导读:本文包含了禽流感病毒蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:新城疫,重组病毒,耐热选育,鸡胚传代
禽流感病毒蛋白论文文献综述
唐国毅,商雨,李林涛,任助,李丽[1]（2019）在《表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒株的鸡胚传代研究》一文中研究指出新城疫和禽流感严重危害世界养禽业,对其防控在我国主要依赖疫苗接种。课题组前期获得了一株可表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒rTS-HA株。进一步对其鸡胚传代特性进行研究,旨在分析重组新城疫病毒在传代过程中的热稳定性和外源基因表达稳定性。将其在SPF鸡胚传至18代,每隔4代耐热选育1次,取中间代次毒株,测定其增殖效价、鸡胚最小致死剂量的平均死亡时间(mean death time,MDT),同时设置未耐热选育的对照。结果表明,通过耐热选育将rTS-HA株传至第18代后,其增殖滴度未发现显着变化,MDT均大于120 h,表明毒力无返强现象,但其耐热性有显着提升,而未进行耐热选育的鸡胚传代株的耐热特性显着下降。动物试验结果表明,耐热选育后毒株的免疫效果较初代毒株也有明显的提升。以上结果表明重组新城疫病毒rTS-HA株需要进行耐热选育传代,才能保持其耐热特性,同时其免疫原性也有一定的提升,可作为新城疫和禽流感二联耐热基因工程活疫苗的候选毒株。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年11期）
黄亚楠,王志玉[2]（2019）在《副流感病毒5包膜糖蛋白的结构与功能》一文中研究指出副流感病毒5(Parainfluenza virus 5,PIV5)属于单股负链不分节段的RNA病毒,迄今尚未发现PIV5与人类已知的疾病有关,主要被用作疫苗载体。其包膜上存在叁种糖蛋白:融合(Fusion,F)蛋白、血凝素-神经氨酸酶(Hemaggulatinin-neuraminidase,HN)蛋白、小疏水性(Small hydrophobic,SH)蛋白。F蛋白能在同源性HN蛋白的协助下介导膜融合,HN蛋白具有受体识别、神经氨酸酶活性和促细胞融合活性,SH蛋白则在病毒致病机制中起作用。本文主要阐述了叁种包膜糖蛋白的结构和功能,旨在为PIV5的研究提供一些参考。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年06期）
姚晓雨,王斌,刘宇婷,张晶,刘鑫[3]（2019）在《细胞溶酶体降解A型流感病毒HA蛋白的机制研究》一文中研究指出为研究A型流感病毒HA蛋白在宿主细胞内的降解通路及其机制,本研究首先将表达流感病毒H5亚型HA蛋白的重组质粒和内质网应激通路相关分子XBP1共转染293T细胞,通过检测荧光素酶活性分析HA蛋白引起细胞的内质网应激水平。结果显示HA蛋白在细胞内的表达能够引起内质网应激。进一步进行药物抑制试验,结果显示部分HA蛋白通过溶酶体进行降解。采用RNA干扰、ELISA、药物处理等相关试验对溶酶体降解的3条途径逐一分析,结果显示HA蛋白未通过分子伴侣介导的自噬途径、内吞途径以及巨自噬途径降解。利用表达细胞凝集结构标志蛋白与表达HA蛋白的重组质粒共转染293T细胞,通过观察并经荧光定量,发现HA蛋白在细胞内过表达时发生凝集,随后通过溶酶体降解。本研究结果表明HA蛋白在宿主细胞内错误折迭并诱发内质网应激,错误折迭的蛋白形成凝集结构后通过溶酶体降解。本研究结果初步阐明了HA蛋白通过溶酶体降解的机制,为开发新的抗病毒手段奠定了基础。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年10期）
孙一,李如梦,李军,马春喜,赵以恒[4]（2019）在《表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗候选株的构建与免疫效果评估》一文中研究指出为了有效防控H7N9亚型禽流感疫情,研制能够预防高致病性H7N9亚型禽流感的疫苗非常必要。研究基于昆虫杆状病毒表达载体系统(BEVS),构建并拯救了一株表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素蛋白(HA)的重组杆状病毒rBac-GD15HA。间接免疫荧光试验及免疫印迹试验鉴定结果表明rBac-GD15HA的HA蛋白在Sf9细胞中成功表达;重组病毒细胞传代试验结果表明rBac-GD15HA在传代过程中能保持较高的病毒滴度,且遗传稳定;鸡的免疫试验结果显示,重组疫苗在一次免疫后即能诱导较高水平的针对H7N9 AIV的抗体应答,并能提供针对高致病性H7N9 AIV 100%的临床保护。因此,研究结果可作为H7N9亚型禽流感疫苗研发策略的参考,为其防控提供一种安全有效的方法,也为今后广谱流感疫苗的研发奠定一定的基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年18期）
宋颖超,袁润余,武婕[5]（2019）在《2006-2018年广东省By系流感病毒血凝素蛋白基因进化特点》一文中研究指出目的分析2006-2018年广东省流行的By系流感病毒血凝素蛋白基因进化特点,部分阐明2017年冬季流感流行的病原学原因。方法采用时空抽样方法对2006-2018年广东省流行的By系流感病毒进行抽样、鉴定、分离和HA基因序列测定,应用Mega7.0和BioEdit7.1.9软件对HA基因核苷酸序列进行比对分析。结果广东省2006-2018年流行的By系病毒HA基因进化与时间推移相关,与地域分布无关,相同年份HA基因病毒在HA基因进化树中位于同一分支。2006-2008年广东By系病毒与2013-2015年推荐的北半球疫苗株B/Massachusetts/2/2012位于Clade2分支,HA蛋白发生R48K、K88R、P108A、G132R、D196N、S229G、E478D和I554V等8个氨基酸位点的突变。2008-2011年是广东省By系病毒交替时期,部分病毒的HA出现K48R、A108P和R132G等3个位点的回复突变,且新增S150I、N165Y和N202S和S229D等4个氨基酸位点突变,进化成Clade3分支,Clade3和Clade2分支病毒同时存在。2012年起Clase3分支完全取代Clade2分支成为广东主要流行分支,且与2015-2018年推荐的北半球疫苗株B/Phuket/3073/2013位于相同分支。2017年冬季广东省流行的By系病毒仍属于Clade3分支,氨基酸突变位点的频率增加,但突变位点均不在抗原表位区。结论 2017年冬季广东省流感流行的主要原因不是By系流感病毒突变,而是人群免疫压力的缺失,推行接种包括By系在内的四价流感疫苗,可预防或减少流感的发生和传播。(本文来源于《新发与再发传染病研究论坛论文集》期刊2019-09-24）
秦波音,王超,刘洋,谭丹,方钟[6]（2019）在《受体相互作用蛋白激酶-3参与甲型流感病毒H1N1感染C57BL/6小鼠诱导特异性CD8~+T细胞应答》一文中研究指出目的研究受体相互作用蛋白激酶-3(receptor-interacting protein 3, RIP3)在C57BL/6小鼠感染甲型流感病毒H1N1 PR8后,在特异性CD8~+T细胞免疫应答中的作用。方法用剂量为0.7×10~3半数组织细胞感染剂量(50%tissue culture infective dose, TCID_(50))的甲型流感H1N1 PR8病毒株,通过滴鼻方式分别感染RIP3敲除(RIP3~(-/-))和野生型(WT)的C57BL/6小鼠。在感染后第8天(day post infection, d.p.i)分离小鼠脾细胞,使用流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting, FACS)检测流感抗原特异性CD8~+T细胞数量及功能:MHC I表位肽四聚体法(tetramer staining)染色流感特异性CD8~+T细胞,细胞内细胞因子染色法(intracellular cytokine staining, ICS)检测CD8~+T细胞产生IFN-γ、TNF-α、IL-2等效应性细胞因子水平和与CD8~+T细胞杀伤功能有关的颗粒酶(granzyme B)的表达情况。结果 0.7×10~3 TCID_(50)流感病毒感染后,WT小鼠中流感抗原特异性CD8~+T细胞比例为RIP3~(-/-)小鼠的2.71倍;WT小鼠中CD8~+T细胞分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2的能力均显着高于RIP3~(-/-)小鼠(P<0.01);且WT小鼠CD8~+T表达granzyme B水平显着高于RIP3~(-/-)小鼠(P<0.01)。结论本研究在甲型流感病毒感染的小鼠体内发现敲除RIP3分子可导致流感感染诱导的特异性CD8~+T细胞数量减少、功能降低,表明RIP3是参与流感抗原特异性CD8~+T细胞的诱生及功能发挥的关键分子之一。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2019年05期）
彭成成,吴熠潇,刘旭平,谭文松[7]（2019）在《H9N2亚型禽流感病毒纯化及病毒HA蛋白定量方法研究》一文中研究指出为实现H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)疫苗上下游过程的控制,本研究结合蔗糖密度梯度离心和SDS-PAGE灰度分析建立了H9N2亚型AIV纯化和病毒HA蛋白定量的方法。首先将收获的病毒原液经差速离心、PEG6000沉淀和蔗糖密度梯度离心分别进行澄清、浓缩和分离纯化;其次,采用改装过的高效液相色谱仪系统(HPLC)准确定位和收集病毒离心区带,并对该区带进行SDS-PAGE和Western blotting分析,同时考察该收集方式的线性和重复性;然后,在此基础上优化病毒液的澄清工艺以提高病毒回收率;最后,观察还原SDS-PAGE分离的H9N2亚型AIV蛋白条带的共迁移情况并确定糖苷酶PNGase F脱糖基处理的最佳条件,采用Image J软件分析SDS-PAGE图谱中4个主要病毒蛋白条带(NP、HA1、M1和HA2)的灰度以确定流感病毒血凝素的含量。结果表明,HPLC收集的病毒离心区带的蛋白浓度与PEG6000浓缩的上清体积在8～32 mL范围内具有良好的线性关系(R~2=0.994),且该收集方式重复性好,批内和批间变异系数分别为1.29%和4.11%。病毒液经过澄清、浓缩和分离纯化后,最终的病毒回收率为79.55%。纯化的H9N2亚型AIV的蛋白浓度为1 000μg/mL时,经糖苷酶PNGase F脱糖基处理后便能得到条带清晰平整且分离良好的SDS-PAGE图谱。经灰度分析,HA含量占总病毒蛋白含量的46.18%。本研究初步建立了H9N2亚型AIV纯化和病毒HA蛋白定量的方法,为H9N2亚型AIV全病毒灭活疫苗的研发和生产提供了简单、准确的检测手段。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年07期）
区旭春,陈智湘,赵清,苏镜,赵可伟[8]（2019）在《C反应蛋白和血象在流感病毒中的变异性研究》一文中研究指出目的探讨甲型/乙型流感阳性与阴性患者C反应蛋白(CRP)和白细胞(WBC)计数/分类的变化及意义。方法对2017年10月27日—2018年9月27日之间在广州中医药大学第叁附属医院芳村分院门诊有疑似流感病毒感染的患者当天进行咽拭子采样,胶体金法检测流感病毒抗原,同时采集指尖,荧光免疫层析法检测CRP,血球仪检测血常规,统计甲型/乙型流感患者各项指标的差异。结果甲型流感组、非流感组的WBC计数、中性粒细胞绝对值、CRP值均值高于乙型流感组(P<0.05),而单核细胞百分低于乙型流感组(P<0.05)。甲型流感组、非流感组在WBC计数>9.16×10~9/L、中性粒细胞绝对值>6.3×10~9/L、单核细胞百分比>10各项中的构成比与乙型流感组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论检测血常规和CRP的水平,对流感的鉴别诊断有一定的指导意义,能较好地协助临床医师判断病情和指导用药。(本文来源于《广州医药》期刊2019年04期）
李鸽,刘肖,李青梅,杨艳艳,王彦红[9]（2019）在《猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出为了制备猪流感病毒(SIV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(MAb),采用差速离心法纯化H1N1和H3N2亚型SIV后交叉免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过建立的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)单克隆抗体检测方法进行筛选。获得3株能稳定分泌抗NP蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为16D5、18G8和20C4,将它们诱导小鼠产生的腹水IPMA效价分别为1×10~(-6)、1×10~(-6)和1×10~(-5)。亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链为κ链。3株单克隆抗体特异识别H1N1、H3N2、H5N1、H7N9和H9N2亚型流感病毒,并且与猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒无交叉反应。Western blot检测结果表明,3株杂交瘤细胞培养上清均在56 ku附近出现一条特异性的蛋白质条带,说明针对SIV的NP蛋白制备了3株单克隆抗体。综上,成功制备了针对SIV NP蛋白的3株单克隆抗体,可识别不同亚型的SIV。(本文来源于《河南农业科学》期刊2019年08期）
范桂芳,徐守兴,杨斓,宋文博,华琳[10]（2019）在《表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-optiHA的构建及生物学特性》一文中研究指出为研发针对猪流感病毒流行毒株和猪伪狂犬病病毒变异毒株更为有效的基因工程疫苗,本研究以变异伪狂犬病病毒基因缺失毒株(rPRVΔTKΔgI/gE)为载体,采用同源重组的方法,成功构建了表达经密码子优化的H1N1亚型猪流感病毒HA基因的重组病毒rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA。对获得的重组病毒在多种细胞上的增殖特性、一步生长曲线、遗传稳定性以及对小鼠的安全性等生物学特性进行了研究。结果表明,构建的rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA重组病毒能够稳定表达HA蛋白,并且经过优化后,目的基因的表达量有明显提高。该重组病毒在ST、PK-15、Vero和BHK-21细胞上的增殖滴度均高于10~(-7.0)/0.1 mL,对PK-15细胞的敏感性最高。一步生长曲线结果表明,重组病毒的增殖特性未受影响。连续传代20代后,该重组病毒依然具有较好的遗传稳定性,并且对小鼠安全性良好。本研究为重组病毒rPRV-optiHA的进一步研究与应用奠定了基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年07期）
禽流感病毒蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
副流感病毒5(Parainfluenza virus 5,PIV5)属于单股负链不分节段的RNA病毒,迄今尚未发现PIV5与人类已知的疾病有关,主要被用作疫苗载体。其包膜上存在叁种糖蛋白:融合(Fusion,F)蛋白、血凝素-神经氨酸酶(Hemaggulatinin-neuraminidase,HN)蛋白、小疏水性(Small hydrophobic,SH)蛋白。F蛋白能在同源性HN蛋白的协助下介导膜融合,HN蛋白具有受体识别、神经氨酸酶活性和促细胞融合活性,SH蛋白则在病毒致病机制中起作用。本文主要阐述了叁种包膜糖蛋白的结构和功能,旨在为PIV5的研究提供一些参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
禽流感病毒蛋白论文参考文献
[1].唐国毅,商雨,李林涛,任助,李丽.表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒株的鸡胚传代研究[J].动物医学进展.2019
[2].黄亚楠,王志玉.副流感病毒5包膜糖蛋白的结构与功能[J].病毒学报.2019
[3].姚晓雨,王斌,刘宇婷,张晶,刘鑫.细胞溶酶体降解A型流感病毒HA蛋白的机制研究[J].中国预防兽医学报.2019
[4].孙一,李如梦,李军,马春喜,赵以恒.表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗候选株的构建与免疫效果评估[J].中国家禽.2019
[5].宋颖超,袁润余,武婕.2006-2018年广东省By系流感病毒血凝素蛋白基因进化特点[C].新发与再发传染病研究论坛论文集.2019
[6].秦波音,王超,刘洋,谭丹,方钟.受体相互作用蛋白激酶-3参与甲型流感病毒H1N1感染C57BL/6小鼠诱导特异性CD8~+T细胞应答[J].中国实验动物学报.2019
[7].彭成成,吴熠潇,刘旭平,谭文松.H9N2亚型禽流感病毒纯化及病毒HA蛋白定量方法研究[J].中国畜牧兽医.2019
[8].区旭春,陈智湘,赵清,苏镜,赵可伟.C反应蛋白和血象在流感病毒中的变异性研究[J].广州医药.2019
[9].李鸽,刘肖,李青梅,杨艳艳,王彦红.猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].河南农业科学.2019
[10].范桂芳,徐守兴,杨斓,宋文博,华琳.表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-optiHA的构建及生物学特性[J].中国兽医学报.2019