本文主要研究内容
作者邓肖玉,易继海,李启峰,何金科,杨琴,王月丽,王震,王勇,陈创夫（2019）在《泛素相关修饰蛋白SUMO-2对RAW264.7细胞内布鲁氏菌16M存活的影响》一文中研究指出：为探究泛素相关修饰蛋白SUMO-2对布鲁氏菌16M的影响,本试验构建了SUMO-2基因干扰和过表达小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,并用布鲁氏菌16M进行侵染。参照GenBank中SUMO-2基因序列设计特异性干扰片段和过表达引物,克隆成功后连接至相应的慢病毒载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,选取阳性克隆菌提取质粒转染HEK-293FT细胞,将重组的慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,利用布鲁氏菌16M分别侵染构建成功的干扰和过表达细胞模型。通过实时荧光定量PCR检测SUMO-2 mRNA的转录水平,Western blotting检测SUMO-2蛋白的表达,ELISA检测IFN-γ和TNF-α水平,菌落计数来确定布鲁氏菌在细胞中的存活能力。结果显示,与对照组相比,干扰组SUMO-2 mRNA水平极显著降低(P<0.01),过表达组SUMO-2 mRNA水平极显著升高(P<0.01),成功构建了SUMO-2干扰和过表达细胞模型。Western blotting结果显示,布鲁氏菌16M感染能以时间依赖的方式下调SUMO-2蛋白的表达。经菌落计数后发现,SUMO-2过表达后布鲁氏菌的数量极显著减少(P<0.01),抑制布鲁氏菌16M的细胞内繁殖。而SUMO-2干扰后布鲁氏菌的数量显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01),促进布鲁氏菌16M的细胞内繁殖。同时,经SUMO-2过表达后,IFN-γ和TNF-α水平极显著升高(P<0.01)。经SUMO-2干扰后,TNF-α水平显著降低(P<0.05),IFN-γ水平极显著降低(P<0.01),SUMO-2在RAW264.7细胞中的表达变化也影响IFN-γ和TNF-α的产生。综上所述,SUMO-2蛋白在布鲁氏菌胞内存活中起着重要作用,可能有助于阐明布鲁氏菌感染的致病机制。
Abstract
wei tan jiu fan su xiang guan xiu shi dan bai SUMO-2dui bu lu shi jun 16Mde ying xiang ,ben shi yan gou jian le SUMO-2ji yin gan rao he guo biao da xiao shu ju shi xi bao RAW264.7mo xing ,bing yong bu lu shi jun 16Mjin hang qin ran 。can zhao GenBankzhong SUMO-2ji yin xu lie she ji te yi xing gan rao pian duan he guo biao da yin wu ,ke long cheng gong hou lian jie zhi xiang ying de man bing du zai ti ,zhuai hua da chang gan jun DH5αgan shou tai xi bao ,shua qu yang xing ke long jun di qu zhi li zhuai ran HEK-293FTxi bao ,jiang chong zu de man bing du gan ran xiao shu ju shi xi bao RAW264.7,li yong bu lu shi jun 16Mfen bie qin ran gou jian cheng gong de gan rao he guo biao da xi bao mo xing 。tong guo shi shi ying guang ding liang PCRjian ce SUMO-2 mRNAde zhuai lu shui ping ,Western blottingjian ce SUMO-2dan bai de biao da ,ELISAjian ce IFN-γhe TNF-αshui ping ,jun la ji shu lai que ding bu lu shi jun zai xi bao zhong de cun huo neng li 。jie guo xian shi ,yu dui zhao zu xiang bi ,gan rao zu SUMO-2 mRNAshui ping ji xian zhe jiang di (P<0.01),guo biao da zu SUMO-2 mRNAshui ping ji xian zhe sheng gao (P<0.01),cheng gong gou jian le SUMO-2gan rao he guo biao da xi bao mo xing 。Western blottingjie guo xian shi ,bu lu shi jun 16Mgan ran neng yi shi jian yi lai de fang shi xia diao SUMO-2dan bai de biao da 。jing jun la ji shu hou fa xian ,SUMO-2guo biao da hou bu lu shi jun de shu liang ji xian zhe jian shao (P<0.01),yi zhi bu lu shi jun 16Mde xi bao nei fan shi 。er SUMO-2gan rao hou bu lu shi jun de shu liang xian zhe huo ji xian zhe zeng jia (P<0.05;P<0.01),cu jin bu lu shi jun 16Mde xi bao nei fan shi 。tong shi ,jing SUMO-2guo biao da hou ,IFN-γhe TNF-αshui ping ji xian zhe sheng gao (P<0.01)。jing SUMO-2gan rao hou ,TNF-αshui ping xian zhe jiang di (P<0.05),IFN-γshui ping ji xian zhe jiang di (P<0.01),SUMO-2zai RAW264.7xi bao zhong de biao da bian hua ye ying xiang IFN-γhe TNF-αde chan sheng 。zeng shang suo shu ,SUMO-2dan bai zai bu lu shi jun bao nei cun huo zhong qi zhao chong yao zuo yong ,ke neng you zhu yu chan ming bu lu shi jun gan ran de zhi bing ji zhi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国畜牧兽医的邓肖玉,易继海,李启峰,何金科,杨琴,王月丽,王震,王勇,陈创夫，发表于刊物中国畜牧兽医2019年08期论文，是一篇关于布鲁氏菌论文,过表达论文,干扰论文,菌落计数论文,中国畜牧兽医2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国畜牧兽医2019年08期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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