周华魏良洲（山东青岛大学医学院附属医院消化科266000）
【中图分类号】R735.3+5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）23-0217-03
【摘要】目的探讨SSTR1、SSTR2在结肠腺瘤型息肉的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVisionTM二步法检测SSTR1、SSTR2亚型蛋白在对照组织、结肠腺瘤型息肉及结肠腺癌组织中的表达。结果SSTR1在结肠癌及结肠腺瘤型息肉中无明显表达差异（P>0.05），与临床分期及肿瘤部位有明显差异(P>0.05)，淋巴结转移癌的SSTR1的表达高于无淋巴结转移的结肠癌。SSTR2在结肠癌中的阳性率为20.5％，与临床分期、淋巴转移及肿瘤部位没有明显差异(各组之间均P>0.05)；对照组结肠黏膜中的阳性率为71.4％，腺瘤中轻度不典型增生阳性率为59.5％；中重度不典型增生阳性率为41.5％。SSTR2在结肠腺瘤型息肉和正常结肠粘膜组织表达无明显差异（P＞0.05）。结肠腺瘤型息肉的中、重度不典型增生低于轻度不典型增生（P＜0.05）。SSTR2在结腺癌中的阳性率及表达强度最低，显著低于结肠腺瘤型息肉（P＜0.01），结肠腺瘤型息肉的中、重度不典型增生明显低于轻度不典型增生（P＜0.05）结论SSTR2的阳性表达及表达强度对诊断结肠腺癌和监视结肠腺瘤型息肉癌变有重要意义。
【关键词】SSTR1SSTR2结肠腺瘤型息肉结肠腺癌免疫组织化学
【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionofsomatostatinreceptorSSTR1、SSTR2inhumancolorectalcancers,adenomaandnormaltissuesanddiscusstherelationshipbetweentheexpressionandcharacteristicsofthetumor．MethodsImmunohistochemistrytechniquewasusedtodemonstratesomatostatinreceptorSSTR1～2expressioninhumancolorectalcancers,adenomaandnormaltissues．TherelationshipbetweentheexpressionrateofSSTR1～2andtheclinicopathologicalparameterswasanalyst．ResultsTheexpressionsofSSTR1werenotrelatedtothelocationandclinicalstage（P>0.05）.TheexpressionratesofSSTRIinthecasesoflymphnodemetastasiswerehigherthanthatinthecasesWithoutlymphnodemetastases.Theantibodiessperificallydetectedthereceptorsinhumancolorectalcancers,adenomaandnormaltissues.TheexpressionrateofSSTR2inthespecimensofcolorectalcancerswas20.5%,TheexpressionrateofSSTR2innormaltissuewas71.4%．Therewassignificantdifferencebetweenthetwogroup(P<0.01).TheexpressionrateofSSTR2inthespecimensoflow-gradeatypicalhyperplasiawas68.2%,Theexpressionrateinhigh-gradeatypicalhyperplasiawas28.6%．Therewassignificantdifferencebetweenthetwogroup（P<0.01).ConclusionsSSTR2isexpressedinhumancolorectalcancers,adenomaandnormaltissues.DeterminationofSSTR2maybeofvalueinthediagnosisaswellasintheprogressionofcolorectalcancer.
【Keywords】SSTR1SSTR2Colonicadenomatypepolypscolorectalcancerimmunohistochemisty
引言
多项研究提示80％以上的结直肠癌是由结肠腺瘤型息肉演变而来，其发病机理尚不明确。近年来的研究表明，生长抑素对包括大肠癌在内的多种消化道恶性肿瘤细胞的生长有抑制作用。在本研究中，我们分别检测SSTR1～2在对照结肠粘膜组织，结肠腺瘤、结肠癌中的表达，探讨SSTR1～2在结肠腺瘤息肉癌变发生、发展中的表达情况，有助于推测结肠腺瘤息肉的生物学行为发展趋势，早期判断其癌变倾向，并判断其预后。
1材料与方法
1.1一般资料
标本为淄博市中心医院病理科（作者工作单位）2005年3月至2010年3月收检的手术及内镜下电切结肠腺瘤型息肉63例（男37例，女26例），平均年龄50.7岁，其中轻度不典型增生22例，中、重度不典型增生41例；选取28例（男10例，女18例）对照结肠组织(距肿瘤边缘10cm以上)（男18例，女10例）及39例（男25例，女14例）结肠癌手术标本作为对照，患者平均年龄48.6岁；结肠癌组织（男22例，女17例）均来自未接受过任何化疗、放疗和免疫治疗并且无其他组织原发肿瘤的患者，患者平均年龄68.5岁。
1.2标本和试剂
130例患者的石蜡组织块制作厚4um连续切片。每份标本常规苏木素一伊红(HE)染色，进行组织形态学观察和细胞分化程度判断。羊抗人SSTR2多克隆抗体(浓缩型、SantaCruzBiotechmlogy公司)；SP免疫组织化学试剂盒(第二抗体为通用型生物素标记的羊抗兔或鼠IgG)、DAB显色剂等(福州迈新生物技术公司)。
1.3实验方法
应用免疫组织化学方法(SP法)检测上述结直肠癌、结肠腺瘤、正常结直肠黏膜中生长抑素受体2亚型的表达。sP法简述如下：石蜡切片经常规二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化；柠檬酸缓冲液高温高压抗原修复；滴加过氧化酶阻断液室温10min，磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗后滴非免疫性动物血清室温10min，滴加第一抗体即抗SSTR抗体(抗ssTR2抗体稀释度为1：400)，4℃冰箱孵育过夜；PBS冲洗后滴加生物素标记的第二抗体室温10min；PBS冲洗后滴加链霉素亲和素，过氧化物酶溶液室温10min，PBS冲洗后DAB显色，冲冼，苏木素复染，封片，显微镜观察。每次实验用已知阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。
1.4结果评估
根据结直肠癌细胞和正常结直肠黏膜上皮细胞阳性细胞数和着色深度计分，每例随机观察5个高倍镜(×400)视野。阳性表达细胞数<5％为0分，5％～24％为1分，25％～49％为2分，50％～74％为3分，≥75％为4分。阳性细胞表达的着色深度：基本不着色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色3分。两者得分相乘，<1分的病例判定为表达阴性，其余的病例判定为表达阳性。
1.5统计学方法
采用x2检验，所得数据应用SPSS11.5统计学软件进行处理。
2结果
2.1SSTR1、SSTR2在不同结肠病理组织上皮中的表达
SSTR1在对照结肠黏膜中表达阳性22例，阴性6例，表达率78.6%；在39例腺癌中表达阳性21例，阴性8例，表达率53.8%，39例腺癌中阳性8例，阴性31例，表达率为20.5％；在63例腺瘤中阳性47例，阴性16例，表达率74.6%，在各度非典型增生中的表达无明显差异（P＞0.05），在结肠腺瘤和对照结肠粘膜组织及结肠癌中均高表达，但在它们之间的表达无明显差异（P＞0.05）。
SSTR2在63例腺瘤中阳性32例，阴性31例，表达率为50.5％；SSTR2在结肠腺瘤和对照结肠粘膜组织表达无明显差异（P＞0.05），腺癌的阳性表达率及表达强度显著低于腺瘤（P＜0.01）。腺瘤中轻度不典型增生26例阳性，表达率为59.5％；中重度不典型增生41例，阳性17例，阴性24例，表达率为41.5％，中重度不典型增生的表达率显著低于轻度不典型增生（P＜0.05）。见表1
表1SSTR2在不同结肠病理组织中的表达
2.2SSTR2阳性表达与临床病理特征的关系：
在结肠腺癌当中，SSTR2的表达与结肠腺癌的组织学分级、TNM分期和浸润深度之间没有明显的差异。高、中分化腺癌中阳性表现高于低分化腺癌（P＜0.05），低、中分化腺癌明显低于高分化腺癌（P＜0.03），与临床分期及浸润深度没有明显差异(各组之间均P>0．05)，见表2。
2.3SSTR1、SSTR2阳性表达与临床病理特征的关系：
SSTR1在结肠腺癌当中的表达与结肠组织分级、TNM分期和肿瘤部位无明显差异(各组之间均P>0．05)，但在有淋巴结转移组织的表达明显高于无淋巴结转移组织（P＜0.03）。
SSTR2的表达与结肠腺癌的组织学分级、TNM分期和浸润深度之间没有明显的差异。高、中分化腺癌中阳性表现高于低分化腺癌（P＜0.05），低、中分化腺癌明显低于高分化腺癌（P＜0.03），与临床分期及浸润深度没有明显差异(各组之间均P>0．05)，见表2。
表2SSTR2阳性表达与临床病理特征的关系
3讨论
结肠腺瘤型息肉是一种良性肿瘤性病变，目前发现95％的早期大肠癌与腺瘤有关。相关研究表明，由重度不典型增生腺瘤演变为早期癌需要3～6年。因此对于有癌变倾向的结肠腺瘤的早期诊断就有重要临床实用价值。有研究提示，结肠癌中SSTR各型表达不同变化，SSTR1在结肠癌中表达尚不清晰，SSTR2被认为是胰腺癌、结肠癌潜在的抑癌基因[1]，故探讨SSTR1、SSTR2在结肠腺瘤息肉癌变发生、发展中的表达情况，不仅具有肿瘤生物学意义，而且也有潜在的临床价值。
很多研究表明，生长抑素与生长抑素受体结合对包括大肠癌在内的多种消化道恶性肿瘤细胞的生长有抑制作用[2]。生长抑素及其类似物通过SSTR相关亚型的介导具有多种多样的生理与药理作用，包括经细胞内信号传导系统，使靶器官出现分泌受抑、分化停止、生长延缓、血流减少、代谢降低和运动减弱[3-6]。生长抑素受体（SSTR,SSR)是一种膜蛋白受体，效应子为腺苷酸环化酶、Ca2+通道、酪氨酸磷酸酶，具有识别不同化学信使的能力，并能通过一些直接或间接的偶联系统启动生物反应[7-10]。SST功能的关键是SSTR在细胞膜上的表达。
本实验结果显示，SSTR1-2在结肠癌、结肠腺瘤型息肉和对照粘膜组织中均有表达，但表达的量不同，表达部位也不相同，其表达量经统计学处理，二者间并无显著性差异。提示SSTR1一2亚型蛋白在结肠癌组织中表达的部位不尽相同，可能与不同的受体亚型在体内发挥不同的介导作用有关。
本实验显示SSTR1在结肠腺瘤、结肠癌和结肠对照组织之间表达无明显差异，但在淋巴结转移的结直肠癌SSTRl表达明显升高，SSTRl表达率随TNM分期呈升高趋势，其原因可能是癌细胞发生淋巴结转移时多种因素诱发SSTRl基因表达。SSTR2腺癌中的阳性率及表达强度显著低于正常组织与相关文献报道一致；还显示SSTR2在分化好恶性程度低的大肠癌中比分化差、恶性程度高者表达高，SSTR2的表达与临床分期、淋巴结转移及肿瘤部位之间均无统计学意义（各组之间均P>0．05)。SSTR2的阳性表达腺瘤组织低于正常组织，但无统计学意义（P＞0.05）；腺癌中的阳性率及表达强度显著低于腺瘤（P＜0.01），瘤中SSTR2的表达随着腺瘤不典型增生程度的增高而降低，具有明显统计学意义（P<0.03）。
本实验结果表明SSTR1与结肠癌的发生无明显关系，SSTR2的表达与结肠腺癌的发生有关，与结肠腺瘤型息肉向结肠腺癌的组织化学转变有关，提示SSTR2的阳性表达强度对诊断结肠腺瘤型息肉癌变有重要意义，有助于结肠癌前病变的监测和随访,对结肠癌高危人群进行筛选,对结肠癌的早期诊断提供客观依据。
参考文献
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