导读:本文包含了海马胆碱能神经刺激肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:海马胆碱能刺激肽,海马提取液,神经干细胞,神经元
海马胆碱能神经刺激肽论文文献综述
杨伟伟,李浩明,金国华,田美玲,秦建兵[1]（2014）在《海马胆碱能刺激肽促进神经干细胞向神经元分化》一文中研究指出目的探讨海马胆碱能刺激肽(HCNP)在神经干细胞向神经元分化过程中所起的作用。方法切割SD大鼠右侧穹窿海马伞,14天后取切割穹窿海马伞侧海马制成海马提取液;将神经干细胞接种于24孔板中,分为HCNP与海马提取液联合培养组、HCNP组以及空白对照组,每组八孔;细胞分化至14天时行Tuj-1、MAP-2免疫荧光检测;计数Tuj-1、MAP-2阳性神经元数及细胞周长,并观察胞体大小和突起长度。结果联合培养组Tuj-1、MAP-2阳性神经元最多,胞体大,突起长;HCNP组神经元数量较前组少,胞体较小,突起数量和长度均小于前组;对照组则仅有少量胞体小、突起短的神经元。HCNP与切割穹窿海马伞侧海马提取液联合培养组神经元成熟度优于其它两组。结论 HCNP对神经干细胞向神经元的分化具有明显促进作用。(本文来源于《四川解剖学杂志》期刊2014年03期）
高飞,陈宏,张桦,郭南京,徐艳花[2]（2012）在《利拉鲁肽对糖尿病前期大鼠胰岛海马胆碱能神经刺激肽前体蛋白的影响》一文中研究指出目的明确利拉鲁肽对糖尿病前期OLETF大鼠的阻抑作用,观察对胰腺海马胆碱能神经刺激肽前体蛋白(hippocampal cholinergicneurostimulating peptide precursor protein,HCNP-pp)的影响。方法检测空腹及餐后2小时血糖,将处于糖耐量减低阶段12～14周龄OLETF大鼠随机分为3组,安慰剂组(PBO组)、100μg/kg利拉鲁肽处理组(L-100组)、200μg/kg利拉鲁肽处理组(L-200组),LETO大鼠为阴性对照组(LETO组)。12周后检测大鼠体重、空腹血糖、餐后2 h血糖和胰岛素,以免疫组织化学染色分析胰岛细胞形态学变化,应用蛋白印迹技术检测HCNP-pp及胰高血糖素样多肽-1受体(GLP-1R)蛋白含量;应用实时定量PCR检测HCNP-pp和LGP-1R、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、3型毒蕈碱样受体(M3R)基因表达水平。结果PBO组OLETF大鼠空腹、餐后2 h血糖符合糖尿病诊断标准,而L-100组、L-200组及LETO组大鼠均未进展为糖尿病状态。PBO组OLETF大鼠体重及空腹胰岛素均明显高于L-100组、L-200组和LETO组(P<0.01)。与PBO组相比,L-200组、LETO组大鼠胰腺胰岛素阳性细胞表达密度明显增多(P<0.01),而与L-100组差别无统计学意义(P>0.05);L-100组、L-200组及LEITO组大鼠胰腺HCNP-pp蛋白相对含量明显减少(P<0.05或P<0.01);L-100组、L-200组及LEITO组大鼠胰腺GLP-1R蛋白相对含量明显增多(P<0.01);L-100组、L-200组和LETO组大鼠胰腺HCNP-pp mRNA水平明显下降(P<0.01);L-200组和LETO组大鼠胰GLP-1R,ChAT、M3R mRNA水平均明显增多(P<0.01);L-100组大鼠GLP-1R和ChAT mRNA水平均明显增多(P<0.01),而M3R mRNA水平则无变化(P>0.05)。结论利拉鲁肽可阻抑糖尿病前期进展,可能与胰腺HCNP-pp表达下降、GLP-1R表达增高及胰岛β细胞密度增加相关。利拉鲁肽改善胰岛素分泌状态,可能与胰腺HCNP增多、ChAT和M3R表达增高相关。(本文来源于《中国药业》期刊2012年11期）
高飞,陈宏,张桦,郭南京,徐艳花[3]（2012）在《海马胆碱能神经刺激肽通过活化3型毒蕈碱受体促进INS-1细胞胰岛素释放》一文中研究指出目的明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进行分析。方法 INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组。对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组给予人工合成HCNP(50 pg/ml)与RPMI 1640液共培养,HCNP+PMA组予人工合成HCNP与RPMI 1640液共培养后,行胰岛素释放前18 h加入PMA(10 nmol/L);应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量。实时定量PCR检测对照组、HCNP组HCNP前体蛋白(HCNP-pp)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)、3型毒蕈碱样受体(3-typemuscarinic receptor,M3R)基因水平表达情况。结果浓度为3.3 mmol/L葡萄糖,叁组间胰岛素含量无明显差异。浓度为5.6mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下,HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组,差异具有统计学意义。HCNP组INS-1细胞HCNP-pp、ChAT、M3R叁者mRNA含量均高于对照组,差异具有统计学意义。结论 HCNP通过提高ChAT活性,推测影响乙酰胆碱合成,进一步活化M3R,促进胰岛素分泌,PMA可阻断此作用。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2012年04期）
高飞[4]（2012）在《海马胆碱能神经刺激肽及其前体蛋白对胰岛β细胞影响与利拉鲁肽作用相关性研究》一文中研究指出研究背景和目的目前,中国已成为世界第一糖尿病大国,2008年中华医学会糖尿病学分会(CDS)组织的糖尿病流行病学调查结果显示,在20岁以上的人群中,年龄标化的糖尿病患病率为9.7%,而糖尿病前期的比例高达15.5%。糖尿病前期是糖尿病高危人群,约60%糖尿病患者来自此人群。2型糖尿病的病理生理机制呈复杂及多方面性,2008年Banting奖获得者Defrozon教授总结近年研究进展,提出胰岛β细胞分泌缺陷、肌肉组织葡萄糖摄取减少、肝糖输出增加、脂毒性、肠促胰岛激素减少、α细胞分泌胰高血糖素增多、肾小管重吸收葡萄糖增加及中枢对葡萄糖摄取的抑制反应下降8种2型糖尿病发病相关的病理生理机制。这些因素导致机体对葡萄糖摄取及储存、处理能力下降。而早在糖耐量减低阶段,胰岛p细胞数量已有明显下降,在确诊2型糖尿病时,胰岛p细胞数量下降可达60%,功能丧失可达80%。因此针对胰岛p细胞增殖、凋亡及分泌功能的研究至关重要。大量研究业已证实,神经末梢释放的乙酰胆碱可激活胰岛β细胞膜3型毒蕈碱样胆碱能受体(type3muscarinic acetylcholine receptors, M3R),进而作用于磷酸肌醇—蛋白激酶C (protein kinase C, PKC)途径引起胰岛素分泌的扩增。而应用佛泊酯(Phorbol12-myristate13-acetate, PMA)直接兴奋PKC后,反而引起p细胞钙离子外流,抑制胰岛素释放,抑制乙酰胆碱扩增胰岛素释放作用。在中枢海马组织,海马胆碱能神经刺激肽前体蛋白(Hippocampal Cholinergic Neurostimulating Peptide precursor protein, HCNP-pp)经类糜蛋白酶裂解为HCNP。HCNP是含有11个氨基酸残基的多肽,可通过激活胆碱乙酰基转移酶(Choline acetyltransferase, ChAT)促进乙酰胆碱合成,进而活化胆碱能神经受体系统。然而,HCNP对胰岛β细胞是否具有提高ChAT活性、活化M3R,进而促胰岛素分泌,目前尚无文献报道。HCNP-pp广泛存在于组织细胞中,又称为磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyl-ethanolamine-binding protein, PEBP)及raf-1激酶抑制蛋白(Raf-1kinase inhibitor protein, RKIP)。它可抑制raf-1激酶磷酸化,进一步抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号转导途径的活化,抑制细胞增殖。已有研究证实,MAPK在胰岛β细胞增殖、分化中起重要作用,HCNP-pp特异地存在胰岛p细胞,作为Raf-1特异性抑制剂,可抑制p细胞增殖。然而,糖尿病状态下胰岛HCNP-pp含量如何变化,是否与β细胞增殖能力下降相关,目前尚无文献报道。胰高血糖素样多肽-1(Glucagon-like peptide-1, GLP-1)在“肠—胰岛轴”中起重要作用。它作用于p细胞上G蛋白偶联的特异性受体,不但通过环磷酸腺苷-蛋白激酶A途径起“肠促胰岛素”作用,还与乙酰胆碱协同作用活化胆碱能神经受体引起胰岛素分泌。此外,细胞培养及动物实验业已证实GLP-1可激活MAPK通路,促进β细胞增殖。利拉鲁肽作为人胰高血糖素样多肽-1类似物,在促进胰岛素分泌及促进β细胞增殖均有明显作用,可能成为治疗糖尿病前期理想药物。然而利拉鲁肽是否可阻抑糖尿病前期的进展,利拉鲁肽的上述作用是否与HCNP及其前体蛋白相关,目前尚无文献报道。综上所述,本课题以p细胞株INS-1细胞及糖尿病前期OLETF大鼠为研究对象,从以下两个方面进行相关研究：1,观察HCNP对INS-1细胞胰岛素分泌的影响；通过对ChAT、M3R基因水平检测,探讨HCNP对INS-1细胞作用的相关途径。2,观测利拉鲁肽干预的糖尿病前期OLETF大鼠胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌的变化；进一步对不同状态的OLETF大鼠胰岛细胞HCNP-pp、HCNP及GLP-1R的蛋白、基因水平进行检测,同时检测ChAT及M3R基因表达,探究利拉鲁肽影响胰岛增殖、胰岛素释放的可能机制。第一部分HCNP对INS-1细胞胰岛素分泌的影响目的：探讨HCNP对INS-1细胞胰岛素分泌的影响及可能的作用途径方法：(1) HCNP合成及纯度检测：应用固相化学合成技术人工合成含11个氨基酸残基的多肽,序列为：H-Ala-Ala-Asp-Ile-Ser-Gln-Trp-Ala-Gly-Pro-Leu-OH采用反向高效液相色谱及电喷雾质谱法对产物进行分离纯化。(2) INS-1细胞的培养及活性鉴定：以含10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基及在37℃,5%CO2培养箱中培养细胞。倒置相差显微镜观察生长情况。(3)胰岛素释放实验：80%INS-1细胞融合成片时,应用0.1%胰酶及0.1%EDTA混合液消化、吹散。接种于6孔板中,每孔6×105个细胞。随机分为3组：对照组、HCNP组、HCNP+PMA组。对照组INS-1细胞给予RPMI1640液培养,HCNP组INS-1细胞给予人工合成HCNP50pg/ml与RPMI-1640液共培养,HCNP+PMA组INS-1细胞予人工合成HCNP50pg/ml与RPMI-1640液共培养并在行胰岛素释放实验前加10nM PMA培养18小时。将各组INS-1细胞置于5%CO2培养箱中培养5天后弃上清,含3.3mmol/L葡萄糖KRBH液预培养40min,提取上清液,测定胰岛素浓度。3.0mlKRBH液再次冲洗后依次加含5.6、6.7mmol/L葡萄糖及新斯的明20μmol/L、氯化胆碱100μmol/L的KRBH液培养40min收集上清液,放射免疫分析方法测定胰岛素含量。(4) qRT-PCR检测ChAT及M3R基因表达水平：80%INS-1细胞融合成片时,应用0.1%胰酶及0.1%EDTA混合液消化、吹散。接种于6孔板中,每孔6×105个细胞。随机分为对照组及HCNP(?)；INS-1细胞经Trizol液裂解,按说明书提取总RNA,-80℃保存。设计ChAT、M3R基因mRNA序列的特异性引物,应用实时荧光定量PCR方法检测ChAT及M3R基因表达水平。结果：(1)在葡萄糖浓度为3.3mmol/L、5.6mmol/L及16.7mmol/L细胞培养上清液胰岛素含量。3.3mmol/L时,对照组、HCNP组及HCNP+PMA组分别为8.36±0.97、8.27±0.79、7.94±0.97μIU/ml;5.6mmol/L时,对照组、HCNP组及HCNP+PMA组分别为8.48±0.92、10.09±1.41、8.36±1.05μIU/ml;16.7mmol/L时,对照组、HCNP组及HCNP+PMA分别为8.73±0.75、10.82±1.32、8.88±1.01μIU/ml。当葡萄糖浓度为3.3mmol/L时,HCNP组胰岛素含量较对照组及HCNP+PMA组无显着变化,差异无统计学意义(F=0.535,P=0.592)；葡萄糖浓度达5.6mmol/L时,HCNP组胰岛素含量较对照组及HCNP+PMA组均增高,差异具有统计学意义(F=6.340,P=0.006)；同样,给予16.7mmol/L葡萄糖刺激INS-1细胞时,HCNP组胰岛素含量较对照组及HCNP+PMA组均增高,差异具有统计学意义(F＝10.836,P<0.001)。(2) HCNP处理组ChAT(3.01±0.47×105拷贝)及M3R(1.06±0.18)两者mRNA含量显着升高,对照组两者含量分别为：1.01±0.30、0.72±0.15；两组相比,ChAT、M3R基因表达水平的差异均具有统计学意义,ChAT(t=-8.837,), M3R(t=-3.546, P=0.005)。结论：(1)在3.3mmol/L葡萄糖浓度时,HCNP对INS-1细胞的胰岛素释放无明显作用,而在5.6mmol/L及16.7mmol/L葡萄糖浓度下,HCNP可促进INS-1细胞胰岛素释放,佛波酯可抑制HCNP此作用,提示HCNP作用可能通过PKC途径促进胰岛素释放。(2) HCNP组ChAT、M3R基因表达水平均高于对照组,提示HCNP促进胰岛素释放作用与INS-1细胞增高的ChAT、M3R基因表达相关。第二部分利拉鲁肽干预的糖尿病前期OLETF大鼠胰岛细胞HCNP-pp、HCNP变化对胰岛β细胞功能、增殖的影响目的：观测不同剂量利拉鲁肽干预的糖尿病前期OLETF大鼠HCNP-pp及HCNP变化对口服葡萄糖耐量试验、早期胰岛素分泌指数及胰岛素阳性细胞密度的影响,探究GLP-1R与HCNP-pp、HCNP的相关性。方法：(1) OGTT试验、早期胰岛素分泌指数及胰岛素阳性细胞表达密度检测：雄性4周龄OLETF大鼠饲养8-10周后,禁食15小时,行口服葡萄糖耐量试验(葡萄糖2g/kg,胃管灌入)葡萄糖氧化酶法分别检测30、60、90、120分钟鼠尾静脉血糖,按国际惯用的大鼠糖尿病诊断参考标准：血糖峰值>16.7mmol/L和糖负荷2小时血糖>11.1mmol/L,符合其中之一为糖耐量减低(Impaired Glucose tolerance, IGT)。将处于IGT阶段的OLETF大鼠随机分为3组,每组8只；分别给予100μg/kg(L-100组)、200μg/kg(L-200组)利拉鲁肽及生理盐水1.0mL/kg (PBO组),一日两次腹腔内注射。LETO组大鼠给予生理盐水1.0mL/kg腹腔内注射。在给药12周再次行OGTT试验,应用酶联免疫吸附方法检测早期胰岛素分泌指数(糖负荷后30min胰岛素增量与葡萄糖增量的比值)即ΔIns30/ΔGlu30=(Ins30-FINS)/(Glu30-FPG);取胰腺行免疫组织化学染色检测胰岛素阳性细胞表达密度(Insulin-positive cells density, Ins-PCD)。(2)胰岛细胞HCNP-pp、ChAT、M3R及GLP-1R mRNA荧光定量分析：将胰岛细胞应用Trizol液裂解,按说明书提取总RNA,-80℃保存。qRT-PCR法测定胰岛HCNP-pp mRNA、ChAT mRNA、M3R mRNA及GLP-1R mRNA表达水平(单位均以×105拷贝表示,下同)。(3)胰岛细胞HCNP-pp、GLP-1R蛋白表达分析：提取胰岛细胞总蛋白,用Bradford法测定蛋白含量。以每毫升样品中的毫克蛋白量(mg/ml)表示。P-actin作为HCNP-pp的内参照,采用Western印迹方法,增强化学发光法显示蛋白条带,测定大鼠胰岛CT-HCNP-pp、NT-HCNP-pp及GLP-1R蛋白的相对含量。结果：(1) OGTT试验、Δ Ins30/Δ Glu30及Ins-PCD:经12周利拉鲁肽干预,PBO组大鼠空腹血糖(8.39±1.14mmol/L)、糖负荷2小时血糖(11.45±1.23mmol/L)均显着高于L-100组(7.15±0.84,8.60±1.23)、L-200组(6.45±0.61,7.59±0.47)及LETO组(7.15±0.84,8.60±1.23)差异具有统计学意义；大鼠空腹血糖(F=22.925,P<0.001),,糖负荷2小时血糖(F=40.805,P<0.001)。而Δ Ins30/Δ Glu30(3.85±0.19)较L-100组(8.90±±0.37)、L-200组(9.55±0.25)及LETO组(11.99±0.31)明显降低,差异具有统计学意义(F＝8.895,P<0.001)；同PBO组胰岛素阳性细胞表达密度(0.67-±0.08,个/μm2)相比,L-100组(0.68±0.07)胰岛素阳性细胞表达密度无明显变化,差异无统计学意义,而L-200组(0.84±0.08,)、LETO组(0.90±0.08)胰岛素阳性细胞表达密度显着增多,差异具有统计学意义(F=15.968,P<0.001)。(2)大鼠胰岛细胞HCNP-pp、GLP-1R、ChAT及M3R基因表达情况：与PBO组HCNP-pp mRNA (5.38±1.47)相比较,LETO组(3.07±0.80)、L-100组(3.58±0.79)及L-200组(3.32±0.65)相对表达水平下降：与PBO组ChAT mRNA (0.85±0.21)、M3R mRNA (0.21±0.05)及GLP-1R mRNA(10.97±2.90)相比,LETO组(分别为：3.33±0.53,0.51±0.08,17.27±3.18)、L-100组(分别为：1.73±0.21,0.38±0.05,15.02±3.36)及L-200组(分别为：1.78±0.46,0.44±0.09,17.43±4.24)叁者相对表达水平均明显增高,差异具有统计学意义；HCNP-pp mRNA(F=8.563, P<0.001), ChAT mRNA(F=55.106, P<0.001), M3R mRNA(F=27.201, P<0.001), GLP-1R mRNA(F=6.012,P=0.003)。(3)大鼠胰岛细胞HCNP-pp、GLP-1R蛋白表达情况：与PBO组CT-HCNP-pp (0.78±0.04)、NT-HCNP-pp(0.75±0.04)蛋白相对含量及NT-HCNP-pp/CT-HCNP-pp比值(0.96±0.02)相比较,L-200组(分别为：0.66±0.04,0.53±0.02,0.85±0.04)及LETO组(分别为：0.68±0.05,0.57±0.06,0.84±0.07)均明显减低,L-100组(分别为0.73±0.02,0.69±0.01,0.95±0.02)NT-HCNP-pp/CT-HCNP-pp比值与对照组差异无统计学意义。与PBO组GLP-1R蛋白相对含量(0.64±0.04)相比,L-100组(0.76±0.03)、L-200组(0.80±0.03)及LETO组(0.81±0.07)均明显增高,差异有统计学意义,CT-HCNP-pp (F=12.973, P<0.001), NT-HCNP-pp (F=18.250, P<0.001), NT-HCNP-pp/CT-HCNP-pp比值(F=17.632, P<0.001), GLP-1R(F=20.467, P<0.001)。(4)大鼠胰岛细胞HCNP-pp与GLP-1R蛋白、基因表达相关性分析：不同组别大鼠胰岛细胞CT-HCNP-pp (0.711±0.061)、NT-HCNP-pp(0.640±0.094)及NT-HCNP-pp/CT-HCNP-pp(0.897±0.071)与GLP-1R(0.750±0.083)蛋白相对水平呈负相关；同样,HCNP-pp mRNA(3.872±1.353)与GLP-1R mRNA(15.106±4.252)表达水平呈负相关。CT-HCNP-pp: y=-0.886X+1.380(R=0.649, t=-4.429, P<0.001); NT-HCNP-pp: y=-0.623X+1.148(R=0.701,t=-5.107, P<0.001); NT-HCNP-pp/CT-HCNP-ppy=-0.685X+1.364(R=0.582,t=-3.717, P=0.001); HCNP-pp mRNA:y=-1.563X+2.11(R=0.498,t=-2.982,P=0.006)。结论：(1)利拉鲁肽具有改善IGT阶段OLETF大鼠血糖、早期胰岛素分泌指数及胰岛β细胞数量,可阻抑糖尿病前期的进展。(2)安慰剂组OLETF大鼠12周后87.5%进展为2型糖尿病状态；胰岛细胞GLP-1R下降、HCNP-pp增多,HCNP减少。提示上述指标变化与2型糖尿病的发生、发展相关。(3)各组大鼠胰岛细胞HCNP-pp与GLP-1R表达水平均呈负相关,推测利拉鲁肽活化GLP-1R阻抑糖尿病前期进展与HCNP-pp表达下降相关。(本文来源于《南方医科大学》期刊2012-04-15）
高飞,宋士军,胡进中,李芳芳,张若楠[5]（2009）在《去卵巢大鼠海马及额叶皮层海马胆碱能神经刺激肽含量的变化》一文中研究指出目的观察雌激素缺乏对大鼠海马CA1/CA2区及额叶皮层海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)含量的影响。方法选取清洁级4月龄雌性SD大鼠30只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)和去卵巢加雌二醇(E2)组(OVX+E2组),每组10只。除Sham组做假性手术外,其余2组均行双侧卵巢切除术;OVX+E2组去卵巢手术10d后给予E2皮下注射,100μg/kg,隔日1次。去卵巢手术后常规喂养4个月,获取组织标本,用于组织蛋白和组织总RNA的提取。用Western印迹法测定大鼠海马和皮层C-HCNPpp、N-HCNPpp的相对含量。用RT-PCR技术检测HCNPpp mRNA水平。结果OVX组大鼠海马和皮层中C-HCNPpp的相对含量较Sham组和OVX+E2组明显升高(P<0.05),而Sham组和OVX+E2组之间无显着差别(P>0.05),叁组大鼠之间的海马和皮层中N-HCNPpp的相对含量差异不显着(P<0.05);OVX组和OVX+E2组大鼠HCNPpp mRNA表达与Sham组无显着差异(P>0.05),OVX+E2组大鼠HCNPpp mRNA表达与OVX组相比增高(P<0.05);叁组大鼠皮层HCNPpp mRNA表达无显着差异(P>0.05)。结论雌激素缺乏可导致大鼠海马CA1/CA2区及额叶皮层HCNP的增多。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2009年11期）
海马胆碱能神经刺激肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的明确利拉鲁肽对糖尿病前期OLETF大鼠的阻抑作用,观察对胰腺海马胆碱能神经刺激肽前体蛋白(hippocampal cholinergicneurostimulating peptide precursor protein,HCNP-pp)的影响。方法检测空腹及餐后2小时血糖,将处于糖耐量减低阶段12～14周龄OLETF大鼠随机分为3组,安慰剂组(PBO组)、100μg/kg利拉鲁肽处理组(L-100组)、200μg/kg利拉鲁肽处理组(L-200组),LETO大鼠为阴性对照组(LETO组)。12周后检测大鼠体重、空腹血糖、餐后2 h血糖和胰岛素,以免疫组织化学染色分析胰岛细胞形态学变化,应用蛋白印迹技术检测HCNP-pp及胰高血糖素样多肽-1受体(GLP-1R)蛋白含量;应用实时定量PCR检测HCNP-pp和LGP-1R、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、3型毒蕈碱样受体(M3R)基因表达水平。结果PBO组OLETF大鼠空腹、餐后2 h血糖符合糖尿病诊断标准,而L-100组、L-200组及LETO组大鼠均未进展为糖尿病状态。PBO组OLETF大鼠体重及空腹胰岛素均明显高于L-100组、L-200组和LETO组(P<0.01)。与PBO组相比,L-200组、LETO组大鼠胰腺胰岛素阳性细胞表达密度明显增多(P<0.01),而与L-100组差别无统计学意义(P>0.05);L-100组、L-200组及LEITO组大鼠胰腺HCNP-pp蛋白相对含量明显减少(P<0.05或P<0.01);L-100组、L-200组及LEITO组大鼠胰腺GLP-1R蛋白相对含量明显增多(P<0.01);L-100组、L-200组和LETO组大鼠胰腺HCNP-pp mRNA水平明显下降(P<0.01);L-200组和LETO组大鼠胰GLP-1R,ChAT、M3R mRNA水平均明显增多(P<0.01);L-100组大鼠GLP-1R和ChAT mRNA水平均明显增多(P<0.01),而M3R mRNA水平则无变化(P>0.05)。结论利拉鲁肽可阻抑糖尿病前期进展,可能与胰腺HCNP-pp表达下降、GLP-1R表达增高及胰岛β细胞密度增加相关。利拉鲁肽改善胰岛素分泌状态,可能与胰腺HCNP增多、ChAT和M3R表达增高相关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
海马胆碱能神经刺激肽论文参考文献
[1].杨伟伟,李浩明,金国华,田美玲,秦建兵.海马胆碱能刺激肽促进神经干细胞向神经元分化[J].四川解剖学杂志.2014
[2].高飞,陈宏,张桦,郭南京,徐艳花.利拉鲁肽对糖尿病前期大鼠胰岛海马胆碱能神经刺激肽前体蛋白的影响[J].中国药业.2012
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