分,其翻译后修饰产物、组蛋白变体对蛋白质和DNA结合程度、DNA转录水平产生影响,进而调控染色质或染色体的结构,发挥所需生物学功能。同时在体内,分子伴侣对组蛋白与DNA形成正确构象的核小体具有辅助作用。为探究中华绒螯蟹精子发生过程中非浓缩核形成的原因,本文以保守性低的组蛋白H1为切入点,研究其变体组蛋白H1.1等、分子伴侣核质蛋白1-假基因9(Nucleophosmin1 pseudogene9,NPM1P9)、核小体组装蛋白1样1(Nucleosome assembly protein 1 like 1,NAP1L1)在精子发生过程的表达和动态分布特征。同时,研究组蛋白H1与分子伴侣NPM1P9间的相互作用,旨在从分子和细胞水平进行全面探究。本研究利用分子克隆技术,构建H1、H1.1和NPM1P9的表达载体并表达相应蛋白;利用单克隆抗体制备技术获得组蛋白H1单克隆抗体(Monoclonal antibody H1,McAb-H1)和组蛋白H1.1单克隆抗体(Monoclonal antibody H1.1,McAb-H1.1);通过免疫印迹、免疫荧光技术探究它们在精子发生过程中的表达及动态分布特征;利用实时荧光定量PCR探究H1与H1.1基因在心脏、肌肉、肝胰腺、精巢中的相对表达;通过生物信息学分析组蛋白H1和H1.1的氨基酸组成和蛋白结构;利用免疫共沉淀技术探究组蛋白H1与其分子伴侣NPM1P9间的相互作用。实验结果表明:成功构建H1、H1.1和NPM1P9的表达载体,经转化、诱导、纯化,成功在体外表达组蛋白H1、H1.1和NPM1P9蛋白;经小鼠免疫、细胞融合获得McAb-H1和McAb-H1.1,其效价均达到1:204800以上。在中华绒螯蟹精子发生过程中,精巢中存在组蛋白H1、磷酸化修饰的组蛋白H1.1;精子中可能存在组蛋白H1、H1.1相应剪接变体H1-delta-like、H1-delta。在精巢中,H1.1基因较H1基因表达量高,且呈显着性差异(P<0.05);H1.1基因在精巢中的表达量较心脏、肌肉、肝胰腺中的高,且呈极显着性差异(P<0.01)。精子发生过程中,NPM1P9、NAP1L1蛋白从细胞质向细胞核转移,且精子中可能存在NPM1P9变体;同时,组蛋白H1和其分子伴侣NPM1P9存在相互作用。本研究为解释中华绒螯蟹精子发生过程中,组蛋白H1、H1变体及其分子伴侣对精子核染色质的包装、非浓缩核的形成奠定基础;同时,为研究其他十足目动物精子提供参考和借鉴。(本文来源于《河北大学》期刊2019-06-01）
刘盈盈[4]（2019）在《耐辐射异常球菌亲水蛋白DohL具有类分子伴侣和核酸内切酶功能并参与氧化胁迫保护》一文中研究指出大量研究发现胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA)与非生物胁迫抗性相关。根据蛋白保守结构域特点,LEA分为7个家族,其中LEA3家族含有11个氨基酸组成的保守基序(motifs)。文献报道几乎所有LEA3蛋白为无序蛋白,具有类分子伴侣功能。本论文前期研究发现,耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)中含有3个与LEA同源的蛋白(DR1172,DR0105和DR1372),但其胁迫抗性机制尚不清楚。本研究中,我们鉴定了一个Deinococcus属特有的LEA3蛋白DR1172,该蛋白含有一个由11个氨基酸组成的保守基序的亲水结构域HD(Hydrophilic Domain,HD),为亲水蛋白,二级结构测定为有序结构,因此将其命名为DohL(Deinococcus ordered hydrophilic LEA3,DohL)。为研究DohL作用机制,我们从DohL结构、生理功能展开研究,主要研究结果如下:1.圆二色谱结果表明,DohL是一种具有有序结构的全新的LEA3蛋白,其α-螺旋度为26.9%,远高于已报道的LEA3蛋白。在50%甘油和50%叁氟乙醇(TFE)诱导后,DohL的α-螺旋度分别增加至93.4%和99.8%,二级结构更加有序。氧化胁迫下,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和数字PCR(ddPCR)结果显示,dohL表达量下降;而蛋白质免疫印记(Western Blot)结果显示,DohL表达量增加,推测该蛋白可能在蛋白水平发挥功能。2.表型结果显示,dohL突变后导致菌株氧化抗性减弱,表明DohL的功能与氧化胁迫抗性相关。氧化胁迫下,dohL基因的缺失导致菌体细胞过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)基因表达和酶活显着下降,进一步表明DohL蛋白能够增强耐辐射异常球菌的氧化抗性。3.HD亲水结构域均能不同程度回补突变株ΔdohL氧化抗性,尤其是回补株Com-DHD16(含有16个motifs),Com-dohL(含有8个motifs)和Com-HD(含有8个motifs)几乎完全回补突变株氧化抗性,回补株Com-THD4-1(前端4个motifs)和Com-THD4-2(后端4个motifs)回补能力相近。5个重组蛋白过表达菌株能够增强大肠杆菌的氧化胁迫抗性,抗氧化能力强弱与突变株回补实验结果一致。结果表明:HD亲水结构域对DohL发挥氧化功能至关重要,且HD的保守基序数量与抗氧化能力存在相关性。4.蛋白-蛋白互作结果显示,DohL与HD能够结合乳酸脱氢酶(LDH),氧化胁迫后,结合力显着增强。酶活和聚合度实验进一步表明,氧化胁迫下5种HD亲水结构域均能够保护氧化胁迫条件下LDH活性并防止其发生聚集。推测,DohL和HD具有类分子伴侣功能,且HD亲水结构域对DohL类分子伴侣功能的发挥至关重要。5.DohL核酸酶活性结果显示,DohL在不需要ATP的情况下能够切割环状质粒;氧化胁迫条件下,DohL催化活性高于T7核酸内切酶。推测DohL可能在清除氧化胁迫条件下DNA断裂片段中具有重要功能。综上所述,DohL是一个具有类分子伴侣和核酸内切酶功能的有序蛋白,在耐辐射异常球菌适应极端环境过程中可能发挥重要作用。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）
韩佳慧[5]（2019）在《耐辐射异常球菌类分子伴侣蛋白DohL有序性及抗逆特性研究》一文中研究指出耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)对氧化和冷冻等胁迫具有极强的耐受性,大量实验表明,以无规卷曲为二级结构的类分子伴侣蛋白LEA3参与到该菌的抗逆过程。前期研究表明,耐辐射异常球菌的类分子伴侣蛋白DohL属于LEA3蛋白家族,具有LEA3蛋白家族的特征,即含有8个由11个氨基酸组成的保守基序(motifs),但与已报道的以无规卷曲为二级结构的LEA3蛋白完全不同,DohL蛋白能够形成以α-螺旋为主的天然有序的二级结构,该结构的有序性可能与其抗逆功能以及耐辐射异常球菌适应极端环境有关。本研究利用定点突变的方法降低DohL蛋白二级结构的有序性,通过测定圆二色谱,构建重组大肠杆菌菌株以及回补菌株,阐明DohL蛋白有序性与抗逆性的关系。主要研究进展如下:1.生物信息学分析发现,DohL蛋白N端序列(1-103位)为Deinococcus属保守序列,可能是其折迭成有序二级结构的关键区域。分析结果显示,亮氨酸(L)、色氨酸(W)和异亮氨酸(I)位点高度保守,且上述3种氨基酸能够促成蛋白形成有序二级结构。因此,本研究将61位的W和75位的I突变为脯氨酸(P),该突变蛋白命名为WIP,将14-17位4个连续L、61位的W和75位的I突变为P,该突变蛋白命名为LWIP。软件预测突变后的2个蛋白有序性均降低,与DohL蛋白相比,有序性从高到低依次为DohL>WIP>LWIP。进一步利用圆二色谱技术测定DohL及突变蛋白二级结构的有序性,结果显示,3个蛋白的有序性分别为DohL:82.5%;WIP:62.2%;LWIP:51.4%,有序性与预测结果一致。2.构建重组大肠杆菌进行蛋白异源表达和表型分析,在氧化和冷冻胁迫条件下,表达突变蛋白的重组菌株比表达DohL蛋白的重组菌生存能力减弱。为进一步研究蛋白保护能力的变化,体外分别表达并纯化了DohL、WIP和LWIP 3个蛋白,同时测定DohL及2个突变蛋白在反复冻融和H_2O_2冲击条件下对LDH(乳酸脱氢酶)的保护作用。体外酶活实验表明,以上3种蛋白在胁迫条件下均能保护LDH的活性,具有类分子伴侣功能,保护作用强弱程度为DohL>WIP>LWIP,表明DohL蛋白保护作用随有序性降低而减弱。3.为验证DohL及2个突变蛋白的抗逆功能,构建了3个回补菌株Com-dohl、Com-wip、Com-lwip,并进行高浓度H_2O_2胁迫处理。实验结果显示,3个回补株均能够不同程度回补突变株耐受氧化胁迫的能力,且3个回补株的回补能力强弱为Com-dohl>Com-wip>Com-lwip,说明DohL蛋白的抗逆功能随有序性降低而减弱,进而导致菌株氧化胁迫抗性减弱。进一步测定菌株体内总抗氧化能力,测定在80 mM H_2O_2处理条件下野生型、突变株及回补株体内总抗氧化能力。结果表明,Com-wip和Com-lwip回补株相比Com-dohl回补株总抗氧化能力减弱,说明DohL蛋白有序性降低影响其抗逆功能,进而降低菌株氧化胁迫抗性,由此推测,高度保守位点上的氨基酸对DohL蛋白的抗逆功能具有重要作用。综上所述,耐辐射异常球菌DohL蛋白N端区域是该蛋白有序折迭的关键区域,DohL蛋白的抗逆功能随蛋白的有序性降低而减弱。研究结果说明耐辐射异常球菌中氨基酸的组成和比例有利于DohL蛋白结构的正确折迭和抗逆功能的发挥,可能是菌株适应极端环境的结果。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）
窦杰[6]（2019）在《组蛋白分子伴侣ASF1调控小鼠植入前胚胎发育机理研究》一文中研究指出ASF1(Anti-Silencing Factor 1)是一种组蛋白分子伴侣,在哺乳动物中具有ASF1A和ASF1B两个亚型。在功能方面,对核小体组装、DNA损伤修复以及转录调控具有重要的意义。然而,当前针对ASF1在小鼠植入前胚胎发育过程中的功能所知甚少。因此,本研究重点探索对了ASF1在小鼠受精卵发育过程以及植入前胚胎发育过程中的功能。首先,我们对ASF1A和ASF1B在小鼠受精卵中动态进行了检测。通过获取小鼠受精卵各个发育阶段(受精后2 h、4 h、6 h、8 h、10 h)的细胞,利用免疫荧光技术对细胞核内蛋白进行定量研究。免疫荧光结果显示,ASF1A和ASF1B在小鼠受精卵各个发育阶段均有表达,并且随着雌雄原核的逐渐形成,二者在细胞核内的含量逐渐增加。其次我们通过免疫荧光以及实时荧光定量PCR对ASF1A和ASF1B在小鼠植入前胚胎发育各个阶段细胞核内的含量以及mRNA总量进行了检测。免疫荧光结果显示,ASF1A和ASF1B在卵子和植入前胚胎各个阶段均有表达,但具有不同的变化动态。ASF1A细胞核中的含量在桑椹胚阶段最低,而ASF1B在四细胞阶段细胞核中的含量最低。实时荧光定量PCR结果表明,AF1A和ASF1B mRNA总量在受精后显着减少,在桑椹胚阶段出现表达高峰。此外ASF1B mRNA总量在合子阶段也处于较高水平。接着,我们对ASF1在小鼠植入前胚胎发育过程中的功能进行了研究。利用ASF1A和ASF1B特异性的siRNA以及Morpholino(MO)分别从转录水平以及翻译水平对ASF1A和ASF1B进行了敲减,进一步研究ASF1在小鼠植入前胚胎发育过程中的作用。实验结果表明,ASF1A敲低对小鼠植入前胚胎发育影响很小,但ASF1B敲低导致小鼠植入前胚胎发育率显着降低。最后,因为ASF1B的敲低会导致植入前胚胎发育率显着降低,并且先前研究表明ASF1对H3K56具有乙酰化作用。因此我们通过MO将ASF1B进行敲低,收集囊胚,利用免疫荧光技术,探究H3K56乙酰化水平的变化状况。结果表明,ASF1B的敲低会导致囊胚阶段组蛋白H3K56乙酰化水平降低。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-04-23）
王佳丽[7]（2019）在《辅助分子伴侣SlBAG蛋白在番茄抗病反应中的功能研究》一文中研究指出灰葡萄胞菌(Botrytis cinerea),即灰霉菌,是一种腐生病原真菌,它的营养方式为死体营养型,能够侵染上百种单子叶及双子叶植物引起灰霉病,严重危害作物生产、蔬菜质量以及水果保鲜。为了进一步探究番茄对灰霉菌的抗病机制,我们在本实验中采用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)、基因过表达等技术,研究了一个辅助分子伴侣调节因子蛋白家族SlBAG在番茄对灰霉菌抗性反应中的功能以及可能的作用机制。分子伴侣(molecularchaperones)可以在蛋白质折迭、蛋白质质量控制、多亚基蛋白复合体的组装以及蛋白质的运输等过程中发挥重要作用。BAG(Bcl-2-associated athanogene)家族是一个进化上高度保守的辅助分子伴侣蛋白家族,在多种植物、哺乳动物以及酵母菌中均已经发现了其同系物的存在。BAG家族蛋白具有共同的保守结构域,可以调控热激蛋白的功能,也可以与一系列转录因子和信号蛋白等形成复合体从而在各种生理过程中发挥作用。人们在哺乳动物中关于BAG家族的研究开始较早并且已经非常的广泛和深入;在拟南芥和水稻中已经分别鉴定到7个和6个BAG家族成员,它们不仅能够在植物的生长发育过程中发挥调控作用,还具有调节植物对非生物胁迫以及对腐生真菌抗病性的功能;但是在番茄中,BAG家族蛋白在对生物或非生物胁迫以及生长发育等过程中发挥的作用还不是很清楚。在本研究中,我们在番茄基因组数据库中搜索,利用生物信息学方法鉴定并克隆到10个番茄SlBAG分子伴侣家族成员。蛋白保守结构域分析表明,这10个番茄SlBAG蛋白均包含一个保守的BAG结构域,并且预测的番茄SlBAG蛋白亚细胞定位是细胞核、线粒体或叶绿体。我们利用VIGS技术对10个番茄SlBAG基因分别进行沉默,并对沉默植株接种B.cinerea。结果发现,SlBAG5沉默后增强了植株对灰霉菌的抗性;通过瞬时过表达以及病毒介导的过表达技术,发现SlBAG5过表达后能够引发活性氧积累以及细胞死亡等现象;利用实时荧光定量检测我们发现,SlBAG5的沉默和过表达还会影响B.cinere 诱导的JA/ET途径相关响应基因(SlNR1、SlLapA1、SlMYC2和SlJAZ7)以及SA途径相关响应基因(SlPR1b、SlPRP2)的表达水平;通过Luminol化学发光法我们检测到,SlBAG5的沉默和过表达能够改变chitin介导的PTI反应,如ROS的产生以及PTI相关基因SlPTI5、SlLRR22、SlERKY28的表达水平等。除此之外,我们还利用酵母筛库的方法,筛选到可能与SlBAG5互作的8个蛋白,并通过双分子荧光互补实验、CO-IP等其他实验方法进一步验证它们之间的互作。(本文来源于《浙江大学》期刊2019-03-01）
余东山,翁天豪,胡晨雨,李艳华,吴南屏[8]（2018）在《分子伴侣、膜转运和信号转导相关蛋白调控扎伊尔型埃博拉病毒样颗粒的复制并与病毒蛋白及核酸产生相互作用》一文中研究指出研究背景和目的:埃博拉病毒(EBOV)生命周期涉及众多宿主因子。目前己发现部分宿主因子参与EBOV生命周期过程,但仍有诸多宿主因子与病毒的相互作用及病理过程不清楚。方法:我们构建了模拟EBOV野毒株生命周期的病毒样颗粒体外复制系统(EBOV-trVLPs);合成靶向负链RNA病毒生命周期的宿主siRNA库(涵盖病毒入侵、脱壳、融合、复制、集合及出芽等重要环节);应用RNAi方法筛选与trVLPs生命周期密切相关宿主因子;并进(本文来源于《浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会论文汇编》期刊2018-11-16）
王侃,刘嘉琪,刘晓灵,高莹莹,陈杰[9]（2018）在《分子伴侣蛋白质二硫键异构酶对Tau蛋白错误折迭的调控》一文中研究指出蛋白质二硫键异构酶(PDI)具有折迭酶和分子伴侣等多种生物学功能。胞内的蛋白质发生错误折迭后会使内质网受到损害,此时细胞内的PDI的表达水平就会上调,发挥保护细胞的功能。我们发现PDI的a和a’结构域的CGHC的半胱氨酸在其与人Tau蛋白相互作用中起到关键作用:野生型PDI与Tau蛋白单体结合形成1:1复合物;PDI a结构域的C53/56A和a’结构域的C397/400A突变体与Tau蛋白单体结合形成2:1复合物;而a和a’结构域的四个半胱氨酸C53/56/397/400A突变体则丧失了与Tau蛋白单体相互作用的能力。野生型PDI与二硫键异构酶活性缺失突变体C4A都具有分子伴侣活性,能够抑制Tau蛋白在体外的积聚,且随PDI浓度升高抑制效果更加明显,具有浓度依赖性,在可诱导细胞模型中,我们使用confocal实验和双分子荧光互补实验(BiFC)证实神经细胞中过表达的野生型PDI、C4A突变体都与异常磷酸化修饰的Tau蛋白在内质网中存在相互作用,细胞实验表明C4A突变体和野生型PDI一样可以抑制细胞水平Tau蛋白的磷酸化修饰和积聚。这些结果说明PDI在抑制Tau蛋白磷酸化修饰和积聚过程中发挥的主要是分子伴侣的作用。此外,PDI可以显着降低由Tau蛋白寡聚体引发的细胞毒性。上述研究有益于阐释PDI抑制Tau蛋白的磷酸化修饰和积聚的分子机制及其在蛋白质质量控制中的作用,并为治疗阿尔茨海默病提供了一种新的策略。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集》期刊2018-10-25）
裴云山,刘晓黎,李从刚[10]（2018）在《分子伴侣蛋白PDI作用机理的NMR研究》一文中研究指出半个多世纪以前,人们发现了分子伴侣能够催化蛋白质的正确折迭。而蛋白质二硫键异构酶(Proteindisulfideisomerase,PDI)到1994年才被王志珍院士等人发现其不仅有二硫键异构酶的活性,还具有分子伴侣的功能~([1])。PDI从发现以来,人们不断发掘其在细胞内的各种功能,并且在2012年得到了晶体结构~([2]),然而PDI作为分子伴侣发挥其折迭/去折迭底物(本文来源于《2018第二十届全国波谱学学术年会会议论文摘要集》期刊2018-10-12）
蛋白分子伴侣论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
新西兰匍柄霉(Stemphylium eturmiunum)是一种重要的丝状真菌,是能够进行有性生殖的少数匍柄霉属真菌之一。前人研究表明,asf1在DNA复制、DNA损伤修复和基因转录激活等生物学过程具有重要作用。然而关于asf1在生物发育方面的功能还鲜有报道。(1)本研究通过农杆菌介导的遗传转化方法将asf1基因从新西兰匍柄霉野生型基因组中敲除,得到asf1基因的缺失突变体,并对突变体进行了回补实验,获得asf1基因的回补转化子;asf1缺失突变体表型发生变化,asf1基因的回补转化子的表型基本与野生型一致。(2)为了验证asf1基因功能的保守性,将asf1基因转入大孢粪壳菌(Sordaria macrospora)asf1基因缺失突变体中,并获得asf1基因异源转化子,转化子表现出有性型特征,与野生型表型一致。(3)对匍柄霉野生型和asf1基因缺失突变体的转录组进行测序并分析,并初步界定了6个关键调控基因,分别为04320(脯氨酸脱氢酶)、10206(尿囊酸透性酶)、01950(热激蛋白)、03521(GTP结合蛋白gtr1)、10302(胆碱脱氢酶)和02026(转录调控因子)。将这6个关键调控基因沉默,得到单基因的沉默突变体,突变体表型发生变化。(4)对初步界定的6个关键调控基因,与ASF1、组蛋白H3和H4酵母双杂交实验和pull down实验,最后获得ASF1互作蛋白02026(转录调控因子)、03521(GTP结合蛋白gtr1),组蛋白H4互作蛋白02026(转录调控因子)、04320(脯氨酸脱氢酶)、03521(GTP结合蛋白gtr1)、10302(胆碱脱氢酶)、01950(热激蛋白)。为了确定ASF1、组蛋白H3和H4与6个基因的互作情况,本研究正在做CO-IP实验,做进一步互作验证。通过转录组分析界定6个关键调控基因对新西兰匍柄霉典型种有性或无性发育的调控作用,还需要深入研究。研究asf1基因通过介导组蛋白的组装与解凝对其它基因的表达进行调控,进而对新西兰匍柄霉的有性及无性发育产生非常重要的影响,为深入研究匍柄霉属真菌的有性及无性发育提供了理论指导。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蛋白分子伴侣论文参考文献
[1].连荫杰,郝惠娟,陈虹宇,薄涛,许静.嗜热四膜虫组蛋白分子伴侣的鉴定与功能分析[C].中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议暨学会成立四十周年论文集.2019
[2].王石,高素素,刘小缦,张修国.新西兰匍柄霉(Stemphyliumeturmiunum)组蛋白分子伴侣ASF1调控有性发育的功能研究[C].多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要.2019
[3].李路.中华绒螯蟹精子发生过程中组蛋白H1及其变体和分子伴侣的表达特征[D].河北大学.2019
[4].刘盈盈.耐辐射异常球菌亲水蛋白DohL具有类分子伴侣和核酸内切酶功能并参与氧化胁迫保护[D].中国农业科学院.2019
[5].韩佳慧.耐辐射异常球菌类分子伴侣蛋白DohL有序性及抗逆特性研究[D].中国农业科学院.2019
[6].窦杰.组蛋白分子伴侣ASF1调控小鼠植入前胚胎发育机理研究[D].内蒙古大学.2019
[7].王佳丽.辅助分子伴侣SlBAG蛋白在番茄抗病反应中的功能研究[D].浙江大学.2019
[8].余东山,翁天豪,胡晨雨,李艳华,吴南屏.分子伴侣、膜转运和信号转导相关蛋白调控扎伊尔型埃博拉病毒样颗粒的复制并与病毒蛋白及核酸产生相互作用[C].浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会论文汇编.2018
[9].王侃,刘嘉琪,刘晓灵,高莹莹,陈杰.分子伴侣蛋白质二硫键异构酶对Tau蛋白错误折迭的调控[C].中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集.2018
[10].裴云山,刘晓黎,李从刚.分子伴侣蛋白PDI作用机理的NMR研究[C].2018第二十届全国波谱学学术年会会议论文摘要集.2018