本文主要研究内容
作者李宾宾,余乃通,杨毅,王健华,张秀春,刘志昕（2019）在《柑橘黄龙病菌亚洲种菌毛装配蛋白基因(PAP)序列分析、原核表达及抗血清制备》一文中研究指出：菌毛装配蛋白（Flp pilus assembly protein, PAP）是一种分泌蛋白,参与细菌菌毛的组装,表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,用其菌毛装配蛋白基因（PAP）的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段,序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种（GenBank登录号:CP001677.5）PAP基因序列一致。功能预测表明它含有两个与分泌功能相关的CpaC和Secretin结构域。PCR产物通过EcoRⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体pET32a-PAP。将pET32a-PAP载体转化BL21（DE3）大肠杆菌,经终浓度为1 mmoL/L IPTG诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni2+-NTA层析柱纯化,并作为抗原腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500～1∶1 000的多克隆抗血清。Western blot分析表明,PAP多克隆抗血清特异性强;以田间样品总蛋白做抗原时,能特异性检测染病样品。本研究为PAP蛋白功能研究和开发柑橘黄龙病菌的蛋白检测产品提供研究基础。
Abstract
jun mao zhuang pei dan bai （Flp pilus assembly protein, PAP）shi yi chong fen bi dan bai ,can yu xi jun jun mao de zu zhuang ,biao da liang gao 。ben yan jiu yi gan ran gan ju huang long bing de hai na qiong hai shi lu cheng xie pian wei cai liao di qu zong DNA,yong ji jun mao zhuang pei dan bai ji yin （PAP）de te yi yin wu jin hang PCRkuo zeng ,huo de gai ji yin de mu de pian duan ,xu lie fen xi biao ming hai na qiong hai gan ju huang long bing jun PAPji yin yu gan ju huang long bing jun ya zhou chong （GenBankdeng lu hao :CP001677.5）PAPji yin xu lie yi zhi 。gong neng yu ce biao ming ta han you liang ge yu fen bi gong neng xiang guan de CpaChe Secretinjie gou yu 。PCRchan wu tong guo EcoRⅤhe XhoⅠshuang mei qie gou jian chong zu zai ti pET32a-PAP。jiang pET32a-PAPzai ti zhuai hua BL21（DE3）da chang gan jun ,jing zhong nong du wei 1 mmoL/L IPTGyou dao ,mu de dan bai zhu yao yi bao han ti xing shi biao da 。mu de dan bai jing Ni2+-NTAceng xi zhu chun hua ,bing zuo wei kang yuan fu qiang mian yi xiao bai shu ,huo de xiao jia zai 1∶500～1∶1 000de duo ke long kang xie qing 。Western blotfen xi biao ming ,PAPduo ke long kang xie qing te yi xing jiang ;yi tian jian yang pin zong dan bai zuo kang yuan shi ,neng te yi xing jian ce ran bing yang pin 。ben yan jiu wei PAPdan bai gong neng yan jiu he kai fa gan ju huang long bing jun de dan bai jian ce chan pin di gong yan jiu ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自植物保护的李宾宾,余乃通,杨毅,王健华,张秀春,刘志昕，发表于刊物植物保护2019年05期论文，是一篇关于柑橘黄龙病论文,基因表达论文,蛋白论文,抗血清制备论文,植物保护2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自植物保护2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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