导读:本文包含了酸序列依赖性扩增论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人乳头状瘤病毒,核酸序列依赖性扩增技术,宫颈癌筛查
酸序列依赖性扩增论文文献综述
欧琼,刘珏,周寿红,张志伟,何宜静[1]（2018）在《一种基于核酸序列依赖性扩增技术的高危型人乳头状瘤病毒E6/E7 mRNA检测方法的建立及应用》一文中研究指出目的建立一种高效的基于核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)的检测方法,为人乳头状瘤病毒(HPV)的普查和宫颈癌防治提供快速准确的分子检测方法。方法收集用于宫颈筛查或宫颈细胞学异常的液基细胞学样本406个,采用NASBA技术检测这些样本中的高危型HPV E6/E7 mRNA。通过probit回归分析法预测了14种高危型HPV E6/E7 mRNA的95%检测极限。以5种低危型HPV RNA和8种常见病原体RNA为模板对该NASBA检测方法的特异性进行了评估。结果 406个检测样本中各项检测数据齐全者356个。比较病理诊断、HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA3种方法的检测结果,发现随着病理学级别的升高,高危型HPV DNA感染阳性率呈现明显的上升趋势,且高危型HPV E6/E7 mRNA感染阳性率同样呈现明显的上升趋势。probit回归分析结果显示,HPV16、18、33、35、39、45、56、59、66和68预测的95%检出限都低于100拷贝/反应,HPV31、51、52和58预测的95%检出限介于100～300拷贝/反应之间。5种低危亚型HPV RNA和8种病原体RNA的NASBA检测结果均为阴性,表明该检测方法未检出非特异性扩增。结论该研究建立的检测高危型HPV E6/E7 mRNA的方法,具备很好的敏感性、准确性和特异性,同时它的快速、高通量等特点进一步提高了其在预测宫颈癌患病风险中的临床诊断价值。(本文来源于《中国慢性病预防与控制》期刊2018年12期）
王向东[2]（2017）在《恒温指数扩增检测植物microRNA的应用及其序列依赖性研究》一文中研究指出MicroRNA是一类非蛋白编码的小RNA分子,由于其对于基因表达过程中的关键调控从而可以作为疾病检测的标志物。随着基础生物学研究的不断发展和疾病早期诊断的需要,miRNA表达水平的精确定量分析变得越来越重要。恒温指数扩增(Isothermal Exponential Amplification Reaction,IEXPAR)技术由于操作简便、反应时间短,高灵敏度、高特异性等特点已经广泛用以检测mRNA、细胞、蛋白质、小分子甚至是离子,进一步讲特别适用于检测序列短小的单链miRNA。尽管拥有众多优势,但传统IEXPAR扩增反应本身存在的瓶颈问题主要是:序列依赖性以及非特异性扩增等,这些问题极大限制了 IEXPAR扩增反应检测miRNA的灵敏度、特异性。为解决这一问题,我们通过摸索,发现在传统IEXPAR模板3'粘性末端添加Poly(dT)10尾巴以及对3'末端封闭修饰(巯基基团修饰)就可以有效改善序列依赖性问题;同时引入单链结合蛋白(SSB),可以进一步抑制空白,提高灵敏度。该模板修饰策略结合SSB对多种miRNA的灵敏检测均起到了很好的作用。研究结果也为进一步解决传统IEXPAR扩增反应瓶颈问题提供一个重要的思路。另一方面,检测miRNA的恒温扩增方法包括高效的IEXPAR扩增方法大多数都是基于动物miRNA作为引物直接引发核酸聚合延伸反应,大量研究结果已经表明植物miRNA与动物miRNA在结构上存在较大的差异,植物miRNA中3'末端2'-O-甲基化修饰。这种3'末端-碱基2'-O-甲基化严重抑制了以目标分子植物miRNA作为引物在聚合酶催化作用下沿核酸模板的聚合延伸反应。因此,传统IEXPAR等高效恒温扩增反应无法用于目标分子植物miRNA的直接扩增及检测,为解决IEXPAR在植物miRNA检测方面存在的固有不足,我们报道了一种新型的,简单的,高灵敏度的检测植物miRNA的方法。此方法主要是将DNA叁通(Three-Way Junction,3WJ)结构和扩增效率极高的恒温指数扩增IEXPAR结合(3WJ-IEXPAR)。在该方法中,根据目标分子miRNA合理设计两条3WJ探针,分别是3WJ引物和3WJ模板,在无目标分子miRNA存在时二者在溶液中独立存在不产生杂交和后续扩增反应,当引入目标分子miRNA时,miRNA分别与3WJ引物和3WJ模板的部分序列互补叁者形成稳定的3WJ结构,进而3WJ引物延伸且生成小引物继而引发高效IEXPAR扩增。该方法通过靶标介导的3WJ结构的形成,使得后续IEXPAR无需miRNA直接引发,而转变为对一段已知优良IEXPAR引物序列的高效扩增,在克服了植物miRNA无法直接引发IEXPAR这一关键问题的同时,也在一定程度上有效避免了 IEXPAR的序列依赖性。该方法对于植物ath-miRNA156a的检测灵敏度高,选择性良好,并成功用于植物拟南芥中Total RNA含量的准确定量分析。(本文来源于《陕西师范大学》期刊2017-05-01）
王立朋,鲍翠霞,于丽梅,张晓录,于威娟[3]（2015）在《核酸序列依赖性扩增、Real-time PCR及GM试验诊断侵袭性曲霉菌感染的临床应用评价》一文中研究指出目的核酸序列依赖性扩增(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)、Real-time PCR及GM试验在侵袭性曲霉菌感染中的诊断价值。方法收集2013年11月~2014年6月临床上曲霉菌感染高危病患的血液标本80例,并根据EORTC/MSG诊断标准分为确诊组8例,拟诊组26例,非感染组46例,分别利用NASBA、real-time PCR及GM试验进行检测,计算3种方法的诊断指标并分析评价。结果 NASBA、real-time PCR及GM试验3种方法的灵敏度分别为76.47%、67.65%、52.94%,特异度分别为80.43%、89.13%、80.43%。联合诊断结果显示,NASBA与real-time PCR串联方案有最好的特异度(100%)及阳性预测值(100%);NASBA与real-time PCR并联方案则最为灵敏(94.12%)。结论 NASBA用于诊断IA最为敏感,而real-time PCR则最为特异,GM试验的表现差于前两者。联合应用的诊断策略,在特定情况下提高临床早期诊断IA的准确性。(本文来源于《中国真菌学杂志》期刊2015年05期）
张英英,谢鹏[4]（2008）在《核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)概述》一文中研究指出随着分子生物学技术的快速发展,体外核酸扩增技术己逐步应用于科研和临床。最近几年才兴起的核酸序列依赖性扩增法(Nuleic and sequerce based amplipicain,NASBA)同传统的实验方法相比有灵敏性高,特异性强,快速,高通量等优点,而倍受中外学者的青睐。本文就NASBA方法作一综述。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2008年S1期）
刘玉洪,徐自忠,花群义,高洪,杨云庆[5]（2006）在《生物芯片、核酸序列依赖性扩增法及荧光定量PCR在检测方面的研究进展》一文中研究指出最近几年才兴起的生物芯片、核酸序列依赖性扩增法(NASBA)及荧光定量PCR技术同传统的实验方法相比有灵敏性高,特异性强,快速,高通量等优点,而倍受中外学者的青睐。但仍有好多初学者对这方法的知识了解甚少,本文就生物芯片、核酸序列依赖性扩增法及荧光定量PCR的定义、原理、检测中的应用和各自的优点做一简单的综述,以便相互之间的学习和进步。(本文来源于《畜牧兽医杂志》期刊2006年03期）
酸序列依赖性扩增论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
MicroRNA是一类非蛋白编码的小RNA分子,由于其对于基因表达过程中的关键调控从而可以作为疾病检测的标志物。随着基础生物学研究的不断发展和疾病早期诊断的需要,miRNA表达水平的精确定量分析变得越来越重要。恒温指数扩增(Isothermal Exponential Amplification Reaction,IEXPAR)技术由于操作简便、反应时间短,高灵敏度、高特异性等特点已经广泛用以检测mRNA、细胞、蛋白质、小分子甚至是离子,进一步讲特别适用于检测序列短小的单链miRNA。尽管拥有众多优势,但传统IEXPAR扩增反应本身存在的瓶颈问题主要是:序列依赖性以及非特异性扩增等,这些问题极大限制了 IEXPAR扩增反应检测miRNA的灵敏度、特异性。为解决这一问题,我们通过摸索,发现在传统IEXPAR模板3'粘性末端添加Poly(dT)10尾巴以及对3'末端封闭修饰(巯基基团修饰)就可以有效改善序列依赖性问题;同时引入单链结合蛋白(SSB),可以进一步抑制空白,提高灵敏度。该模板修饰策略结合SSB对多种miRNA的灵敏检测均起到了很好的作用。研究结果也为进一步解决传统IEXPAR扩增反应瓶颈问题提供一个重要的思路。另一方面,检测miRNA的恒温扩增方法包括高效的IEXPAR扩增方法大多数都是基于动物miRNA作为引物直接引发核酸聚合延伸反应,大量研究结果已经表明植物miRNA与动物miRNA在结构上存在较大的差异,植物miRNA中3'末端2'-O-甲基化修饰。这种3'末端-碱基2'-O-甲基化严重抑制了以目标分子植物miRNA作为引物在聚合酶催化作用下沿核酸模板的聚合延伸反应。因此,传统IEXPAR等高效恒温扩增反应无法用于目标分子植物miRNA的直接扩增及检测,为解决IEXPAR在植物miRNA检测方面存在的固有不足,我们报道了一种新型的,简单的,高灵敏度的检测植物miRNA的方法。此方法主要是将DNA叁通(Three-Way Junction,3WJ)结构和扩增效率极高的恒温指数扩增IEXPAR结合(3WJ-IEXPAR)。在该方法中,根据目标分子miRNA合理设计两条3WJ探针,分别是3WJ引物和3WJ模板,在无目标分子miRNA存在时二者在溶液中独立存在不产生杂交和后续扩增反应,当引入目标分子miRNA时,miRNA分别与3WJ引物和3WJ模板的部分序列互补叁者形成稳定的3WJ结构,进而3WJ引物延伸且生成小引物继而引发高效IEXPAR扩增。该方法通过靶标介导的3WJ结构的形成,使得后续IEXPAR无需miRNA直接引发,而转变为对一段已知优良IEXPAR引物序列的高效扩增,在克服了植物miRNA无法直接引发IEXPAR这一关键问题的同时,也在一定程度上有效避免了 IEXPAR的序列依赖性。该方法对于植物ath-miRNA156a的检测灵敏度高,选择性良好,并成功用于植物拟南芥中Total RNA含量的准确定量分析。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酸序列依赖性扩增论文参考文献
[1].欧琼,刘珏,周寿红,张志伟,何宜静.一种基于核酸序列依赖性扩增技术的高危型人乳头状瘤病毒E6/E7mRNA检测方法的建立及应用[J].中国慢性病预防与控制.2018
[2].王向东.恒温指数扩增检测植物microRNA的应用及其序列依赖性研究[D].陕西师范大学.2017
[3].王立朋,鲍翠霞,于丽梅,张晓录,于威娟.核酸序列依赖性扩增、Real-timePCR及GM试验诊断侵袭性曲霉菌感染的临床应用评价[J].中国真菌学杂志.2015
[4].张英英,谢鹏.核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)概述[J].重庆医科大学学报.2008
[5].刘玉洪,徐自忠,花群义,高洪,杨云庆.生物芯片、核酸序列依赖性扩增法及荧光定量PCR在检测方面的研究进展[J].畜牧兽医杂志.2006
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