导读:本文包含了和转染论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肝癌细胞,质粒扩增,转染,转染率
和转染论文文献综述
孙越鹏,朱晓西,范芳[1]（2019）在《HepG2.2.15和BEL-7402肝癌细胞的培养和转染的实验研究》一文中研究指出目的阐述HepG2.2.15和7402两类肝癌细胞的培养,用脂质体转染法转染细胞,观察转染率。方法 DMEM高糖培养基培养细胞,用脂质体转染法转染表达荧光蛋白的pEGFP-N1质粒。结果两类肝癌细胞生长特征,消化时间不同;HepG2.2.15细胞转染率为27%,7402细胞的转染率为89%。(本文来源于《临床医药文献电子杂志》期刊2019年34期）
郭海林,撒应龙,黄建文,王周,王林[2]（2016）在《小肠黏膜下基质复合口腔黏膜细胞和转染TIMP-1 siRNA的成纤维细胞用于尿道重建的实验研究》一文中研究指出目的:探索应用小肠黏膜下基质(small intestinal submucosa,SIS)复合口腔黏膜细胞(oral keratinocytes,OK)和转染金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)siRNA的成纤维细胞(fibroblasts,FB)构建组织工程化尿道的可行性。方法:分离培养OK,FB,并用TIMP-1siRNA转染FB,检测转染前后FB分泌Ⅰ型胶原的改变。剥离24只雄性兔子腹侧尿道黏膜2.0cm×0.8cm,并将其平均分为3组,每组8只。第1组应用单纯SIS修复,第2组应用SIS复合OK修复,第3组应用SIS复合OK和转染TIMP-1siRNA的FB修复。术后1个月、6个月行逆行尿道造影检查和组织学分析评估叁组尿道重建的效果。结果:转染TIMP-1siRNA的FB分泌Ⅰ型胶原明显减少。逆行尿道造影下,第1组兔子中有5只尿道管腔通畅,第2组有6只,第3组有7只。组织学上,第1组在1个月时形成了不完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较明显。第2组和第3组在1个月时形成了完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较轻,且第3组生长的尿路上皮、平滑肌和血管较第2组明显增多。结论:OK和转染TIMP-1siRNA的FB可作为尿道组织工程中的种子细胞用于尿道修复重建,OK和转染TIMP-1siRNA的FB可抑制尿道瘢痕的产生。(本文来源于《临床泌尿外科杂志》期刊2016年03期）
张奇昕,原明璐,陈顺,袁伟恩[3]（2014）在《新型可降解PEI衍生物的表征及其在Brl-3A细胞中的毒性和转染研究》一文中研究指出目的:对新型可降解高分子进行表征,研究其在Brl-3A细胞中的毒性和转染效率,以及连接剂比例对以上方面的影响。方法:通过化学方法合成不同比例PEI-Tr高分子,考察其包裹质粒DNA形成纳米颗粒的粒径和电位,以CCK-8方法考察Brl-3A细胞中的细胞毒性,以荧光素酶质粒为报告基因考察Brl-3A细胞中的转染效率。结果:PEI-Tr材料能形成200 nm以下带20 mV左右正电荷的纳米颗粒,具有较好的细胞内吞能力和溶液稳定性,细胞毒性实验证明,随着浓度增加PEI-Tr材料显示了远低于PEI-25kDa的细胞毒性,细胞转染实验表明其拥有高效输送质粒的能力。结论:PEI-Tr是一种高效低毒的可降解聚阳离子载体,在基因输送领域有很大的潜力;连接剂的比例在聚阳离子功能中起到重要作用。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2014年31期）
郑斌,刘涛,郑永晨,李佳睿[4]（2014）在《克隆人Toll样受体9基因和转染真核细胞对CpG的反应》一文中研究指出目的克隆人Toll样受体9(TLR9)基因,重组入真核表达载体,转染真核细胞,检测对CpG的反应。方法利用逆转录PCR从人外周血mRNA扩增TLR9基因;TLR9基因定向重组入真核表达载体pcDNA3.0;利用磷酸钙转染方法导入肝癌细胞系SMMC7721,经G418培养筛选,克隆出携有人TLR9 CDNA的细胞系;用不同的CpG刺激转染的细胞系观察生长率。结果逆转录PCR扩增出3.0 kb的DNA片段,经TA克隆和细胞DNA序列分析为人TLR9基因全序列;利用定向克隆的方法将人TLR9基因成功重组入pcDNA3.0。结论制备的SMMC7wgq-TLR9系可以用于CpG研究。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2014年20期）
郑君飘,刘清华,徐世宏,马道远,肖志忠[5]（2014）在《真鲷精子在外源DNA下的生理特性和转染效果》一文中研究指出为研究真鲷(Pagrus major)精子在外源DNA下的生理特性和转染效果,探索真鲷精子介导转基因技术,作者通过计算机辅助分析外源DNA环境下(不同孵育时间、DNA长度、DNA浓度)真鲷精子活率和运动速度的变化,进一步采用PCR和荧光探针的方法检测外源DNA与真鲷精子的结合情况,并通过人工授精来评价外源DNA能否转染精子并传递至F0代。结果表明:外源DNA浓度、孵育时间及DNA长度对精子活率无显着影响。在5μg/106个精子的高浓度10 kb DNA下孵育12 h,真鲷精子仍具有(75.89±5.55)%的精子活率,平均直线速度(70.97±6.37)μm/s,与对照组无显着差异,但精子平均曲线速度显着下降,比对照组低21.85μm/s。真鲷精子与带Fluorescein荧光素的DNA片段共孵育后,部分精子在荧光显微镜下观察到绿光。将DNA孵育后精子进行人工授精表明经过1μg DNA/106个精子孵育后的受精率和孵化率无显着下降,通过PCR法并没有在外源DNA处理的精子和F0代中检测到目的基因,表明外源DNA虽然能够吸附在真鲷精子表面,但并不足以携带进入卵子产生转基因后代。(本文来源于《海洋科学》期刊2014年07期）
俞计成[6]（2014）在《共轭高分子荧光探针在生物检测、成像和转染中的应用》一文中研究指出共轭高分子由于其主链上存在高度离域的π电子,所以具有优异的光电性能,并因此作为一个交叉学科的研究热点在化学、材料和生物等领域得到了广泛的关注。通过将芴环单体与低带隙单体共聚,人们可获得不同发光颜色的聚芴类共轭高分子,它们具有量子效率高,抗光漂白能力强,生物毒性低,侧链易进行官能团修饰等优势,在生物分子检测,生物成像等方面有着很大的发展前景。本论文主要分为叁个部分：1.利用水溶性共轭高分子的荧光探针与不同DNA形成的静电复合物的差异,通过琼脂糖凝胶电泳的方法区分不同的DNA链段；2.制备得到包裹近红外共轭高分子荧光探针和抗癌药物的pH敏感纳米颗粒,研究其在活体内的降解。3.利用阳离子共轭高分子与小干扰RNA(siRNA)自组装形成纳米复合物,研究纳米复合物细胞内的转染效率和释放过程。首先,我们利用凝胶电泳法来研究荧光探针与生物大分子的作用,并实现结果的可视化。研究多彩的聚芴类荧光探针在凝胶电泳中的行为,为未来多通道同时检测生物大分子奠定了基础。利用水溶性共轭高分子作为荧光探针,根据它们与DNA形成的静电复合物电荷和空间位阻的不同,通过琼脂糖凝胶电泳直观可见地对DNA单／双链结构、碱基序列长度和构型进行区分。其次,我们采取了Suzuki偶联反应在聚芴主链中引入5,7-双噻吩-2,3-二甲基噻吩并[3,4-b]吡嗪基团,利用引入基团的强缺电子能力改变共聚物主链能带结构,得到了发射近红外荧光的共轭高分子BTTPF,为进一步在活体内进行荧光成像奠定了基础。将BTTPF作为荧光探针与抗癌药物阿霉素(DOX)通过乳化溶剂挥发法包裹在由葡聚糖衍生物和聚乙烯醇构成的pH敏感纳米颗粒中,研究了DOX/BTTPF纳米颗粒在微酸性缓冲液中的降解过程,发现利用BTTPF和DOX之间的FRET作用在降解过程中的变化可以有效的来指示DOX的释放速率。并进一步利用BTTPF的近红外荧光跟踪纳米颗粒在小鼠体内的分布和在肿瘤部位的降解情况,发现利用颗粒降解引起的FRET效率的变化在体内也能有效地指示DOX的释放过程。最后,我们还利用共轭高分子(ThPFN和BtPFN)与siRNA有序的静电自组装,得到了能够有效负载并保护siRNA的ThPFN/siRNA/BtPFN纳米复合物,并且发现由于ThPFN和BtPFN能够有效的产生FRET作用,导致组装前后荧光会发生变化。利用ThPFN/siRNA/BtPFN纳米复合物解离时FRET效率的变化,得以实现在细胞内对siRNA释放过程的免标记(Label-Free)跟踪。同时发现由于阳离子ThPFN外壳能够有效的保护siRNA和提高纳米复合物被细胞摄取的效率,所以ThPFN/siRNA/BtPFN纳米复合物具有很高的转染效率,是一种有效的siRNA载体。(本文来源于《南京大学》期刊2014-05-17）
贺艳霞,赵春亭,王丽,刘竹珍,吴少玲[7]（2013）在《直接转染HOXB4基因和转染HOXB4基因的脐带间充质干细胞体外扩增人脐血CD34~+细胞的研究》一文中研究指出本研究探讨直接转染HOXB4基因和转染HOXB4基因的人脐带间充质干细胞体外扩增人脐血CD34+细胞中有核细胞数、CD34+细胞比例与扩增倍数、细胞周期及集落形成能力的异同。将人脐带间充质干细胞(HUCMSC)分为2组,1组利用慢病毒载体将HOXB4基因转染至HUCMSC并建立滋养层(HOXB4-HUCMSC),另1组建立未转染的滋养层(HUCMSC)。应用免疫磁珠分选系统(MACS)分选出人脐血CD34+细胞,在含细胞因子的培养液中培养48 h后分5组,其中对照组2组:A组CD34+细胞(CD34+cells)为空白对照组,B组空病毒转染CD34+细胞(GFP-CD34+cells)为阴性对照组;实验组共3组:直接转染HOXB4基因组(HOXB4-CD34+cells)为C组;HUCMSC滋养层组(HUCMSC+CD34+cells)为D组;HOXB4-HUCMSC滋养层组(HOXB4-HUCMSC+CD34+cells)为E组。于培养第6、10、14 d计数有核细胞数(NC),第10 d比较不同处理条件对CD34+细胞比例、细胞周期与集落形成能力的影响。结果表明,利用慢病毒载体可将HOXB4基因转染至HUCMSC并检测到表达,成功建立了HUCMSC与HOXB4-HUCMSC滋养层。经过14 d体外培养,5组有核细胞均得到显着扩增,比较表明,其效果依次为HOXB4-HUCMSC滋养层组>直接转染HOXB4基因组>HUCMSC滋养层组>2对照组(P<0.05)。在体外扩增第10 d,5组有核细胞CD34+比例均大幅下降,经计算实验组CD34+细胞扩增倍数较第0 d显着增高,经比较显示,CD34+细胞比例与扩增倍数高低依次为直接转HOXB4基因组>HOXB4-HUCMSC滋养层组>HUCMSC滋养层组>两对照组(P<0.05);流式细胞仪分析细胞周期表明,实验组的S+G2/M期比例较对照组高,其中HOXB4-HUCMSC滋养层组比例最高,为41.57%,高于直接转染HOXB4基因的37.87%与HUCMSC的滋养层组的28.65%(P<0.05)。HOXB4-HUCMSC滋养层组与直接转HOXB4基因组的集落形成能力无差别,但均高于HUCMSC滋养层组与对照组。结论:HOXB4-HUCMSC滋养层可显着扩增CD34+细胞并可保持其干细胞活性,与直接转染HOXB4基因的CD34+细胞可能产生的潜在致病性基因插入和致突变性风险相比较,HOXB4-HUCMSC滋养层对CD34+细胞的体外扩增相对更安全,有潜在的应用价值。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2013年06期）
刘云云,刘中霖,王勇,程度,梁嫣然[8]（2012）在《PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物物理性能和转染C17.2神经干细胞效率的研究》一文中研究指出目的探索PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的物理性能及转染C17.2神经干细胞的效率。方法设计合成PEG-PEI共聚物基因载体,与ROCK-Ⅱ-siRNA进行复合;用凝胶阻滞电泳实验、粒径与电位的测定观察PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的复合效果;采用透射电镜观察PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的形态学;通过流式细胞仪技术定量检测复合物对C17.2神经干细胞的转染效果。结果 PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物在N/P=10时完全复合。随着N/P比的增大,复合物的粒径变小而电位增大。在N/P=50时,透射电镜观察到复合物为球形,很好的分散性,平均粒径约为100 nm。PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物在N/P=50时转染C17.2神经干细胞的转染效率最高,为(70.24±5.21)%。结论 PEG-PEI基因载体可以很好的与ROCK-Ⅱ-siRNA复合。PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物对于C17.2神经干细胞具有良好的转染效率。(本文来源于《解剖学研究》期刊2012年06期）
史疆,尹东锋[9]（2012）在《泊洛沙姆407修饰对聚乙烯亚胺的毒性和转染性质的影响》一文中研究指出目的:考察泊洛沙姆407修饰对聚乙烯亚胺(PEI)的毒性和转染性质的影响。方法:使用琥珀酰亚胺碳酸脂法将P407连接在PEI的氨基上,得到新聚合物,通过~1H-NMR确定新聚合物的结构,将该聚合物与DNA形成复合物,测定复合物的zeta电位,MTT法考察复合物的细胞毒性,使用质粒pGL3-1us作为报告基因,测定虫荧光素酶活性评价复合物对Hela细胞的转染效率。结果:~1H-NMR结果表明合成的聚合物具有较高的纯度。复合物的Zeta电位随氮/磷比(N/P)值的增加而增高。复合物的细胞毒性随着N/P值的增加而增大,新聚合物其细胞毒性显着低于未修饰的PEI。新聚合物在高N/P值时仍能保持较高的转染效率。结论:泊洛沙姆407修饰的PEI可以作为一种有效的非病毒基因载体。(本文来源于《中国药师》期刊2012年01期）
季军,姬尚义,何霞,令文萍[10]（2010）在《白蛋白纳米-超声微泡载组织型纤溶酶原激活物基因靶向体系制备和转染方法》一文中研究指出目的观察构建的白蛋白纳米组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因质粒超声微泡载体的体内转染效果。方法选择兔为实验对象,构建高表达tPA基因质粒;以白蛋白为原料制备载tPA基因质粒纳米粒;用蔗糖和白蛋白制备糖蛋白超声微泡并与载tPA基因质粒纳米粒进行交联形成靶向超声微泡转基因载体。免疫组织化学法检测心脏、肝脏、腿部骨骼肌和肋骨组织的靶向转染及tPA的有效表达,同时用ELISA法检测血tPA含量和D-二聚体含量。结果构建的白蛋白纳米tPA基因质粒超声微泡载体系统超声靶向转染心脏、肝脏、骨骼肌和肋骨组织后可见有效tPA表达,同时伴有血tPA和D-二聚体含量增高和tPA功能增强,两者从术前的(0.20±0.05)μg/L和(81.76±9.84)μg/L增高至术后4周的(0.44±0.05)μg/L和(669.28±97.74)μg/L。结论成功建立了白蛋白纳米tPA基因质粒超声微泡载体系统,为纳米靶向转基因提供了理论和实验方法。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2010年23期）
和转染论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探索应用小肠黏膜下基质(small intestinal submucosa,SIS)复合口腔黏膜细胞(oral keratinocytes,OK)和转染金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)siRNA的成纤维细胞(fibroblasts,FB)构建组织工程化尿道的可行性。方法:分离培养OK,FB,并用TIMP-1siRNA转染FB,检测转染前后FB分泌Ⅰ型胶原的改变。剥离24只雄性兔子腹侧尿道黏膜2.0cm×0.8cm,并将其平均分为3组,每组8只。第1组应用单纯SIS修复,第2组应用SIS复合OK修复,第3组应用SIS复合OK和转染TIMP-1siRNA的FB修复。术后1个月、6个月行逆行尿道造影检查和组织学分析评估叁组尿道重建的效果。结果:转染TIMP-1siRNA的FB分泌Ⅰ型胶原明显减少。逆行尿道造影下,第1组兔子中有5只尿道管腔通畅,第2组有6只,第3组有7只。组织学上,第1组在1个月时形成了不完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较明显。第2组和第3组在1个月时形成了完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较轻,且第3组生长的尿路上皮、平滑肌和血管较第2组明显增多。结论:OK和转染TIMP-1siRNA的FB可作为尿道组织工程中的种子细胞用于尿道修复重建,OK和转染TIMP-1siRNA的FB可抑制尿道瘢痕的产生。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
和转染论文参考文献
[1].孙越鹏,朱晓西,范芳.HepG2.2.15和BEL-7402肝癌细胞的培养和转染的实验研究[J].临床医药文献电子杂志.2019
[2].郭海林,撒应龙,黄建文,王周,王林.小肠黏膜下基质复合口腔黏膜细胞和转染TIMP-1siRNA的成纤维细胞用于尿道重建的实验研究[J].临床泌尿外科杂志.2016
[3].张奇昕,原明璐,陈顺,袁伟恩.新型可降解PEI衍生物的表征及其在Brl-3A细胞中的毒性和转染研究[J].现代生物医学进展.2014
[4].郑斌,刘涛,郑永晨,李佳睿.克隆人Toll样受体9基因和转染真核细胞对CpG的反应[J].中国老年学杂志.2014
[5].郑君飘,刘清华,徐世宏,马道远,肖志忠.真鲷精子在外源DNA下的生理特性和转染效果[J].海洋科学.2014
[6].俞计成.共轭高分子荧光探针在生物检测、成像和转染中的应用[D].南京大学.2014
[7].贺艳霞,赵春亭,王丽,刘竹珍,吴少玲.直接转染HOXB4基因和转染HOXB4基因的脐带间充质干细胞体外扩增人脐血CD34~+细胞的研究[J].中国实验血液学杂志.2013
[8].刘云云,刘中霖,王勇,程度,梁嫣然.PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物物理性能和转染C17.2神经干细胞效率的研究[J].解剖学研究.2012
[9].史疆,尹东锋.泊洛沙姆407修饰对聚乙烯亚胺的毒性和转染性质的影响[J].中国药师.2012
[10].季军,姬尚义,何霞,令文萍.白蛋白纳米-超声微泡载组织型纤溶酶原激活物基因靶向体系制备和转染方法[J].中国现代医学杂志.2010