突变体富集论文-杨帆,陈克终,姜冠潮,李剑锋,王俊

突变体富集论文-杨帆,陈克终,姜冠潮,李剑锋,王俊

导读:本文包含了突变体富集论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:肺肿瘤,表皮生长因子受体,突变

突变体富集论文文献综述

杨帆,陈克终,姜冠潮,李剑锋,王俊[1](2011)在《改良的内切酶突变体富集法检测肺癌标本中EGFR基因突变》一文中研究指出背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变是肺癌靶向药物疗效的可靠预测指标,因此基因突变的检测具有非常重要的临床意义。本研究建立使用常规实验仪器、高灵敏度、简便的检测表皮生长因子受体突变的方法,以利于临床中快速的检测EGFR基因突变。方法采用改良的内切酶法富集法检测251例肺腺癌DNA标本中EGFR基因外显子19缺失突变和21(L858R)点突变,并与直接测序进行比较。利用混合突变/野生型EGFR基因的细胞系测定改良方法的灵敏度。结果在251例腺癌标本DNA中使用测序法检测出EGFR外显子19突变46例、外显子21突变26例。采用改良的突变体富集法检另外测出外显子19突变78例、外显子21突变57例,总突变率53.8%。灵敏度检测显示对于外显子19和21,新方法的检测灵敏度达0.5%。结论本方法具有简便、经济、灵敏度高等特点,便于临床快速筛查非小细胞肺癌病理组织中的EGFR基因突变。(本文来源于《中国肺癌杂志》期刊2011年08期)

苏健,郭爱林,黄迎,陈世良,张绪超[2](2010)在《突变体富集法检测表皮生长因子受体基因19外显子的缺失突变》一文中研究指出目的:建立突变体富集法检测非小细胞肺癌中表皮生长因子受体(EGFR)基因19外显子的缺失突变,并比较突变体富集法与直接法的检出率。方法:构建EGFR野生型和突变型的载体,按不同的比例配成混合液,分别用突变体富集法和直接测序法检测混合液中EGFR19外显子的缺失突变,确定两种方法的灵敏度。收集198例非小细胞肺癌住院患者的手术切除组织,分别采用两种方法对EGFR基因19外显子进行基因分析。结果:直接测序法可检测出1∶10突变质粒和野生型质粒混合液中的突变型,突变体富集法可达1∶100。198例标本中,直接测序法检出杂合性缺失23例,突变率为11.6%,突变体富集法检测出杂合性缺失41例,突变率为20.7%。EGFR19缺失突变多见于女性,病理类型多为肺腺癌和腺鳞癌。结论:突变体富集法检测EGFR19外显子缺失突变敏感性高,可提高样本EGFR19缺失突变的检出率。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2010年11期)

李存枚,潘卫,曹洁,王锦红,黄德圣[3](2009)在《HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体的构建及在大肠杆菌中的高效表达》一文中研究指出目的构建HIV-1HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体,并在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行高效表达和纯化。方法应用PCR拼接的方法将首轮合成Tat基因的半胱氨酸富集区(64~111位核苷酸,22~37位氨基酸)移位至缺失半胱氨酸富集区的Tat(△C)的N末端,获得其突变体序列(Tat(CN)DNA),构建其原核表达质粒pET32a-Tat(CN),并转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,经SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物,纯化后的产物用间接ELISA进行鉴定。结果构建了pET32a-Tat(CN)突变体,pET32a-Tat(CN)融合蛋白在大肠杆菌中表达水平为5.17mg/ml,相对分子质量为31ku。间接的ELISA结果表明,pET32a-Tat(CN)能与Tat兔抗血清呈特异反应。结论成功构建了HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区移位至TatN端的突变体,并能在大肠杆菌中高效表达,其纯化的蛋白pET32a-Tat(CN)很好地保留了与HIV-1Tat兔抗血清的免疫反应性,为HIV-1Tat的疫苗基础研究提供了一有价值的研究结论。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2009年01期)

张新勇,岳文涛,吴羽华,徐丽焱,张春彦[4](2008)在《突变体富集PCR法检测非小细胞肺癌病理组织EGFR基因突变》一文中研究指出目的:建立突变体富集PCR法检测非小细胞肺癌病理组织中的EGFR基因突变。方法:选取55例细支气管肺泡癌和59例非小细胞肺癌病理组织蜡块,提取基因组DNA,采用不同的突变体富集PCR法(PCR-PAGE和PCR-RLFP)检测EGFR基因常见的19和21外显子突变,并经过直接测序验证。结果:在59例非小细胞肺癌中共检测出EGFR基因突变22例,突变率为37·3%(22/59)。55例细支气管肺泡癌中共检测出24例基因突变,突变率为43·6%(24/55)。经直接测序验证,EGFR19外显子有3种类型缺失突变。EGFR21外显子的错义突变为L858R。结论:突变体富集PCR法准确、快速、经济,便于临床筛查非小细胞肺癌病理组织中的EGFR基因突变。(本文来源于《中国医院用药评价与分析》期刊2008年04期)

张峰,刘叁光,刘晔,李冬斌,李荣琴[5](2005)在《突变体富集聚合酶链反应检测胰腺癌K-ras基因突变的研究》一文中研究指出胰腺癌是一种恶性程度极高,早期难以诊断,预后极差的恶性肿瘤,临床确诊者大多属于晚期癌,5年生存率总体低于5%。我们采用突变体富集聚合酶链反应(PCR)检测胰腺癌细胞系K ras基因点突变,以期为早期诊断胰腺癌提供一种简便、灵敏而有效的检验方法。一、材料与(本文来源于《中华实验外科杂志》期刊2005年08期)

李文通,徐定邦[6](1982)在《过滤法富集黑曲霉营养缺陷型和不同化柠檬酸的突变体》一文中研究指出丝状真菌营养缺陷型突变体的富集,一般采用过滤法。即将经诱变处理的孢子培养于最低限度培养基,原养型孢子可以萌发形成菌丝,过滤时被滤层截留;营养缺陷型孢子不能萌发,过滤时能通过滤层而被富集,由于营养缺陷型突变体本身或以营养缺陷型突变体为亲本用准性杂交方法获得的异源二倍体是发酵工业菌种选育的重要途径之一,(本文来源于《食品与发酵工业》期刊1982年04期)

徐定邦,李文通[7](1982)在《微生物突变体的富集方法》一文中研究指出自1948年Davis等开创青霉素富集法以来,有关微生物突变体的富集方法有了很大发展,分离各类突变体的效率提高了几十、几百、甚至几千倍。本文将这些方法的原理,主要操作步骤和近年来应用的发展作一归纳,供参考。(本文来源于《微生物学通报》期刊1982年04期)

突变体富集论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:建立突变体富集法检测非小细胞肺癌中表皮生长因子受体(EGFR)基因19外显子的缺失突变,并比较突变体富集法与直接法的检出率。方法:构建EGFR野生型和突变型的载体,按不同的比例配成混合液,分别用突变体富集法和直接测序法检测混合液中EGFR19外显子的缺失突变,确定两种方法的灵敏度。收集198例非小细胞肺癌住院患者的手术切除组织,分别采用两种方法对EGFR基因19外显子进行基因分析。结果:直接测序法可检测出1∶10突变质粒和野生型质粒混合液中的突变型,突变体富集法可达1∶100。198例标本中,直接测序法检出杂合性缺失23例,突变率为11.6%,突变体富集法检测出杂合性缺失41例,突变率为20.7%。EGFR19缺失突变多见于女性,病理类型多为肺腺癌和腺鳞癌。结论:突变体富集法检测EGFR19外显子缺失突变敏感性高,可提高样本EGFR19缺失突变的检出率。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

突变体富集论文参考文献

[1].杨帆,陈克终,姜冠潮,李剑锋,王俊.改良的内切酶突变体富集法检测肺癌标本中EGFR基因突变[J].中国肺癌杂志.2011

[2].苏健,郭爱林,黄迎,陈世良,张绪超.突变体富集法检测表皮生长因子受体基因19外显子的缺失突变[J].实用医学杂志.2010

[3].李存枚,潘卫,曹洁,王锦红,黄德圣.HIV-1HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体的构建及在大肠杆菌中的高效表达[J].安徽医科大学学报.2009

[4].张新勇,岳文涛,吴羽华,徐丽焱,张春彦.突变体富集PCR法检测非小细胞肺癌病理组织EGFR基因突变[J].中国医院用药评价与分析.2008

[5].张峰,刘叁光,刘晔,李冬斌,李荣琴.突变体富集聚合酶链反应检测胰腺癌K-ras基因突变的研究[J].中华实验外科杂志.2005

[6].李文通,徐定邦.过滤法富集黑曲霉营养缺陷型和不同化柠檬酸的突变体[J].食品与发酵工业.1982

[7].徐定邦,李文通.微生物突变体的富集方法[J].微生物学通报.1982

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