导读:本文包含了斑点免疫印迹法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:管家蛋白质,QDB,定量蛋白质组学,高通量研究
斑点免疫印迹法论文文献综述
门婷婷[1]（2018）在《量化斑点免疫印迹分析（QDB）在组织和细胞水平揭示管家蛋白质表达的研究》一文中研究指出目的:主要用于维持细胞功能的管家蛋白质通常用作内源性对照,因为它们被认为是充分和稳定表达的。然而,理想的、稳定表达的管家蛋白质实际上并不存在。由于各种因素,细胞暴露于快速变化的微环境中,为了在这些压力下生存下来,细胞必须采取各种策略来增加其对快速变化的微环境的适应性。这些微妙的调整都可能会影响到管家蛋白质的稳定性,严重影响结果的准确性和可靠性,甚至可能完全颠覆结果。因此,明确管家蛋白质的稳定性,在蛋白质组学水平是非常关键的。为了明确管家蛋白质在组织和细胞中的变化水平,并提出高通量研究方法:量化斑点免疫印迹分析技术(QDB)的优势,我们进行了相关研究。方法:(1)选取14只TRAMP鼠(C57BL/6系),用Western Blot法检测14只小鼠肝脏组织中6种管家蛋白质的含量,分析不同小鼠肝脏组织之间管家蛋白质的表达。(2)将TRAMP鼠肝脏按照解剖结构分为10个部位,用Western Blot法检测肝脏10个不同部位中6种管家蛋白质的水平,分析相同组织不同部位之间管家蛋白质的表达。(3)摘取87例小鼠的整个前列腺(包括40只野生鼠,47只TRAMP鼠,均为C57BL/6系)。将小鼠分为野生组与TRAMP组,再按周龄(12W、16～18W、20～30W)分层。用QDB技术检测前列腺组织样品中管家蛋白质Tubulin的表达水平。检测Tubulin的含量,探讨Tubulin的稳定性。(4)选取8种人类细胞系,用Western Blot法和QDB技术检测细胞中管家蛋白质Tubulin的含量。分析不同细胞中Tubulin的表达水平。(5)构建HEK293T单克隆细胞(转染腺病毒EIA基因的人肾上皮细胞系),共繁殖培养12组,分别使用QDB技术和Western Blot法检测12组细胞中管家蛋白质Tubulin的含量,分析相同细胞中Tubulin的表达是否一致。结果:综合分析管家蛋白质在组织中的表达是不稳定的。利用Western Blot方法检测6种管家蛋白质在肝脏组织中的表达,分析发现表达的不稳定性,进一步用QDB技术在大规模水平检测前列腺组织中Tubulin的含量,相同或不同周龄的野生鼠或TRAMP鼠中,Tubulin的表达水平不一致且差异显着。此外,我们在细胞实验中用Western Blot分析发现管家蛋白质Tubulin稳定性,但是具体差异无法测量,进一步通过QDB技术检测管家蛋白质Tubulin的绝对含量,明确Tubulin在细胞中的水平是比较稳定的。结论:管家蛋白质可以在个体之间呈现显着变化。基于相对测量的结论本质上是有限的,而在高通量研究中测量个体蛋白质的绝对含量是蛋白质组学水平所必需的,以避免在蛋白质水平上对结果的偏倚解释。(本文来源于《滨州医学院》期刊2018-03-19）
王美玲,冯珍如,李志艳,史晓敏,郑新芝[2]（2011）在《斑点免疫印迹法检测变应原特异性IgE抗体的比对分析》一文中研究指出目的比较斑点免疫印迹法(dot-immunoblotting test,dot-IBT)与荧光酶免疫分析法(fluorescence enzyme immunoassay,FEIA)对血清变应原特异性IgE抗体(specific IgE,sIgE)检测结果的一致性,从而验证dot-IBT法检测sIgE抗体的有效性。方法收集来自临床科室待检测标本(1035份),同时应用dot-IBT法与FEIA法进行sIgE检测。比较和分析两种不同方法所得结果。结果两种方法实验结果总符合率大于90%,KAPPA系数均大于0.74。结论应用dot-IBT检测sIgE与FEIA法检测结果具有较高符合率;dot-IBT可以作为一种快速、简便、经济的检测方法应用于sIgE检测。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2011年03期）
王厚伟,窦彦玲,田景振,李峰,王世军[3]（2009）在《基于寒/热性对照抗原的斑点免疫印迹法中药药性研究》一文中研究指出目的:从免疫原性上探讨中药药性的物质基础。方法:以高良姜、肉桂与仙茅3味典型热性中药水提物的混合品作为热性对照抗原,以黄连、大黄与知母3味典型寒性中药水提物的混合品作为寒性对照抗原,免疫家兔后,制备相应多克隆抗体,分别应用寒、热性对照抗原抗体与9味中药水提物作斑点免疫印迹,杂交信号应用QuantityOne定量扫描分析。结果:9味中药与热性对照抗原多克隆抗体的印迹信号大小顺序为:干姜、附子、杜仲、秦皮、金银花、知母、黄连、大黄、黄柏;与热性对照抗原多克隆抗体的印迹信号相似度分别为:57.33%,43.56%,34.16%,30.2%,28.81%,26.53%,21.68%,17.62%,14.85%;9味中药与寒性对照抗原多克隆抗体的印迹信号大小顺序为:大黄、知母、黄连、黄柏、干姜、金银花、秦皮、杜仲、附子;与寒性对照抗原多克隆抗体的印迹信号相似度分别为:55.22%,54.23%,46.72%,34.08%,30.3%,24.48%,24.33%,20.35%,15.17%。以印迹信号相似度为聚类变量,经Wistar’sMethod聚类分析,9味中药被聚为2大类,一大类为:黄柏、知母、黄连、大黄,该大类与寒性对照抗原距离小,与寒性对照抗原的距离依次增大;另一大类为:干姜、附子、杜仲、秦皮、金银花,该大类与热性对照抗原距离小,与热性对照抗原的距离依次增大。结论:总体上,测试中药与对照抗原抗体的印迹信号相似度越小,其药性与对照抗原的距离越大;斑点免疫印迹法是中药药性物质基础研究的一种实用、有效的新方法。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2009年04期）
王厚伟[4]（2008）在《斑点免疫印迹法快速测定4品种家蚕蛾下颚溶茧酶含量》一文中研究指出目的:测定4品种家蚕蛾下颚溶茧酶含量,并建立斑点免疫印迹法在中药材药效成分含量的测定方法。方法:以兔抗溶茧酶多抗为一抗,应用斑点免疫印迹法对4品种家蚕蛾下颚溶茧酶含量作定性检测,杂交信号应用Quantity one软件作定量分析。结果:4品种家蚕蛾下颚的个体溶茧酶平均含量分别为6.41、8.09、7.62、1.88μg/头。结论:不同品种家蚕蛾间下颚溶茧酶含量差异显着。斑点免疫印迹法简便快捷,结果准确,无需大型设备,可用于类似中药材药效物质的含量测定与品质评价。(本文来源于《中药材》期刊2008年11期）
王厚伟[5]（2008）在《斑点免疫印迹法快速测定地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物》一文中研究指出目的测定参环毛蚓、秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓和天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物,建立斑点免疫印迹法评价相应生药材药效成分明确的中药炮制品质量新方法。方法以兔抗蚓激酶单抗为一抗,应用斑点免疫印迹法对地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物作定性检测,杂交信号应用Quantity One软件作定量分析。结果现行中药材参环毛蚓与山东产地方品种:秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓、天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物的质量分数分别为125.23、118.34、81.05、72.13μg/g。结论秉氏环毛蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物与现行地龙炮制品参环毛蚓无显着差异,理论上可作为广地龙的替代品。斑点免疫印迹法简便快捷,结果准确,无需大型设备,可用于地龙与类似中药材炮制品的品质评价。(本文来源于《中草药》期刊2008年11期）
王厚伟[6]（2008）在《斑点免疫印迹法中药药性物质基础研究策略》一文中研究指出中药药性的物质基础是否存在规律性问题的回答,对于目前国家973项目"中药药性理论相关基础问题研究"中的中药药性物质基础的研究具有方向性的指导意义。本文首次提出了斑点免疫印迹法中药药性物质基础的思路,其基本思想是:分别选用10味典型寒、热性中药的水提物作为对照抗原,免疫动物后制备相应的寒、热性对照抗原抗体,以之与其他中药水提物作斑点免疫印迹,依据对照抗原抗体对不同药性中药水提物抗原的免疫识别作用,根据杂交信号的有、无和强、弱,平行比较不同药性中药之间物质基础的相似度。应用凝胶分析软件对杂交信号作轨迹定量扫描分析,根据同一中药与寒、热性对照抗原抗体的杂交信号,作聚类分析,并作出中药药性寒、热程度的距离图谱。(本文来源于《辽宁中医杂志》期刊2008年10期）
王厚伟,田景振,李峰[7]（2008）在《基于3味寒性中药多克隆抗体的斑点免疫印迹法中药药性研究》一文中研究指出目的:从免疫原性上探讨中药药性的物质基础。方法:以黄连、大黄与知母3味典型寒性中药水提物的混合品作为寒性对照抗原,免疫家兔后,制备相应多克隆抗体,应用该寒性对照抗原抗体与9味中药水提物作斑点免疫印迹,杂交信号应用Quantity One定量扫描分析。结果:9味中药免疫印迹信号轨迹的大小顺序为:大黄、知母、黄连、黄柏、干姜、金银花、秦皮、杜仲、附子;与寒性对照抗原的相似度分别为:22.75%,11.60%,6.99%,2.05%,2.02%,1.66%,1.61%,1.30%,0.75%;经Wistar's Method聚类分析,大黄、知母、黄连被聚为一大类,与对照抗原距离最小;其他6味中药被聚为3小类,分别为:黄柏、干姜,金银花、秦皮,杜仲、附子,后者与对照抗原距离最大。结论:9味中药的免疫印迹信号总体上随着药性由寒转热而变弱,斑点免疫印迹法是中药药性物质基础研究的一种实用、有效的新方法。(本文来源于《中药药理与临床》期刊2008年05期）
王厚伟,田景振[8]（2008）在《斑点免疫印迹法快速测定水蛭炮制品中水蛭素水解产物含量》一文中研究指出目的:测定4批次水蛭炮制品水蛭素水解产物含量,建立斑点免疫印迹法评价相应生药材药效成分明确的中药炮制品质量新方法。方法:以鼠抗水蛭素单抗为一抗,应用斑点免疫印迹法对水蛭炮制品中水蛭素水解产物作定性检测,杂交信号应用Quantity one软件作定量分析。结果:4批次水蛭炮制品所含水蛭素水解产物的质量分数分别为296.51,165.47,95.58,298.05μg.g-1。结论:不同批次水蛭炮制品之间水蛭素水解产物含量差异显着,斑点免疫印迹法简便快捷,结果准确,无需大型设备,可用于水蛭与类似中药材炮制品的品质评价。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2008年19期）
王厚伟[9]（2008）在《基于药物抗原性的斑点免疫印迹法中药药性研究与思考》一文中研究指出分别选用10味典型寒、热性中药的水提物作为对照抗原,免疫动物后制备相应的寒、热性对照抗原抗体,以之与其他中药水提物作斑点免疫印迹,对照抗原抗体对不同药性中药水提物抗原产生免疫识别作用,根据杂交信号的有、无和强、弱,平行比较不同药性中药之间物质基础的相似度。应用凝胶分析软件对杂交信号进行轨迹定量扫描分析,根据同一中药与寒、热性对照抗原抗体的杂交信号进行聚类分析,并做出中药药性寒、热程度的距离图谱。(本文来源于《山东中医药大学学报》期刊2008年05期）
虞伟,顾晨曦,张瑾,贾丽,李晓军[10]（2008）在《抗CCP抗体斑点免疫印迹试验测定方法的建立与初步应用》一文中研究指出目的建立检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的斑点免疫印迹试验,探讨其在类风湿关节炎(RA)疾病诊断中的价值。方法通过方阵滴定法选择斑点免疫印迹试验检测抗CCP抗体的最佳实验条件,并用该法检测RA、其他疾病及健康人血清,同时与自行建立的ELISA法及欧蒙试剂抗CCP抗体检测结果作对比分析。结果斑点免疫印迹试验检测抗CCP抗体对RA的诊断敏感性为52%,特异性为94%,并具有较好的方法学稳定性和特异性。在48例被诊断为RA患者中有25例抗CCP抗体阳性,显着高于其他疾病组和正常对照组(P<0.01)。对比研究结果表明,该法与基于RSA-CCP固相模式建立的ELISA法具有高度的相关性(χ2=131.712)和一致性(Kappa=0.771,P<0.001),与欧蒙试剂检测结果亦具有高度的相关性(χ2=24.147)和很好的一致性(Kappa=0.714,P<0.001)。结论成功建立了抗CCP抗体检测的斑点免疫印迹试验,实验结果稳定,特异,可靠,值得进一步推广和研究。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2008年06期）
斑点免疫印迹法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的比较斑点免疫印迹法(dot-immunoblotting test,dot-IBT)与荧光酶免疫分析法(fluorescence enzyme immunoassay,FEIA)对血清变应原特异性IgE抗体(specific IgE,sIgE)检测结果的一致性,从而验证dot-IBT法检测sIgE抗体的有效性。方法收集来自临床科室待检测标本(1035份),同时应用dot-IBT法与FEIA法进行sIgE检测。比较和分析两种不同方法所得结果。结果两种方法实验结果总符合率大于90%,KAPPA系数均大于0.74。结论应用dot-IBT检测sIgE与FEIA法检测结果具有较高符合率;dot-IBT可以作为一种快速、简便、经济的检测方法应用于sIgE检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
斑点免疫印迹法论文参考文献
[1].门婷婷.量化斑点免疫印迹分析（QDB）在组织和细胞水平揭示管家蛋白质表达的研究[D].滨州医学院.2018
[2].王美玲,冯珍如,李志艳,史晓敏,郑新芝.斑点免疫印迹法检测变应原特异性IgE抗体的比对分析[J].中国实验诊断学.2011
[3].王厚伟,窦彦玲,田景振,李峰,王世军.基于寒/热性对照抗原的斑点免疫印迹法中药药性研究[J].中国中药杂志.2009
[4].王厚伟.斑点免疫印迹法快速测定4品种家蚕蛾下颚溶茧酶含量[J].中药材.2008
[5].王厚伟.斑点免疫印迹法快速测定地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物[J].中草药.2008
[6].王厚伟.斑点免疫印迹法中药药性物质基础研究策略[J].辽宁中医杂志.2008
[7].王厚伟,田景振,李峰.基于3味寒性中药多克隆抗体的斑点免疫印迹法中药药性研究[J].中药药理与临床.2008
[8].王厚伟,田景振.斑点免疫印迹法快速测定水蛭炮制品中水蛭素水解产物含量[J].中国中药杂志.2008
[9].王厚伟.基于药物抗原性的斑点免疫印迹法中药药性研究与思考[J].山东中医药大学学报.2008
[10].虞伟,顾晨曦,张瑾,贾丽,李晓军.抗CCP抗体斑点免疫印迹试验测定方法的建立与初步应用[J].中国实验诊断学.2008