导读:本文包含了转基因干涉论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:大豆,GmGBP1基因,植物组织培养,可变剪接
转基因干涉论文文献综述
郑艳红,李欣,陶亚涵,李靖,孙嘉璠[1]（2019）在《GmGBP1干涉转基因大豆种质创制及其对下游基因可变剪接的调控》一文中研究指出GmGBP1基因与大豆光周期开花时间相关,本试验以GmGBP1基因为对象,利用大豆子叶节转化法进行植物组织培养,得到GmGBP1干涉(GmGBP1-i) T2转基因大豆材料并进行分子检测。RNA-seq转录组测序获得可变剪接数据,进一步利用RT-PCR方法对WT与GmGBP1-i大豆叶片测序结果中的可变剪接基因进行验证,共检测到3个基因发生可变剪接,表明GmGBP1干涉表达量降低引起了下游基因可变剪接。本研究为大豆GmGBP1的基因功能分析及解析大豆成花诱导机理奠定了基础。(本文来源于《中国油料作物学报》期刊2019年03期）
龚磊,王舰,杨永智[2]（2016）在《RNA干涉转基因马铃薯对卷叶病毒抗性的研究》一文中研究指出利用大田统计方法,结合分子生物学手段和生物信息学手段对转化的23个转基因马铃薯突变株进行抗病性鉴定,分析转化群体中外源基因的插入信息,并利用双夹心抗体酶联免疫法技术研究受侵染后马铃薯卷叶病毒基因在这些转化体中的表达情况。结果表明,一些株系出现了性状突变,通过分子生物手段检测发现大部分株系都有一定的马铃薯卷叶病毒抗性,但是抗性水平差异很大。试验验证了RNA干涉技术策略的可行性。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2016年08期）
李燕萍,李磊,张志勇,沈小娟,李晚忱[3]（2015）在《两种人工接种方法鉴定RNA干涉介导的转基因玉米对矮花叶病的抗性》一文中研究指出本研究采用两种人工接种方法,以玉米成株期病情指数为指标,鉴定了63个转基因玉米株系的田间抗病性。结果表明,T4代转化株系‘47’和‘13h2-3’的抗病性达R抗级,超过抗病对照‘H9-21’。有82.5%(52/63)的转基因株系抗病性比未转化对照显着提高,表明用反向重复的RNA干涉表达载体转化玉米,可获得转基因抗病毒材料,且干涉片段适度延长可增加获得抗病材料的几率。另外,本文通过两种病毒接种方法的比较,发现采用玻璃纤维刷苗床穿刺接种比常规石英砂摩擦接种具有更小的误差。(本文来源于《植物保护》期刊2015年06期）
田莉莉,牛良[4]（2014）在《GFLV CP基因RNAi载体构建及其在转基因烟草中的干涉效果》一文中研究指出为探讨RNAi策略在抗GFLV基因工程中的效果,通过RT-PCR克隆获得了310 bp的GFLV外壳蛋白基因保守片段,采用Gateway技术将该基因片段连入目标载体p HELLSGATE12构建了RNAi植物表达载体,并通过农杆菌介导法转入烟草中,RT-PCR检测表明目的基因片段已整合到烟草基因组中并在RNA水平上得到表达,病毒接种结果显示阳性植株的发病率明显低于对照,说明在转基因植株中dsRNA表达可干涉GFLV侵染过程。(本文来源于《华北农学报》期刊2014年S1期）
包崇来,杜黎明,胡天华,朱琴妹,胡海娇[5]（2014）在《紫红线茄转基因体系优化及SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化》一文中研究指出建立了以紫红线茄下胚轴为外植体的高效转基因体系。利用该方法,以获得茄子SmARF8基因RNA干涉转基因植株为目的,构建了以NPTⅡ基因为筛选标记的融合表达载体pCAMBIAI35S-2300-SmARF8-INT,并通过农杆菌介导,侵染茄子下胚轴外植体。含有2 mg·L-1吲哚乙酸,0.5 mg·L-1玉米素,25 mg·L-1卡那霉素和500 mg·L-1头孢氨苄的MS选择培养基可直接诱导外植体产生转基因分化苗,再生率达到80%。转基因苗继续生长并在不含激素的MS培养基上产生健壮根系,最终获得转基因株系。RT-PCR和qRT-PCR分析验证了T0代转基因株系中内源基因SmARF8被干涉后不表达或表达量降低,Southern blot分析显示选择的T0代转基因株系中存在1个T-DNA插入拷贝。以上研究结果表明利用建立的转基因体系SmARF8基因在茄子中被成功敲除。(本文来源于《园艺学报》期刊2014年06期）
郭文静,谭艳平,刘学群,王春台[6]（2013）在《水稻osvdac7干涉载体的构建及转基因植株的表达》一文中研究指出目的:构建水稻osvdac7基因RNA干涉表达载体,获得osvdac7表达下调的转基因水稻植株。方法:采用pMCG161双元载体,以传统方法构建水稻osvdac7基因RNA干涉表达载体;愈伤组织转化法获得osvdac7干涉转基因阳性植株,并应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测干涉阳性植株中osvdac7的表达水平。结果:成功构建了2个osvdac7基因RNA干涉表达载体,获得了21株转osvdac7干涉载体的阳性植株,其中9株转化植株的osvdac7表达明显下调。结论:成功获得了干涉osvdac7基因表达下调的转化植株,为研究水稻osvdac基因家族的生物学功能打下基础。(本文来源于《生物技术》期刊2013年05期）
蒋亮,彭正文,党颖慧,赵萍,肖阳[7]（2013）在《干涉BmNPV极早期非必需基因ie-2的转基因家蚕系统构建和抗性检测》一文中研究指出家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是严重危害家蚕的病原之一。为了探究通过转基因干涉BmNPV非必需基因抑制病毒的增殖,提高家蚕抗性的可行性,选择BmNPV极早期非必需基因ie-2作为靶标,构建转基因干涉载体,通过显微注射获得转基因家蚕系统A4Pie2H-A和A4Pie2H-B。3龄幼虫添食感染BmNPV后,A4Pie2H-A与A4Pie2H-B的幼虫死亡率分别比非转基因对照品种降低19%和24%;定量PCR结果显示A4Pie2H-A与A4Pie2H-B的幼虫体内的ie-2 mRNA表达量分别为非转基因对照品种的50%和20%,病毒DNA含量分别为非转基因对照品种的32%和12%。此外,2个转基因家蚕系统的全茧量和茧层率与正常家蚕品种比较无显着差异。研究结果表明,干涉BmNPV极早期非必需基因ie-2可以显着抑制转基因家蚕体内病毒的复制增殖,使幼虫死亡率降低。(本文来源于《蚕业科学》期刊2013年04期）
龚磊[8]（2013）在《RNA干涉转基因马铃薯抗卷叶病毒（PLRV）抗病性研究》一文中研究指出马铃薯卷叶病毒属黄化病毒组，由蚜虫以持久方式传播，是马铃薯上最重要的病毒病害之一。马铃薯卷叶病毒可侵染马铃薯引起卷叶、黄化、矮缩、僵化及块茎网状坏死等症状，严重影响马铃薯的产量和品质，是一种世界范围的马铃薯的重要病害。RNAi是由dsRNA介导的基因沉默现象，是细胞内的一种防御机制，可特异地降解细胞内与之具有同源性的核酸，达到调节细胞内编码基因的表达的作用。由于RNAi具有抗病毒表现型为高抗或近似于免疫，抗病性更持久，生物安全性高等优点，具有更加广阔的应用前景。因此，探讨利用RNA介导抗性来培育抗病毒转基因马铃薯的这一新策略的可行性和应用价值具有重要的现实意义。本研究利用大田统计方法结合分子生物学手段和生物信息学手段对本室转化的23个转RNA干涉载体马铃薯突变株进行抗病性鉴定。具体研究成果如下：1.通过大田试验发现了一些具有明显特征突变的转化体，如株高、叶片形态、产量等方面，说明转入的外源载体引起了原来马铃薯基因组的改变。2．利用酶联免疫法检测技术研究受侵染后马铃薯卷叶病毒基因在这些转化体中的表达情况，其中4p1-3、4p2-3、4p2-7、4号、5p1-6、5p2-6、5号为阳性，初步说明除这几个株系以外的株系均有一定的马铃薯卷叶病毒抗性，所转入的RNA干涉载体起到了一定的干涉PLRV作用。3.通过荧光定量PCR分子生物学实验研究，我们可以发现转RNA干涉载体均有不同水平的马铃薯卷叶病抗性，但是抗性水平差异很大。其中4P1-3、4P2-3、4P2-7、5P1-6、5P2-1抗性水平较差，4P1-1、4P1-2、4P2-9、5p1-2、5p2-4抗性水平较高。4.整个实验可以验证RNA干涉这一技术策略的可行性，为得到对马铃薯卷叶病毒具有稳定抗性的马铃薯转基因植株提供依据。(本文来源于《青海大学》期刊2013-05-01）
李磊[9]（2013）在《RNA干涉抗矮花叶病转基因玉米株系后代鉴定》一文中研究指出玉米矮花叶病作为玉米的主要病害之一,在世界范围内分布极为广泛,且危害极为严重。由于矮花叶病传播与感染的特殊性,导致对该病的防治手段极其匮乏且效果不显着。因此,选育具有矮花叶病抗性的玉米品种是目前较为行之有效的一种方法。而RNA干涉技术以其特异性强、抗病程度高等优点,为培育具有对病毒病抗性显着增强的转基因植物开辟了一种全新的途径。本研究是在前人已经获得RNA干涉抗矮花叶病转基因玉米的工作基础上,对其后代进行PCR检测,筛选出阳性株系。对筛选出的阳性株系,按随机区组设计种植,进行田间接种,鉴定其对矮花叶病毒的抗性。另外,对植物病毒的人工接种方法做了技术改进。主要结果如下：(1)通过对愈伤组织和茎尖为受体的两种不同方法转化的转基因玉米株系的后代进行PCR检测,结果显示随着世代的提高,植株阳性率也逐步提高,后代的遗传逐渐稳定。(2)对不同转基因株系病情指数的方差分析表明,转化愈伤组织再生的转基因玉米T4代和T5代株系与茎尖转化法再生的转基因玉米T4代株系相较于非转基因受体对照,对矮花叶病的抗性有显着提高。其中,转化愈伤组织的9个T4代株系,2个T5代株系,以及茎尖法转化的7个T4代株系,抗性更为突出且至少鉴定为“中抗”。(3)通过倒置显微镜下观察石英砂人工摩擦接种法与玻璃纤维刷穿刺法对叶片造成的损伤程度,发现改进的玻璃纤维刷穿刺法对叶片的机械损伤程度大大降低,且伤口更为均匀一致,接种效果较好。对转化愈伤组织再生的转基因玉米T4代和T5代株系正态性检验结果表明,改进的玻璃纤维刷穿刺法相较于石英砂人工摩擦接种法,实验的随机误差大大降低。(本文来源于《四川农业大学》期刊2013-05-01）
王钟[10]（2013）在《玉米黄质环氧化酶基因的转基因RNA干涉》一文中研究指出玉米黄质亦称玉米黄素(Zeaxanthin,β-carotene-3,3'-diol),是玉米籽粒中含量最丰富的类胡萝卜素。同时p-胡萝卜素、隐黄质和叶黄素常与玉米黄质构成类胡萝卜素混合物。玉米黄质为脂溶性化合物,其分子中含有40个碳和11个共轭双键。玉米黄质和叶黄素互为同分异构体,而叶黄素是眼睛视网膜和晶状体内不可缺少的类胡萝卜素,它们对维持眼睛健康具有特别重要的作用。类胡萝卜素摄入量较高时,老年性黄斑变性的患病风险较低,在各种类胡萝卜素中,这方面效果最突出的就是叶黄素和玉米黄质。通过基因工程创造富含玉米黄质的玉米种质,可望培育出具有保健作用的鲜食玉米品种。玉米籽粒中,玉米黄质经缩合、脱氢、环化、羟基化等过程合成,又经氧化等步骤分解。玉米黄质环氧化酶(Zeaxanthin epoxidase,Zep),就是氧化分解玉米黄质的关键酶。本研究利用RNA干涉技术构建Zep基因干涉载体,农杆菌介导转化玉米胚性愈伤组织,以期为培育玉米黄质高效积累的富含玉米黄质转基因材料。1.玉米黄质环氧化酶基因RNA干涉表达载体构建。以玉米自交系"18-599W"的mRNA为模板,克隆Zep基因547bp片段,同时在两端引入限制性内切酶酶切位点,以正反两个方向插入RNA干涉工程质粒pSKintron的150bp内含子两端,再将这一反向重复序列克隆至(?)pTF101.1M质粒中,构建成单子叶植物RNA干涉载体(pTFZepRNAi).2.玉米愈伤组织转化以玉米优良自交系“18-599R”和"18-599W"的幼胚为外植体,诱导培养愈伤组织,利用农杆菌介导发转化,经过叁轮除草剂梯度筛选后分化再生植株84株,移栽至田间共存活79株。3.T0代再生植株的PCR检测设计叁条引物覆盖对除草剂筛选阳性材料进行PCR检测。使用Fuz/Ruz和ruz/ruz进行设计叁条引物覆盖,引物Fuz/Ruz是跨启动子的目的片段特异性扩增,引物ruz/ruz是对插入载体内含子的特异性扩增。通过特异性引物对转基因的抗性愈伤分化得到再生植株进行分子检测获得了9个阳性植株。基于本研究分子水平检测的阳结果以及根据田间植株表型的观察,可以进一步为培育出富集玉米黄质玉米品种提供材料。(本文来源于《四川农业大学》期刊2013-05-01）
转基因干涉论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
利用大田统计方法,结合分子生物学手段和生物信息学手段对转化的23个转基因马铃薯突变株进行抗病性鉴定,分析转化群体中外源基因的插入信息,并利用双夹心抗体酶联免疫法技术研究受侵染后马铃薯卷叶病毒基因在这些转化体中的表达情况。结果表明,一些株系出现了性状突变,通过分子生物手段检测发现大部分株系都有一定的马铃薯卷叶病毒抗性,但是抗性水平差异很大。试验验证了RNA干涉技术策略的可行性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转基因干涉论文参考文献
[1].郑艳红,李欣,陶亚涵,李靖,孙嘉璠.GmGBP1干涉转基因大豆种质创制及其对下游基因可变剪接的调控[J].中国油料作物学报.2019
[2].龚磊,王舰,杨永智.RNA干涉转基因马铃薯对卷叶病毒抗性的研究[J].湖北农业科学.2016
[3].李燕萍,李磊,张志勇,沈小娟,李晚忱.两种人工接种方法鉴定RNA干涉介导的转基因玉米对矮花叶病的抗性[J].植物保护.2015
[4].田莉莉,牛良.GFLVCP基因RNAi载体构建及其在转基因烟草中的干涉效果[J].华北农学报.2014
[5].包崇来,杜黎明,胡天华,朱琴妹,胡海娇.紫红线茄转基因体系优化及SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化[J].园艺学报.2014
[6].郭文静,谭艳平,刘学群,王春台.水稻osvdac7干涉载体的构建及转基因植株的表达[J].生物技术.2013
[7].蒋亮,彭正文,党颖慧,赵萍,肖阳.干涉BmNPV极早期非必需基因ie-2的转基因家蚕系统构建和抗性检测[J].蚕业科学.2013
[8].龚磊.RNA干涉转基因马铃薯抗卷叶病毒（PLRV）抗病性研究[D].青海大学.2013
[9].李磊.RNA干涉抗矮花叶病转基因玉米株系后代鉴定[D].四川农业大学.2013
[10].王钟.玉米黄质环氧化酶基因的转基因RNA干涉[D].四川农业大学.2013