导读:本文包含了信号传导抑制剂论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:FAK,防己诺林碱,A549,细胞
信号传导抑制剂论文文献综述
Guo,B,王盈[1]（2015）在《激酶抑制剂防己诺林碱靶向FAK和抑制A549细胞中FAK-介导的信号传导通路的研究》一文中研究指出将4种肺癌细胞系(A549、NCI-H292、NCI-H446和NCI-H460)暴露在不同剂量(10~40μmol/L)的防己诺林碱下,观察该化合物对上述4种肿瘤细胞的作用及肿瘤细胞在增殖、凋亡和侵润方面的变化。结果表明,防己诺林碱通过抑制FAK(Tyr397)的磷酰化及其下游通路,有效抑制了A549细胞的增殖和侵润,但对NCI-H292、NCI-H446和NCI-H460细胞(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2015年01期）
杨红梅[2]（2014）在《Wnt信号传导途径抑制剂对ALDH1阳性富含干细胞的叁阴性细胞系HCC38的影响》一文中研究指出目的：探索wnt信号传导通路抑制剂盐霉素对富含干细胞的叁阴性乳腺癌细胞亚群的治疗作用。方法：体外培养ALDH1表达的叁阴乳腺癌细胞株HCC38，将细胞分成叁组，第一组加入生理盐水作为阴性对照，第二组加入不同浓度盐霉素作为实验组，第叁组加入紫叁醇作为阳性对照组。1.MTT法检测抑制剂盐霉素（sinomycin）对处理后HCC38细胞体外增殖的抑制效应；2.应用流式细胞仪检测盐霉素对细胞凋亡的影响；3.应用无血清悬浮培养人乳腺癌细胞的微球体（mammospheres，MSs）验证HCC38细胞富含肿瘤干细胞。4. Transwell侵袭实验证明肿瘤细胞的迁移能力。5.Westen蛋白印迹试验检测wnt信号通路下游关键蛋白β-catenin水平。结果：HCC38细胞在培养中可形成微球体，富含干细胞，与对照组相比，盐霉素能杀伤球体，并且与紫叁醇比较盐霉素作用更明显、盐霉素能够抑制HCC38细胞的生长、诱导HCC38细胞凋亡、降低HCC38细胞细胞侵袭力、降低HCC38的蛋白表达。结论：Wnt信号转导通路的抑制剂盐霉素通过抑制wnt下游蛋白，对富含干细胞的叁阴性乳腺癌细胞具有潜在的治疗价值，可能是抑制乳腺癌干细胞的有效药物。(本文来源于《吉林大学》期刊2014-05-01）
苗也,陈晖,李敏,李虹伟[3]（2013）在《β肾上腺素受体激酶抑制剂对心肌梗死后心力衰竭大鼠β肾上腺素受体信号传导的影响》一文中研究指出目的对心肌梗死后心力衰竭大鼠经尾静脉注射腺病毒介导的β肾上腺素受体激酶抑制剂(βARKct),观察其对神经内分泌激素以及β肾上腺素受体信号传导的影响。方法体重250 g左右的雄性SD大鼠24只随机分为3组,其中2组结扎冠状动脉左前降支形成急性前壁心肌梗死,4周后形成心力衰竭:模型组大鼠尾静脉注射空腺病毒载体,治疗组心力衰竭大鼠尾静脉注射腺病毒介导的β肾上腺素受体激酶抑制剂(Ad-βARKct);另一组为假手术组尾静脉注射空腺病毒载体。4周后测定各组大鼠血儿茶酚胺和NT-ProBNP水平以及左心室非梗死区心肌组织儿茶酚胺水平、β肾上腺素受体激酶(βARK1)以及β肾上腺素受体的表达。结果与模型组比较,治疗组大鼠血NT-ProBNP水平降低(P<0.01),血儿茶酚胺水平降低而心肌组织儿茶酚胺水平升高(均P<0.01),βARK1 mRNA水平降低(P<0.01)且βARK1蛋白表达水平降低(P<0.01),β肾上腺素受体mRNA水平升高(P<0.01)。结论通过尾静脉注射Ad-βARKct可以明显改善心肌梗死后心力衰竭大鼠的神经内分泌激素水平及β肾上腺素受体信号传导。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2013年24期）
严尔福[4]（2013）在《EGCG作为一种有效的STAT3信号传导通路抑制剂的研究》一文中研究指出原发性肝癌是几种最为常见的恶性肿瘤之一，其患者有较低的生存率。信号传导转录激活因子3(STAT3)是一种新被发现的致癌基因，它能够促进肝癌细胞的生长，繁殖，死亡和进展。在本研究中，我们从多种角度探究了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)作为一种潜在的STAT3抑制剂的应用和相关机理。此前的一些研究也已表明EGCG是一种广谱的抗癌化合物。有相关报道其能够阻滞几种细胞因子的活化，从而阻断多种下游信号转导通路如STAT3/JAK信号通路。当应用药物干预BEL-7402和QGY-7701细胞模型后，我们应用MTT体外实验证明了EGCG能够强烈的抑制这两种细胞系的增值和迁移。EGCG能够诱导体外肝癌细胞呈现一个很明显的浓度依赖性抑制效果。两者的半数抑制剂浓度(IC50)分别为：BEL-7402细胞系大约为55μM， QGY-7704细胞系大约为35μM。我们还应用流式细胞仪技术证明了EGCG能够通过干预STAT3信号通路诱导肝癌细胞发生凋亡。用20μM,40μM,80μM and160μM干预BEL-7402细胞24小时后凋亡率分别为4.4%,6.7%,8.5%和35.6%。相同的条件下，QGY-7704细胞24小时后凋亡率分别为9.1%,15.3%,22.7%和50.6%(P<0.05)。这些结果证明了QGY-7704对于EGCG的干预作用相比于BEL-7402细胞更为敏感。同时，EGCG能够明显降低磷酸化STAT3的表达量，但是对于总STAT3表达量影响不是很明显。RT-PCR的结果证明EGCG能够下调STAT3调控基因表达，从而有效抑制肝癌细胞迁移，入侵和增值。再者，我们应用分子对接的方式阐释了STAT3和EGCG的相互作用。EGCG中的-C=O作为氢的受体同时与GLU612中的-NH以及SER613中的-OH形成氢键，这种结构也形成了较为牢固的相互作用；EGCG中的一个芳环上的氢与STAT3中ARG609中的一个-HH2还形成一般的氢键。除此之外，EGCG的其余部分主要以范德华力与STAT3的疏水袋（LYS591、GLU594、ARG609、SER611、GLU612、SER613、THR620、VAL637、GLU638、PRO639）产生相互作用。这些结果和PT-PCR的结果一样，证明了EGCG能够从分子水平上阻滞STAT3活化。总之，我们通过我们一系列实验证明了EGCG能够通过干预STAT3信号通路抑制HCC细胞的生长，入侵和迁移，并且诱导肝癌细胞的凋亡。(本文来源于《天津大学》期刊2013-06-01）
杨荟,徐安平,吕军,刘亚[5]（2012）在《信号传导和转录激活因子3及其蛋白抑制剂在狼疮小鼠肾组织中的表达》一文中研究指出目的探讨信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其蛋白抑制剂(PIAS3)在MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中的表达。方法以18周龄雌性MRL/lpr小鼠作为狼疮肾炎组,相同周龄的BALB/C小鼠作为正常对照组。分别取两组小鼠肾组织,应用荧光定量RT-PCR法检测STAT3和PIAS3 mRNA的表达,采用Western blot和免疫组织化学方法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3的蛋白表达,同时检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理的表现。结果 MRL/lpr小鼠尿蛋白、血尿素氮、血肌酐均高于BALB/C小鼠(P<0.05)。MRL/lpr小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾小管间质炎症细胞浸润,而BALB/C小鼠肾小球、肾小管无异常。MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均较BALB/C小鼠升高(P<0.05),其PIAS3mRNA表达则较BALB/C小鼠明显降低(P<0.01),而两组小鼠STAT3总蛋白的表达无明显差别。结论 MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均高于对照组,而其PIAS3 mRNA表达低于对照组。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2012年06期）
程魁[6]（2011）在《免疫蛋白TLR3和4的抑制剂的设计、合成、结构修饰及信号传导研究》一文中研究指出上篇：干扰、调节蛋白质与蛋白质,或蛋白质与核酸之间的相互作用是当今药物研发的重要靶点。从过去的几十年到现在,主要的研究都聚焦在利用小分子来调节蛋白质与蛋白质之间的相互作用,并且已取得了巨大的进展。而研究蛋白质与核酸(RNA)之间的相互作用却相对滞后,一个很重要的原因是RNA具有很好的柔韧性、灵活性,与蛋白紧密结合,不易受到外界干扰。同时,RNA结合蛋白(RBPs)对转录后调控RNA有重要的影响,也对进化中的基因表达模式起到了关键的作用。上篇主要工作集中在探寻小分子抑制剂,来干扰RNA与免疫蛋白TLR3之间的相互作用,从而抑制TLR3的信号产生,达到治疗炎症性疾病的目的。(1)通过TLR3/dsRNA复合物的晶体结构(PDB:3CIY),定义出小分子与TLR3之间的相互作用靶点。(2)运用软件Glide5.6,借助高通量计算机筛选(High Throughput Virtual Screening, HTVS)的办法,从120万个药物小分子数据库中筛选出10000个有可能的小分子抑制剂；接下来对这10000个小分子进行标准精度筛选(standard precision, SP),得到了5000个更有可能的小分子抑制剂；紧接着进行高精确度筛选(extra-precision, XP)得到了100个潜在的小分子抑制剂；然后根据结构的合理性、与活性残基作用的能力、分子量、以及结合能的大小,挑选出了9个化合物,向Enamine购买。(3)对这9个化合物进行体外抑制TLR3的活性评价,得到了2个母体化合物。(4)随后以这2个母体化合物为骨架,考虑到电子等排体效应、电负性效应、空间异构效应等,展开了结构修饰和优化,共设计、合成出了72个新化合物,并对其进行了构效关系(Structure-activity Relationship, SAR)研究。(5)对抑制效果最好的潜在药物,进行了下游信号传导——肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1p(IL-1β)、干扰素β (IFN-β)的研究；同时也对细胞色素P450酶和常见的激酶进行了毒性及抑制活性评价。研究结果显示出：(1)2个母体化合物(T5626488和T5260630)都含有苯丙氨酸(Phe)的结构,对TLR3的抑制活性分别为IC50154±6μM和145±4μM。(2)当用苯环代替T5626488中的7元环,并在苯环上引入F、五元环上引入Cl后(4a),其对TLR3抑制活性提高了45倍,达到最好(IC503.44±0.41μM)。(3)F与Cl二者缺一,抑制活性将大幅减少,甚至消失(9a-11a,13a)。(4)在有抑制活性(IC50<100μM)的手性对应异构体中,R构型均好于对应的L构型。(5)用多一个羟基的酪氨酸(7a,7b)代替苯丙氨酸(4a,4b)之后,无论是R还是S构型,其抑制TLR3的活性都大大降低。(6)不同浓度的抑制活性测试显示4a在40μM左右已经将TLR3的信号全部抑制。(7)特异性测试显示,4a只针对TLR3有较强的抑制活性,而对TLR1/2, TLR2/6, TLR4,和TLR7没有抑制活性。(8)WST针对Raw264.7Cell细胞毒性测试显示4a在81μM时细胞没有毒性；在细胞色素P450酶家族(Cyp3A4, Cyp2D6, Cyp2C19和Cyp1A2)毒性测试进一步显示,相对于特定的P450酶家族的抑制剂而言,4a在25和50μM时,毒性均没有超过特定的阳性对照抑制剂。(9)对激酶家族中有代表性的的12种激酶测试显示,4a在10μM时对所有激酶都仍然保持着100%的抑制活性。(10)生物物理实验部分：通过荧光淬灭滴定(Fluorescence Quenching Titration)验证4a与TLR3相结合。通过荧光各向异性测定(Fluorescence Anisotropy)显示4a能够与dsRNA竞争来与TLR3相结合；在浓度为68μM时,几乎将所有的dsRNA都竞争出局；归一化结果显示,4a与dsRNA竞争结合TLR3符合单点竞争结合模型(one-site-competition model)。(11)下游信号传导研究显示进一步证明,4a能够通过与TLR3相互作用,有效地干扰TLR3与dsRNA相结合,抑制了下游信号因子TNF-α、IL-1β和IFN-β的产生。上篇也对TLR4的抑制剂的合成进行了研究。文献报导,TLR4与吗啡的治疗疼痛作用有关,如果抑制TLR4的产生,用少量的吗啡就可以达到同样的止疼效果。之前课题组已经报导了TLR4的抑制剂的筛选、合成和活性研究。本论文里的主要工作是进一步降低先导化合物的毒性和提高先导化合物结构的刚性,共设计合成了5个直链和2个大环的抑制剂。结果显示,直链的2个化合物抑制活性有所提高,大环的化合物毒性有所降低。血液内释放的细胞因子的测试结果显示,不同浓度下17对血液里的IL-1β, IL-6, IL-8和TNF-α的抑制效果非常显著,在50μM达到最佳,值得进一步深入研究。下篇：革兰氏阳性和阴性的病原菌对药物的耐药性的不断出现,给医院的用药和公共的卫生安全带来了极大地威胁。尤其令人震惊的是出现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐表皮葡萄球菌(MRSE)和耐万古霉素的Enteroccocus faecium菌的出现,迫使我们不得不加快步伐开发新型的抗菌药或进一步提高现有药物的抗菌活性。随着分子生物学技术的进一步发展,科学家通过确定抗菌药物的靶点来进行抗菌药物研究。近年来,细菌脂肪酸生物合成途径中所涉及的关键酶引起了研究人员的广泛兴趣。其中β-酮脂酰-ACP合成酶Ⅲ(β-Ketoacyl-ACP synthase Ⅲ, FabH, KAS Ⅲ)控制着细菌脂肪酸生物合成的起始步骤,是细菌脂肪酸生物合成的关键酶,是最有望成为新型抗菌药物靶标之一。在这里,我们合成了64个酰胺希夫碱类化合物,测定了它们对FabH的抑制作用。对其中抑制效果较好的前15个化合物进行了抗革兰氏阳性菌(芽孢杆菌Bacillus subtilis ATCC6633,金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC6538)和革兰氏阴性菌的测试(大肠杆菌Escherichia coli ATCC35218,假单胞菌Pseudomonas aeruginosa ATCC13525),结果显示2d、5f、7e和5e对这4种菌都有较好的抑制作用,MIC在0.39-6.25之间。为了更好的研究构效关系和抑制机理,我们采用分子模拟的方法,选取FabH的晶体结构(1HNJ.pdb),将对FabH有较好抑制活性的分子进行了模拟研究。化合物5f、7e和5e中的亚胺基氢、酚羟基氢与FabH中的活性残基Gly152和Gly209存在分之间的氢键相互作用。这些分子模拟数据为进一步的机制研究提供了思路和方向。(本文来源于《南京大学》期刊2011-05-01）
江雪杰[7]（2011）在《联合信号传导通路抑制剂逆转急性髓系白血病耐药及其机制研究》一文中研究指出背景与目的：急性髓细胞白血病(AML)是成年人常见的血液系统恶性肿瘤之一,目前白血病的治疗仍以化疗为主。尽管联合化疗已明显延长了患者的生存期,但白血病细胞多药耐药(multidrug resistance, MDR)仍为当今血液肿瘤治疗中的一大难题。近来研究认为多通道多靶点信号传导通路异常,细胞信号网络调控失衡,导致细胞增殖失控、凋亡受阻,是白血病细胞耐药的重要机制。当前应用单一细胞信号传导通路抑制剂如Bortezomib、RAD001、LBH589和叁氧化二砷等抗肿瘤效果差,而有限的初步研究结果显示联合多靶点信号传导通路抑制剂能够增强抗肿瘤活性,提高细胞对化疗药物的反应性。但是,用于耐药的急性髓系白血病方面研究极少,联合上述药物逆转白血病细胞耐药及探索优化组合方案的研究报道缺乏。HL-60/ADM细胞是公认的急性髓系白血病多药耐药细胞株,我们前期研究证明Bortezomib联合叁氧化二砷可以协同逆转HL-60/ADM和难治性AML原代细胞耐药,增强化疗的敏感性。蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib, Velcade,万珂)可以特异性抑制NF-κB通路蛋白的磷酸化,降低抗凋亡蛋白的活性,具有靶向抗肿瘤效应。体内外研究证明Bortezomib对淋巴瘤、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞均有较好的抗肿瘤效应,还可以克服传统化疗药物的耐药性。RAD001(Everolimus)是新合成的雷帕霉素衍生物,通过抑制mTOR的活性,阻断P I3K/Akt/mTOR信号通路,诱导细胞凋亡。有研究表明,RAD001与细胞毒性药物或P13K抑制剂或组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275联合,可以协同抑制HL-60、Jarket等白血病细胞增殖作用和促进凋亡作用。LBH589是第二代高活性的组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC inhibitors, HDACIs),在骨髓瘤细胞中研究表明LBH589可以调节Bcl-2、Bax等多种凋亡蛋白的表达,诱导细胞凋亡,还可以提高马法兰、Bortezomib等药物的抗肿瘤治疗效果。在T细胞白血病／淋巴瘤中的研究发现,组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合Bortezomib作用于细胞信号通路中Akt、NF-kB、JNK、p38MAPK等多个靶点,可以协同诱导caspase介导的细胞凋亡。有研究报道,LBH589联合Akt抑制剂AEE788可以抑制MEK、Akt蛋白磷酸化,可以协同诱导K562、Jurkat和ML-1白血病细胞凋亡。2008年ASH会议上Mamta Gupta等报道,在弥漫大B细胞淋巴瘤中LBH589与雷帕霉素联用也有协同抗肿瘤效果。但在耐药性AML细胞中联合多靶点信号通路抑制剂诱导细胞凋亡、逆转耐药的报道极少。本课题拟研究联合Bortezomib、RAD001、LBH589抑制急性髓系白血病多药耐药细胞株HL-60/ADM增殖,诱导凋亡及逆转耐药作用,旨在优化分子靶向药物逆转AML耐药的最佳组合方案并探讨其机制,随后通过难治性AML原代细胞验证,为难治性白血病治疗探索一条新途径。研究方法：首先选择急性髓系白血病多药耐药细胞株HL60/ADM为研究对象。应用MTT法计算增值抑制率,以24h阿霉素ICso值比较HL-60/ADM和HL-60细胞对阿霉素的敏感性,以耐药倍数大于30倍定义为耐药。此后将HL60/ADM细胞于含有10%小牛血清的RPMI-1640培养基中进行培养,以不同浓度药物处理HL60/ADM细胞12-72h,观察时间-剂量依赖性增殖抑制效应,在0-50nM之间确定LBH589 48h IC50浓度,在0-30nM之间确定Bortezomib 48h IC50浓度,在0-30μM之间确定RAD001 48h IC50浓度。确定LBH589 48h IC50浓度约为28nM, Bortezomib 48h IC50浓度为16nM, RAD001 48h IC50浓度为12μM。将HL-60/ADM细胞分为LBH589、RAD001、Bortezomib单药处理组、LBH589联合RAD001处理组和LBH589联合Bortezomib处理组,每组处理的细胞数一致,每组均设置空白对照组。各组检测指标相同,即用MTT法检测细胞增殖、AnnexinV-FITC/PI和Hoechst33342染色检测细胞凋亡,并应用流式细胞仪检测HL-60/ADM细胞MRP1表达和摄取阿霉素的情况。根据各组增殖抑制率,利用Calcusyn软件计算药物协同指数(CI)确定优化组合方案。选择难治性AML患者原代细胞,以优化组合方案处理细胞,MTT测定其增殖抑制率,验证其在原代细胞中的有效性。利用优化方案处理HL60/ADM细胞,分别提取细胞总蛋白和核蛋白,Western Blot检测PI3K/Akt/NF-κB信号通路及凋亡蛋白水平变化。对Western印迹胶片用Gel-Pro Analyzer软件进行光密度扫描定量分析,用目的蛋白和β-actin的积分光密度值(IOD)的比值来反映蛋白的相对表达水平,探讨联合多靶点信号传导抑制剂逆转白血病细胞耐药的分子机制。利用SPSS13.0软件进行统计学分析。不同浓度RAD001增殖活性差异采用单因素方差分析。依据LBH589、RAD001、Bortezomib单药或联合对HL60/ADM细胞增殖活性影响,利用Calcusyn软件计算药物协同作用指数(CI),反映药物之间的相互作用效果。判定标准：CI＜1,反映药物之间为协同作用；CI=1,反映药物之间为相加作用；CI＞1,反映药物之间为拮抗作用。采用方差分析比较不同处理组细胞凋亡率,两两比较采用LSD法；多样本采用方差分析；对原代细胞的细胞活性差异采用随机区组方差分析,两两比较采用LSD法检验；不同处理组蛋白相对表达水平的比较,采用单因素方差分析。结果：1. HL60/ADM细胞的耐药性确定MTT法检测HL60/ADM细胞阿霉素敏感性显示：阿霉素作用于HL60/ADM细胞的IC50值约为6.833μg/ml,作用于HL60细胞的IC50值仅为0.086μg/ml, HL60/ADM细胞耐药倍数为HL60的79倍,说明HL60/ADM细胞对阿霉素高度耐药,可以作为下一步研究对象。2.RAD001或联合LBH589对HL60/ADM细胞增殖、凋亡及耐药的影响MTT法检测细胞增殖活力显示：不同浓度RAD001对HL60/ADM细胞均具有生长抑制作用,随时间延长和剂量增加增值抑制率也逐渐提高,呈明显的时间一剂量依赖关系。不同浓度RAD001作用于HL60/ADM细胞48h和72h,30μmol/L药物浓度均达到最大抑制效果,增加药物浓度至40或50μmol/L时细胞增殖抑制率之间差异无显着意义,P>0.05。RAD001和LBH589对HL60/ADM细胞48hIC50值分别为12μmol/L和28nmol/L。以两药1/2IC50、3/4IC50、IC50、1.5IC50、2IC50浓度联合作用于耐药HL60/ADM细胞48h,1/2 IC50、3/4 IC50、IC50联合组细胞增殖抑制率高于各单药组,P<0.05。但1.5IC50、2IC50联合组增殖抑制率与RAD001单药组相比变化不明显,P>0.05。利用Calcusyn软件计算药物协同指数(CI),不同浓度RAD001联合LBH589时CI值均大于或等于1,说明两药联合没有协同抑制HL60/ADM细胞增殖的作用。AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡显示：对照组HL60/ADM细胞凋亡率为5.13±0.7%,5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L RAD001处理组细胞凋亡率分别为17.6±1.58%、48.3±5.74%和78.5±8.71%。可见随着药物浓度的增加,细胞凋亡率也随之增加(P<0.05)。Hoechst33342染色形态学观察凋亡显示：空白对照组细胞几乎无凋亡现象,不同浓度RAD001处理HL60/ADM细胞48h均可见凋亡小体,表现为核固缩、凝集,明亮的颗粒状蓝染,并且也随着RAD001浓度增加,凋亡细胞也逐渐增多。流式细胞仪检测细胞MRP1蛋白表达结果显示：HL-60/ADM细胞MRP1阳性率为92.9±3.54%,与HL-60细胞(1.87±0.09%)相比差异显着,P<0.01,提示耐药性AML细胞株HL-60/ADM高表达MRP1。10μmol/L RAD001处理HL-60/ADM细胞24h后,MRP1阳性率为79.10±3.88%,显着低于对照组,P<0.01。10μmol/L RAD001处理HL-60/ADM细胞24h后,加入终浓度为0.5μg/ml阿霉素,流式细胞仪检测细胞阿霉素摄取率结果显示：RAD001处理组为15.36±1.5%,明显高于对照组(8.53±0.74%),P<0.01,提示RAD001可以提高HL-60/ADM细胞阿霉素摄取率。以上结果提示,RAD001处理HL-60/ADM细胞能够下调MRP1的表达,提高阿霉素摄取率,逆转耐药。3.LBH589联合Bortezomib对HL60/ADM细胞增值、凋亡的影响MTT法检测细胞增殖抑制率结果显示：LBH589和Bortezomib对HL60/ADM抑制效应显示出剂量依赖性,即随药物剂量增加增殖抑制作用显着增强。LBH589. Bortezomib单药对HL60/ADM细胞48h IC50值分别为28nmol/L和16nmol/L,以HL60/ADM细胞1/2 IC50、3/4 IC50、IC50、3/2 IC50、2 IC50浓度LBH589、Bortezomib单药或联合作用于HL60/ADM细胞48h,各浓度联合组增值抑制率均高于单药组,P值均<0.05,利用Calcusyn软件计算药物协同作用指数。不同浓度LBH589联合Bortezomib时CI值均小于1,说明具有协同抑制增殖作用,其中21nmol/L LBH589联合12nmol/L Bortezomib协同作用最为明显,CI值为0.531。AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测凋亡显示：21nmol/L LBH589、12nmol/L Bortezomib单药或联合处理HL60/ADM细胞48h。对照组细胞凋亡率为5.36±0.47%,而LBH589和Bortezomib单药处理后凋亡率分别为45.6±5.56%,39.4±4.38%,显着高于对照组(P<0.01),但单药组之间没有统计学差异(P>0.05)。而两药联合处理后细胞凋亡率进一步提高至76.8±9.64%,与单药组之间差异显着,P<0.01。Hoechst33342染色形态学观察凋亡显示：空白对照组细胞几乎无凋亡现象,而LBH589、Bortezomib单药组和联合组处理细胞48h均可见凋亡小体,并且在对照组、单药组、联合组中凋亡细胞依秩增多。4.LBH589联合Bortezomib对HL60/ADM细胞耐药的影响及机制研究流式细胞仪检测细胞MRP1表达结果显示：21nmol/L LBH589、12nmol/L Bortezomib单药处理HL-60/ADM细胞24h,其MRP1阳性率分别为76.06±4.94%和71.84±5.54%,均低于对照组,P<0.05。当上述浓度LBH589和Bortezomib联合时可以进一步降低MRP1的表达,其阳性率为57.78±3.48%,P<0.05。流式细胞仪检测细胞阿霉素摄取率结果显示：21nmol/L LBH589和12nmol/L Bortezomib联合处理组阿霉素摄取率为64.81±3.31%,高于LBH589(28.96±2.37%)和Bortezomib (37.26±3.66%)单药组,P<0.01,而单药组与对照组(8.53±0.74%)之间也存在显着性差异,P<0.01。以上结果提示,LBH589、Bortezomib单药或联合处理HL-60/ADM细胞能够下调MRP1的表达,提高细胞阿霉素摄取率,逆转耐药,而两药联合时效果更加明显。Western blotting检测HL-60/ADM细胞的蛋白水平变化结果显示：LBH589单药处理HL-60/ADM细胞24h和48h Acetyl-Histone3表达高于对照组,当与Bortezomib联合处理时可以进一步提高细胞Acetyl-Histone3的表达水平,P<0.05,但Histone3总蛋白表达水平保持不变。分析P53蛋白的结果显示,LBH589、Bortezomib联合处理24h或单药处理48h P53蛋白表达均高于对照组,P<0.01,而联合处理48h后P53蛋白水平进一步升高。研究抗凋亡蛋白Bcl-2和XIAP结果发现,LBH589、Bortezomib两药联合处理细胞24h和48h可以降低Bcl-2和XIAP的表达水平。与凋亡相关的Caspase和PARP蛋白在LBH589、Bortezomib单药作用HL-60/ADM细胞24h可以诱导细胞Caspase-8、3和PARP蛋白的裂解激活,产生裂解片段,延长时间至48h或两药联合时可以进一步提高活化作用,P<0.05。研究PI3K/Akt/NF-KB信号传导通路中蛋白变化结果显示：LBH589、Bortezomib单药或两药联合处理后总AKT蛋白和总IKKα蛋白水平保持不变。但单药处理细胞48h,可以抑制磷酸化AKT蛋白(p-AKT)、磷酸化IKKα/β蛋白(p-IKKα/β)的表达,当两药联合时效果更加明显,P<0.05。研究核转录因子NF-κB P65结果表明：LBH589、Bortezomib单药处理24h或48h,细胞核蛋白NF-κB P65蛋白水平较对照组减低,P<0.05,而两药联合处理可以进一步抑制其表达。以上结果提示LBH589和Bortezomib联合处理HL-60/ADM细胞可以明显降低PI3K/Akt/NF-κB信号传导通路活性,上调P53蛋白的表达,抑制Bcl-2和XIAP蛋白表达,促进Caspase-3、8和PARP的裂解激活,诱导细胞凋亡。5.LBH589联合Bortezomib对难治性急性髓系白血病原代细胞增殖的影响MTT法检测原代细胞增殖抑制率结果显示：LBH589和Bortezomib对难治性AML原代细胞抑制效应均显示出剂量依赖性,但原代细胞对不同浓度药物的敏感性均低于细胞株,P<0.01。LBH589、Bortezomib对HL60/ADM细胞48hIC5o值分别为28nmol/L和16nmol/L,以两药HL60/ADM细胞1/2 IC50、3/4 IC50、IC50、3/2 IC50、2 IC50浓度联合作用于难治性AML原代细胞48h,各浓度联合结果均高于单药组,P值均<0.05。利用Calcusyn软件计算药物协同指数,不同浓度药物联合时CI值均小于1,说明均有协同抑制增殖作用。其中,21nmol/L LBH589和12nmol/L Bortezomib联合对原代细胞增殖抑制率协同作用也最为明显,CI值为0.498。与HL60/ADM细胞株相比,不同浓度药物对耐药AML原代细胞敏感性均低于HL60/ADM细胞株。研究结果表明LBH589联合Bortezomib可以协同抑制难治性AML原代细胞增殖,但其抑制率低于HL60/ADM细胞。结论：1、LBH589、RAD001单药对耐药AML细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用,其抑制作用效果随着时间和剂量的增加而增强。2、不同浓度LBH589、RAD001联合作用于HL-60/ADM细胞,协同作用指数(CI)均大于或等于1.0,表示两种药物联合时没有协同抑制增殖作用。3、不同浓度LBH589、Bortezomib联合作用于HL-60/ADM细胞和难治性AML原代细胞,CI值均小于1,说明两药联合具有协同抑制增殖及诱导凋亡作用,其中21nmol/L LBH589和12nmol/L Bortezomib联合时协同作用最为明显。4、LBH589、Bortezomib能够明显下调HL-60/ADM细胞MRP1的表达,提高细胞阿霉素摄取率,逆转耐药,而两药联合效果更加明显。5、LBH589联合Bortezomib处理HL-60/ADM细胞,可以降低PI3K/Akt/NF-κB信号通路活性,上调P53蛋白的表达,抑制Bcl-2和XIAP蛋白表达,促进Caspase-3、8和PARP的裂解激活,共同参与逆转AML耐药。(本文来源于《南方医科大学》期刊2011-03-31）
高玲[8]（2011）在《XIAP抑制剂embelin对乳腺癌细胞生长抑制及信号传导通路的作用》一文中研究指出目的：乳腺癌是女性最常见的肿瘤,是当前导致女性死亡的主要原因。蒽环类化疗药物盐酸多柔比星(doxorubicin hydrochloride, DOX)是一线抗乳腺癌药物,其通过嵌入DNA或RNA链碱基对之间,抑制DNA或RNA合成以抑制快速生长肿瘤细胞的复制。然而,蒽环类化疗药物有对心脏的毒副作用,限制了它的使用剂量和剂量强度,所以我们需要发掘高效低细胞毒性的与其它化疗药物有协同作用的抗肿瘤药物。X连锁凋亡抑制蛋白(X chromosome-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)是凋亡抑制蛋白家族中最具效力的蛋白,它能有效抑制凋亡终末途径中的caspases,从而抑制细胞凋亡在多种肿瘤组织和细胞中XIAP呈高表达。Embelin是一种小分子XIAP抑制剂,有研究表明其可抑制人实体瘤细胞的生长和促进细胞凋亡。但embelin对人乳腺癌细胞的作用少有研究。本文观察XIAP在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的差异表达,并观察embelin对乳腺癌细胞生长抑制的作用、信号传导通路蛋白表达的差异、细胞凋亡的影响、细胞周期的改变以及embelin与DOX联合应用的效应。方法和结果：1.采用Pathway Array方法检测10对乳腺癌组织中XIAP蛋白的表达,结果表明XIAP蛋白在乳腺癌组织表达明显高于正常乳腺组织(P<0.001)。2.不同浓度的embelin作用于乳腺癌细胞72h后,采用MTT法检测细胞的活性,结果显示embelin能够降低乳腺癌细胞活性且呈剂量效应关系。不同浓度DOX作用于乳腺癌细胞72 h后,采用MTT法检测细胞的活性,结果显示DOX能够降低乳腺癌细胞活性且呈剂量效应关系。1/2 IC50浓度的embelin作用于乳腺癌细胞(T47D 5μM,MDA-MB-231 12.5μM和AU5659μM),同时分别给予DOX 10、25、50、100、200、400、800和1600 nM作用72h后,采用MTT法检测细胞的活性,证明embelin可增加小剂量DOX对乳腺癌细胞的抑制作用。3.乳腺癌细胞T47D, MDA-MB-231和AU565分别用embelin 35、40和38μM处理,对照组用DMSO处理48h,应用Pathway Array实验方法检测信号传导通路蛋白的表达。结果证明部分蛋白表达有差异。应用IPA工具绘制至少在两种乳腺癌细胞中倍数变化超过1.5倍的信号传导通路蛋白的网络图。4.乳腺癌细胞T47D,MDA-MB-231和AU565给予embelin 10、20、40和60μM作用48h。应用Western blot检测XIAP蛋白,caspase-3蛋白及细胞周期相关信号传导通路蛋白p-Rb、p-cdc2、cdk2、cdk4、cdk6、cdc2 p34、CHK1及cdc25C。见XIAP蛋白及细胞周期相关信号传导通路蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达增高,且多呈剂量相关性。5.乳腺癌细胞T47D, MDA-MB-231和AU565分别给予embelin 10、20和40μM,对照组给予DMSO,作用72h后应用流式细胞仪检测细胞周期。见embelin可以诱导乳腺癌细胞S期阻滞,在T47D细胞中还可以诱导G2/M期阻滞,在MDA-MB-231细胞中小剂量embelin可以诱导G2/M期阻滞,大剂量embelin可以诱导G0/G1期阻滞。6.乳腺癌细胞MDA-MB-231分别给予embelin 10、20、40和60μM,对照组给予DMSO,作用24h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡。Embelin剂量为40和60gM时凋亡细胞百分比较对照组增加(P<0.001)。结论：XIAP蛋白在乳腺癌组织表达明显高于正常乳腺组织。Embelin可抑制乳腺癌细胞活性,促进凋亡,诱导细胞发生S期,G2/M或G0/G1期阻滞,还可增加小剂量DOX对乳腺癌细胞活性的抑制作用。Embelin抑制乳腺癌细胞活性主要机制由于细胞周期相关蛋白Cdk2、Cdk4、Cdk6、cyclinE、p-Rb (Ser780)、p-Rb (Ser807/811)、CHK1、Cdc25C、PCNA、Eg5、cdc2 p34和p-cdc2(Tyr15)的表达降低,诱导细胞周期阻滞；及凋亡相关蛋白XIAP和c-IAP2表达降低,促进细胞凋亡；还与肿瘤抑制蛋白p-PTEN (Ser380)表达增高,肿瘤相关蛋白p-PDKl (Ser241)、HIF-3a、PDEF、WT1表达降低有关。这些体外实验结果为进一步研究embelin对乳腺癌的治疗奠定了基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2011-03-01）
王大广[9]（2011）在《胃癌信号传导蛋白表达谱筛选和分析及XIAP、CDK6抑制剂对胃癌细胞的影响》一文中研究指出目的：应用Protein Pathway Array技术筛选与胃癌信号传导相关的蛋白质表达谱；研究XIAP抑制剂Embelin和CDK6抑制剂PD0332991是否在胃癌细胞中具有抗肿瘤效应,其具体的分子生物学机制是什么,以及对胃癌细胞信号传导网络的影响。方法：第一部分中应用Protein Pathway Array技术,142种抗体,检测149例胃癌组织和正常胃黏膜组织蛋白质表达情况(包括56对胃癌和癌旁正常粘膜组织,37例胃癌组织)。56对组织被分为训练组(n=37)和验证组(n=19)应用聚类分析和判别分析的方法鉴定癌组织和正常组织的差异表达蛋白。用56例癌组织标本分析差异表达蛋白与肿瘤浸润和淋巴结转移的相关性。用93例肿瘤组织进行生存分析。第二部分中应用MTT法及流式细胞术研究XIAP抑制剂Embelin对胃癌细胞的增殖抑制作用及对细胞周期及凋亡的影响,应用Westen-blot技术研究Embelin作用于胃癌细胞后细胞周期相关蛋白表达的情况,并应用Protein Pathway Array技术及Ingenuity Pathway Analysis (IPA)分析软件研究Embelin对胃癌细胞传导网络的影响。第叁部分中应用MTT法及流式细胞术研究CDK6抑制剂PD0332991对胃癌细胞的增殖抑制作用及对细胞周期影响,应用Westen-blot技术研究PD0332991作用于胃癌细胞后细胞周期相关蛋白表达的情况,并应用Protein Pathway Array技术及Ingenuity Pathway Analysis (IPA)分析软件研究PD0332991对胃癌细胞传导网络的影响。结果：在第一部分中我们的研究发现,共有22种蛋白在正常组织和癌组织中存在差异表达；经过交叉验证的统计方法进行判别分析发现有9种蛋白可对癌组织和正常组织进行准确的预测分类；在不同T分期的肿瘤中,共有10种蛋白存在差异表达,其中经过聚类分析和判别分析等方法分析后发现其中有4种蛋白可将肿瘤分为高侵袭性和低侵袭性两个类别。另外我们还发现有4种蛋白与淋巴结转移相关；我们的结果还表明AKT和CDK2的表达水平是影响胃癌预后的独立风险因素。在第二部分中我们的结果表明XIAP抑制剂Embelin能抑制胃癌细胞的增殖,并能使胃癌细胞阻滞于S期和G2/M期,且能诱导胃癌细胞的凋亡；Embelin对胃癌细胞周期的阻滞作用是通过下调cyclinB1/cdc2,cdc25和cdc2等细胞周期蛋白的表达实现的。应用Protein Pathway Array技术研究Embelin处理过的细胞与对照组细胞信号传导蛋白表达谱的差别,共有36种蛋白质在叁种细胞中均有显着差别且趋势一致,Ingenuity Pathway Analysis (IPA)分析软件结果表明,这些蛋白与细胞死亡,细胞发育,肿瘤的发生,细胞周期,DNA复制/重组/修复,和细胞运动等功能有关,且与PTEN, JAK/STAT, WNT/beta-catenin, PI3K/AKT,细胞周期G2/M检验点,细胞周期G1/S检验点,P53信号等传导通路相关。在第叁部分中我们的结果表明CDK6抑制剂PD0332991能抑制胃癌细胞的增殖,并能使胃癌细胞阻滞于G1/S期；PD0332991对胃癌细胞周期的阻滞作用是通过抑制Rb磷酸化实现的。应用Protein Pathway Array技术研究PD0332991处理过的细胞与对照组细胞信号传导蛋白表达谱的差别,共有31种蛋白质至少在叁种细胞中均有显着差别且趋势一致,Ingenuity Pathway Analysis (IPA)分析软件结果表明,这些蛋白与细胞发育,细胞死亡,肿瘤发生,细胞周期,细胞生长与增殖等功能有关,且与癌症分子机制相关通路,p53信号,磷脂酰肌醇激酶/AKT信号,细胞凋亡信号,抑癌基因信号,14-3-3-介导的信号,JAK/Stat信号,细胞周期：G2/MDNA损坏检查点调控,表皮生长因子信号,缺氧诱导因子1α信号,细胞周期：G1/S检查点调控,成纤维细胞生长因子信号,Rac信号,p70S6K信号,雷帕霉素靶蛋白信号,胞外信号调节激酶5信号,RAR活化作用,Wnt/β-蛋白信号,胞外信号调节激酶/信号丝裂原活化蛋白激酶和应激激活蛋白激酶/氨基末端激酶信号等传导通路相关。结论：胃癌中存在广泛的信号传导蛋白表达的异常,其中一些蛋白可能被选作与临床病理生物学行为相关的分子标记,一些蛋白可能与侵润转移等相关,一些蛋白可能与患者的预后相关。XIAP抑制剂能通过诱导凋亡和细胞周期阻滞抑制胃癌细胞增殖,其分子生物学机制是通过调节细胞周期相关蛋白实现的；CDK6抑制剂能通过抑制Rb磷酸化使胃癌细胞周期阻滞,从而抑制胃癌细胞增殖。上述两种抑制剂均能调节与多种细胞功能和细胞信号通路网路相关的蛋白质的表达。(本文来源于《吉林大学》期刊2011-03-01）
郭小华,刘鹰翔[10]（2010）在《Hedgehog信号传导途径抑制剂的研究进展》一文中研究指出Hedgehog信号传导途径在细胞分化及胚胎器官形成过程中扮演着重要角色,异常激活hedgehog信号传导,可引起多种肿瘤的发生。研究和开发hedgehog信号传导途径抑制剂为肿瘤的治疗提供了新的策略。该文对hedgehog信号传导途径抑制剂及其构效关系的研究进行综述。(本文来源于《中国药物化学杂志》期刊2010年05期）
信号传导抑制剂论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：探索wnt信号传导通路抑制剂盐霉素对富含干细胞的叁阴性乳腺癌细胞亚群的治疗作用。方法：体外培养ALDH1表达的叁阴乳腺癌细胞株HCC38，将细胞分成叁组，第一组加入生理盐水作为阴性对照，第二组加入不同浓度盐霉素作为实验组，第叁组加入紫叁醇作为阳性对照组。1.MTT法检测抑制剂盐霉素（sinomycin）对处理后HCC38细胞体外增殖的抑制效应；2.应用流式细胞仪检测盐霉素对细胞凋亡的影响；3.应用无血清悬浮培养人乳腺癌细胞的微球体（mammospheres，MSs）验证HCC38细胞富含肿瘤干细胞。4. Transwell侵袭实验证明肿瘤细胞的迁移能力。5.Westen蛋白印迹试验检测wnt信号通路下游关键蛋白β-catenin水平。结果：HCC38细胞在培养中可形成微球体，富含干细胞，与对照组相比，盐霉素能杀伤球体，并且与紫叁醇比较盐霉素作用更明显、盐霉素能够抑制HCC38细胞的生长、诱导HCC38细胞凋亡、降低HCC38细胞细胞侵袭力、降低HCC38的蛋白表达。结论：Wnt信号转导通路的抑制剂盐霉素通过抑制wnt下游蛋白，对富含干细胞的叁阴性乳腺癌细胞具有潜在的治疗价值，可能是抑制乳腺癌干细胞的有效药物。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
信号传导抑制剂论文参考文献
[1].Guo,B,王盈.激酶抑制剂防己诺林碱靶向FAK和抑制A549细胞中FAK-介导的信号传导通路的研究[J].中国医药工业杂志.2015
[2].杨红梅.Wnt信号传导途径抑制剂对ALDH1阳性富含干细胞的叁阴性细胞系HCC38的影响[D].吉林大学.2014
[3].苗也,陈晖,李敏,李虹伟.β肾上腺素受体激酶抑制剂对心肌梗死后心力衰竭大鼠β肾上腺素受体信号传导的影响[J].中华临床医师杂志(电子版).2013
[4].严尔福.EGCG作为一种有效的STAT3信号传导通路抑制剂的研究[D].天津大学.2013
[5].杨荟,徐安平,吕军,刘亚.信号传导和转录激活因子3及其蛋白抑制剂在狼疮小鼠肾组织中的表达[J].南方医科大学学报.2012
[6].程魁.免疫蛋白TLR3和4的抑制剂的设计、合成、结构修饰及信号传导研究[D].南京大学.2011
[7].江雪杰.联合信号传导通路抑制剂逆转急性髓系白血病耐药及其机制研究[D].南方医科大学.2011
[8].高玲.XIAP抑制剂embelin对乳腺癌细胞生长抑制及信号传导通路的作用[D].吉林大学.2011
[9].王大广.胃癌信号传导蛋白表达谱筛选和分析及XIAP、CDK6抑制剂对胃癌细胞的影响[D].吉林大学.2011
[10].郭小华,刘鹰翔.Hedgehog信号传导途径抑制剂的研究进展[J].中国药物化学杂志.2010