导读:本文包含了双链病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:宿主防御,cGAS-STING,DNA,敏感度
双链病毒论文文献综述
王晨光,管玉坤,Mengze,Lv,Rui,Zhang,Zhaoying,Guo[1]（2019）在《锰增加双链DNA的cGAS-STING通路的敏感度并为宿主防御DNA病毒所需要》一文中研究指出文章简介通过分析细胞培养基不同组分对细胞抗病毒能力的影响,课题组意外发现Mn2+可以强烈激活细胞内的cGASSTING通路,使细胞获得很强的抗病毒能力。分子机制研究表明,病毒感染引发宿主细胞线粒体膜电位的丧失及(本文来源于《科学新闻》期刊2019年02期）
钱忠军[2]（2017）在《有望揭示病毒装配新机制》一文中研究指出本报武汉8月11日专电(驻鄂钱忠军)华中农业大学果树病理研究团队首次发现线形双链RNA病毒，这是迄今国际上已知的最长病毒。该病毒处于从正单链RNA病毒到双链RNA病毒及从“裸露”病毒到外壳包被病毒的进化过渡地位，且具有很小的基因组却包被在超长的病毒颗(本文来源于《文汇报》期刊2017-08-12）
荚恒霞[3]（2017）在《一种线性双链RNA病毒的鉴定及其分子生物学特性研究》一文中研究指出山茶刺盘孢菌(Colletotrichum camelliae Massee)可寄生茶树引起茶云纹叶枯病(Tea Brown Blight)。该病是危害茶树叶的最常见病害,在世界各茶区分布广泛,造成叶枯、芽坏死以及枯萎等症状,从而导致茶叶的产量和质量的严重下降。本研究从茶叶片上分离得到茶云纹叶枯病菌株LT-3-1,相比正常的茶云纹叶枯病菌株DP-3-1,菌株LT-3-1的菌落形态较异常,生长速度较缓慢,致病力也较弱。通过提取LT-3-1和DP-3-1菌株菌丝的dsRNA,发现LT-3-1中存在8条dsRNA片段,大小分别为2444、2253、2012、1299、1122、1085、1053和990bp,共编码了10个开放阅读框(Open Reading Frame Finder,ORF)。其中dsRNA1、-2、-3、-4、-6、-7都编码一个独立的开放阅读框,依次命名为ORF1、ORF2、ORF3、ORF4、ORF6、ORF7,而dsRNA5和-8分别编码ORF5-1、ORF5-2和ORF8-1、ORF8-2。其中ORF1编码依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp),ORF3编码甲基转移酶,ORF4编码外壳蛋白(Coat protein,CP),其他的开放阅读框所编码的蛋白功能未知。基于该病毒与已知病毒的序列相似性和RdRp进化树分析,显示该dsRNA链为一个新的dsRNA病毒基因组成分。基于该病毒的病毒形态(见下面分析),我们将其命名为刺盘孢线形病毒(Colletotrichum camelliae filamentous virus 1,CcFV1)。采用蔗糖梯度超速离心提纯病毒粒体,从各梯度层提取核酸显示在20%-30%蔗糖层存在8条核酸链,大小与从菌丝中提取的8条dsRNA大小一致;提取蛋白显示在该层存在大小为31kDa的蛋白(命名为P31),经质谱分析表明P31为该病毒的CP蛋白,由dsRNA4编码。将20%-30%蔗糖层纯化的病毒液进行铜网吸附后负染,经透射电镜观察,观察到了长线形的类似病毒的粒子,长为127.1-4661.6nm,宽为11.9-17.7 nm。为了进一步的确定该线形粒子是该病毒的病毒粒体,回收P31蛋白免疫2-3周龄的Balb/C雌鼠,制备CcFV1 CP蛋白的多克隆抗体,间接ELISA测定其效价为1:128000,最适工作浓度为1:2000,且Western-blot分析证明该抗体可与P31蛋白发生特异的免疫反应。将提纯的病毒液和稀释的抗体(1:2000或1:8000)混合,经铜网吸附负染进行透射电镜观察,显示该抗体有效地结合在线形粒子周围,由此确定该线形粒子即为该病毒的病毒粒体。对菌株LT-3-1的分生孢子后代进行单孢培养,挑取47株单孢后代菌株进行dsRNA的提取以及RT-RCR检测,结果显示CcFV1在后代菌株中的脱毒率为100%。采取PEG介导CcFV1 dsRNA1至-8转染无毒菌株DP-3-1和脱毒菌株LT-3-1D2的细胞原生质体,提取dsRNA进行病毒检测,表明在两种菌株中的传毒率分别为10/94和3/129。对脱毒和转染菌株进行病毒提取,从转染菌株中可以提取到CcFV1的核酸、蛋白和长线形病毒粒子,而脱毒菌株中检测不到这些成分。比较脱毒菌株和带毒菌株生物学性状表明,带毒菌株较无毒菌株黑色素增多,菌丝轮纹圈消失,生长速度降低(正常菌株为6.3-6.5 mm/d,带毒菌株为5.4 mm/d),致病力减弱(正常菌株病斑大小为6.1-14.9 mm,带毒菌株为5.4 mm)。将菌株LT-3-1和脱毒菌株LT-3-1D2进行超薄切片观察,相比较于菌株LT-3-1D2来说,菌株LT-3-1细胞中囊泡结构增多,伏鲁宁体和液泡消失。(本文来源于《华中农业大学》期刊2017-06-01）
张俊,胡荣,李政,方守国,郭灵芳[4]（2015）在《双链RNA技术在植物病毒病监测中的应用》一文中研究指出正常的植物体内很难检测到双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)的存在,但是植物遭受病原生物入侵后,往往产生大量的dsRNA,有些是植物应对病原物入侵而产生的小分子dsRNA,有些是RNA病毒入侵寄主而产生的复制中间体(replicative intermediate,RI)或病毒本身的基因组核酸就是dsRNA。鉴于90%的植物病毒病是RNA病毒引起的情况,探讨了dsRNA技术(dsRNA提取和克隆技术)在植物病毒病监测中的应用。具体应用如下:①dsRNA病毒病的监测,可选择双链RNA快速小量提取法,它能够从0.5~0.8 g的植物组织中快速提取dsRNA,借助dsRNA病毒特异的基因组图谱完成对样品的鉴定,在水稻病毒病的监测中得到了应用;②单链RNA病毒病的监测,可选择双链RNA快速大量提取法,即富集复制中间体的方法,从5~10g植物组织中富集病毒的dsRNA,然后通过克隆和序列分析完成鉴定,该方法在蔬菜和花卉病毒病中得到了应用;③新病毒的挖掘,借助dsRNA技术,发现了6种新的病毒,其中3种病毒的基因组已登录Genbank,即Brassica compestris chrysovirus 1(KP782029、KP78203、KP782031)、Panax notoginseng virus A(KT388111)、Erysiphe cichoracearum endornavirus(KT388110)。因此,双链RNA技术可以作为植物病毒病监测的一种重要手段。(本文来源于《植物病理学研究进展——中国植物病理学会第十二届青年学术研讨会论文选编》期刊2015-10-23）
王爱华,管世鹤,杨凯,张浩,孙蓓蓓[5]（2015）在《干扰素诱导的双链RNA依赖性蛋白激酶体外抗乙型肝炎病毒活性的研究》一文中研究指出目的构建表达双链RNA依赖性蛋白激酶(PKR)融合绿色增强荧光蛋白(p EGFP-PKR)真核表达质粒,并进一步研究PKR蛋白在体外抗乙型肝炎病毒(HBV)活性。方法以p EGFP-N1为空载体,运用分子克隆技术构建重组质粒p EGFP-PKR,通过双酶切和直接测序两种方法验证重组质粒p EGFP-PKR是否构建成功。以能分泌完整HBV病毒颗粒子的肝胚瘤细胞株Hep G2.2.15细胞为细胞模型,采用重组质粒转染方式处理Hep G2.2.15细胞,运用荧光显微镜观察融合蛋白p EGFP-PKR在细胞内的表达,以电化学发光方法和实时荧光定量PCR技术分析细胞上清HBV抗原表达和细胞病毒复制水平。结果酶切鉴定和序列分析证实成功构建重组质粒p EGFP-PKR,转染Hep G2.2.15细胞后在荧光显微镜下可见融合蛋白p EGFP-PKR表达,同时细胞分泌的HBV抗原与空载体组相比较明显下降(P<0.05),而细胞外HBV复制水平未见明显变化。结论在体外肝细胞模型中,PKR蛋白具有一定的抗HBV活性作用。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2015年09期）
王俊红,问姣,董鹏,张静,焦杨[6]（2015）在《重组双链及单链腺相关病毒介导Exendin-4表达效率的比较》一文中研究指出比较双链腺相关病毒(Double-stranded adeno-associated virus,ds AAV)及单链AAV(Singlestranded adeno-associated virus,ss AAV)介导Exendin-4分泌表达效率。应用基因工程方法构建ds AAV/p SSHG/Exendin-4,与重组ss AAV比较转染NIH3T3细胞效率及转染后细胞上清Exendin-4浓度,免疫组化检测Exendin-4表达。经限制性内切酶及测序证实载体构建成功,测定重组ds AAV p SSHG/Exendin-4滴度为2.5×1011pfu,较重组ss AA滴度高(2.5×109pfu);ds AAV/p SSHG/GFP转染NIH3T3细胞表达绿色荧光强;ELISA法检测感染重组ds AAV的NIH3T3细胞上清中Exendin-4的浓度为181.1±8.75pmol/ml,较重组ss AAV分泌浓度(133.81±8.09pmol/ml)升高(P<0.05);重组ds AAV及ss AAV转染NIH3T3细胞Exendin-4表达均为阳性。重组ds AAV可分泌表达Exendin-4并较ss AAV具有更高效转染能力,为研究Exendin-4功能及应用于临床打下基础。(本文来源于《生物医学工程研究》期刊2015年02期）
黄佳鸣,宁喜斌,史秀杰,刘荭,丛健[7]（2015）在《叁重荧光定量PCR快速检测水产品中的双链DNA病毒的研究》一文中研究指出目的:建立对水产品中叁种双链DNA病毒(斑点叉尾鮰病毒、锦鲤疱疹病毒、流行性造血器官坏死病毒)快速、敏感、特异的检测方法。方法:针对叁种病毒的DNA聚合酶基因的保守序列设计叁对特异性引物和叁条Taqman探针,优化体系,建立叁重荧光定量PCR体系,并对该方法的灵敏性和特异性评估。结果:建立的叁重荧光定量PCR体系特异性强,引物之间及引物和探针之间无相互干扰。对叁种病毒的检测限均能达到102拷贝/μL。结论:该方法体系稳定,重复性好,可操作性强,对水产品中的双链DNA病毒的快速检测具有重要的应用价值。(本文来源于《食品工业科技》期刊2015年01期）
孙润泽[8]（2014）在《原核表达双链RNA抗水稻黑条矮缩病毒和水稻条纹病毒研究》一文中研究指出水稻是一种重要的粮食作物,水稻的高产稳产对于保障粮食安全有重要的战略意义。水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf disease, RBSDV)和水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)是危害水稻的两种主要病毒病害,每年给水稻生产带来巨大经济损失。目前我国水稻病毒病防治主要以化学防治为主。而化学防治又存在诸如农药残留,污染生态环境和诱发传毒介体抗药性等问题。RNA介导的病毒抗性(RNA-mediated virus resistance)指依托于基因工程技术,构建包含病毒基因发夹RNA的植物表达载体,转化植物,以抵抗病毒侵染。目前利用该策略已转化获得多种抗病毒转基因植物。RNA介导的病毒抗性具有表型近乎免疫、抗性持久、生物安全性高等特点。尽管如此,由于公众出于对转基因植物生态风险和食品安全性的考虑,抗病毒转基因植物的应用仍然受到极大地限制。用细菌等原核生物表达病毒dsRNA处理植物,通过RNA沉默技术抵御病毒侵染,为我们提供另一条有效途径。本研究选取RBSDV和RSV的外壳蛋白基因(Coat Protein, CP)作为靶序列,利用PCR技术分别扩增两个CP基因的中间区域长度为400bp的cDNA片段,分别构建发夹RNA (hpRNA)结构的原核表达载体,转入大肠杆菌M-JM1091acY菌株中,经IPTG诱导,均可表达400bp的dsRNA。对单一变量温度、IPTG终浓度、诱导时间进行初步筛选,然后优化组合叁个变量,进行诱导表达优化实验。结果显示,dsRNA的最适表达条件是在0.4mmol/L IPTG和32℃条件下,诱导3h, dsRNA的相对表达量最大。在病毒传毒介体飞虱迁飞时期即秧田期,用稀释不同倍数的表达载体菌液破碎液喷施水稻幼苗,进行水稻田间病毒防效实验。统计结果显示,喷施终浓度2.4×10-3μg/μL pGEM-RBSDVCP400表达载体菌液破碎液的水稻发病率为25.1%,喷施终浓度2.4×10。μg/μL pGEM-RSVCP400dsRNA表达载体菌液破碎液的水稻发病率为11.7%,与同组其他稀释浓度相比发病率最低；而喷施TE缓冲液和水的对照组发病率分别为56.1%和62.8%；表明原核表达双链RNA可以有效地抵抗RBSDV和RSV的侵染。Northern blot检测显示,用原核表达dsRNA处理的水稻植株中,可以分别检测到RBSDV和RSV的siRNA,表明抗性是由RNA介导的。(本文来源于《山东农业大学》期刊2014-06-12）
王俊红[9]（2014）在《重组双链腺相关病毒表达Exendin-4对2型糖尿病大鼠模型的治疗作用》一文中研究指出目的：构建表达Exendin-4重组双链腺相关病毒（dsAAV）载体，包装并检测重组病毒转染细胞效率及表达Exendin-4浓度，观察重组dsAAV治疗2型糖尿病大鼠模型效果。方法：重迭延伸PCR扩增Exendin-4基因片段，应用基因工程方法构建加有神经营养因子4信号肽的dsAAV载体pSSHG/NT4-Exendin-4，使用表达GFP的对照AAV转染NIH3T3细胞观察转染效率，ELISA法检测重组病毒转染NIH3T3细胞上清Exendin-4浓度，同时与ssAAV比较；注射重组dsAAV于糖尿病大鼠模型颌下腺，分别于2、4、6及第8周检测血糖水平、胰岛素浓度，免疫组化方法检测颌下腺Exendin-4及胰岛素的表达。结果：经限制性内切酶及测序证实载体构建成功，测定重组dsAAV滴度为2.5×1011pfu，较ssAA滴度高(2.5×109pfu)；dsAAV/GFP转染NIH3T3细胞表达绿色荧光强；ELISA法检测感染dsAAV的NIH3T3细胞上清中Exendin-4的浓度为181.1±8.75pmol/ml，较ssAAV分泌浓度（133.81±8.09pmol/ml）升高（p<0.05）；dsAAV/Exendin-4治疗组鼠血糖控制良好，增加胰岛素分泌，与对照组比较有显着统计学差异（p<0.05）。治疗组大鼠颌下腺Exendin-4及胰岛素免疫组织化学染色阳性。结论：成功构建、包装可表达Exendin-4的重组dsAAV，具有高效转染能力，对糖尿病大鼠具有持续控制血糖及促进胰岛素分泌的治疗效果，为其应用于临床打下基础。(本文来源于《第四军医大学》期刊2014-05-01）
郭灵芳,刘小娟,吴祖建,章松柏[10]（2014）在《双链RNA快速小量提取法在水稻dsRNA病毒病诊断中的应用》一文中研究指出水稻病毒病是水稻生产中重要的病害,目前国内流行的水稻病毒病病原多为dsRNA病毒,每一种dsRNA病毒都有特异性基因图谱,为此,探讨了双链RNA快速小量提取法在水稻dsRNA病毒病诊断中的应用。结果表明:1)双链RNA快速小量提取法可以从0.5~0.8g的水稻组织中快速提取dsRNA,在3h内完成对样品的鉴定,提取产物可以直接应用于dsRNA的检测、分类以及相关基因的克隆;2)提取效率较传统方法高,以SRBSDV为例,传统dsRNA提取方法中dsRNA的产率为0.15~0.3μg/g,该方法中dsRNA的产率茎组织达到3μg/g以上,叶组织0.1~0.5μg/g;3)该方法也可以应用于介体体内的dsRNA病毒基因组核酸的提取。(本文来源于《贵州农业科学》期刊2014年01期）
双链病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本报武汉8月11日专电(驻鄂钱忠军)华中农业大学果树病理研究团队首次发现线形双链RNA病毒，这是迄今国际上已知的最长病毒。该病毒处于从正单链RNA病毒到双链RNA病毒及从“裸露”病毒到外壳包被病毒的进化过渡地位，且具有很小的基因组却包被在超长的病毒颗
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
双链病毒论文参考文献
[1].王晨光,管玉坤,Mengze,Lv,Rui,Zhang,Zhaoying,Guo.锰增加双链DNA的cGAS-STING通路的敏感度并为宿主防御DNA病毒所需要[J].科学新闻.2019
[2].钱忠军.有望揭示病毒装配新机制[N].文汇报.2017
[3].荚恒霞.一种线性双链RNA病毒的鉴定及其分子生物学特性研究[D].华中农业大学.2017
[4].张俊,胡荣,李政,方守国,郭灵芳.双链RNA技术在植物病毒病监测中的应用[C].植物病理学研究进展——中国植物病理学会第十二届青年学术研讨会论文选编.2015
[5].王爱华,管世鹤,杨凯,张浩,孙蓓蓓.干扰素诱导的双链RNA依赖性蛋白激酶体外抗乙型肝炎病毒活性的研究[J].中国药理学通报.2015
[6].王俊红,问姣,董鹏,张静,焦杨.重组双链及单链腺相关病毒介导Exendin-4表达效率的比较[J].生物医学工程研究.2015
[7].黄佳鸣,宁喜斌,史秀杰,刘荭,丛健.叁重荧光定量PCR快速检测水产品中的双链DNA病毒的研究[J].食品工业科技.2015
[8].孙润泽.原核表达双链RNA抗水稻黑条矮缩病毒和水稻条纹病毒研究[D].山东农业大学.2014
[9].王俊红.重组双链腺相关病毒表达Exendin-4对2型糖尿病大鼠模型的治疗作用[D].第四军医大学.2014
[10].郭灵芳,刘小娟,吴祖建,章松柏.双链RNA快速小量提取法在水稻dsRNA病毒病诊断中的应用[J].贵州农业科学.2014
标签：宿主防御; cGAS-STING; DNA; 敏感度;