本文主要研究内容
作者何明旺,项雅婧,孙云,曹贞洁,周永灿（2019）在《卵形鲳鲹Hepcidin-5的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备》一文中研究指出：为了制备高效的卵形鲳鲹hepcidin-5蛋白多克隆抗体和对其特异性进行鉴定,本研究通过PCR扩增的方法获得了卵形鲳鲹抗菌肽hepcidin-5(Tro H5)的成熟肽cDNA序列,并构建了原核表达载体pET-32a(+)/TroH5,然后将其转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中进行原核表达.经IPTG诱导,成功表达了相对分子质量约为35kDa的融合重组蛋白.经不同诱导条件的优化,最终确定在IPTG终浓度为0. 1mmol/L和温度为20℃时,其表达量最大.可溶性分析表明:该融合蛋白主要存在于上清中.经镍柱亲和层析纯化获得了纯度较高的融合蛋白,然后以免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA法检测,其效价达到1∶105.蛋白免疫印迹(Western blot)检测表明:所制备的多克隆抗体特异性强.本研究为进一步探究hepcidin-5的生物学功能奠定了基础.
Abstract
wei le zhi bei gao xiao de luan xing chang can hepcidin-5dan bai duo ke long kang ti he dui ji te yi xing jin hang jian ding ,ben yan jiu tong guo PCRkuo zeng de fang fa huo de le luan xing chang can kang jun tai hepcidin-5(Tro H5)de cheng shou tai cDNAxu lie ,bing gou jian le yuan he biao da zai ti pET-32a(+)/TroH5,ran hou jiang ji zhuai ru da chang gan jun biao da jun zhu BL21(DE3)zhong jin hang yuan he biao da .jing IPTGyou dao ,cheng gong biao da le xiang dui fen zi zhi liang yao wei 35kDade rong ge chong zu dan bai .jing bu tong you dao tiao jian de you hua ,zui zhong que ding zai IPTGzhong nong du wei 0. 1mmol/Lhe wen du wei 20℃shi ,ji biao da liang zui da .ke rong xing fen xi biao ming :gai rong ge dan bai zhu yao cun zai yu shang qing zhong .jing nie zhu qin he ceng xi chun hua huo de le chun du jiao gao de rong ge dan bai ,ran hou yi mian yi xiao shu zhi bei duo ke long kang ti ,jing ELISAfa jian ce ,ji xiao jia da dao 1∶105.dan bai mian yi yin ji (Western blot)jian ce biao ming :suo zhi bei de duo ke long kang ti te yi xing jiang .ben yan jiu wei jin yi bu tan jiu hepcidin-5de sheng wu xue gong neng dian ding le ji chu .
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自海南大学学报(自然科学版)的何明旺,项雅婧,孙云,曹贞洁,周永灿，发表于刊物海南大学学报(自然科学版)2019年01期论文，是一篇关于卵形鲳鲹论文,原核表达论文,多克隆抗体论文,海南大学学报(自然科学版)2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自海南大学学报(自然科学版)2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。