导读:本文包含了阳性造血祖细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:结直肠癌肝转移,结肠癌肿瘤干细胞,骨髓源性前体细胞,无血清培养基
阳性造血祖细胞论文文献综述
吴丽火[1]（2018）在《CD133阳性造血祖细胞对结肠癌肿瘤干细胞生物学特性的影响》一文中研究指出目的:结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,肝转移是结直肠癌最常见的远处转移形式。本研究拟研究骨髓来源造血前体细胞对结肠癌肿瘤干细胞(CCSCs)的生物学特性的影响,从细胞学水平初步探讨结直肠癌肝转移发生前的相关分子机制。方法:本研究先通过对结肠癌细胞株HCT116经无血清培养基(SFM)培养法后所形成的细胞亚群进行鉴定,探究选用该SFM培养法作为分离CCSCs的可行性;继在体外将CD133+造血祖细胞与CCSCs亚群共趋化培养,观察CCSCs的有关生物学特性(迁移、侵袭和克隆增殖能力等)的变化。将结肠癌细胞株HCT116置于SFM中培养,观察“肿瘤细胞球”的形成过程;运用流式细胞仪分别检测普通培养基(SSM)中单层细胞与SFM中肿瘤细胞球两组细胞中CD133和CD24阳性细胞的比例;运用免疫荧光法分别检测两组细胞中CD133和CD24蛋白表达量的差异。并将CCSCs亚群细胞与CD133+造血祖细胞(HPCs)在体外按20:1的比例共培养48h后,观察CD133+HPCs对CCSCs亚群细胞的各种影响:运用CCK-8和平板克隆法观察对CCSCs增殖特性的影响;运用Transwell小室检测其细胞迁移和侵袭特性的改变;分别运用qPCR法和Western blot法检测其与肿瘤侵袭转移相关的标志物(MMP-9、VEGF)的基因和蛋白的表达情况。结果:结肠癌细胞株HCT116可在SFM法培养下悬浮成球状生长并可稳定传代;流式细胞仪检测表明肿瘤细胞球中的干细胞标记分子CD133(P=0.000)和CD24(P=0.001)阳性细胞含量均显着高于单层细胞;免疫荧光检测显示肿瘤细胞球中CD133和CD24表达量也较单层细胞多。CCK-8和平板克隆法实验结果均显示在共培养条件下,HPCs可诱导增强CCSCs亚群细胞的增殖能力和克隆形成能力(P=0.031);Transwell小室迁移实验和侵袭实验显示:HPCs可增强CCSCs亚群细胞的迁移能力(P=0.011)和侵袭能力(P=0.001);qPCR和Western blot结果显示:CCSCs细胞亚群内的部分标志物(MMP-9、VEGF)基因(P=0.000;P=0.005)和蛋白质表达水平均明显增强。结论:SFM培养法可用于培育和分离结肠癌细胞株HCT116中的CCSCs亚群;CD133+HPCs可诱导和增强CCSCs亚群细胞的迁移、侵袭、增殖等能力。(本文来源于《福建医科大学》期刊2018-05-01）
王定平[2]（2012）在《VEGFR1阳性造血祖细胞在大肠癌肝转移中的作用》一文中研究指出研究背景及目的大肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升的趋势。远处转移是导致大肠癌患者死亡最主要的原因之一，其中肝脏是远处转移的主要靶器官，大约20%~25%的大肠癌患者在原发肿瘤检出的同时已并发有肝转移；即使是根治术后，亦有8%~30%的患者将出现肝转移，8%~10%的患者出现肺转移，因此早期发现和防治远处转移是提高大肠癌患者生存率的关键因素之一。研究表明，肿瘤的转移是一个多步骤发生、多因素参与、多环节调控的复杂过程，目前虽然关于肿瘤转移的研究在逐渐深入，但对肿瘤转移的确切分子机制仍然不甚清楚，尤其是肿瘤的器官特异性定向转移，即归巢性转移的机理和调控仍然是研究的热点和难点。2005年Kaplan等首次报道了VEGFR1阳性造血祖细胞（VEGFR1~+Hematopoietic Progenitor Cell,VEGFR1~+HPC）即VEGFR1~+CD133~+双阳性细胞簇，在肿瘤的定向转移中起着重要的作用。研究表明，在肿瘤转移发生前，VEGFR1~+HPC先于肿瘤细胞到达预转移部位，改变靶器官的微环境以适应肿瘤细胞的生长，并进一步通过特定的配体-受体结合引导肿瘤细胞到达靶器官形成转移灶。本文通过观察VEGFR1~+HPC在人大肠癌组织及转移灶中的分布表达，探讨VEGFR1~+HPC与大肠癌转移的关系；进一步，建立大肠癌细胞移植肝转移动物模型，动态观察在转移发生过程中肿瘤组织、肝脏、及骨髓中VEGFR1~+HPC的含量变化，探讨VEGFR1~+HPC在大肠癌定向肝转移中的作用。方法1.临床研究：选择四川省肿瘤医院2006年~2011年收治的大肠癌并发肝转移行同期或分期切除且保存完整的手术标本37例，以及非肿瘤性肠段切除患者6例作为研究对象，应用免疫组织化学染色检测VEGFR1、CD133在大肠癌及转移淋巴结、无转移淋巴结、肝脏转移灶和非肿瘤性淋巴结中的表达分布情况，以同蜡块的癌旁组织作为对照。2.动物实验：首先采用人结肠癌细胞HCT-116肿瘤组织行盲肠原位瘤块包埋法构建大肠癌原位移植肝转移模型；在该模型的基础上，分别于瘤块接种前及接种后2周、4周、6周、8周处死小鼠，以免疫组化学染色法检测肿瘤组织及肝转移灶(或肝组织)中VEGFR1、CD133的表达，应用流式细胞术定量检测肝脏、及骨髓中VEGFR1~+HPC（即VEGFR1~+CD133~+双阳性细胞）的含量变化。结果1.在大肠癌组织、癌旁组织中均可发现VEGFR1~+HPC细胞簇，且大肠癌组织阳性率明显高于癌旁组织(P <0.05)；在肝脏转移组织中，VEGFR1~+HPC呈高表达，阳性率也显着高于癌旁组织(P <0.05)；在6例非肿瘤性淋巴结中未见VEGFR1~+HPC细胞，而在大肠癌转移淋巴结、无转移淋巴结中均可发现VEGFR1~+HPC阳性细胞簇，主要位于淋巴结边缘的被膜下、边缘窦附近。转移淋巴结多呈片状的强阳性或阳性表达，而非转移淋巴结多呈散在的点状、灶状阳性或弱阳性分布，且转移淋巴结组阳性率高于非转移组(P <0.05)。2. HCT-116人结肠癌细胞瘤块盲肠原位移植后2周、4周、6周、8周处死裸鼠后解剖发现，盲肠部位均有肿瘤形成，直径1~3.5cm大小不等，缘肠管呈侵润性生长。在种植后2周、4周，未发现有肝、肺、脾等处转移病灶形成；种植后第6周，开始出现肝转移，部分有还同时伴有肺转移、脾脏转移、或腹腔转移。3.动物模型中免疫组化检测显示，在瘤块接种前裸鼠肝脏没有VEGFR1~+HPC细胞簇；在接种后2周、4周肝转移灶形成前，肝脏就可见少量VEGFR1~+HPC细胞簇出现，呈点状、灶状分布，主要分布于汇管区附近；在接种后6周、8周出现肝脏、脾脏、肺脏等处转移时，VEGFR1~+HPC细胞较前明显增多，呈片状分布，主要位于转移灶、癌旁组织、肝脏汇管区等处。4.流式细胞术检测显示，在瘤块接种前、接种后2周、4周、6周、8周，肝脏、骨髓中VEGFR1~+HPC细胞数目均逐次递增，组间统计有显着差异（P <0.05）。结论1.在大肠癌原发灶及肝脏转移灶中VEGFR1~+HPC表达明显高于癌旁组织；转移淋巴结及非转移淋巴结中均可见VEGFR1~+HPC表达，但转移淋巴结VEGFR1~+HPC细胞簇含量明显增加，且主要分布于淋巴结边缘的被膜下、边缘窦附近，与肿瘤常见转移部位一致；提示在发生淋巴结转移前，VEGFR1~+HPC已经在预转移灶部位聚集。2.利用HCT-116人结肠癌细胞瘤块盲肠原位移植的方法符合大肠癌细胞生物学特性，模拟了临床大肠癌转移的自然过程，成瘤效果稳定，转移率高，并且转移部位与大肠癌常见的转移部位基本一致，是比较理想的大肠癌转移模型。3.动物模型显示在肝转移灶形成前，VEGFR1~+HPC就在肝脏提前聚集，随着转移的进展，其数量也逐渐增加，提示VEGFR1~+HPC在大肠癌肝脏转移中可能起着定向和引导的作用。4.动物实验同时表明，随着转移的发生和进展，骨髓中VEGFR1~+HPC数量也呈增加趋势，与肝脏VEGFR1~+HPC变化一致，提示聚集于肝脏的VEGFR1~+HPC来源于骨髓VEGFR1~+HPC的动员。(本文来源于《泸州医学院》期刊2012-04-01）
王定平,郑阳春,燕锦[3]（2012）在《VEGFR1阳性造血祖细胞在大肠癌归巢性肝转移中的作用》一文中研究指出远处转侈尤其是肝转移是大肠癌患者死亡的最主要原因,阐明大肠癌肝转移的分子机制,早期发现和防治肝转移,是提高大肠癌长期生存率的关键。研究表明,肿瘤细胞的远处转移有明显的器官特异性,VEGFR1阳性造血祖细胞(VEGFR1~+ Hematopoietic progenitor cell,VEGFR1~+ HPC)在其中可能起决定性的调节作用。本文就VEGFR1~+HPC在大肠癌定向肝转移中的作用及可能机制作一综述。(本文来源于《肿瘤预防与治疗》期刊2012年02期）
杨朝晖,杨敏,熊汉真,李学农[4]（2008）在《VEGFR1阳性造血祖细胞簇与人大肠癌转移的关系》一文中研究指出目的观察血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)阳性造血祖细胞与人大肠癌转移的关系及机制。方法将人大肠癌细胞株SW480/M5瘤块原位接种至裸鼠结肠,建立大肠癌原位移植肝转移裸鼠模型,应用FCM观察转移灶内VEGFR1阳性造血祖细胞与大肠癌细胞的数量与比例及其相互关系,应用Western blot观察转移相关因子的表达。结果肿瘤转移灶及尚未形成转移的常见部位均可见VEGFR1阳性造血祖细胞细胞簇,并且与肿瘤转移的时间呈正相关,而无肿瘤裸鼠未见此细胞簇形成;在肿瘤转移过程中,基质金属蛋白酶9、基质细胞衍生因子1蛋白表达逐渐增强。结论VEGFR1阳性造血祖细胞簇形成总是伴随大肠癌转移,可能促进转移相关因子表达,促成转移的发生。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2008年05期）
杨朝晖[5]（2008）在《VEGFR1阳性造血祖细胞与大肠癌转移关系的研究》一文中研究指出研究背景和目的:大肠癌(Colorectal cancer,CRC)是常见的恶性肿瘤之一。近年来,我国大肠癌的发病率和死亡率呈逐渐上升趋势,侵袭和转移是导致其死亡的主要原因。肿瘤的发生和发展是一个多因素、多步骤、多基因共同作用的复杂过程。肿瘤细胞和宿主之间的相互作用是肿瘤发生发展的内在因素,肿瘤细胞转移具有一定的器官倾向性,这可能是瘤细胞与特定的器官微环境相互作用的结果。肿瘤转移取决于肿瘤细胞本身的分子特性和其分泌的因子对周围间质细胞的影响,包括血管、结缔组织和免疫细胞等。特殊的肿瘤微环境通过各种调节机制影响着肿瘤细胞的生长发展和侵袭转移。因此,肿瘤转移不只是肿瘤细胞本身的生物学特性及遗传特性所决定,从根本上说是癌细胞与宿主相互作用的结果,宿主甚至起决定性作用。造血祖细胞(hematopoietic progenitor cell)是造血组织具有自我复制和分化潜能的原始细胞。最初CD34~+抗原被认为是造血祖细胞的重要标志,该抗原在原始造血细胞表达旺盛,后随细胞分化而逐渐减弱。对祖细胞表面标志性抗原的初步研究发现,CD133~+细胞较CD34~+细胞具有更强的增殖潜能且包含有更高比例的长期培养起始细胞,在正常骨髓微环境条件下CD133~+细胞可能比CD34~+细胞具有更强的趋化和迁移能力,CD133~+造血祖细胞可能代表了更原始的造血细胞。2005年Kaplan RN发现了VEGFR1阳性造血祖细胞(vascular endothelialgrowth factor receptor 1 positive hematopoietic progenitor cell,VEGFR1~+ HPC)在动物肿瘤转移中起到决定的作用,VEGFR1~+HPC并非以前发现的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)即VEGFR2阳性造血祖细胞,而是同时具备CD133和VEGFR1两种标记的一种造血祖细胞,因为腹腔注射VEGFR2抗体,不能阻断VEGFR1~+HPC细胞簇形成及瘤转移灶形成,只能限制肿瘤转移灶生长。利用β半乳糖苷酶标记骨髓细胞移植的小鼠Lewis肺癌模型、小鼠B16黑色素瘤模型和c-myc转基因小鼠自发性淋巴瘤模型发现:VEGFR1~+ HPC首先在特定器官形成细胞簇(VEGFR1~+HPC cellular clusters),为瘤细胞准备了易于形成转移的微环境,这些细胞簇形成部位与肿瘤转移常见部位一致。肿瘤转移到某种特定器官的细胞和分子机制还不是很清楚,但是很多肿瘤都有转移到某一特定器官的倾向。依靠肿瘤转移相关细胞标签—VEGFR1~+造血祖细胞在靶器官形成转移的微环境,促进了肿瘤的侵袭和转移。但目前的研究均采用动物受致死性辐射后进行骨髓移植的研究方法,各器官存在辐射损伤后可能会造成非特异性骨髓动员及骨髓来源细胞的聚集,且尚未在人癌实验层次获得证实。本研究主要以人大肠癌为研究对象探讨造血祖细胞对肿瘤转移的作用,分叁部分进行,首先从临床病理角度利用免疫组织化学方法检测VEGFR1~+HPC细胞簇在大肠癌伴有癌转移淋巴结和未伴有癌转移淋巴结组织中的形成情况;其次利用大肠癌原位移植肝转移裸鼠模型,应用FCM观察转移灶内VEGFR1阳性造血祖细胞与大肠癌细胞的数量与比例及其相互关系,应用Western Blot观察转移相关因子的表达;最后分离人脐血CD133~+造血祖细胞,观察体外培养条件下其对于大肠癌肿瘤细胞增殖、黏附以及侵袭能力的影响。研究内容:1用免疫组织化学方法检测VEGFR1~+HPC在大肠癌伴有癌转移淋巴结和未伴有癌转移淋巴结组织中的形成情况。2将人大肠癌细胞株SW480/M5和SW480/EGFP~+瘤块原位接种至裸鼠结肠,建立大肠癌原位移植转移裸鼠模型,应用FCM观察转移灶内VEGFR1阳性造血祖细胞与大肠癌细胞的数量与比例及其相互关系,应用Western Blot观察转移相关因子MMP-9、SDF-1的表达。3分离人脐血CD133~+造血祖细胞,观察体外培养条件下其对于大肠癌肿瘤细胞增殖、黏附以及侵袭能力的影响。主要方法和结果:1应用免疫组织化学方法检测人造血祖细胞在大肠癌伴有癌转移淋巴结和未伴有癌转移淋巴结组织中的定位情况。结果显示:造血祖细胞主要定位在淋巴结的被膜下、淋巴窦、小血管和癌转移灶旁边。在伴有癌转移淋巴结和未伴有癌转移淋巴结组织均可以发现,并且形成大小不等的细胞簇。2结肠原位接种SW480/M5和SW480/EGFP~+瘤块自发转移动物模型的建立。分别将SW480/M5和SW480/EGFP~+细胞悬液制成5×10~6/ml,注射裸鼠皮下,14d后处死裸鼠,取瘤块接种于结肠部位,术后观察裸鼠的原位成瘤及转移情况。6只裸鼠在大肠癌原位种植SW480/EGFP~+瘤块后五周时全部处死,结果显示:SW480/EGFP~+具有多向转移的潜能,肝、脾、胰腺、肾被膜、淋巴结均发生了转移,尤其腹腔种植转移能力明显强于SW480/M5细胞;大肠癌原位种植SW480/M5瘤块后不同时期分别处死6只裸鼠,结果显示:叁周后没有裸鼠发生肝脏转移;五周后3只发生肝脏转移(50.0%);七周后4只裸鼠发生肝脏转移(66.7%)。3流式细胞术观察裸鼠原位瘤块接种后不同时间VEGFR-1~+HPC的量的变化SW480/M5瘤块在接种前,接种后叁周、五周、七周和SW480/EGFP~+瘤块接种后五周分别处死六只裸鼠,结果显示:原位接种SW480/M5瘤块前,接种后不同时间段裸鼠肝脏CD133~+和VEGFR1~+细胞所占比例随转移时间不断增加,并且在转移部位癌灶形成之前已经存在,各组之间均有显着性差异(F=474.570,P=0.000);另外,同样为原位接种后五周,SW480/M5组的裸鼠肝脏组织内CD133和VEGFR1双阳性细胞比SW480/EGFP~+的多,两者之间有显着性差异(t=11.619,P=0.000)。这可能与SW480/M5是肝转移亚系,较多发生肝脏转移,器官特异性较强有关。4应用Western blot分析MMP-9、SDF-1在转移前后及不同转移时间的蛋白表达情况MMP-9和SDF-1在SW480/M5原位接种前后及不同转移时间对比分析发现:裸鼠SW480/M5瘤块原位接种后叁周、五周、七周肝脏内MMP-9蛋白水平,随着肿瘤转移时间MMP-9蛋白表达增强;SDF-1蛋白水平也有增强趋势。5通过免疫磁珠分选术分选出脐血CD133~+造血祖细胞,体外观察其对大肠癌细胞增殖、粘附以及侵袭的影响取健康、新鲜的脐带血,采用免疫磁珠分选技术,分选出CD133~+的造血祖细胞,用含20%胎牛血清的低糖DMEM体外培养1～2周后,与SW480/M5、SW480/EGFP~+和SW620细胞共同培养后,采用MTT、Transwell的方法检测CD133~+造血干细胞在体外培养条件下对SW480/M5、SW480/EGFP~+和SW620细胞的增殖、黏附以及侵袭能力的影响。免疫磁珠分选技术分选的脐血CD133~+造血祖细胞阳性率高达73%以上,分选出的CD133~+造血祖细胞体外培养1～2周,不会诱导分化,仍保留祖细胞的特征。首先利用FN黏附试验检验细胞的黏附能力,结果显示加入CD133~+脐造血祖细胞后SW480/M5的黏附能力强于对照组SW480/M5(t=2.731,P=0.014);加入CD133~+脐造血祖细胞后SW480/EGFP~+的黏附能力强于对照组SW480/EGFP~+(t=2.512 P=0.022);加入CD133~+脐造血祖细胞后SW620的粘附能力强于对照组SW620(t=6.126,P=0.000)。其次利用运动小室的方法对CD133~+脐造血祖细胞对SW480/M5、SW480/EGFP~+以及SW620叁种细胞的运动能力进行了比较,结果显示:加入CD133~+脐造血祖细胞后SW480/M5的运动能力强于对照组SW480/M5(t=6.481,P=0.000);加入CD133~+脐造血祖细胞后SW480/EGFP~+的运动能力强于对照组SW480/EGFP~+(t=4.181,P=0.003);加入CD133~+脐造血祖细胞后SW620的运动能力强于对照组SW620(t=3.491,P=0.008)。最后,又对CD133~+脐造血祖细胞分别对SW480/M5、SW480/EGFP~+和SW620增殖能力的影响进行了检验。96孔板中,SW480/M5细胞和CD133~+脐造血祖细胞,相同数量的肿瘤细胞代替CD133~+脐造血祖细胞作为对照组,共同接种后的第二天,细胞数目就超过了对照组细胞(t=3.941,P=0.001);SW480/EGFP~+细胞和CD133~+脐造血祖细胞,相同数量的肿瘤细胞代替CD133~+脐造血祖细胞作为对照组,共同接种后的第二天,细胞数目就超过了对照组细胞(t=2.776,P=0.012);SW620细胞和CD133~+脐造血祖细胞,相同数量的肿瘤细胞代替CD133~+脐造血祖细胞作为对照组,共同接种后的第二天,细胞数目就超过了对照组细胞(t=7.580,P=0.000)。结论:1大肠癌患者淋巴结组织中可见VEGFR1~+ HPC细胞簇形成,在没有转移癌灶的淋巴结亦可以见到,但伴有癌转移的淋巴结转移组比非转移组VEGFR1~+ HPC细胞簇含量高,并且在没有转移癌灶的淋巴结也可以见到,而在非癌患者如淋巴结反应性增生、慢性扁桃体炎组织中,则不形成VEGFR1~+ HPC细胞簇,提示VEGFR1~+ HPC细胞簇形成可能与人大肠癌转移相关,其形成是持续性的,而不仅限于转移前。2原位接种瘤块前裸鼠肝脏组织内无VEGFR1阳性细胞簇,原位接种瘤块后不同时间裸鼠肝脏VEGFR1阳性细胞随转移时间不断增加,并且在转移部位癌灶形成之前已经出现。VEGFR-1~+HPC可能在大肠癌转移中起着重要的作用。3免疫磁珠分选脐血CD133~+造血祖细胞,在体外培养的条件下,与大肠癌细胞共培养可以显着增强大肠癌细胞的增殖、黏附以及侵袭能力。4应用Western Blot通过对MMP-9、SDF-1在转移前后及不同转移时间对比分析发现:裸鼠原位接种后不同时间段肝脏内MMP-9蛋白水平与肿瘤转移正相关,随着肿瘤转移时间MMP-9蛋白表达增强;SDF-1蛋白水平也呈增强趋势。说明人大肠癌转移可能与转移相关因子MMP-9,SDF-1表达增强有关。本研究的创新之处:1在人癌实验层次上证实了VEGFR-1~+HPC对肿瘤转移的促进作用,为抗肿瘤转移研究提供了实验基础;2成功分选了脐血CD133~+造血祖细胞,并在体外培养的条件下直接观察其对大肠癌细胞增殖、黏附及侵袭能力的影响;3采用Western Blot技术,探讨人大肠癌转移灶转移相关因子MMP-9、SDF-1的表达情况,初步探讨两者与肿瘤转移的关系。(本文来源于《南方医科大学》期刊2008-04-01）
熊汉真[6]（2008）在《CD133阳性造血祖细胞对结直肠癌细胞生物学特性的影响》一文中研究指出研究背景和目的结直肠癌(colorectal carcinoma，CRC)是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一，而转移是患者的主要致死原因。肿瘤转移是一个多步骤、多阶段的复杂过程，转移的肿瘤细胞经历了细胞骨架变化、黏附特性的改变、运动能力的增强及蛋白水解酶表达增加等一系列改变。动物实验最新的研究表明，造血祖细胞与肿瘤转移有着密切联系，KaplanRN等利用β半乳糖苷酶标记骨髓细胞移植的小鼠Lewis肺癌模型、小鼠B16黑色素瘤模型和c-myc转基因小鼠自发性淋巴瘤模型发现：VEGFR-1阳性造血祖细胞(vascular endothelial growth factor receptor-1 hemopoietic progenitor cells，VEGFR-1~+HPC)首先在特定器官形成VEGFR-1~+HPC细胞簇(VEGFR-1~+HPCcellular clusters)，为瘤细胞准备了易于形成转移的微环境，这些细胞簇形成部位与肿瘤转移常见部位一致。研究表明，VEGFR-1~+HPC充当了肿瘤转移必不可少的细胞书签(cellular bookmarking)或者说特使细胞(envoy cells)。VEGFR-1~+HPC并非以前发现的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPC)即VEGFR-2阳性造血祖细胞，腹腔注射VEGFR-2抗体，不能阻断VEGFR-1~+HPC细胞簇形成及瘤转移灶形成，只能限制肿瘤转移灶生长。同时利用VEGFR-1抗体阻断或剔除VEGFR-1~+HPC，则能够抑制预迁移器官造血祖细胞簇的形成与肿瘤转移。但造血祖细胞在人体肿瘤的主要作用及机制仍不十分清楚，且目前尚未在人类肿瘤模型上得到证实，由于脐血来源广泛，获取较容易，成为骨髓及外周造血干祖细胞的极佳替代来源，我们选定CD133~+造血祖细胞，在减少其诱导分化的同时，观察其对低转移人大肠癌细胞体内外的增殖和侵袭作用。CD133是一个目前公认的造血祖细胞表面抗原，在正常及异常造血和非造血组织中均有表达，随着细胞的分化成熟其表达减弱、消失。在正常造血组织中，如人胚胎、肝脏和骨髓、脐血、成人骨髓和外周血CD34~+细胞中都可检测到CD133 mRNA，而在其他成熟血细胞均未检测到其表达。同时随着最新的研究表明，CD133 mRNA在外周血中的表达里，实体恶性肿瘤转移患者的表达水平明显高于非转移患者，且以骨转移患者的CD133 mRNA表达为着。但这一结果的作用机制主要是由于CD133~+造血祖细胞或者是CD133~+肿瘤干细胞的结果尚不清楚。本研究重点探讨CD133~+造血祖细胞对结直肠癌增殖、侵袭及转移的影响，阐明CD133~+造血祖细胞在结直肠癌转移中的主要生物学功能，为揭示结直肠癌转移机制及抗转移治疗奠定基础。方法1．CD133~+造血祖细胞的筛选、鉴定及培养由南方医院妇产科提供新鲜脐血标本20例，在脐血采集后6h内，利用CD133~+免疫磁珠，分离出CD133~+造血祖细胞，并分别予流式细胞仪及免疫细胞染色分析和鉴定样本量中CD133~+细胞含量，同时在减少诱导CD133~+分化的同时，培养CD133~+造血祖细胞。2．CD133~+造血祖细胞对结直肠癌细胞生物学特性的影响将CD133~+造血祖细胞与SW480共趋化培养，用MTT法检测肿瘤细胞的增殖及黏附能力的影响，用Transwell小室法检测肿瘤细胞的迁移能力的变化，用Westem blot了解VEGFR-1、MMP-2、E-Cadherin的表达情况。观察CD133~+造血祖细胞作用前后细胞增殖、体外侵袭变化。3．应用整体可视化结肠癌转移动物模型观察共移植效应利用稳定表达绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)的结肠癌细胞株SW480／EGFP~+；通过结肠癌尾静脉注射的方法建立结肠癌转移模型，利用肿瘤细胞表达EGFP的特点，将CD133~+细胞与SW480／EGFP~+共培养通过尾静脉注射的方法观察肿瘤细胞成瘤能力及体内转移能力的变化，应用组织病理学及分子生物学技术对结肠癌转移动物模型进行评价和鉴定。结果1、CD133~+造血祖细胞的筛选、鉴定及培养由南方医院妇产科提供，脐血标本共20份(其中18份成功提取新鲜细胞，2份失败)，50～80 ml／份，枸橼酸抗凝，经产妇和家属同意取自足月健康顺产新生儿，新鲜脐血采集后6 h内，分离出CD133~+造血祖细胞。从新鲜的脐血中得到的单个核细胞数平均为(1．48±0．19)×10~7／ml，经CD133磁珠分离系统分离得CD133~+富集细胞的平均数为(1．33±0．01)×10~5／ml，新鲜脐血单个核细胞中的CD133~+细胞所占比例为(0．8±0．01)％，经流式细胞仪鉴定CD133~+CD34~+细胞纯度达到80％以上。CD133~+细胞培养一周后，免疫细胞化学染色CD133，显微镜下观察CD133阳性细胞数>90％。2、CD133~+造血祖细胞对结直肠癌细胞生物学特性的影响CD133~+造血祖细胞能显着促进SW480细胞的生长(n=60、Z=-6．106、P=0．000)，能促进肿瘤细胞的形态学改变，即肿瘤细胞的核深染，异型明显，细胞呈多角形或不规则形，能显着促进SW480细胞的迁移能力；细胞黏附实验表明，含有CD133~+造血祖细胞的实验组其肿瘤细胞的黏附能力明显高于对照组(n=60、Z=-3．679，P=0．000)。利用丙酮沉淀法提取细胞总蛋白(即浓缩蛋白)检测MMP-2、VEGFR-1及E-Cadherin蛋白表达情况发现实验组中的3种蛋白表达水平均高于对照组。3、利用整体可视化结肠癌转移裸鼠模型观察共移植效应转染后的结肠癌细胞SW480／EGFP~+稳定、高效的表达绿色荧光蛋白，采用尾静脉注射的方法建立结肠癌可视化转移动物模型，注射2周后，实验组可见肿瘤转移，对照组未见有转移情况，注射4周后，实验组67％发生转移，对照组仅有一只发生转移，注射6周后，实验组中成瘤转移率为4／6，对照组中的成瘤转移率为1／6。经过生存分析的统计结果表明，实验组的转移率高于对照组(n=6，Breslow检验，P=0．045)。通过分子生物学技术，发现实验组中MMP-2、VEGFR-1蛋白高表达，而E-Cadherin的表达则逐渐减低。结论1、CD133~+造血祖细胞可显着促进人结直肠癌细胞的增殖及侵袭能力，CD133~+造血祖细胞与人结直肠癌细胞裸鼠共移植具有促转移作用，初步证明，人造血祖细胞可能对人结直肠癌细胞转移形成具有重要影响。2、CD133~+造血祖细胞可与结直肠癌细胞直接作用，能促进转移相关基因和血管生成因子MMP-2、VEGFR-1蛋白高表达，同时调节E-Cadherin的蛋白表达，初步表明：CD133~+造血祖细胞的促转移作用可能与转移相关因子MMP-2、VEGFR-1及E-Cadherin的表达有关。本研究的创新之处1、将人造血祖细胞与结直肠癌细胞株共趋化培养，直接在人癌实验层次揭示了造血祖细胞对结直肠癌细胞的作用。2、将人造血祖细胞与结直肠癌细胞株共趋化培养后进行人类肿瘤动物模型共移植实验研究。初步证明，CD133~+人造血祖细胞可显着促进人结直肠癌细胞的增殖及侵袭能力，CD133~+造血祖细胞与人结直肠癌细胞裸鼠共移植具有促转移作用，人造血祖细胞可能对人结直肠癌细胞转移形成具有重要影响。(本文来源于《南方医科大学》期刊2008-04-01）
杨敏[7]（2008）在《VEGFR-1阳性造血祖细胞在乳腺癌转移中的作用》一文中研究指出研究背景和目的乳腺癌(breast cancer,BC)是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤,其发病率在世界范围内呈上升趋势,居妇女恶性肿瘤的首位或第2位,在西方发达国家已成为妇女的第1位死亡原因。乳腺癌转移是乳腺癌患者预后差的主要原因,有效的切断转移途径,成为临床除手术切除乳腺原发肿瘤外,提高患者生存率,延长患者生存时间,彻底根治乳腺癌的关键问题。肿瘤转移是一个多基因、多步骤、多阶段的复杂过程,目前人们虽然对肿瘤转移进行了大量的研究,但是肿瘤转移的机制仍不清楚,尤其对肿瘤转移早期事件知之甚少。血管内皮细胞生长因子受体-1(vascular endothelial growthfactor receptor-1,VEGFR-1)也称Fms相似的酪氨酸激酶(Fms-like tyrosine kinase,Fit-1),是血管内皮细胞生长因子受体的一个成员。VEGFR-1与血管内皮细胞生长因子-A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)、胎盘生长因子(placenta growth factor,PIGF)、血管内皮细胞生长因子-B(vascular endothelialgrowth factor-B,VEGF-B)相结合并通过其弱的酪氨酸激酶活性发挥各种生物学作用,参与缺血性疾病的血管新生、血管损伤后重塑、动脉粥样硬化、某些炎症病变以及肿瘤发生、转移等病理过程。近年来有研究发现VEGFR-1通过其弱的酪氨酸激酶活性在肿瘤的发生和转移中发生重要作用。Kaplan等报道,VEGFR-1~+CD133~+双阳性细胞即VEGFR-1~+造血祖细胞(VEGFR-1~+ hemopoietic progenitor cell,VEGFR-1~+ HPC)在肿瘤细胞到达转移灶前即可以到达特定组织器官,这些双阳性细胞聚集成团,为原发性肿瘤细胞形成一个转移位点,随后肿瘤细胞才从原发部位到达转移部位,形成转移灶。VEGFR-1~+HPC一方面吸引肿瘤细胞到达转移部位,另一方面又为肿瘤细胞到达后的定居提供更加疏松的“土壤”,有利于转移灶的形成。在随后的研究中,作者还发现,用特异性的抗VEGFR-1抗体,可以显着抑制多种肿瘤的转移。采用小鼠Lewis肺癌模型、小鼠B16黑色素瘤模型等动物肿瘤实验研究表明,VEGFR-1~+HPC充当了肿瘤转移必不可少的细胞书签(cellularbookmarking)或者说特使细胞(envoy cells)。但造血祖细胞在人体肿瘤的主要作用及机制仍不十分清楚,目前尚未在人类肿瘤模型上得到证实。本研究以乳腺癌为研究对象探讨造血祖细胞对乳腺癌转移的影响作用,主要分两部分进行,首先分离人脐带血造血祖细胞,观察体外培养条件下其对于乳腺癌细胞增殖、黏附以及侵袭能力的影响,并应用整体可视化乳腺癌肝转移模型研究裸鼠体内VEGFR-1~+HPC对乳腺癌转移能力的影响,为探讨乳腺癌转移形成机制,寻求新的抗乳腺癌靶标、阻断乳腺癌转移提供实验依据。研究内容通过细胞转染技术建立整体可视化乳腺癌高肝转移动物模型,为进一步研究VEGFR-1~+HPC在乳腺癌转移中的作用,提供良好的动物模型。通过免疫磁珠细胞分选技术分选出人脐带血CD133~+HPC,与乳腺癌细胞共培养,检测其对乳腺癌细胞增殖、黏附以及侵袭能力的影响。通过流式细胞术、免疫组织化学技术检测乳腺癌原位接种后不同时间裸鼠肝组织内VEGFR-1~+HPC含量的变化,验证VEGFR-1~+HPC在乳腺癌转移中的作用。通过免疫组织化学技术、Western blot技术检测肿瘤转移相关因子MMP-2、MMP-9等在裸鼠荷瘤不同时期含量的变化,初步探讨VEGFR-1~+HPC促进乳腺癌转移的作用机制。主要方法和结果1.整体可视化乳腺癌高肝转移动物模型的建立利用阳离子脂质体Lipofectamine(TM)~2000将pEGFP-N1质粒转染导入乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231细胞,挑选阳性克隆后筛选出稳定表达绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的细胞株pEGFP-MDA-MB-231细胞;通过体内连续传代的方法,建立高肝转移的乳腺癌动物模型,利用肿瘤细胞表达EGFP的特点,借助整体荧光体视镜结合IPP5.0软件采集、分析EGFP发出的荧光信号,在动物活体实时观察乳腺癌局部成瘤及转移情况;应用常规病理学方法对乳腺癌原位及转移动物模型进行评价和鉴定。结果:转染后的pEGFP-MDA-MB-231细胞稳定、高效的表达EGFP,且增殖能力与MDA-MB-231相比,差异没有显着性;pEGFP-MDA-MB-231细胞裸鼠乳房垫原位接种的成功率高达60%,组织块原位接种的成功率高达100%;第一代裸鼠肿瘤转移率较低(1/5),待肿瘤长至适合大小时,取瘤组织采用外科手术原位接种的方法将瘤组织块缝合在裸鼠乳房垫下,经体内连续传代的方法,裸鼠体内传代3次后,肿瘤肝转移能力明显增强,至接种第6周后,几乎所有的裸鼠均出现肝转移(5/5)。通过常规病理学的方法,验证了可视化高肝转移动物模型的可靠性。2.通过免疫磁珠分选技术分选出人脐带血CD133~+HPC,体外观察其对乳腺癌细胞增殖、黏附以及侵袭能力的影响取健康、新鲜的脐带血,利用人CD133免疫磁珠,采用免疫磁珠分选技术,分选出CD133~+HPC,用含20%胎牛血清的低糖DMEM培养基体外培养1～2周,与人乳腺癌MDA-MB-231细胞共同培养24 h后,采用MTT、Transwell的方法检测CD133~+HPC在体外培养条件下对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、黏附以及侵袭能力的影响。结果:免疫磁珠分选技术分选的CD133~+HPC阳性率高达80%以上,分选出的CD133~+HPC体外培养1～2周,减少诱导分化,仍保留祖细胞的特征。取培养1～2周的CD133~+HPC与乳腺癌细胞共培养24 h后,MTT法检测CD133~+HPC对乳腺癌细胞增殖能力的影响,与肿瘤细胞单独培养组比较,共培养组肿瘤细胞增殖能力显着增强,差异具有显着性(t=2.232,P=0.040)。CD133~+HPC与乳腺癌细胞共培养24 h,胰酶消化后接种于铺有FN的96孔板,进行细胞基质黏附试验。MTT法检测CD133~+HPC对乳腺癌细胞黏附能力的影响,与肿瘤细胞单独培养组相比,共培养组肿瘤细胞黏附能力显着增强,差异具有显着性(t=2.435,P=0.027)。采用Transwell小室观察CD133~+HPC对肿瘤细胞体外侵袭能力的影响,与肿瘤细胞单独培养组相比,共培养组肿瘤细胞穿过基底膜的能力显着增强,差异具有显着性(F=1028.685,P=0.000)。以上实验结果说明体外培养的条件下,CD133~+HPC可以显着促进乳腺癌细胞的增殖、黏附以及侵袭能力。3.流式细胞术、免疫组织化学技术观察裸鼠肿瘤接种后不同时间VEGFR-1~+HPC量的变化在裸鼠乳腺癌原位接种前、接种后的不同时期颈椎脱臼法处死裸鼠,取裸鼠的肝组织,制成单细胞悬液后行流式细胞术(flow cytometry,FCM)检查不同荷瘤时间裸鼠肝组织内VEGFR-1~+HPC细胞含量的变化:送检FCM后,剩余的裸鼠肝、肺组织常规石蜡包埋做成蜡块,切成3μm厚的薄片,免疫组织化学染色行VEGFR-1、CD133阳性细胞的检测与分析,观察VEGFR-1、CD133在裸鼠肝组织内的定位和细胞簇形成情况,进一步验证FCM检验结果。结果:VEGFR-1~+HPC的数量随裸鼠乳腺癌原位接种的不同时间而改变,乳腺癌接种后第2周、第4周、第6周裸鼠肝组织悬液中VEGFR-1~+HPC的含量较接种前裸鼠肝组织内VEGFR.1~+HPC的含量明显增加,差异有显着性(P=0.000):肿瘤接种后,随着裸鼠荷瘤时间的延长,裸鼠肝组织内VEGFR-1~+HPC在肿瘤细胞到达肝组织前即可被检测到其含量逐渐增加,各组之间的差异具有显着性,与时间呈正相关(F=66.896,P=0.000)。说明VEGFR-1~+HPC提前肿瘤细胞到达预转移部位,随着裸鼠荷瘤时间的延长,VEGFR-1~+HPC的量逐渐增加,VEGFR-1~+HPC提前到达预转移部位,可能吸引肿瘤细胞的迁移;其含量随着荷瘤时间的延长而增加,可能为肿瘤细胞的定居提供适宜的微环境。免疫组织化学检测结果显示:VEGFR-1、CD133阳性细胞在肿瘤细胞到达肝组织前即有表达,随着裸鼠荷瘤时间的延长,阳性细胞数增加且聚集成小的细胞簇,主要分布在裸鼠肝组织的被膜下、汇管区小血管旁等部位,与肿瘤转移时肿瘤细胞最早到达形成转移瘤的部位基本一致。4.Western blot检测裸鼠肿瘤接种后不同时间肝组织内转移相关因子MMP-2、MMP-9的表达,初步探讨VEGFR-1~+HPC促进肿瘤转移的机制裸鼠组织标本送检FCM后,剩余的裸鼠取100-200 mg肝组织抽提组织总蛋白,BCA法测定蛋白浓度并分装,采用化学发光法进行Western blot检测裸鼠肿瘤接种后不同时期肝组织内MMP-2、MMP-9表达量的改变。结果:在裸鼠肿瘤接种前以及接种后的不同时间,尚未形成转移前组织内的MMP-2、MMP-9等转移相关因子随着肿瘤接种和裸鼠荷瘤时间的延长而表达量增加。初步表明MMP-2、MMP-9可能在VEGFR-1~+HPC促肿瘤转移中发挥作用,在肿瘤细胞到达转移灶前可能引起了局部微环境中的细胞及细胞外基质的改变,降解了细胞外基质,为肿瘤细胞的到达和定居形成一个适宜的微环境。5.VEGFR-1、CD133阳性细胞在人乳腺癌组织标本中免疫组织化学方法检测与分析,进一步验证VEGFR-1~+HPC在人乳腺癌转移中的作用。收集南方医院普外科2007年4月至2008年4月手术切除乳腺癌标本10例,10例区域淋巴结转移癌取自手术切除标本所附淋巴结,女性,患者年龄31-85岁(平均55岁)。5例淋巴结反应性增生标本取自南方医院普外科2007年8月至2008年5月。全部标本术前均未接受化疗及放疗,所有组织均用10%中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,3μm厚切片,分别进行HE染色和免疫组织化学检测。结果:在乳腺癌患者的区域淋巴结可以检测到CD133、VEGFR-1阳性细胞。在有淋巴结转移乳腺癌患者的区域淋巴结中CD133、VEGFR-1阳性细胞簇的量较无淋巴结转移患者的区域淋巴结中CD133、VEGFR-1阳性细胞簇的量多,所形成的细胞簇包含的细胞数目较多。表明CD133、VEGFR-1阳性细胞可能与乳腺癌转移相关,可能可以做为预测乳腺癌转移的一个指标。结论1.成功地稳定转染EGFP至人乳腺癌MDA-MB-231细胞,并采用体内连续传代的方法,建立了整体可视化乳腺癌高肝转移动物模型,为研究乳腺癌转移及临床前的治疗提供了一种良好的动物模型。2.通过免疫磁珠分选技术可以得到纯度较高的CD133~+HPC,该细胞在体外培养的条件下,短期内不会诱导分化,可以保留其祖细胞特性。CD133~+HPC与乳腺癌细胞共培养可以显着促进乳腺癌细胞的体外增殖、黏附以及侵袭能力。3.VEGFR-1~+HPC在乳腺癌的转移中可能发挥重要作用。VEGFR-1~+HPC在乳腺癌细胞到达转移灶前,提前到达预转移部位,其含量随着裸鼠荷瘤时间的延长而不断增加,而且其在预转移组织的表达部位与肿瘤转移最先到达的部位基本一致。可能吸引乳腺癌细胞的迁移,并为转移瘤的形成提供适合定居的转移微环境。4.VEGFR-1~+HPC促进乳腺癌转移的作用可能与转移相关因子MMP-2、MMP-9等的表达增强有关。VEGFR-1~+HPC可能通过改变局部微环境中MMP-2、MMP-9等转移相关因子的表达为转移瘤细胞的定居与转移瘤的形成提供适宜的转移前微环境。本研究的创新之处1.建立了整体可视化乳腺癌原位接种高肝转移动物模型,为乳腺癌的实验研究提供了较理想的实验工具2.成功筛选了CD133~+HPC,发现其对乳腺癌细胞具有促增殖、黏附及侵袭的作用3.在人癌实验层次上证实了VEGFR-1~+HPC对乳腺癌转移的促进作用,为抗肿瘤转移研究提供了实验基(本文来源于《南方医科大学》期刊2008-04-01）
阳性造血祖细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景及目的大肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升的趋势。远处转移是导致大肠癌患者死亡最主要的原因之一，其中肝脏是远处转移的主要靶器官，大约20%~25%的大肠癌患者在原发肿瘤检出的同时已并发有肝转移；即使是根治术后，亦有8%~30%的患者将出现肝转移，8%~10%的患者出现肺转移，因此早期发现和防治远处转移是提高大肠癌患者生存率的关键因素之一。研究表明，肿瘤的转移是一个多步骤发生、多因素参与、多环节调控的复杂过程，目前虽然关于肿瘤转移的研究在逐渐深入，但对肿瘤转移的确切分子机制仍然不甚清楚，尤其是肿瘤的器官特异性定向转移，即归巢性转移的机理和调控仍然是研究的热点和难点。2005年Kaplan等首次报道了VEGFR1阳性造血祖细胞（VEGFR1~+Hematopoietic Progenitor Cell,VEGFR1~+HPC）即VEGFR1~+CD133~+双阳性细胞簇，在肿瘤的定向转移中起着重要的作用。研究表明，在肿瘤转移发生前，VEGFR1~+HPC先于肿瘤细胞到达预转移部位，改变靶器官的微环境以适应肿瘤细胞的生长，并进一步通过特定的配体-受体结合引导肿瘤细胞到达靶器官形成转移灶。本文通过观察VEGFR1~+HPC在人大肠癌组织及转移灶中的分布表达，探讨VEGFR1~+HPC与大肠癌转移的关系；进一步，建立大肠癌细胞移植肝转移动物模型，动态观察在转移发生过程中肿瘤组织、肝脏、及骨髓中VEGFR1~+HPC的含量变化，探讨VEGFR1~+HPC在大肠癌定向肝转移中的作用。方法1.临床研究：选择四川省肿瘤医院2006年~2011年收治的大肠癌并发肝转移行同期或分期切除且保存完整的手术标本37例，以及非肿瘤性肠段切除患者6例作为研究对象，应用免疫组织化学染色检测VEGFR1、CD133在大肠癌及转移淋巴结、无转移淋巴结、肝脏转移灶和非肿瘤性淋巴结中的表达分布情况，以同蜡块的癌旁组织作为对照。2.动物实验：首先采用人结肠癌细胞HCT-116肿瘤组织行盲肠原位瘤块包埋法构建大肠癌原位移植肝转移模型；在该模型的基础上，分别于瘤块接种前及接种后2周、4周、6周、8周处死小鼠，以免疫组化学染色法检测肿瘤组织及肝转移灶(或肝组织)中VEGFR1、CD133的表达，应用流式细胞术定量检测肝脏、及骨髓中VEGFR1~+HPC（即VEGFR1~+CD133~+双阳性细胞）的含量变化。结果1.在大肠癌组织、癌旁组织中均可发现VEGFR1~+HPC细胞簇，且大肠癌组织阳性率明显高于癌旁组织(P <0.05)；在肝脏转移组织中，VEGFR1~+HPC呈高表达，阳性率也显着高于癌旁组织(P <0.05)；在6例非肿瘤性淋巴结中未见VEGFR1~+HPC细胞，而在大肠癌转移淋巴结、无转移淋巴结中均可发现VEGFR1~+HPC阳性细胞簇，主要位于淋巴结边缘的被膜下、边缘窦附近。转移淋巴结多呈片状的强阳性或阳性表达，而非转移淋巴结多呈散在的点状、灶状阳性或弱阳性分布，且转移淋巴结组阳性率高于非转移组(P <0.05)。2. HCT-116人结肠癌细胞瘤块盲肠原位移植后2周、4周、6周、8周处死裸鼠后解剖发现，盲肠部位均有肿瘤形成，直径1~3.5cm大小不等，缘肠管呈侵润性生长。在种植后2周、4周，未发现有肝、肺、脾等处转移病灶形成；种植后第6周，开始出现肝转移，部分有还同时伴有肺转移、脾脏转移、或腹腔转移。3.动物模型中免疫组化检测显示，在瘤块接种前裸鼠肝脏没有VEGFR1~+HPC细胞簇；在接种后2周、4周肝转移灶形成前，肝脏就可见少量VEGFR1~+HPC细胞簇出现，呈点状、灶状分布，主要分布于汇管区附近；在接种后6周、8周出现肝脏、脾脏、肺脏等处转移时，VEGFR1~+HPC细胞较前明显增多，呈片状分布，主要位于转移灶、癌旁组织、肝脏汇管区等处。4.流式细胞术检测显示，在瘤块接种前、接种后2周、4周、6周、8周，肝脏、骨髓中VEGFR1~+HPC细胞数目均逐次递增，组间统计有显着差异（P <0.05）。结论1.在大肠癌原发灶及肝脏转移灶中VEGFR1~+HPC表达明显高于癌旁组织；转移淋巴结及非转移淋巴结中均可见VEGFR1~+HPC表达，但转移淋巴结VEGFR1~+HPC细胞簇含量明显增加，且主要分布于淋巴结边缘的被膜下、边缘窦附近，与肿瘤常见转移部位一致；提示在发生淋巴结转移前，VEGFR1~+HPC已经在预转移灶部位聚集。2.利用HCT-116人结肠癌细胞瘤块盲肠原位移植的方法符合大肠癌细胞生物学特性，模拟了临床大肠癌转移的自然过程，成瘤效果稳定，转移率高，并且转移部位与大肠癌常见的转移部位基本一致，是比较理想的大肠癌转移模型。3.动物模型显示在肝转移灶形成前，VEGFR1~+HPC就在肝脏提前聚集，随着转移的进展，其数量也逐渐增加，提示VEGFR1~+HPC在大肠癌肝脏转移中可能起着定向和引导的作用。4.动物实验同时表明，随着转移的发生和进展，骨髓中VEGFR1~+HPC数量也呈增加趋势，与肝脏VEGFR1~+HPC变化一致，提示聚集于肝脏的VEGFR1~+HPC来源于骨髓VEGFR1~+HPC的动员。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
阳性造血祖细胞论文参考文献
[1].吴丽火.CD133阳性造血祖细胞对结肠癌肿瘤干细胞生物学特性的影响[D].福建医科大学.2018
[2].王定平.VEGFR1阳性造血祖细胞在大肠癌肝转移中的作用[D].泸州医学院.2012
[3].王定平,郑阳春,燕锦.VEGFR1阳性造血祖细胞在大肠癌归巢性肝转移中的作用[J].肿瘤预防与治疗.2012
[4].杨朝晖,杨敏,熊汉真,李学农.VEGFR1阳性造血祖细胞簇与人大肠癌转移的关系[J].南方医科大学学报.2008
[5].杨朝晖.VEGFR1阳性造血祖细胞与大肠癌转移关系的研究[D].南方医科大学.2008
[6].熊汉真.CD133阳性造血祖细胞对结直肠癌细胞生物学特性的影响[D].南方医科大学.2008
[7].杨敏.VEGFR-1阳性造血祖细胞在乳腺癌转移中的作用[D].南方医科大学.2008