精原干细胞微环境论文-金波

精原干细胞微环境论文-金波

导读:本文包含了精原干细胞微环境论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:精原干细胞,自我更新,间隙连接蛋白(Cx43),微环境

精原干细胞微环境论文文献综述

金波[1](2012)在《小鼠精原干细胞的自我更新与其微环境中Connexin-43的关系》一文中研究指出精原干细胞(Spermatogonial stem cells, SSCs)是体内自然状态下唯一能将遗传信息传至子代的成体干细胞,它们能通过维持自我更新和分化的稳定从而保证雄性生命过程中精子发生的持续进行。间隙连接蛋白(connexin, Cx)是紧密连接的分子基础,在哺乳动物不同组织和细胞内广泛表达,其中Cx43是睾丸内最重要的连接蛋白之一。已有报道表明,Cx43在细胞的增殖和迁移过程中发挥重要的作用。本研究旨在探讨Cx43在支持细胞内的表达情况及其对SSCs自我更新和分化的影响。本研究分别制作了丙基硫氧嘧啶(Propylthiouracil, PTU)药物模型、白消安模型和隐睾模型小鼠,应用5-乙炔-2-脱氧尿苷(5-ethynyl-2-deoxyuridine, EdU)、荧光免疫组织化学和苏木精-伊红(HE)染色等方法对模型小鼠的睾丸组织切片进行形态学观察和定量分析,探究微环境中Cx43与SSCs的关系。PTU可以抑制甲状腺激素的去碘化,从而导致支持细胞过度增殖。结果发现PTU药物组中支持细胞过度增殖导致睾丸内前髓细胞白血病锌指蛋白(Promyelocytic leukemia zinc finger protein, PLZF)阳性细胞数相对高于正常对照组,且10d、20d和30d差异极其显着(p<0.01),而PTU药物组内细胞的增殖和Cx43的表达却相对少于正常对照组。在白消安损伤模型里,药物处理后SSCs数量开始急剧减少,在第8d SSCs数量达到最低,随后开始恢复;光密度分析白消安模型中增殖细胞EdU的表达,结果也与其吻合,呈先下降再上升的趋势,且在5d时达到最低值;而该模型中Cx43的表达趋势则与前2组实验完全相反,在术后0-8d呈上升趋势,且8d达到最高值,之后逐渐恢复至正常水平,统计学分析表明,术后3d、5d、8d、10d和18d睾丸内Cx43的表达均显着高于0d(P<0.01)。人工单侧隐睾模型可用于模拟临床隐睾症状态,实验显示与对侧正常组睾丸相比,人工隐睾组睾丸的大小和质量均显着降低,生精上皮显着萎缩,隐睾手术后6d和12d,PLZF+细胞数并没有明显变化,18d时手术组PLZF+细胞数显着高于对照组。对隐睾模型中增殖细胞的表达进行检测,发现隐睾手术后6d和12d,实验组和对照组没有显着变化,而在18d手术组增殖细胞显着低于对照组。对隐睾模型中Cx43的表达进行检测,发现术后随着时间的推移,实验组和对照组中Cx43的表达没有显着变化。(本文来源于《吉林大学》期刊2012-06-01)

李玲玲,刘洋,金波,张学明[2](2012)在《精原干细胞微环境的生物学特性》一文中研究指出成体干细胞的自我更新和分化与其微环境关系密切。精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是体内自然状态下唯一能将遗传信息传至子代的成体干细胞。探讨SSCs更新和分化的调控机制有助于精子发生机理的阐明,并为探究其他成体干细胞增殖分化的调节机制提供依据。因此,SSCs系统为成体干细胞微环境研究提供了理想模型。资料表明,SSCs的更新和分化受其微环境的调控。基于本室的工作,参考最新文献,本文主要从SSCs微环境的基本特性、构成及其产生的各种调控因子等角度,评述了SSCs微环境的生物学特性及其与SSCs更新和分化间的关系,以期为本领域研究及其他成体干细胞相关研究提供借鉴。(本文来源于《中华男科学杂志》期刊2012年04期)

常青[3](2009)在《低剂量棉酚和甾体激素联合用药抗男性生育协同作用分析及对精原干细胞微环境的影响》一文中研究指出在抗生育研究中,开发出有效、安全和可逆的男性避孕药是该领域的研究重点。除了发现新的抗生育药物外,联合使用不同机理的抗生育药物也是男性抗生育研究的方向之一。我室经多年研究发现,低剂量棉酚和甾体激素联合用药(简称棉甾联合用药)可基本满足了起效快、副作用低和生殖能力可逆性恢复的要求,具有推广价值。与单独使用棉酚和甾体激素相比,棉甾联合用药起效更快,两者在抗生育效果方面具有协同作用,但是尚不明确两者发挥协同作用位点。此外,我室前期的研究显示,棉甾联合用药可以诱导精母细胞凋亡,尚不清楚生精上皮中其他细胞是否发生改变,尤其是精子发生最初级的精原细胞是否受到联合用药的影响及相关的分子机理如何,尚待进一步研究。本实验采用大鼠喂服棉酚和甾体激素联合用药方式(棉酚12.5mg/(kg·d)+去氧孕烯125μg/(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg·d)),与单独喂服相同剂量的棉酚或甾体激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,用药后4、6和8周取睾丸和附睾组织,使用形态学和体视学方法,研究棉甾联合用药后大鼠睾丸精子发生状态、精子活力、组织的改变和各级生精细胞数量的变化,以确定棉甾联合用药对精子发生的抑制程度、精子活动度、组织结构和生精上皮细胞群的改变,并用药物协同作用分析方法,发现棉酚和甾体激素协同作用的环节。其中的一个重点是判断精原细胞数量变化,以明确精原细胞(包括其中的精原干细胞)是否受棉甾联合用药的影响,并应用免疫组化、Real-time PCR和Western blot技术,揭示精原干细胞微环境(Niche)因子胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、Ets相关分子(ERM)和干细胞因子(SCF)的表达变化,寻找联合用药对精原细胞的作用分子。研究结果显示,棉甾联合用药可有效地抑制精子发生,减少附睾成熟精子的数量和活动度。在抑制精子发生、睾丸组织学和生精上皮细胞群变化方面,未观察到低剂量棉酚和甾体激素具有协同作用,在减少附睾成熟精子数量和降低精子活动度方面,两者具有协同作用。棉甾联合用药后,生精上皮中非B型精原细胞(包括精原干细胞、A型和In型精原细胞)、StageⅧ-ⅩⅥ粗线期和双线期精母细胞以及球形精子细胞数量明显减少;B型精原细胞、前细线期精母细胞、细线期和偶线期精母细胞以及StageⅠ-Ⅶ粗线期精母细胞数量未见明显变化。在叁个精原干细胞微环境因子中,GDNF表达明显下调,ERM和SCF的表达未见明显的变化。总之,联合用药中的低剂量棉酚和甾体激素具有各自的作用位点,甾体激素主要作用于睾丸抑制精子发生,棉酚主要作用于成熟精子细胞或附睾,两者在降低附睾精子数量和活动度方面具有协同作用。棉甾联合用药中甾体激素成分可以影响生精上皮中非B型精原细胞(包括精原干细胞、A型和In型精原细胞),使其数量减少;同时发现GDNF的表达下调,提示精原干细胞微环境发生改变,精原干细胞的自我增殖减慢。SCF分子的表达没有明显变化,提示精原干细胞的分化可能不受影响。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2009-05-01)

王丽莉[4](2008)在《基因转染精原干细胞在受体微环境中的增殖与分化》一文中研究指出在非灵长类哺乳动物睾丸中,As(Asinde)型精原细胞是精子发生的干细胞。雄性一生中精原干细胞不断分裂,一部分继续增殖进行自我更新,一部分分化最终形成精子。精原干细胞是动物体内唯一能进行遗传信息传递的干细胞。因此,精原干细胞既是干细胞生物学的重要研究对象,又是研究精子发生、制作转基因动物和研究基因功能的重要资源。精原干细胞移植技术指供体睾丸细胞可被移植到受体睾丸中,在那里重新构建生精功能。1994年,Brinster等人首次报道了精原干细胞移植的成功,被认为是研究生殖干细胞、支持细胞及其间相互作用的技术突破。之后与该技术相关的其他技术也得以迅速发展,包括干细胞富集技术、冷冻保存技术、细胞长期培养等技术。利用不同的载体遗传修饰精原干细胞与精原干细胞移植技术相结合成功地产生了转基因动物的研究为揭示精子发生过程和制作转基因动物提供了新的方法。精原干细胞移植技术有着广阔的应用前景:①将能育男性的精原干细胞移植到不育男性的生精小管内,可恢复不育男性的生精功能,使供体生精细胞分化为精子;②可为即将进行化疗和放疗的男性患者提供生育力的保护;③精原干细胞可望成为防止先天缺陷引起的致死性或高危性疾病以及进行生殖细胞基因治疗的工具;④是研究精子发生机制的有力手段;⑤非常有用于经济动物生精细胞系的保存。鉴于上述精原干细胞、移植技术及其相关操作的特点及前景,尤其是在利用精原干细胞移植术制备转基因动物方面的巨大优势,本课题将在基因转染精原干细胞,以及移植后对精原干细胞在受体微环境中的增殖与分化情况进行深入探讨和研究。本研究的实验方法,首先是提取质粒(pmaxGFP),之后分别采取传统的两步酶消化法和差速贴壁法分离并分选纯化精原干细胞.绿色荧光蛋白(GPT)基因在体外经脂质体法介导转染入供体鼠的精原干细胞,再将进行过体外转染的供体精原干细胞移植到经白消胺处理30天,去除内源性精原干细胞的受体鼠生精小管中。在睾丸移植手术进行后的不同时间点将受体鼠的睾丸切除,分别进行实体观察,以及组织形态学和核酸水平的检测,从而研究携带外源基因的供体精原干细胞移植后在受体睾丸环境中的增殖和分化行为。实验结果表明,(1)实验组移植3个月后,受体小鼠曲细精管内供体精原干细胞大量增殖并重新启动生精过程,生成了精子,且交配试验获得了正常的仔鼠,说明本实验所使用的睾丸输出管移植技术是成熟可靠的。(2)本实验中所使用的体外转染方法——脂质体法,转染效率可达10%左右,但是,因为尚未得到具有GFP稳定整合的仔鼠,所以还不清楚这种体外转染方法是否为瞬时转染,鉴于时间原因转基因后代还需做进一步的观测。由于精原干细胞在睾丸细胞中的比率非常低,体外培养尚不能象胚胎干细胞那样连续传代,加上在体繁殖周期较长都造成了本实验转染效率不高的结果,但是,克服了具体技术细节后,在精原干细胞水平做基因转染仍然是一种非常有潜力的方法。(本文来源于《首都师范大学》期刊2008-05-18)

精原干细胞微环境论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

成体干细胞的自我更新和分化与其微环境关系密切。精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是体内自然状态下唯一能将遗传信息传至子代的成体干细胞。探讨SSCs更新和分化的调控机制有助于精子发生机理的阐明,并为探究其他成体干细胞增殖分化的调节机制提供依据。因此,SSCs系统为成体干细胞微环境研究提供了理想模型。资料表明,SSCs的更新和分化受其微环境的调控。基于本室的工作,参考最新文献,本文主要从SSCs微环境的基本特性、构成及其产生的各种调控因子等角度,评述了SSCs微环境的生物学特性及其与SSCs更新和分化间的关系,以期为本领域研究及其他成体干细胞相关研究提供借鉴。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

精原干细胞微环境论文参考文献

[1].金波.小鼠精原干细胞的自我更新与其微环境中Connexin-43的关系[D].吉林大学.2012

[2].李玲玲,刘洋,金波,张学明.精原干细胞微环境的生物学特性[J].中华男科学杂志.2012

[3].常青.低剂量棉酚和甾体激素联合用药抗男性生育协同作用分析及对精原干细胞微环境的影响[D].北京协和医学院.2009

[4].王丽莉.基因转染精原干细胞在受体微环境中的增殖与分化[D].首都师范大学.2008

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