谢琮琮:蓝杆藻ATCC51142中琥珀酸半醛脱氢酶的原核表达及生化表征论文

谢琮琮:蓝杆藻ATCC51142中琥珀酸半醛脱氢酶的原核表达及生化表征论文

本文主要研究内容

作者谢琮琮,李至敏,王小琴,雷国风,张伟,李志敏(2019)在《蓝杆藻ATCC51142中琥珀酸半醛脱氢酶的原核表达及生化表征》一文中研究指出:【背景】蓝藻中生成琥珀酸的三羧酸循环途径与其他物种不同。由于α-酮戊二酸脱羧酶和琥珀酸半醛脱氢酶的存在使得蓝藻的三羧酸循环途径变得完整。琥珀酸半醛脱氢酶催化琥珀酸半醛氧化为琥珀酸,在蓝藻中广泛存在。【目的】克隆、表达和纯化蓝杆藻ATCC51142中cce4228基因编码蛋白,并对其进行生化表征。【方法】以蓝杆藻ATCC51142基因组为模板克隆得到cce4228基因,将其插入到原核表达载体pET-28a上,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中进行异源表达,利用Ni-NTA树脂纯化cce4228蛋白。运用紫外分光光度法和生物信息学方法表征重组cce4228蛋白生化特性。【结果】构建了pET-28a-cce4228重组表达质粒,重组cce4228蛋白在大肠杆菌中得到可溶性表达,获得了纯度大于90%的cce4228蛋白。酶动力学测试和生物信息学分析结果显示,cce4228蛋白是一个NADP+-依赖型的琥珀酸半醛脱氢酶。【结论】蓝杆藻ATCC51142中cce4228基因编码一个偏好NADP+辅因子的琥珀酸半醛脱氢酶,cce4228蛋白的生化表征结果为进一步深入研究cce4228蛋白的结构功能关系及催化机制奠定了基础。

Abstract

【bei jing 】lan zao zhong sheng cheng hu po suan de san suo suan xun huan tu jing yu ji ta wu chong bu tong 。you yu α-tong wu er suan tuo suo mei he hu po suan ban quan tuo qing mei de cun zai shi de lan zao de san suo suan xun huan tu jing bian de wan zheng 。hu po suan ban quan tuo qing mei cui hua hu po suan ban quan yang hua wei hu po suan ,zai lan zao zhong an fan cun zai 。【mu de 】ke long 、biao da he chun hua lan gan zao ATCC51142zhong cce4228ji yin bian ma dan bai ,bing dui ji jin hang sheng hua biao zheng 。【fang fa 】yi lan gan zao ATCC51142ji yin zu wei mo ban ke long de dao cce4228ji yin ,jiang ji cha ru dao yuan he biao da zai ti pET-28ashang ,zai da chang gan jun BL21(DE3)xi bao zhong jin hang yi yuan biao da ,li yong Ni-NTAshu zhi chun hua cce4228dan bai 。yun yong zi wai fen guang guang du fa he sheng wu xin xi xue fang fa biao zheng chong zu cce4228dan bai sheng hua te xing 。【jie guo 】gou jian le pET-28a-cce4228chong zu biao da zhi li ,chong zu cce4228dan bai zai da chang gan jun zhong de dao ke rong xing biao da ,huo de le chun du da yu 90%de cce4228dan bai 。mei dong li xue ce shi he sheng wu xin xi xue fen xi jie guo xian shi ,cce4228dan bai shi yi ge NADP+-yi lai xing de hu po suan ban quan tuo qing mei 。【jie lun 】lan gan zao ATCC51142zhong cce4228ji yin bian ma yi ge pian hao NADP+fu yin zi de hu po suan ban quan tuo qing mei ,cce4228dan bai de sheng hua biao zheng jie guo wei jin yi bu shen ru yan jiu cce4228dan bai de jie gou gong neng guan ji ji cui hua ji zhi dian ding le ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自微生物学通报的谢琮琮,李至敏,王小琴,雷国风,张伟,李志敏,发表于刊物微生物学通报2019年11期论文,是一篇关于蓝杆藻论文,琥珀酸半醛脱氢酶论文,原核表达论文,蛋白纯化及表征论文,微生物学通报2019年11期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自微生物学通报2019年11期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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