导读:本文包含了牛前脂肪细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:蕨菜,超临界CO_2萃取,化学成分,3T3-L1细胞
牛前脂肪细胞论文文献综述
吴永祥,张瑶,卢玮玮,胡晓倩,权泰亨[1]（2019）在《蕨菜超临界萃取物化学成分及其抑制3T3-L1前脂肪细胞分化作用研究》一文中研究指出目的分析蕨菜超临界CO_2萃取物(SFE-PA)的化学成分,并探究萃取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用及机制。方法采用GC-MS分析SFE-PA主要化学成分。体外培养3T3-L1前脂肪细胞,构建脂肪细胞分化的细胞模型,MTT法测定细胞毒性,采用油红O染色法分析SFE-PA对脂肪细胞分化的抑制作用,利用qRT-PCR检测脂肪细胞分化中相关基因的mRNA表达水平。结果从SFE-PA中共鉴定出10种化合物,主要成分有4,4,5,7,8-五甲基-二氢香豆素(36.07%)、β-谷甾醇(25.66%)、4-氨基-7-二乙氨基-香豆素(8.26%)、棕榈酸(5.05%)等。SFE-PA浓度依赖性地抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,并减少细胞中脂质的沉积。同时,SFE-PA明显下调PPARγ、CEBPα、SREBP-1c、FAS、ACC的mRNA表达水平。结论 SFE-PA具有明显抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的作用,这一作用与其调控脂肪细胞分化转录调控因子和脂质合成相关基因等密切相关,而高含量的酚类、醇类化合物可能是其发挥作用的物质基础。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2019年11期）
任毅,杨霞,侯敬天,吕欣,王建红[2]（2019）在《二甲双胍作用于3T3-L1前脂肪细胞诱导阶段对v-SNAREs蛋白家族mRNA表达的影响》一文中研究指出目的观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中二甲双胍对囊泡相关膜蛋白(VAMPs)mRNA表达变化,探讨二甲双胍促进葡萄糖转运子4(GLUT4)转运中的作用机制。方法在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中,分别持续给予不同浓度的二甲双胍(0、0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L)干预12 d后,比较不同浓度的二甲双胍对AMPK、GLUT4及VAMP2、VAMP3、VAMP4、VAMP5、VAMP7、VAMP8的mRNA水平。结果与0 mmol/L组相比,0.5 mmol/L组GLUT4、VAMP2、VAMP3、VAMP8 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与0 mmol/L组相比,1 mmol/L组上调GLUT4、VAMP2、VAMP3、VAMP8 mRNA水平升高(P<0.05);与1 mmol/L组相比,2 mmol/L组下调GLUT4及VAMP2、VAMP3、VAMP5、VAMP8 mRNA表达水平(P<0.05)。各组间AMPK1、VAMP4、VAMP7的mRNA表达水平比较差异无统计学意义。结论二甲双胍可以作用于前脂肪细胞的诱导分化过程,且呈剂量依赖性地上调脂肪细胞中GLUT4及VAMP2、VAMP3、VAMP8 mRNA的表达。(本文来源于《中西医结合心脑血管病杂志》期刊2019年19期）
王丹丹,程佩,孙文星,徐广飞[3]（2019）在《白藜芦醇抑制人内脏前脂肪细胞增殖和分化》一文中研究指出目的本试验研究白藜芦醇对人内脏前脂肪细胞细胞活力和细胞周期的影响;白藜芦醇对人内脏前脂肪细胞分化和脂质沉积的影响,以及对脂肪分化关键基因表达的影响。方法用白藜芦醇(0,5,10,20,50 mM)干预人内脏前脂肪细胞(HPA-v),在0、24、48、72 h通过MTT试验检测白藜芦醇对细胞活力的影响;用白藜芦醇(0,5,10,20,50mM)干预HPA-v细胞24 h,通过流式细胞技术分析白藜芦醇对HPA-v细胞周期的影响;用地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤诱导HPA-v向脂肪细胞分化,在分化过程中用不同浓度的白藜芦醇(0,5,10,20,50 mM)进行干预,通过油红O染色检测白藜芦醇对脂肪分化和脂质沉积的影响,通过RT-PCR检测白藜芦醇对脂肪分化关键基因PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3表达的影响。结果 (1)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制HPA-v的细胞活力,10、20、50 mM的白藜芦醇干预72 h可显着抑制HPA-v的细胞活力;(2)20、50 mM的白藜芦醇干预24 h,可显着增加S期HPA-v的细胞比例,显着降低G0-G1和G2-M期的细胞比例;(3)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制HPA-v的成脂分化,20、50 mM的白藜芦醇可以显着减少脂肪细胞中脂质的沉积;(4)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的mRNA表达,10、20、50 mM的白藜芦醇可以显着抑制PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的mRNA表达。结论白藜芦醇抑制HPA-v的细胞活力,增加S期HPA-v的细胞比例,抑制细胞增殖;白藜芦醇抑制HPA-v成脂分化,减少脂质沉积;白藜芦醇抑制脂肪分化与PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的表达下调相关。(本文来源于《营养研究与临床实践——第十四届全国营养科学大会暨第十一届亚太临床营养大会、第二届全球华人营养科学家大会论文摘要汇编》期刊2019-09-20）
胡婷婷,巩雪俐,高佳乐,徐尤宗盛,孟轩羽[4]（2019）在《双链RNA结合蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡作用》一文中研究指出目的探究双链RNA结果蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡的影响。方法以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,将pCMV6-Entry STAU1真核表达质粒,通过脂质体转染3T3-L1前脂肪细胞(实验组),对照组转染pCMV6-Entry空载体。分别利用RTq-PCR和Western blot检测stau1、caspase3、caspase9、cyclinD1、cyclinE1 mRNA及蛋白质的表达水平;对照组和实验组采用CCK-8细胞计数法及Annexin V-FITC/PI双染法检测STAU1对细胞数量及凋亡情况的影响。结果 (1)与对照组比较,实验组stau1、caspase3、caspase9 mRNA和蛋白质的表达水平均显着上升(P<0.05),cyclinE1 mRNA和蛋白质的表达水平显着下降,差异具有统计学意义(P<0.05),cyclinD1 mRNA表达水平降低而蛋白质表达水平无明显变化。(2)与对照组相比,实验组细胞数量显着减少,凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 STAU1可能通过下调cyclinE1的表达抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖;通过上调caspase3、caspase9的表达水平促进细胞凋亡。(本文来源于《新疆医科大学学报》期刊2019年09期）
李德鹏,耿晓晖,高月锋,王尚尚,富俊才[5]（2019）在《葡萄籽原花青素对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响》一文中研究指出试验旨在研究葡萄籽原花青素(Grape Seed Proanthocyanidin Extract,GSPE)对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响。选择1月龄健康小尾寒羊公羔羊,屠宰后取腹股沟白色脂肪组织。分离绵羊前脂肪细胞,并进行原代体外培养。诱导分化后,进行油红O的染色鉴定。将传代培养后的绵羊前脂肪细胞随机分成6个处理组,每个处理组3个重复,培养基内添加不同浓度GSPE(0、6.25×10~1、1.25×10~2、2.5×10~2、5×10~2、1×10~3ng/mL)。培养结束后,用CCK-8法测定GSPE对绵羊前脂肪细胞增殖的影响。绵羊前脂肪细胞由诱导分化培养基和分化培养基处理后,再用含不同浓度GSPE(0、6.25×10~1、1.25×10~2、2.5×10~2、5×10~2、1×10~3ng/mL)的培养基培养。培养结束后,测定甘油叁磷酸脱氢酶(G3PDH)、脂肪酸合成酶(FAS)以及FASmRNA、激素敏感脂肪酶mRNA(HSLmRNA)。结果表明:不同浓度的GSPE具有促前脂肪细胞增殖的作用,且有明显的时间和浓度效应;在分化试验中,与对照组相比,不同浓度的GSPE能明显抑制TG合成,但在诱导分化第8天,仅6.25×10~1、1.25×10~2 ng/mL的GSPE对TG的合成有抑制作用;在诱导分化后期,GSPE降低了脂肪沉积过程中关键酶G3PDH、FAS的活性,对FAS mRNA的表达无明显影响(P>0.05),显着降低HSL mRNA的表达(P<0.01),并且GSPE是通过同时作用脂类生成与脂解来抑制脂肪沉积。(本文来源于《现代畜牧兽医》期刊2019年08期）
瞿茹怡,徐玉梅,蒋英,郑洁[6]（2019）在《硫酸脱氢表雄酮抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的分子机制研究》一文中研究指出目的探讨硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)对3T3-L1前脂肪细胞株分化的影响及可能的分子机制。方法以3T3-L1细胞株为研究对象,先观察不同时间点不同剂量的DHEA-S对3T3-L1细胞活力的影响,确定合适的干预浓度。3T3-L1细胞分为DMSO组(对照组)和DHEA-S组,观察DHEA-S对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。通过测定甘油醛3-磷酸脱氢酶(G3PDH)活性和用油红O染色计算的脂肪细胞分化率,评估脂肪细胞分化的变化;用real time-PCR法观察诱导前(第0天)和诱导后不同时间点(第1,2,4,6,10,14天)目的基因过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP1-c)、CCAAT增强子结合蛋白家族(C/EBPs)、11β-羟类固醇脱氢酶1(11HSDB1)、激素敏感性脂肪酶(HSL)和脂蛋白酯酶(LPL) mRNA表达的变化。结果 MTT实验结果显示DHEA-S在50μmol/L时对细胞活力影响<30%,对后续的干预影响较小。分化后第4天对照组和DHEA-S组的G3PDH活性分别为(380. 83±28. 43) nmol/(min·mg)和(253. 07±27. 67) nmol/(min·mg),分化后第10天对照组和DHEA-S组的G3PDH活性为(573. 93±17. 5) nmol/(min·mg)和(398. 17±24. 05) nmol/(min·mg),差异均具有统计学意义(P <0. 01)。油红O染色计算脂肪细胞分化率对照组和DHEA-S组在诱导后第4天分别为39. 09%±5. 51%和15. 66%±0. 75%,第10天分别为78. 82%±3. 37%和49. 09%±9. 75%,差异也有统计学意义(P <0. 01)。real time PCR检测结果显示,DHEA-S显着抑制脂肪细胞分化相关的关键基因(PPARγ、ADD1/SREBP1-c、C/EBPs、11HSDB1、LPL和HSL) mRNA的表达。结论 DHEA-S(50μmol/L)在体外可能通过抑制11HSDB1的表达,减少局部活性皮质醇,进而下调其他脂肪细胞分化的关键基因,抑制3T3-L1细胞的分化。(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2019年08期）
许洁[7]（2019）在《壬基酚诱发大鼠肥胖和促进3T3-L1前脂肪细胞分化的研究》一文中研究指出(本文来源于《中国毒理学会青年委员会科技沙龙论文集》期刊2019-06-13）
齐雯[8]（2019）在《MEHP对3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢的影响及机制》一文中研究指出邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)是邻苯二甲酸酯类物质中最常使用的增塑剂,广泛应用于食品包装材料、医疗器械、儿童玩具等,可通过多种途径进入人体。DEHP摄入机体后,可在肝脏和小肠细胞中迅速代谢成其水解产物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯(mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP),DEHP对机体的毒性作用主要通过MEHP实现。作为一种环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptor,EEDs),DEHP暴露可对生物体生殖系统、神经系统、内分泌系统等多个组织系统产生毒性作用。流行病学研究和毒理学研究表明DEHP暴露可影响机体脂代谢,诱发肥胖;MEHP对3T3-L1小鼠前脂肪细胞生长具有促进作用,能够促使3T3-L1细胞分化为成熟脂肪细胞,增加细胞内脂质沉积,但其作用机制尚不清楚。本研究通过体外培养3T3-L1小鼠前脂肪细胞并给予DEHP代谢产物MEHP暴露,分析MEHP暴露对3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢的影响,探讨脂代谢相关信号通路和脂代谢关键基因在MEHP暴露影响3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢中的作用和机制,可为防治环境内分泌干扰物所致人群脂代谢相关疾病提供理论依据。第一部分MEHP对3T3-L1细胞分化和脂代谢的影响目的:明确MEHP对3T3-L1细胞分化和脂代谢的影响,探讨脂代谢关键基因在MEHP影响3T3-L1细胞分化中的作用。方法:使用含10%小牛血清的DMEM培养基体外培养3T3-L1小鼠前脂肪细胞,给予3T3-L1细胞梯度MEHP暴露。MTT法检测3T3-L1小鼠前脂肪细胞存活率;根据MTT结果确定染毒剂量与实验分组。暴露剂量与分组:空白对照(0μM MEHP),溶剂对照组(0.25‰DMSO,0μM MEHP),低剂量组(10μM MEHP),中剂量组(50μM MEHP)和高剂量组(250μM MEHP)。采用流式细胞术检测细胞周期、细胞内活性氧以及线粒体膜电位的改变;采用经典激素鸡尾酒方法进行3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化实验,并在分化过程中持续给予不同剂量MEHP暴露;油红O染色观察3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化程度;化学发光法检测甘油叁酯、胆固醇水平;实时荧光定量PCR方法检测脂代谢关键基因Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγm RNA表达水平;western blot方法检测脂代谢调控因子Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγ的表达水平。采用IBM SPSS 24.0进行统计分析。结果:1.3T3-L1细胞暴露于63,125,250,500μM MEHP 24 h后,细胞存活率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.各剂量MEHP组3T3-L1小鼠前脂肪细胞周期无明显改变(P>0.05);与对照组相比,中、高剂量组3T3-L1细胞活性氧含量显着升高(P<0.05),线粒体膜电位显着降低(P<0.05)。3.诱导分化过程中可见,3T3-L1小鼠前脂肪细胞体积增大、形态变圆、细胞质内出现反光脂滴,细胞内脂质含量随MEHP暴露剂量增加而升高(P<0.05);分化结束后,中、高剂量组细胞中甘油叁酯含量明显高于对照组,差异具有统计学意(P<0.05)。4.3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化后,MEHP暴露组中Acox-1 m RNA表达水平显着高于对照组(P<0.05),中、高剂量组中Acox-1 m RNA表达显着高于低剂量组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组中FABP4和PDK4 m RNA的相对表达量显着高于对照组,高剂量组FABP4 m RNA的相对表达量显着高于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05);高剂量组FAS和C/EBPβm RNA的相对表达量显着高于其他各组(P<0.05);3T3-L1细胞中PPARγm RNA的相对表达量随着MEHP暴露剂量的增加而增加(P<0.05)。5.3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化后,低、中、高剂量组中的Acox-1蛋白表达水平显着高于对照组(P<0.05),中、高剂量组中Acox-1蛋白表达显着高于低剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05);中、高剂量MEHP暴露组中C/EBPβ蛋白的表达水平显著高于对照组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组中FABP4蛋白表达水平显着高于对照组,高剂量组FABP4蛋白表达量显着高于其他各组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组FAS蛋白表达水平显着高于其他各组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组LPL和PDK4蛋白表达水平显着高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),中、高剂量MEHP暴露组PPARγ蛋白的表达量显著高于低剂量组和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.MEHP暴露能够促进3T3-L1小鼠前脂肪细胞的增殖、分化和细胞内脂质蓄积。2.MEHP暴露能够改变3T3-L1小鼠前脂肪细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧的水平影响线粒体功能。3.MEHP暴露可通过上调Acox-1、C/EBPβ、FAS、FABP4、LPL、PDK4和PPARγ基因m RNA及其蛋白的表达影响脂代谢。第二部分MEHP对3T3-L1细胞脂代谢相关信号通路的影响目的:明确MEHP暴露对3T3-L1细胞脂代谢相关信号通路JAK-STAT信号通路和及Notch信号通路基因表达的影响,探讨JAK-STAT信号通路和Notch信号通路在MEHP影响3T3-L1前脂肪细胞分化和脂代谢中的作用。方法:3T3-L1细胞培养、实验分组以及甘油叁酯、胆固醇水平检测同第一部分。Real-time-PCR方法检测JAK-STAT信号通路中JAK-1、JAK-2、JAK-3、TYK-2、STAT-1、STAT-3、STAT-5a和STAT-5b m RNA的表达水平,以及Notch信号通路中Notch-1、Notch-2、Notch-3、Notch-4及其配体Dll-1、Dll-4、Jagged-1、Jagged-2 m RNA表达水平;western Blot方法检测JAK-STAT信号通路中JAK-1、JAK-2、JAK-3、TYK-2、STAT-1、STAT-3、STAT-5a以及STAT-5b的蛋白表达水平,以及Notch信号通路中Notch-1、Notch-2、Notch-3、Notch-4及其配体Dll-1、Dll-3、Jagged-1以及Jagged-2蛋白表达水平。采用IBM SPSS 24.0进行统计分析。结果:1.3T3-L1细胞诱导分化后,高剂量组细胞JAK-2、JAK-3 m RNA表达显着低于其余各组(P<0.05);与对照组相比,MEHP暴露组细胞TYK-2 m RNA表达显着升高,差异具有统计学意义(P<0.05),中、高剂量组TYK-2 m RNA表达水平显着高于低剂量组(P<0.05);高剂量组STAT-1 m RNA表达显着高于空白对照组(P<0.05);MEHP暴露组STAT-3 m RNA的相对表达量显着高于对照组(P<0.05);中、高剂量组中STAT-3 m RNA表达明显高于低剂量组(P<0.05);高剂量组STAT-5a m RNA表达显着高于对照组和低剂量组(P<0.05)。2.诱导分化后,高剂量组3T3-L1小鼠前脂肪细胞中JAK-1蛋白表达明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MEHP暴露组细胞TYK-2蛋白表达水平显着高于对照组(P<0.05);中、高剂量组TYK-2蛋白表达显着高于低剂量组(P<0.05);MEHP暴露组细胞STAT-3、STAT-5a蛋白表达水平显着高于对照组(P<0.05),中、高剂量组STAT-3、STAT-5a表达水平显着高于低剂量组(P<0.05);中、高剂量组中STAT-5b表达水平显着升高(P<0.05),高剂量组STAT-5b蛋白表达水平最高(P<0.05)。3.JAK-STAT信号通路基因表达水平与甘油叁酯水平的相关研究发现,诱导分化后3T3-L1细胞中甘油叁酯的含量与TYK-2、STAT-3、STAT-5a m RNA和蛋白表达水平显着相关(P<0.05)。4.3T3-L1细胞诱导分化后,中剂量组细胞Notch-1 m RNA的相对表达量显着高于对照组(P<0.05),高剂量组Notch-1 m RNA显着高于其余各组(P<0.05);Notch-3、Notch-4 m RNA表达水平随着MEHP暴露剂量升高而呈上升趋势,高剂量组显着高于其余各组(P<0.05);中剂量组细胞Jagged-1 m RNA表达显着高于空白对照组(P<0.05);中、高剂量组与对照组相比,3T3-L1细胞Jagged-2m RNA表达明显上升(P<0.05),高剂量组Jagged-2 m RNA表达显着高于低剂量组(P<0.05);高剂量组Dll-4 m RNA的相对表达量显着高于其余各组(P<0.05)。5.诱导分化后的3T3-L1细胞,高剂量组细胞Notch-2蛋白表达显着高于其余各组(P<0.05);中剂量组的Jagged-1表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);高剂量组细胞Jagged-2蛋白表达显着高于对照组(P<0.05);高剂量组Dll-1蛋白表达水平相助高于其余各组;高剂量组与低剂量组Dll-4蛋白表达量显着升高(P<0.05)。6.JAK-STAT信号通路和Notch信号通路基因m RNA和蛋白表达水平与3T3-L1细胞内TG含量的相关性研究结果显示,诱导分化后3T3-L1细胞内TG含量与JAK-STAT信号通路TYK-2、STAT-3、STAT-5a m RNA及其蛋白表达水平显着相关;与Notch信号通路Notch-1、Jagged-2 m RNA表达水平显着相关(P<0.05)。结论:1.MEHP暴露可影响JAK-STAT信号通路相关基因和蛋白的表达,影响3T3-L1细胞分化成熟和细胞内脂质蓄积。2.MEHP暴露后3T3-L1细胞中TG含量与JAK-STAT信号通路中TYK-2、STAT-3、STAT-5a m RNA及其蛋白表达密切相关。3.MEHP暴露可影响Notch信号通路中基因和蛋白表达,影响3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化成熟和细胞内脂质蓄积。4.MEHP暴露后3T3-L1细胞中TG含量与Notch信号通路中Notch-1、Jagged-2 m RNA及其蛋白表达密切相关。第叁部分STAT-3在MEHP影响3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢中的作用及其机制目的:构建稳定转染3T3-L1小鼠前脂肪细胞STAT-3沉默细胞株;明确JAK-STAT信号通路中STAT-3在MEHP影响3T3-L1前脂肪细胞分化和脂质水平中的作用;探讨STAT-3在MEHP所致脂代谢紊乱中的作用机制。方法:采用STAT-3沉默慢病毒(Lv/sh-STAT-3)、非沉默慢病毒(Lv/sh-NC)分别感染3T3-L1小鼠前脂肪细胞,构建稳定转染3T3-L1小鼠前脂肪细胞STAT-3沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR方法以及western blot方法检测细胞中STAT-3的沉默效率。采用经典激素鸡尾酒法对正常3T3-L1细胞和Lv/sh-NC、Lv/sh-STAT-3稳转3T3-L1细胞进行诱导分化,并给予不同处理。实验分组为:亲本对照组(Parental)为0μM MEHP,非沉默感染组(Lv/sh-NC)为0μM MEHP,STAT-3沉默组(Lv/shSTAT-3)为0μM MEHP,暴露组包括250μM MEHP暴露STAT-3沉默组(Lv/shSTAT-3+MEHP)和250μM MEHP暴露非沉默感染组(Lv/sh-NC+MEHP)。油红O染色观察3T3-L1细胞分化程度;化学发光法检测甘油叁酯、胆固醇水平;实时荧光定量PCR方法检测脂代谢调控因子Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγm RNA表达水平;western blot方法检测脂代谢调控因子Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγ的表达水平。结果:1.STAT-3沉默慢病毒(Lv/sh-STAT-3)以及非沉默慢病毒(Lv/sh-NC)感染3T3-L1小鼠前脂肪细胞后,感染效率较高,感染效果较好。2.Lv/sh-NC组细胞内STAT-3 m RNA和蛋白表达水平与Parental组相比均无明显变化(P>0.05),Lv/sh-STAT-3组STAT-3 m RNA及其蛋白表达水平均显着低于Parental组和Lv/sh-NC组(P<0.05)。3.Lv/sh-STAT-3组3T3-L1细胞内TG含量略低于Parental组和Lv/sh-NC组,但差异无统计学意义(P>0.05);Lv/sh-STAT-3+NC组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组3T3-L1细胞中TG含量明显高于非暴露Parental组、Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组,差异具有统计学意义(P<0.05);而Lv/sh-STAT-3+MEHP组细胞内TG含量明显低于Lv/sh-NC+MEHP组,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.Lv/sh-NC和Lv/sh-STAT-3组细胞内Acox-1、FAS、FABP4、LPL、PDK4m RNA表达水平与Parental组相比未发生明显变化(P>0.05)。Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组中Acox-1、FAS、FABP4、LPL、PDK4 m RNA表达水平明显高于Parental组、Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.与Parental组相比,Lv/sh-NC组细胞C/EBPβ基因m RNA表达水平未发生明显变化(P>0.05),而Lv/sh-STAT-3组与Parental组和Lv/sh-NC组相比,细胞内C/EBPβm RNA表达水平显着降低(P<0.05);Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/shSTAT-3+MEHP组细胞C/EBPβm RNA表达水明显高于Parental组、Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组(P<0.05),而Lv/sh-STAT-3+MEHP组C/EBPβm RNA表达水平明显低于Lv/sh-NC+MEHP组(P<0.05)。与Parental组比较,Lv/sh-NC组细胞PPARγm RNA表达水平无明显变化(P>0.05);而Lv/sh-STAT-3组细胞PPARγm RNA表达水平显着低于Parental组和Lv/sh-NC组(P<0.05);与非暴露Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组相比,Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组内的PPARγm RNA表达水平显着升高(P<0.05);而Lv/sh-STAT-3+MEHP组的PPARγm RNA表达水平显着低于Lv/sh-NC+MEHP组(P<0.05)。6.与Parental组相比,Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组细胞Acox-1、FABP4、FAS、PDK4和C/EBPβ、PPARγ蛋白表达水平未发生明显变化;而MEHP暴露后,Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组内的Acox-1、FABP4、FAS、PDK4和C/EBPβ、PPARγ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:1.采用STAT-3沉默慢病毒(Lv/sh-STAT-3)成功构建稳定转染3T3-L1小鼠前脂肪细胞STAT-3沉默细胞株。2.STAT-3能够促进3T3-L1细胞分化成熟和内脂质蓄积3.MEHP可能通过STAT-3调节脂代谢关键基因C/EBPβ和PPARγm RNA及其蛋白的表达水平在所致脂代谢紊乱中发挥作用。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
李文梅[9]（2019）在《壬基酚诱发大鼠肥胖和促进3T3-L1前脂肪细胞分化的研究》一文中研究指出国内外肥胖人数激增,成为生命健康中重要的安全隐患。流行病学调查和动物实验表明,除不良饮食和生活习惯导致肥胖以外,环境内分泌干扰物(Environmentalendocrine disruptors,EDCs)暴露与肥胖具有关联性。壬基酚(Nonylphenol,NP)作为典型的EDCs,广泛存于生活环境中,通过污染食物和食物链等途径进入机体,扰乱内分泌稳态。为探究NP暴露是否导致肥胖及其可能作用关键期,本文采用体内外实验分别探讨NP暴露对大鼠致肥作用和NP对脂肪细胞分化的作用研究。第一部分 壬基酚暴露对大鼠致肥作用研究目的:探讨NP长期暴露对大鼠的致肥作用。方法:40只4周龄SD大鼠(150±10)g,雌雄各半,随机分为4组,每组10只。分别为:对照组(C组),[低(L)、中(M)、高(H)]NP剂量组,染毒剂量为0、0.02、0.2、2μg/(kg·day~(-1))。定期监测大鼠体重,持续染毒26周进行剖杀取材。取腹主动脉全血得血清,全自动生化仪检测血清中脂质总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油叁酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(Hight density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平;ELISA法检测OD值计算血清中脂代谢蛋白[脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS)、调控脂肪细胞分化的关键基因转录调节因子(CCAAT enhancer binding protein Alpha,CEBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferators-activated receptorγ,PPARγ)、转录因子固醇结合蛋白1(Sterrol regulatory element-binding protein factor 1,SREBP1)]含量;取性腺旁脂肪垫称重后以计算脂肪脏器系数;脂肪组织HE染色后,镜下观察病理变化并进行脂肪细胞计数;用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)检测其中NP含量;取适量脂肪组织100 mg提取蛋白/RNA进行蛋白印迹法实验(Western Blot,WB)/实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Quantitative real-time reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)实验,检测脂肪组织中脂代谢(CEBPα、FAS、PPARγ、SREBP1)和凋亡[B淋巴细胞癌-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteiny1 aspartate specific protein-3,caspase-3)]相关目的蛋白/目的基因的表达水平。结果:1.大鼠NP暴露1-17周,大鼠体重有增高趋势,但无统计学差异;NP暴露21-26周随着NP剂量的增加大鼠体重呈现出C组<L组<M组<H组的变化趋势(P均<0.05);2.大鼠暴露NP后脂肪重量/脂肪系数(F_(脂肪重量)=103.605;F_(脂肪系数)=169.807,P<0.001)随NP暴露剂量的增加而增加;3.各染毒组脂肪组织中NP含量高于对照组,染毒浓度越高,组织中NP蓄积量越高(F=561.353,P<0.001);4.NP暴露组血脂(TC、TG、LDLC)含量均高于对照组(F_(TC)=3.798;F_(TG)=14.117;F_(LDL-C)=4.946,P<0.05);5.脂肪组织HE染色,200倍镜下观察到对照组脂肪细胞排列整齐、大小均匀,中、高剂量组脂肪细胞面积逐渐增大,且部分细胞膜破裂,经镜下细胞计数发现,对照组的细胞数明显多于NP,随NP剂量的增加,镜下细胞数减少(F=85.873,P<0.001);6.血清中脂代谢相关蛋白含量增加(F_(CEBPα)=189.104;F_(FAS)=51.011;F_(PPARγ)=114.306;F_(SREBP1)=30.432,P<0.001);7.NP暴露组脂肪组织中脂代谢相关蛋白(CEBPα、FAS、PPARγ、SREBP1)和凋亡相关蛋白(bax、caspase-3)表达增加(F_(CEBPα)=53.403;F_(FAS)=295.249;F_(PPARγ)=169.936;F_(SREBP1)=213.586;F_(Bax)=245.707;F_(Caspase-3)=87.711,P<0.001);8.NP暴露组脂肪组织中脂代谢相关mRNA(CEBPα、FAS、PPARγ、SREBP1 mRNA)和凋亡相关mRNA(bax、caspase-3 mRNA)相对表达量增加(F_(CEBPα)=101.086;F_(FAS)=439.600;F_(PPARγ)=10.540;F_(SREBP1)=123.499;F_(bax)=31.758;F_(caspase-3)=42.238,P<0.001)。结论:1.2μg/kg/day NP暴露21周可导致大鼠肥胖,主要表现为体重、脂肪重量/脂肪系数、血脂增加;2.大鼠NP暴露后血清中脂蛋白含量和脂肪组织中脂代谢(FAS、CEBPα、PPARγ、SREBP1)蛋白/RNA的表达水平异常;3.NP暴露诱发大鼠肥胖同时导致脂肪组织凋亡蛋白表达增加。第二部分 壬基酚促进3T3-L1前脂肪细胞分化的研究目的:探讨壬基酚对3T3-L1前脂肪细胞分化影响的关键期。方法:将3T3-L1前脂肪细胞培养至接触抑制后,NP暴露48h后运用噻唑蓝[Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide,MTT]法测其细胞活力,计算半数最大抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)确定NP暴露浓度;根据MDI诱导方案将细胞NP暴露时间分为MDI诱导前(诱导前期)、MDI诱导时(诱导中期)、MDI诱导成熟脂肪细胞(诱导后期),NP暴露时间均为48 h。倒置相差显微镜观察细胞状态和分化情况;将各组细胞经油红O染色后在倒置相差显微镜下观察脂质沉积;蛋白印迹法检测细胞中脂代谢相关蛋白(CEBPα、FAS、PPARγ、SREBP1)和凋亡相关蛋白(bax、caspase-3)表达情况。结果:1.通过MTT比色法测细胞活力计算得出NP对3T3-L1前脂肪细胞IC50为40μM,由此确定NP暴露剂量为0、40 p M、40 n M、40μM。2.NP暴露3T3-L1前脂肪细胞(诱导前期)发现,视野内油红染色程度加深,其中NP(40 p M、40 n M)油红染色主要集中在细胞膜部位;NP40μM时细胞内出现红染色。NP暴露组细胞内脂代谢相关蛋白(CEBPα、FAS、PPARγ、SREBP1)和凋亡相关蛋白(bax、caspase-3)表达增加(FCEBPα=517.864;FFAS=124.005;FPPARγ=286.338;FSREBP1=1640.631;Fbax=220.050;Fcaspase-3=1199.542,P<0.001)。3.在3T3-L1前脂肪细胞经MDI诱导时暴露NP48 h后持续培养12 d(诱导中期),油红O染色可见暴露NP后脂滴增多增大,NP(40μM)时,视野内分化细胞数明显高于对照组,且脂滴明显增多增大;NP暴露组细胞内脂代谢相关蛋白明显高于对照组(FCEBPα=539.103;FFAS=715.740;FPPARγ=114.783;FSREBP1=139.600;Fbax=54.329;Fcaspase-3=449.201,P<0.001)。4.成熟脂肪细胞暴露NP 48 h(诱导后期),经油红O染色发现,与对照组比较NP暴露可使细胞内红染程度稍有增加。细胞内脂代谢相关蛋白(CEBPα、FAS、PPARγ、SREBP1)和凋亡相关蛋白(bax、caspase-3)表达均稍有增加(FCEBPα=29.727;FFAS=20.609;FPPARγ=330.951;FSREBP1=27.093;Fcaspase-3=15.490,P<0.001;Fbax=4.686,P=0.008)。结论:1.NP可促进3T3-L1前脂肪细胞分化,引起细胞脂代谢和凋亡相关蛋白表达增加;2.NP促进脂肪分化关键期是MDI诱导分化前期和MDI诱导分化期,且随NP暴露剂量增加,细胞分化程度增加。(本文来源于《遵义医科大学》期刊2019-05-01）
温加静[10]（2019）在《罗非鱼前脂肪细胞传代培养模型的建立及诱导分化》一文中研究指出本实验以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为实验对象,探索罗非鱼前脂肪细胞的诱导分化及传代培养方法。本论文首先设计不同的原代培养条件:培养时间、接种密度、换液方式,探索最佳的首次传代培养条件。实现传代后,通过比较不同血清、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、谷氨酰胺(Gln)对罗非鱼前脂肪细胞传代培养的影响,探索罗非鱼前脂肪细胞的新传代培养基,并对细胞进行了冻存、复苏,从而建立了罗非鱼前脂肪细胞传代培养模型。之后,本论文分析了传代培养的罗非鱼前脂肪细胞及在其他不同离体培养条件下(24小时离体培养;原代培养汇合期;原代诱导分化)的脂肪细胞与活体中脂肪组织的脂肪酸组成差异。研究发现,细胞离体培养时间越长,脂肪酸组成成分越少、越简单,但C16:0、C18:0、C18:1n-9和C18:2这4种脂肪酸一直存在且保持较高比例。罗非鱼脂肪组织里,不饱和脂肪酸比例显着高于饱和脂肪酸,其中,单不饱和脂肪酸含量最高。然而,体外培养的脂肪细胞里,饱和脂肪酸所占比重都高于不饱和脂肪酸。最后,本文探索了传代培养的罗非鱼前脂肪细胞的诱导分化方法。本文设计了四种诱导分化培养基:(1)培养基1:15%FBS+10μg/ml胰岛素+DMEM/F12;(2)培养基2:培养基1+1.0mmol/L DEX+0.5mmol/L IBMX;(3)培养基3:培养基2+0.4mmol/L吲哚美辛;(4)培养基4:培养基2+2μg/ml鳕鱼肝油脂肪酸(甲基酯)。12天后,采用油红染色比较观察细胞的生长状况,结果发现培养基4对细胞的诱导结果最佳。本论文工作建立了较为系统的罗非鱼前脂肪细胞的传代培养和分化诱导方法,并对体外培养的脂肪细胞与脂肪组织间的脂肪酸组成有了新的认识,为进一步开展罗非鱼脂代谢提供了可靠的细胞研究平台。(本文来源于《华东师范大学》期刊2019-04-01）
牛前脂肪细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中二甲双胍对囊泡相关膜蛋白(VAMPs)mRNA表达变化,探讨二甲双胍促进葡萄糖转运子4(GLUT4)转运中的作用机制。方法在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中,分别持续给予不同浓度的二甲双胍(0、0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L)干预12 d后,比较不同浓度的二甲双胍对AMPK、GLUT4及VAMP2、VAMP3、VAMP4、VAMP5、VAMP7、VAMP8的mRNA水平。结果与0 mmol/L组相比,0.5 mmol/L组GLUT4、VAMP2、VAMP3、VAMP8 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与0 mmol/L组相比,1 mmol/L组上调GLUT4、VAMP2、VAMP3、VAMP8 mRNA水平升高(P<0.05);与1 mmol/L组相比,2 mmol/L组下调GLUT4及VAMP2、VAMP3、VAMP5、VAMP8 mRNA表达水平(P<0.05)。各组间AMPK1、VAMP4、VAMP7的mRNA表达水平比较差异无统计学意义。结论二甲双胍可以作用于前脂肪细胞的诱导分化过程,且呈剂量依赖性地上调脂肪细胞中GLUT4及VAMP2、VAMP3、VAMP8 mRNA的表达。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
牛前脂肪细胞论文参考文献
[1].吴永祥,张瑶,卢玮玮,胡晓倩,权泰亨.蕨菜超临界萃取物化学成分及其抑制3T3-L1前脂肪细胞分化作用研究[J].中国药理学通报.2019
[2].任毅,杨霞,侯敬天,吕欣,王建红.二甲双胍作用于3T3-L1前脂肪细胞诱导阶段对v-SNAREs蛋白家族mRNA表达的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志.2019
[3].王丹丹,程佩,孙文星,徐广飞.白藜芦醇抑制人内脏前脂肪细胞增殖和分化[C].营养研究与临床实践——第十四届全国营养科学大会暨第十一届亚太临床营养大会、第二届全球华人营养科学家大会论文摘要汇编.2019
[4].胡婷婷,巩雪俐,高佳乐,徐尤宗盛,孟轩羽.双链RNA结合蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡作用[J].新疆医科大学学报.2019
[5].李德鹏,耿晓晖,高月锋,王尚尚,富俊才.葡萄籽原花青素对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响[J].现代畜牧兽医.2019
[6].瞿茹怡,徐玉梅,蒋英,郑洁.硫酸脱氢表雄酮抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的分子机制研究[J].山西医科大学学报.2019
[7].许洁.壬基酚诱发大鼠肥胖和促进3T3-L1前脂肪细胞分化的研究[C].中国毒理学会青年委员会科技沙龙论文集.2019
[8].齐雯.MEHP对3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢的影响及机制[D].吉林大学.2019
[9].李文梅.壬基酚诱发大鼠肥胖和促进3T3-L1前脂肪细胞分化的研究[D].遵义医科大学.2019
[10].温加静.罗非鱼前脂肪细胞传代培养模型的建立及诱导分化[D].华东师范大学.2019