抗原肽段论文-王建华,张俊哲,赵丹,王玉玲,肖妍

抗原肽段论文-王建华,张俊哲,赵丹,王玉玲,肖妍

导读:本文包含了抗原肽段论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:赤羽病病毒,Gc蛋白,重组肽段,原核表达

抗原肽段论文文献综述

王建华,张俊哲,赵丹,王玉玲,肖妍[1](2019)在《赤羽病病毒Gc_(405aa—480aa)肽段的高效可溶性表达及抗原性鉴定》一文中研究指出为表达和鉴定赤羽病病毒Gc蛋白强抗原性肽段,对Gc蛋白的1个75氨基酸肽段(405aa—480aa)编码序列,经密码子优化后进行基因合成,构建重组表达载体p ET-Gc_(405aa—480aa),转化表达菌株BL21(DE3),在28℃用0.1 mmol/L IPTG诱导重组肽段表达。将重组rHis-Gc_(405aa—480aa)肽段,通过Ni~+-NTA树脂亲和层析方法纯化后,用Western-bloting和ELISA分析其抗原性。SDS-PAGE显示,重组rHis-Gc_(405aa—480aa)肽段以完全可溶性形式在大肠杆菌中得到高效表达;用Ni+-NTA树脂亲和层析方法纯化,获得了较高纯度的重组rHis-Gc_(405aa—480aa)肽段;Western-blotting显示,该重组肽段对赤羽病病毒阳性血清具有很强的反应原性。本研究表达、纯化和鉴定了具有强抗原性的重组rHis-Gc_(405aa—480aa)肽段,为进一步开展Gc蛋白单克隆抗体制备、B细胞表位鉴定和诊断试剂研制奠定了基础。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2019年03期)

彭方毅,崔玉花,马明炎,李元宽,邬红雨[2](2015)在《肺弹性蛋白降解肽段人工抗原的合成与鉴定》一文中研究指出目的制备和鉴定肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,为进一步研制慢性阻塞性肺疾病(COPD)免疫检测试剂盒打下良好基础。方法以Sulfo-SMCC为偶联剂,钥孔血蓝蛋白(KLH)为载体蛋白制备免疫原;经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)电泳鉴定偶联情况;以免疫原免疫Balb/c小鼠制备特异性抗体,间接竞争酶联免疫吸附实验(ELISA)法评价抗血清效价及特异性。结果紫外扫描和SDS-PAGE电泳确认了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原合成成功,其蛋白浓度为1.181mg/mL,抗血清效价高于1∶64 000,IC50为13.7ng/mL,抗血清与无关肽段无交叉反应。结论本实验成功制备了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,其具有较好的免疫原性,为建立快速准确检测COPD免疫检测方法奠定基础。(本文来源于《重庆医学》期刊2015年22期)

代飞飞,刘磊,郭晶,邵宁生,刘雪梅[3](2014)在《抗原性肽段模拟抗NMDA受体脑炎抗原NR1亚单位的初步探索》一文中研究指出目的抗NMDA受体脑炎是近年来发现的一种人体针对神经元细胞膜表面NMDA受体NR1亚单位产生的特异性IgG抗体所致的自身免疫性脑炎,可引起包括精神症状、癫痫发作等在内的严重神经系统症状。本研究拟根据预测的NMDA受体NR1亚单位的B细胞抗原表位固相合成肽段以模拟NR1亚单位的抗原性,为后续临床抗(本文来源于《中华医学会第十七次全国神经病学学术会议论文汇编(上)》期刊2014-09-19)

蒋桂云,陈念华,付远辉,焦月盈,徐青[4](2014)在《携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原病毒样颗粒的制备》一文中研究指出目的采用杆状病毒表达系统制备携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原(HBsAg)病毒样颗粒(VLPs)。方法将Aβ42分子的C末端6个氨基酸进行3个串联后,插入到HBsAg的113 aa与114 aa之间,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建表达HBsAg Aβ37-42的重组杆状病毒载体,转染Sf9细胞,Western blot鉴定目的蛋白表达情况,用氯化铯(CsCl)密度梯度超速离心纯化,电镜观察VLPs的形态。结果制备并纯化出HBsAg VLPs和携带Aβ37-42肽段的HBsAg VLPs(HBsAgAβ37-42 VLPs)。结论制备携带Aβ抗原表位的重组HBsAg作为一种阿尔茨海默病(AD)疫苗具有一定的可行性,值得进一步探讨。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2014年08期)

郄霜,戴振华,杨锡琴,修冰水,陈堃[5](2014)在《结核分枝杆菌Rv3871抗原优势肽段的克隆表达及抗原性鉴定》一文中研究指出目的:为了提高结核病诊断试剂的特异性和敏感性,克隆表达结核分枝杆菌H37Rv株RD1区Rv3871抗原优势肽段,并应用ELISA法对其抗原性进行初步鉴定。方法:利用Biosun生物信息学软件对Rv3871抗原进行表位分析,通过PCR从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增Rv3871抗原优势肽段编码基因,在大肠杆菌HB101中进行表达,采用间接ELISA法初步评价其抗原性。结果:Rv3871-1肽段检测的敏感性为32.5%(13/40),特异性为97.2%(35/36);Rv3871-2敏感性为45%(18/40),特异性为100%;Rv3871-3敏感性为37.5%(15/40),特异性为91.6%。结论:结核分枝杆菌RD1区Rv3871抗原优势肽段Rv3871-2有较高的特异性和敏感性,有望作为候选抗原用于结核病患者的血清学检测。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2014年03期)

蒋桂云[6](2014)在《携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原病毒样颗粒的制备》一文中研究指出目的阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是引起老年痴呆最常见的原因,随着人口老龄化,世界人口中AD患者迅速增加,而目前临床上尚无特异的防治方法。本研究尝试采用杆状病毒表达系统,制备携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原(HBsAg)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs),为后续评价免疫效果、提高A42分子的C末端作为疫苗抗原的免疫原性以及提高免疫衰老人群对疫苗的反应性提供研究基础。方法将Aβ42分子的C末端6个氨基酸进行3个串联后,插入到乙肝病毒(Hepatitis B Virus, HBV)表面抗原(HBV surface antigen, HBsAg)的113aa与114aa之间;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,首先构建穿梭质粒pFastBac1-HBsAgAβ37-42和pFastBac1-HBsAg;利用转座重组机制,将穿梭质粒与含杆状病毒DNA和辅助质粒的DH10Bac感受态细胞进行转座操作,经过抗生素和蓝白斑筛选出重组菌株,提取重组杆状病毒DNA,获得携带HBsAgAβ37-42或HBsAg基因的重组杆状病毒质粒,经PCR鉴定正确后,转染Sf9细胞,扩增获得重组病毒;取病毒感染的细胞,经裂解后,以Western blot鉴定目的蛋白HBsAg和Aβ37-42的表达情况,并用氯化铯(CsCl)密度梯度超速离心纯化VLPs;分别使用SDS-PAGE和BCA方法分析VLPs的纯度和浓度,电镜观察VLPs的形态。结果成功制备了携带A37-42肽段的HBsAg病毒样颗粒(HBsAgA37-42VLPs)和作为对照的HBsAg VLPs,以CsCl密度梯度超速离心法实现了VLPs的分离纯化,通过电镜观察到VLPs的形态。结论以重组乙肝病毒表面抗原携带A抗原表位制备AD的VLPs疫苗具有一定的可行性,值得进一步探讨。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2014-03-01)

戴振华,王国华,冯晓燕,张立,陈堃[7](2012)在《抗结核分枝杆菌抗原优势肽段单克隆抗体的制备和初步鉴定》一文中研究指出目的:制备和初步鉴定抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体。方法:以两种优势肽段的融合抗原PGEX-4T-2/38kD-ESAT6-CFP10和PGEX-4T-2/Mtb8.4-MPT64-Mtb16.3-Mtb8作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合后,通过有限稀释法筛选阳性克隆,经ELISA和Western blotting分析单抗的特性和特异性。结果:获得17株结核分枝杆菌抗原优势肽段特异单克隆抗体杂交瘤细胞株,经间接ELISA方法测定,杂交瘤细胞培养上清效价为28~212,接种小鼠的腹水效价为216~220。Western blotting结果显示,每株单抗均能特异性的识别融合蛋白的优势肽段。结论:制备了针对抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体,为结核分枝杆菌的快速诊断和抗原性分析奠定了基础。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2012年12期)

方静,周颖,李智慧,达飞,胡要磊[8](2010)在《小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4的胞外肽段表达及纯化》一文中研究指出目的:真核细胞表达小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4胞外段肽,研究表达肽段与抗原呈递细胞B7分子结合后减轻小鼠淋巴细胞刺激后的增殖抑制,从而启动T淋巴细胞进一步增殖。方法:从小鼠脾脏淋巴细胞获得总RNA,通过逆转录PCR扩增出CTLA-4全长基因,克隆并测序。依据胞外段序列和真核表达载体pcDNA3.1序列,合成引物扩增胞外片段,两者经内切核酸酶处理、连接构建重组表达pcDNA3.1载体,重组质粒经测序验证后,采用lipofectamine2000转染入小鼠肝癌细胞Hepa1-6,经G418筛选获得稳定表达细胞株。结果:获得小鼠CTLA-4胞外段真核表达载体和小鼠肝癌细胞Hepa1-6稳定表达转染细胞株,制备了CTLA-4胞外肽段,经His标签抗体和小鼠CTLA-4抗体Westernblot检测表达蛋白带均呈阳性。结论:获得CTLA-4胞外段肽,为进一步研究该肽的作用打下基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2010年11期)

刘卫卫,白欣立,李震中,张军峰,李鑫[9](2010)在《空肠弯曲菌cdtA及其高抗原肽段的原核重组质粒的构建和表达》一文中研究指出目的空肠弯曲菌细胞扩张毒素cdtA及其高抗原肽段蛋白人工表达。方法使用PCR方法获得cdtA、cdtA1、cdtA2编码的基因,经确证后将该基因克隆到谷胱甘肽转移酶融合表达载体(pGEX-5x-1)中,构建了pGEX-5X-1-cdtA、cdtA1、cdtA2表达质粒,在大肠杆菌BL21中获得了相应表达。结果 pGEX-cdtA、cdtA1、cdtA2重组菌株具有明显的表达带,其分子量与预期的结果相同。结论成功构建了cdtA及其高抗原肽段的原核表达重组质粒,并表达出相应蛋白为其免疫原性分析及研制疫苗奠定了基础。(本文来源于《脑与神经疾病杂志》期刊2010年05期)

冯晓燕,陈坤,宋晓国,王国华,朱翠侠[10](2009)在《结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38kD-ESAT6-CFP10的构建与抗原性初步检测》一文中研究指出目的为了提高结核病诊断试剂的特异性和敏感性,构建了结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38 kD-ESAT6-CFP10,并且采用双抗原夹心ELISA方法初步分析了该融合抗原的抗原性。方法运用生物学软件分析抗原优势肽段并模拟其串联后的叁维结构,以确保串联后仍保持良好的抗原性。通过PCR方法分别扩增38 kD、ESAT-6和CFP10抗原优势肽段基因并将其进行连接,然后将融合基因分别连接入pBVIL1和pGEX-4T-2表达载体,在大肠杆菌菌株DH5α中进行表达。将两种不同载体表达的38 kD-ESAT6-CFP10融合抗原分别作为包被抗原和标记抗原,以双抗原夹心ELISA方法初步评价其抗原性。结果获得了38 kD、ESAT-6和CFP10的抗原优势肽段融合抗原38 kD-ESAT6-CFP10,并在大肠杆菌中进行了高效表达,初步验证所获得的抗原具有良好的抗原性。结论该种抗原优势肽段融合抗原有望成为结核病血清学诊断的重要候选抗原,并且双抗原夹心ELISA方法有助于提高检测的特异性和敏感性。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2009年03期)

抗原肽段论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的制备和鉴定肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,为进一步研制慢性阻塞性肺疾病(COPD)免疫检测试剂盒打下良好基础。方法以Sulfo-SMCC为偶联剂,钥孔血蓝蛋白(KLH)为载体蛋白制备免疫原;经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)电泳鉴定偶联情况;以免疫原免疫Balb/c小鼠制备特异性抗体,间接竞争酶联免疫吸附实验(ELISA)法评价抗血清效价及特异性。结果紫外扫描和SDS-PAGE电泳确认了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原合成成功,其蛋白浓度为1.181mg/mL,抗血清效价高于1∶64 000,IC50为13.7ng/mL,抗血清与无关肽段无交叉反应。结论本实验成功制备了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,其具有较好的免疫原性,为建立快速准确检测COPD免疫检测方法奠定基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗原肽段论文参考文献

[1].王建华,张俊哲,赵丹,王玉玲,肖妍.赤羽病病毒Gc_(405aa—480aa)肽段的高效可溶性表达及抗原性鉴定[J].中国动物检疫.2019

[2].彭方毅,崔玉花,马明炎,李元宽,邬红雨.肺弹性蛋白降解肽段人工抗原的合成与鉴定[J].重庆医学.2015

[3].代飞飞,刘磊,郭晶,邵宁生,刘雪梅.抗原性肽段模拟抗NMDA受体脑炎抗原NR1亚单位的初步探索[C].中华医学会第十七次全国神经病学学术会议论文汇编(上).2014

[4].蒋桂云,陈念华,付远辉,焦月盈,徐青.携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原病毒样颗粒的制备[J].安徽医科大学学报.2014

[5].郄霜,戴振华,杨锡琴,修冰水,陈堃.结核分枝杆菌Rv3871抗原优势肽段的克隆表达及抗原性鉴定[J].生物技术通讯.2014

[6].蒋桂云.携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原病毒样颗粒的制备[D].安徽医科大学.2014

[7].戴振华,王国华,冯晓燕,张立,陈堃.抗结核分枝杆菌抗原优势肽段单克隆抗体的制备和初步鉴定[J].中国卫生检验杂志.2012

[8].方静,周颖,李智慧,达飞,胡要磊.小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4的胞外肽段表达及纯化[J].中国生物工程杂志.2010

[9].刘卫卫,白欣立,李震中,张军峰,李鑫.空肠弯曲菌cdtA及其高抗原肽段的原核重组质粒的构建和表达[J].脑与神经疾病杂志.2010

[10].冯晓燕,陈坤,宋晓国,王国华,朱翠侠.结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38kD-ESAT6-CFP10的构建与抗原性初步检测[J].中国实验诊断学.2009

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