1.湖南省中医药研究院附属医院湖南长沙410006；2.湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007
【摘要】目的观察中药经典方剂六味地黄汤对肝微粒体CytP450酶系的P3A及b5影响进行比较分析。方法ICR小鼠50只雌雄各半，随机分成10组，每组十只，即：空白组（生理盐水组），肝药酶诱导剂（苯巴比妥钠）组，肝药酶抑制剂（西米替丁）组，六味地黄汤组5.63g/kg?d，六味地黄汤组11.26g/kg?d。苯巴比妥纳组为皮下注射给药，其余组均为灌胃给药，1次/天，苯巴比妥纳组0.08g/kg?d，西米替丁组0.4g/kg?d，其他中药组均20ml/Kg?d，共10天。末次给药1小时后处理动物，取肝组织制备肝微粒体，测定P3A及b5的含量，进行统计比较。结果六味地黄汤11.26g/kg.d组与六味地黄汤5.63g/kg.d组小鼠肝细胞微粒色素P3A含量明显增加（P<0.05）；六味地黄汤11.26g/kg.d组与六味地黄汤5.63g/kg.d组六味地黄汤小鼠肝细胞微粒色素b5含量减少（P<0.05）。结论六味地黄汤对P3A有诱导作用，对b5具有抑制作用，高剂量作用均强于低剂量组。
【关键词】六味地黄汤；肝微粒体；CytP450酶
六味地黄汤记载于宋代?钱乙《小儿药证直诀》中，为现代多应用于血糖、血脂、血压、抗疲劳及儿科等疾病的治疗。该方组成有熟地黄、山萸肉、干山药、泽泻、牡丹皮、茯苓六味药组成，主治一切慢性疾病过程中出现的肾阴亏损，或肝肾不足，或兼见阴虚火旺之证[1]。今年来许多研究表明中药对肝微粒体CytP450酶系有诱导或者抑制作用，本文将从中药经典方六味地黄汤对肝微粒体CytP450的影响进行比较观察，我们前期为对肝微粒体CytP450的影响的基础上进一步研究六味地黄汤配伍增效和减毒机制以及药物相互作用提供实验依据。
1材料与方法
1.1实验动物
ICR小鼠，雌雄各半，体重22±2g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK（湘）2013-0002.
1.2药品与试剂
六味地黄汤组成：熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、茯苓、丹皮，上述药物均为同批道地药材，由湖南省中医药研究院附属医院中心药房提供，经生药室鉴定合格。由制剂室制备，均采取二次水提取法制得粗提取物，并分别浓缩成浸膏。使用时按需要用蒸馏水配成相应的浓度使用。苯巴比妥钠（国药准字H12020381天津金耀药业有限公司），西咪替丁（国药准字H43021799生产企业：湖南汉森制药有限公司）；0.25mol/L蔗糖溶液，浓HCl溶液，88mmol/LCacl2溶液，PMS缓冲液。
1.3仪器器材
仪器：PH测定仪、冷温高速离心机、组织匀浆机、天平。
器材：手术剪（大、小）各2把，注射器15、10、5、2、1ml各5支，中号培养皿10个，40孔试管架二个，试管约200支，塘磁盘二个，大量冰块。
1.6统计分析方法
采用SPSS19.0统计分析软件进行统计学分析。计量资料均采用均数±标准差（±S）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较，方差齐，采用LSD（L）法进行分析，方差不齐的实验数据采用Dunnett’s法进行统计学处理，P﹤0.05表示有统计学意义，P﹤0.01表示所检验的差别有非常显著性意义。
2.结果
2.1与生理盐水组比较，六味地黄汤5.63g/kg.d组小鼠肝细胞微粒色素P3A含量增加（P<0.05）；六味地黄汤11.26g/kg.d组P3A含量明显增加（P<0.01）；西咪替丁组P3A含量明显减少（P<0.05）；苯巴比妥钠组P3A含量明显增加（P<0.01）。六味地黄汤10g/kg.d比六味地黄汤5.63g/kg.d（P<0.05），六味地黄汤11.26g/kg.d及六味地黄汤10g/kg.d对P3A有诱导作用，高剂量组诱导作用强于低剂量组。
2.2与生理盐水组比较，六味地黄汤5.63g/kg.d组小鼠肝细胞微粒色素b5含量减少（P<0.05）；六味地黄汤11.26g/kg.d组b5含量明显减少（P<0.01）；西咪替丁组b5含量无明显变化（P＞0.05）；苯巴比妥钠组b5含量明显增加（P<0.01）。六味地黄汤10g/kg.d比六味地黄汤5.63g/kg.d（P<0.05），六味地黄汤11.26g/kg.d及六味地黄汤10g/kg.d对b5有抑制作用，高剂量组抑制作用强于低剂量组。
3.讨论
中药复方配伍是中药复方的核心，随着中药和方剂研究的不断深入，方剂配伍原理的现代研究日益受到重视[2]。中药及其复方的药理作用具有多效性[3]，通过辨证论治原则组成的复方，其各个组成部分相互之间产生化学反应又具有新物质及新功能，使得复方形式比单味药具有更优越的整体调节功能，从而更有力地纠正机体的各种不平衡状态，为有效地治疗复杂疾病奠定了基础[4]。随着中药复方的广泛应用，配伍的有效性和安全性逐渐成为研究者关注焦点。
参考文献：
[1]杨林，孙静，郝璐.六味地黄丸组方的临床应用及研究.浙江中医药大学学报.2010.（05）.
[2]杨丽蓉.中药复方配伍研究方法概况与进展.海峡药学.2008.（06）.
[3]李庆生，李静平，毛晓健，朱兆云，刘波，孙敏.中药复方新药研发中的制剂工艺研究思路与方法探讨.天津中医药.2008.（04）.