导读:本文包含了家蚕抗菌肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:家蚕,眠期,抗菌肽基因,转录表达
家蚕抗菌肽论文文献综述
杨伟克,唐芬芬,刘增虎,董占鹏[1]（2019）在《眠期家蚕抗菌肽基因的转录表达分析》一文中研究指出【目的】探究家蚕眠期抗菌肽基因的表达变化规律,为深入拓展理解眠期家蚕免疫防御机制提供新线索。【方法】以四龄眠0、12、24 h和五龄起蚕的家蚕幼虫为实验材料,利用抑菌曲线法测定血淋巴的抑菌活性,采用实时荧光定量PCR检测脂肪体抗菌肽基因的表达情况。【结果】四龄眠0、12、24 h和五龄起蚕的血淋巴对金黄色葡萄球菌均无抑菌作用,而四龄眠12和24 h的血淋巴对大肠杆菌均有明显的抑菌作用。这表明眠期家蚕血淋巴出现了选择性抑菌活性。在四龄眠至五龄起蚕不同发育时间,抗菌肽基因Lebocin3和Moricin的表达量无显着变化;Attacin1基因仅在四龄眠24 h出现上调表达;CecropinB6和Gloverinv2基因的表达量逐渐减弱,呈现下调表达的趋势,而Enbocin2和DefensinB的表达量逐渐升高,呈现上调表达趋势。【结论】眠期家蚕抗菌肽基因表达规律并不一致,Attacin1、Enbocin2和DefensinB可能在家蚕眠期发挥一定的免疫防御功能。(本文来源于《西南农业学报》期刊2019年10期）
胡丛武,李瑞林,侯成香,高坤,耿涛[2]（2018）在《家蚕抗菌肽Cecropin A单克隆抗体制备及其对Cecropin A组织特异性表达检测》一文中研究指出球孢白僵菌是家蚕的重要病原,危害着蚕业生产的发展,同时也是最普遍采用的生防真菌之一。目前已知抗菌肽作为家蚕先天免疫过程中一类主要的抗菌复合物,对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌等具有很好的杀死或抑制生长作用。抗菌肽种类繁多,作用机制也不尽相同。通过对球孢白僵菌侵染家蚕幼虫后的转录组数据及血淋巴差异蛋白组数据进行分析,发现抗菌肽Cecropin A在家蚕受到球孢白僵菌侵染后显着上调表达,并且家蚕Cecropin A在家蚕体内体外都对白僵菌有明显的抑菌作用,但其发挥作用的具体机制还不清楚。本研究根据NCBI登录的抗菌肽BmcecropinA(登录号:NM_001043997.1)cDNA序列,采用生物信息学抗原性分析预测软件对序列进行分析,化学合成法合成CecropinA成熟肽(23～63)以及51～63氨基酸序列,分别偶联KLH和BSA后以此为抗原混合免疫Balb/c小鼠,制备获得小鼠源单克隆抗体,获得两株可识别特异性抗原表位的杂交瘤细胞株。通过蛋白质印迹检测发现杂交瘤细胞培养上清液对家蚕Cecropin A具有明显的特异性抗原抗体反应。利用杂交瘤细胞上清以1:10比例稀释后对大造品系家蚕血淋巴进行蛋白质印迹检测,结果显示仅其中一株杂交瘤细胞上清能在PVDF膜上与抗原结合产生特异性单一条带,大小约为5kD,即为目的蛋白CecropinA,表明该细胞株产生的单克隆抗体可识别线性表位,不依赖于抗原的特定构象;继续使用该株杂交瘤上清对家蚕大造品系、箐松×皓月品系血淋巴进行蛋白质印迹检测,结果显示相同大小位置上,箐松×皓月品系并未检测到条带,表明该株杂交瘤上清所识别的抗原表位处存在氨基酸多态性,造成其对抗原的识别具有家蚕品系特异性。本研究所制备的单克隆抗体将被应用于CecropinA在家蚕幼虫感染球孢白僵菌后的组织特异性表达及其互作蛋白的筛选等研究工作。(本文来源于《中国蚕学会2018年学术年会论文集》期刊2018-10-11）
谢昆,谭玉婷,王靖,赵昱,张成桂[3]（2018）在《家蚕抗菌肽基因BmCecropinD的克隆及重组蛋白的自诱导表达》一文中研究指出BmCecropinD是家蚕体内的一种抗菌肽,具有极强的抗菌活性。以家蚕中肠总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增BmCecropinD基因,构建pET32a-BmCecropinD原核表达载体,采用自诱导表达系统表达BmCecropinD重组蛋白。结果表明,BmCecropinD基因大小186bp,编码61个氨基酸,自诱导表达的重组蛋白约为18ku,表达产率比IPTG诱导的重组蛋白表达产率高,为BmCecropinD抗菌肽的纯化、活性鉴定及应用奠定了基础。(本文来源于《动物医学进展》期刊2018年05期）
谢昆,王靖,王丽仙,朱灵明,尹建华[4]（2018）在《家蚕抗菌肽基因的克隆及重组蛋白的自诱导表达》一文中研究指出抗菌肽是生物体内具有抗菌活性的一种小分子物质,在昆虫细胞抵御外源微生物的感染过程中发挥着重要作用。为研究家蚕抗菌肽基因克隆、重组抗菌肽的表达和纯化方法,以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计4对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增BmCecropin、BmCecropin B6、BmCecropin D和Bmmoricin这4种抗菌肽基因,通过自诱导方式原核表达4种抗菌肽重组蛋白,并对4种抗菌肽重组蛋白进行Ni-NTA亲和层析和超滤纯化。结果表明,克隆的BmCecropin、BmCecropin B6、BmCecropin D和Bmmoricin这4种抗菌肽的基因大小分别为198,108,105,129 bp,通过自诱导方式表达的BmCecropin、BmCecropin B6、BmCecropin D和Bmmoricin这4种抗菌肽重组蛋白,经SDS-PAGE电泳检测,大小分别为24,21,20,22 ku,经Ni-NTA亲和层析和超滤纯化后的4种抗菌肽重组蛋白条带单一。结果可为4种抗菌肽重组蛋白后续的抑菌试验和在抑菌剂、化妆品和防腐剂等方面的进一步应用奠定基础。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年01期）
谢昆,王丽仙,王靖,朱灵明,尹建华[5]（2017）在《家蚕抗菌肽基因BmMoricin的克隆及重组蛋白的自诱导表达》一文中研究指出抗菌肽是构成昆虫体液免疫的主要方式,BmMoricin是家蚕免疫系统中1种重要的抗菌肽,具有极强的抑菌活性。以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计1对特异性引物,通过RT-PCR技术扩增BmMoricin,构建pET32aBmMoricin原核表达载体,采用自诱导表达系统表达BmMoricin重组蛋白。结果表明,BmMoricin基因片段的大小为201 bp,编码66个氨基酸,自诱导表达的BmMoricin重组蛋白大小约为19 ku,表达产率比异丙基-β-D-疏基半乳糖苷(IPTG)诱导的重组蛋白表达产率高,为BmMoricin抗菌肽的生物学活性鉴定及应用奠定了基础。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2017年21期）
刘怡[6]（2017）在《BmBrC-Z介导家蚕免疫反应中20E对抗菌肽基因的激活》一文中研究指出昆虫具有高效的先天性免疫系统以防御病原菌和寄生虫对自身的侵袭,体液免疫和细胞免疫为昆虫的两大免疫系统。抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是昆虫体液免疫反应中的重要效应因子,对于防御外来微生物入侵发挥着重要作用,可以直接抑制入侵微生物的增殖甚至直接将其杀死。已有的研究表明蜕皮激素20E(20-hydroxyecdysone,20E)对昆虫的先天性免疫反应有重要调控作用,当昆虫遭到病原菌入侵时,其机体的20E通过Immune Deficiency(IMD)信号通路上调AMPs等免疫相关基因的表达。但是,20E是怎样调控AMPs等免疫相关基因表达的分子机制仍不清楚。本文对转录因子BmBrC-Z是否在家蚕体液免疫反应中介导了20E诱导抗菌肽基因表达进行了探究,结果证实了BmBrC-Z确实介导了20E上调BmAMPs的表达。主要结果如下:1、分别用大肠杆菌E.coli和黑胸败血芽孢杆菌B.bombyseptieus侵染家蚕五龄3天的幼虫,发现若在侵染前注射外源20E,家蚕的存活率显着升高,血液中菌落数量显着降低,表明蜕皮激素20E可以促进家蚕的免疫反应。2、分别在体内和体外用20E诱导家蚕的脂肪体进行并检测7个BmAMPs基因的表达水平,发现20E上调BmAMPs基因的表达且不同基因之间差异显着,初步筛选出表达量最高的BmCeCE作为主要研究对象之一。3、对11个BmAMPs基因启动子区域的转录因子结合位点进行预测,发现其中10个基因的启动子区域均存在BrC-Z元件,预测BmBrC-Z基因对BmAMPs基因具有调控作用;随后在BmNs细胞系中过表达BmBrC-Z基因并检测7个BmAMPs基因的表达水平,选出表达量最高的两个基因BmLeB3和BmGlv2,与BmCeCE一同作为进一步转录探究的抗菌肽基因。4、构建家蚕BmCeCE、BmGlv2和BmLeB3启动子的荧光报告载体并在BmNs细胞系中用20E诱导,证实这3个BmAMPs基因的确受20E信号的上调,将BmLeB3启动子上的BrC-Z4调控元件突变后启动子活性显着降低且不再受20E调节,表明BrC-Z是20E诱导BmAMPs的重要调控元件。5、在转染BmAMPs启动子报告基因的BmNs细胞系中将BmBrC-Z基因过表达后发现BmAMPs启动子活性显着升高,更直接地表明BmBrC-Z基因可以介导BmAMPs的表达。综上所述,在家蚕的体液免疫系统中,20E信号可以上调抗菌肽基因BmCeCE、BmGlv2和BmLeB3的表达,BmBrC-Z转录因子介导了这一过程。(本文来源于《重庆大学》期刊2017-04-01）
修妤,娄齐年,王安皆,石瑞常,华丽峰[7]（2016）在《新疆家蚕抗菌肽研究现状及应用综述》一文中研究指出抗菌肽是生物机体进行自我防御的屏障,能够抑制杀死多种细菌及寄生虫,但不同生物体内的抗菌肽在结构特征上存在较大差异,本文主要介绍了家蚕抗菌肽的特性,并重点介绍了新疆家蚕抗菌肽的研究现状和应用前景。(本文来源于《科技视界》期刊2016年24期）
黄玉霞,耿涛,侯成香,吕丁丁,覃光星[8]（2016）在《白僵菌诱导家蚕抗菌肽enbocin1基因的表达特征及产物的抗真菌活性》一文中研究指出家蚕的抗菌肽家族基因enbocin1是蚕体免疫系统相关基因。为解析家蚕对病原真菌感染免疫应答反应的分子机制,采用实时荧光定量PCR检测抗菌肽基因enbocin1在家蚕5龄幼虫感染球孢白僵菌(Beauveria bassiana)后的时空表达模式,结果显示:enbocin1主要在幼虫脂肪体中显着上调表达,而且持续至感染诱导后30 h,感染后8、30 h的表达水平分别上调了约44倍和6倍;在马氏管、体壁中该基因的诱导表达差异不显着,在血淋巴中几乎检测不到该基因的表达。进一步用原核表达系统成功表达并纯化获得了高纯度的重组家蚕抗菌肽enbocin1,体外抑菌试验表明其对白僵菌具有较强的抑菌活性,且重组enbocin1蛋白浓度与抑菌活性之间具有量效关系。用重组enbocin1蛋白制备了效价达1∶30 000的多克隆抗体,可用于进一步深入研究enbocin1的功能及其作用机制。研究结果提示抗菌肽enbocin1在家蚕抵御真菌感染的过程中可能具有重要作用。(本文来源于《蚕业科学》期刊2016年04期）
刘栋然,王磊,杨柳,钱岑,魏国清[9]（2016）在《家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂15抑制酚氧化酶原及抗菌肽的表达》一文中研究指出丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)在调节蛋白酶生物学功能上具有重要作用,本研究探讨了家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂15的功能。将Bmserpin-15在大肠杆菌中进行原核表达、纯化、并制备了相应的多克隆抗体。另外采用荧光定量PCR检测了家蚕Bmserpin-15的表达特征。结果表明该基因在脂肪体和丝腺中的表达量较高。白僵菌、藤黄色微球菌、大肠杆菌和核型多角体病毒刺激在基因和蛋白水平上均可诱导Bmserpin-15的明显表达,尤其是白僵菌和藤黄微球菌。重组表达的Bmserpin-15蛋白能够抑制血淋巴中酚氧化酶原的活性,但不影响酚氧化酶的活性。而重组Bmserpin-15蛋白注射家蚕后,其脂肪体内抗菌肽的表达水平明显下降。以上结果表明Bmserpin-15在家蚕天然免疫中具有重要作用。(本文来源于《第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）》期刊2016-07-01）
吕丁丁,耿涛,侯成香,黄玉霞,覃光星[10]（2016）在《家蚕抗菌肽cecropin A的表达特征及其体内外抑菌研究》一文中研究指出家蚕抗菌肤cecropin A(BmCecA)是家蚕体液免疫中产生的一种重要的抗菌肤。本研究利用RT-PCR技术克隆出BmCecA基因的开放阅读框(ORF),该ORF编码22个氨基酸的信号肤和37个氨基酸的成熟肤,通过蛋白结构分析该成熟肤形成经典的双亲α螺旋。实时荧光定量PCR表明,BmCecA在5龄家蚕的体壁、马氏管、中肠、丝腺、血淋巴和脂肪体中均有表达在脂肪体中表达量最高,其次是血淋巴。通过固相合成法合成BmCecA成熟肤用质谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明其分子量约为4.05 kD,高效液相色谱检测其纯度为89.14%。用合成多肤分别对革兰氏阴性菌大肠杆菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomouas aerugiuosa)、革兰氏阳性菌球形节杆菌(Arthrobacter globiformis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)做体外抑菌实验,发现BmCecA对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有明显的抑菌作用。首次用BmCecA做家蚕的体内抑菌实验,结果显示注射BmCecA的家蚕存活率显着高于对照组相对于对照组,致死中时间(LT_(50))分别延长了17.85%(大肠杆菌)、37.31%(铜绿假单胞菌)、21.92%(球形节杆菌)、49.45%(枯草芽孢杆菌)差异显着。凝胶迁移实验结果说明BmCecA可能在破坏细菌细胞膜之后作用于基因组DNA和RNA,从而导致细菌的快速死亡。本研究结果有利于从分子水平上深入理解家蚕乃至其它昆虫抵御细菌侵染的防御机理,也为家蚕的抗菌育种提供理论依据。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2016年06期）
家蚕抗菌肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
球孢白僵菌是家蚕的重要病原,危害着蚕业生产的发展,同时也是最普遍采用的生防真菌之一。目前已知抗菌肽作为家蚕先天免疫过程中一类主要的抗菌复合物,对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌等具有很好的杀死或抑制生长作用。抗菌肽种类繁多,作用机制也不尽相同。通过对球孢白僵菌侵染家蚕幼虫后的转录组数据及血淋巴差异蛋白组数据进行分析,发现抗菌肽Cecropin A在家蚕受到球孢白僵菌侵染后显着上调表达,并且家蚕Cecropin A在家蚕体内体外都对白僵菌有明显的抑菌作用,但其发挥作用的具体机制还不清楚。本研究根据NCBI登录的抗菌肽BmcecropinA(登录号:NM_001043997.1)cDNA序列,采用生物信息学抗原性分析预测软件对序列进行分析,化学合成法合成CecropinA成熟肽(23～63)以及51～63氨基酸序列,分别偶联KLH和BSA后以此为抗原混合免疫Balb/c小鼠,制备获得小鼠源单克隆抗体,获得两株可识别特异性抗原表位的杂交瘤细胞株。通过蛋白质印迹检测发现杂交瘤细胞培养上清液对家蚕Cecropin A具有明显的特异性抗原抗体反应。利用杂交瘤细胞上清以1:10比例稀释后对大造品系家蚕血淋巴进行蛋白质印迹检测,结果显示仅其中一株杂交瘤细胞上清能在PVDF膜上与抗原结合产生特异性单一条带,大小约为5kD,即为目的蛋白CecropinA,表明该细胞株产生的单克隆抗体可识别线性表位,不依赖于抗原的特定构象;继续使用该株杂交瘤上清对家蚕大造品系、箐松×皓月品系血淋巴进行蛋白质印迹检测,结果显示相同大小位置上,箐松×皓月品系并未检测到条带,表明该株杂交瘤上清所识别的抗原表位处存在氨基酸多态性,造成其对抗原的识别具有家蚕品系特异性。本研究所制备的单克隆抗体将被应用于CecropinA在家蚕幼虫感染球孢白僵菌后的组织特异性表达及其互作蛋白的筛选等研究工作。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
家蚕抗菌肽论文参考文献
[1].杨伟克,唐芬芬,刘增虎,董占鹏.眠期家蚕抗菌肽基因的转录表达分析[J].西南农业学报.2019
[2].胡丛武,李瑞林,侯成香,高坤,耿涛.家蚕抗菌肽CecropinA单克隆抗体制备及其对CecropinA组织特异性表达检测[C].中国蚕学会2018年学术年会论文集.2018
[3].谢昆,谭玉婷,王靖,赵昱,张成桂.家蚕抗菌肽基因BmCecropinD的克隆及重组蛋白的自诱导表达[J].动物医学进展.2018
[4].谢昆,王靖,王丽仙,朱灵明,尹建华.家蚕抗菌肽基因的克隆及重组蛋白的自诱导表达[J].华北农学报.2018
[5].谢昆,王丽仙,王靖,朱灵明,尹建华.家蚕抗菌肽基因BmMoricin的克隆及重组蛋白的自诱导表达[J].江苏农业科学.2017
[6].刘怡.BmBrC-Z介导家蚕免疫反应中20E对抗菌肽基因的激活[D].重庆大学.2017
[7].修妤,娄齐年,王安皆,石瑞常,华丽峰.新疆家蚕抗菌肽研究现状及应用综述[J].科技视界.2016
[8].黄玉霞,耿涛,侯成香,吕丁丁,覃光星.白僵菌诱导家蚕抗菌肽enbocin1基因的表达特征及产物的抗真菌活性[J].蚕业科学.2016
[9].刘栋然,王磊,杨柳,钱岑,魏国清.家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂15抑制酚氧化酶原及抗菌肽的表达[C].第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）.2016
[10].吕丁丁,耿涛,侯成香,黄玉霞,覃光星.家蚕抗菌肽cecropinA的表达特征及其体内外抑菌研究[J].基因组学与应用生物学.2016