去势裸鼠论文-邢向荣

去势裸鼠论文-邢向荣

导读:本文包含了去势裸鼠论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:乳岩宁方,依西美坦,乳腺癌,Wnt,JNK信号通路,JNK,AP-1

去势裸鼠论文文献综述

邢向荣[1](2018)在《乳岩宁方联合依西美坦对乳腺癌荷瘤去势裸鼠Wnt/JNK信号通路的影响》一文中研究指出目的:通过观察乳岩宁方联合依西美坦对MDA-MB-435乳腺癌荷瘤去势裸鼠一般状态、瘤重、抑瘤率及雌激素水平的影响,证实乳岩宁方联合依西美坦具有抑制乳腺癌细胞生长的作用;通过检测Wnt/JNK信号通路效应因子JNK和AP-1蛋白及下游STAT3和Bcl-2癌基因、P53和Caspase8抑癌基因蛋白的表达水平,探究乳岩宁方联合依西美坦对乳腺癌荷瘤去势裸鼠抑癌的作用机制。材料与方法:1.实验材料细胞株:人乳腺癌MDA-MB-435细胞株实验动物:BALB/C雌性裸鼠,SPF级,共42只,体重为20±2g,4~6周龄。药品制备:乳岩宁方:由柴胡10g、太子参15g、法半夏10g、黄芩15g、炙甘草10g、生龙骨30g、生牡蛎30g、白花蛇舌草20g、半枝莲20g、夏枯草15g、莪术15g、浙贝母20g中药组成。一次性购于辽宁中医药大学附属医院。制备方法:按照中药常规煎法,将乳岩宁方中药进行两次煎煮,先加入10倍水煎煮1小时后滤出药液,再加入8倍水煎煮半小时滤出药液,剩余的药渣再次过滤出药液,合并所有药液,将其调至3.3g/ml浓度,保存在4℃冰箱中备用。依西美坦:将其溶解于蒸馏水中,调至3mg/ml浓度备用。2.造MDA-MB-435荷瘤去势裸鼠模型雌性裸鼠行腹腔内麻醉,在裸鼠背部肋弓下缘0.5cm,脊柱旁开0.5~1cm处备皮,常规消毒,络合碘消毒,取手术刀行纵形切口约1cm,切开皮肤后逐层切开肌肉,剪刀剪开腹膜打开腹腔,暴露出乳白色发亮的脂肪团,紧靠肾脏下极,此为卵巢重要的解剖标志。用镊子轻轻提起乳白色脂肪团表面的肌层,用剪刀沿腰大肌外侧缘剪开长约0.5cm肌层,在脂肪团中可找到淡红色米粒大小“桑椹样”裸鼠卵巢。分离后钳夹结扎,行卵巢切除,压迫止血,其余组织放回腹腔,分层缝合肌层及皮肤,络合碘切口消毒。用同样的方法切除对侧卵巢,再按上述方法缝合和消毒。术后抗感染继续正常饲养7d,裸鼠自由活动、进食饮水,每天给予更换垫料,即成功建立去势裸鼠模型。在2只去势裸鼠右侧胸壁处碘伏消毒,用2个1ml注射器各抽取细胞液0.2ml分别接种在去势裸鼠的右侧胸壁第二乳垫下,接种后10天左右,发现在接种部位乳垫处有肿瘤结节,质硬,活动度差,迅速增大。当原代肿瘤结节长至大小约0.8cm~3时,无菌条件下手术取出肿瘤组织,立即放入DMEM高糖培养基(含10%FBS)中,将其剪成大小约1mm~3的小块备用,采用骨髓穿刺针建立荷瘤裸鼠原位移植造模的方法分别移植余下的去势裸鼠。经过4~5d全部40只去势裸鼠在种瘤处均可见乳腺肿瘤生长,13~15天肿瘤可长至大小约9±2mm,即成功建立荷瘤去势裸鼠模型。3.实验分组及给药将40只荷瘤去势裸鼠随机分为4组:(1)模型对照组;(2)依西美坦组;(3)乳岩宁方组;(4)联合组。每组均为10只荷瘤去势裸鼠。(1)模型对照组:给予生理盐水灌胃;(2)依西美坦组:给予依西美坦4mg/kg体重灌胃,相当于临床人用量的10倍;(3)乳岩宁方组:给予乳岩宁方33.3g/kg体重灌胃,相当于临床人用量的12倍;(4)联合组:同时给予乳岩宁方33.3g/kg体重和依西美坦4mg/kg体重灌胃。4组荷瘤去势裸鼠给药均为0.2ml/只·d,日一次灌胃,共连续给药21d。4.实验取材给药21天后实验结束,分别给4组荷瘤去势裸鼠进行标本取材。(1)血清标本:采用摘眼球取血法,使鼠眼球突出充血后,以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,同时轻按鼠心脏部位,加快血液从眼眶垂直流入EP管中,共收集血液标本约0.5ml~1ml。将血液标本在室温条件下静置2小时,然后1000×g离心20 min,取上清液存放于2ml冻存管中,放置在-80℃深低温冰箱中保存以备ELISA检测用。(2)瘤体标本:取血后采用脱颈处死法处死荷瘤去势裸鼠,将瘤体组织完整剥离,称取其重量后放置在冰盒上。肉眼观察瘤体组织后,将标本切开取材,切取肿瘤全层组织,注意不同部位取材以避免取到肿瘤坏死组织。将标本分为2份:1)Western Bloting标本:将肿瘤组织块放置于EP管中,在-80℃深低温冰箱中保存备用;2)RT-PCR标本:取约8 mm~3大小的肿瘤组织2~3块,将其放置在1mlTrizol中,用记号笔标记后,立即在-80℃深低温冰箱中保存备用。5.检测指标及方法(1)观察一般状态变化:用药后观察荷瘤去势裸鼠的体重、行为活动、进食饮水量和死亡情况。隔日测量荷瘤去势裸鼠体重,绘制体重变化曲线。记录给药前、给药第7、15、21天各组荷瘤去势裸鼠在小鼠自主活动测试仪5分钟内自主活动次数。每日记录荷瘤去势裸鼠进食量和饮水量。若出现死亡情况,记录死亡时间及只数。实验结束时脱颈处死荷瘤去势裸鼠,将瘤体组织完整剥离,称取其重量,计算抑瘤率。(2)采用竞争抑制酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组荷瘤去势裸鼠血清中E2、P的水平。(3)采用Western blotting法检测瘤组织中JNK蛋白表达,癌基因STAT3和Bcl-2蛋白表达水平。(4)采用RT-PCR法检测瘤组织中AP-1基因表达水平,抑癌基因P53和Caspase8基因的表达水平。采用SPSS20.0软件,计数资料采用单因素方差分析(ANOVA),数据以均数±标准差(X±S)表示,以P<0.05为差异有统计学意义;P>0.05为差异无统计学意义。结果:1.一般状态及瘤重、抑瘤率:1周左右依西美坦组荷瘤去势裸鼠一般状态逐渐呈下降趋势,表现为体重下降、精神萎靡、食欲降低、饮水量减少、皮色光亮减少、皮毛干瘪疏松易脱落、呈弓背状、喜扎堆、活动次数减少等。联合组在给药2周出现一般状态下降,程度较依西美坦组轻。乳岩宁方组与模型对照组状态较好,表现相似。直至实验结束四组荷瘤去势裸鼠无一只死亡。给药7、15、21天时各给药组荷瘤去势裸鼠体重出现不同程度下降,依西美坦组下降明显多于乳岩宁方组及联合组(P<0.05)。在给药7天时,依西美坦组和乳岩宁方组自主活动次数均下降,依西美坦组下降明显,与乳岩宁方组比较有统计学意义(P<0.05),而联合组未见明显下降;在给药15、21天时,各给药组自主活动次数均明显下降,叁组比较有统计学意义(P<0.05)。乳岩宁方组、依西美坦组和联合组的瘤重均明显轻于模型对照组,有统计学意义(P<0.05),其中联合组和依西美坦组明显轻于乳岩宁方组,有统计学意义(P<0.05),但联合组与依西美坦组相比无统计学意义(P>0.05)。乳岩宁方组、依西美坦组及联合组的抑瘤率分别为37.53%、60.83%、66.09%。2.雌激素水平:测各组荷瘤去势裸鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)水平,与模型对照组相比,乳岩宁方组、依西美坦组和联合组的均明显下降,有统计学意义(P<0.05);其中联合组较乳岩宁方组和依西美坦组下降显着,有统计学意义(P<0.05);但乳岩宁方组与依西美坦组相比,无统计学意义(P>0.05)。3.效应因子JNK和AP-1蛋白表达水平:与模型对照组相比,乳岩宁方组、依西美坦组和联合组的JNK的蛋白表达和AP-1基因的相对表达量明显下降,有统计学意义(P<0.05),其中联合组较乳岩宁方组、依西美坦组明显下降,有统计学意义(P<0.05)。AP-1基因的相对表达量联合组较依西美坦组下降不明显,无统计学意义(P>0.05)。4.癌基因STAT3和Bcl-2蛋白表达水平和抑癌基因P53和Caspase8基因的表达水平:乳岩宁方组、依西美坦组和联合组均可下调STAT3和Bcl-2的蛋白表达,上调P53、Caspase8的基因表达量,与模型对照组相比有统计学意义(P<0.05)。STAT3蛋白下调的水平乳岩宁方组较依西美坦组和联合组明显,有统计学意义(P<0.05)。Bcl-2蛋白的下调水平乳岩宁方组、依西美坦组、联合组之间无统计学意义(P>0.05)。上调P53、Caspase8的基因表达量,联合组较乳岩宁方组、依西美坦组明显,有统计学意义(P<0.05)。结论:1.乳岩宁方能起到维持乳腺癌荷瘤去势裸鼠体重和体力状态的作用,减轻依西美坦带来的体重下降、活动减少、精神状态差等不良反应。2.乳岩宁方能下调乳腺癌荷瘤去势裸鼠血清雌激素水平,与依西美坦有协同作用。3.乳岩宁方能下调乳腺癌荷瘤去势裸鼠Wnt/JNK信号通路的效应因子JNK和AP-1的蛋白表达水平,与依西美坦联合作用更强。4.乳岩宁方一方面能下调Wnt/JNK信号传导通路下游蛋白STAT3、Bcl-2表达起到抑制乳腺癌细胞增殖的作用;另一面能上调Wnt/JNK信号传导通路下游P53、Caspase8基因表达,起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用,最终起到抗肿瘤的作用。且与依西美坦联合应用作用更明显。(本文来源于《辽宁中医药大学》期刊2018-11-01)

张青川,顾牣赜,张游华[2](2017)在《低剂量蟾毒灵联合羟基喜树碱联用对裸鼠人去势抵抗性前列腺癌移植瘤的影响》一文中研究指出目的:探讨不同剂量蟾毒灵(Bufalin)与羟基喜树碱(HCPT)联合用药对裸鼠去势抵抗性前列腺癌移植瘤的抗肿瘤作用及其可能诱导凋亡的机制。方法:裸鼠人去势抵抗性前列腺癌移植瘤模型的建立:将处于对数生长期的Du145细胞使用生理盐水制成浓度为1×10~7/ml的细胞悬液,注射到裸鼠腹部皮下,每只0.2ml,共接种5只,饲养3周后取出瘤体,做第二代裸鼠腹部皮下传代,共计36只。分组给药:将36只裸鼠随机分为6组,每组6只,即生理盐水阴性对照组(NS)、羟基喜树(本文来源于《第十二次全国中西医结合男科学术大会暨全国中西医结合男科诊疗技术研修班暨2017上海市中西医结合学会上海市中医药学会泌尿男科专业委员会学术年会讲义论文资料汇编》期刊2017-09-01)

李玲,廖秦平[3](2012)在《替勃龙对去势裸鼠子宫内膜癌移植瘤的影响》一文中研究指出目的通过裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型的体内实验,探讨替勃龙应用于子宫内膜癌患者的安全性。方法 (1)体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞株;建立去势裸鼠子宫内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘤动物实验模型;(2)将成瘤裸鼠随机分为替勃龙组(15只)和对照组(15只),分别予以替勃龙0.375mg·kg-1·d-1和对照治疗35d;(3)比较给药前后两组肿瘤体积变化、肿瘤重量和肿瘤转移状况(体表、盆腹腔淋巴结、腹水);应用免疫组化SP法测定两组实验动物皮下移植瘤Ki67、P53、P27、bcl-2蛋白表达情况,判断替勃龙对移植瘤的影响和对内膜癌细胞增殖及凋亡的影响。结果 (1)替勃龙组和对照组裸鼠两组子宫内膜癌皮下移植瘤体积变化无统计学差异[(2.063±1.038)cm3vs.(2.170±0.822)cm3,P=0.791];肿瘤重量无统计学差异[(0.699±2.02)gvs.(0.807±2.83)g,P=0.314];替勃龙治疗35d后,没有引起子宫内膜癌肿瘤体表、盆腹腔转移和腹水发生;(2)替勃龙组和对照组两组裸鼠人子宫内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘤Ki67增殖指数、P53、P27、bcl-2蛋白表达情况均无统计学差异。结论替勃龙不刺激裸鼠子宫内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘤生长、转移和细胞增殖、凋亡。替勃龙应用于子宫内膜癌患者的术后激素补充治疗可具有一定的安全性。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2012年07期)

王巧莲,梁元姣,吴元赭,郝群,李鹏[4](2010)在《去势后人子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型的建立》一文中研究指出目的:研究建立去势后人子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型的方法。方法:将裸鼠在麻醉情况下切除双侧卵巢,随机分成3组,采用细胞悬液法和肿瘤组织块法建立人子宫内膜癌的裸鼠皮下移植瘤模型。结果:细胞悬液法5×106/0.2ml/只,瘤块法1.5mm×1.5mm×2mm和1.0mm×1.0mm×1.0mm,叁种植瘤法成瘤率无统计学意义,但不同的植瘤法成瘤时间有差异;各组肿瘤体积大小不同,差异有统计学意义。结论:选择适当的方法建立人子宫内膜癌去势裸鼠移植瘤模型是可行的,可为开展人子宫内膜癌的基础和临床研究提供理想的动物模型。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2010年12期)

黄学惠,尚鶄,廖秦平[5](2009)在《Tibolone对去势裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤生长及转移的影响》一文中研究指出目的研究Tibolone对去势裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤生长及转移的影响,探讨Tibolone治疗子宫内膜癌的安全性.方法建立去势裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤模型,比较Tibolone灌胃组和对照组给药前后肿瘤体积变化和转移状况.结果Tibolone灌胃组和安慰剂组裸鼠子宫内膜癌皮下移植瘤体积增加值相同(1.976±1.350)mm3和(2.217±1.071)mm3,P=0.879;Tibolone灌胃组(35 d)后,没有引起肿瘤转移.结论Tibolone不刺激裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤生长及转移(本文来源于《昆明医学院学报》期刊2009年04期)

去势裸鼠论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:探讨不同剂量蟾毒灵(Bufalin)与羟基喜树碱(HCPT)联合用药对裸鼠去势抵抗性前列腺癌移植瘤的抗肿瘤作用及其可能诱导凋亡的机制。方法:裸鼠人去势抵抗性前列腺癌移植瘤模型的建立:将处于对数生长期的Du145细胞使用生理盐水制成浓度为1×10~7/ml的细胞悬液,注射到裸鼠腹部皮下,每只0.2ml,共接种5只,饲养3周后取出瘤体,做第二代裸鼠腹部皮下传代,共计36只。分组给药:将36只裸鼠随机分为6组,每组6只,即生理盐水阴性对照组(NS)、羟基喜树

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

去势裸鼠论文参考文献

[1].邢向荣.乳岩宁方联合依西美坦对乳腺癌荷瘤去势裸鼠Wnt/JNK信号通路的影响[D].辽宁中医药大学.2018

[2].张青川,顾牣赜,张游华.低剂量蟾毒灵联合羟基喜树碱联用对裸鼠人去势抵抗性前列腺癌移植瘤的影响[C].第十二次全国中西医结合男科学术大会暨全国中西医结合男科诊疗技术研修班暨2017上海市中西医结合学会上海市中医药学会泌尿男科专业委员会学术年会讲义论文资料汇编.2017

[3].李玲,廖秦平.替勃龙对去势裸鼠子宫内膜癌移植瘤的影响[J].中华临床医师杂志(电子版).2012

[4].王巧莲,梁元姣,吴元赭,郝群,李鹏.去势后人子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型的建立[J].现代肿瘤医学.2010

[5].黄学惠,尚鶄,廖秦平.Tibolone对去势裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤生长及转移的影响[J].昆明医学院学报.2009

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