分子克隆技术论文-言普,曾妍静,沈文涛,庹德财,黎小瑛

分子克隆技术论文-言普,曾妍静,沈文涛,庹德财,黎小瑛

导读:本文包含了分子克隆技术论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:DNA,分子克隆,Nimble,Cloning

分子克隆技术论文文献综述

言普,曾妍静,沈文涛,庹德财,黎小瑛[1](2018)在《新型DNA分子克隆技术——Nimble Cloning》一文中研究指出DNA分子克隆技术是分子生物学研究的基础,其创新和发展直接推动着分子生物学的进步。目前使用的分子克隆方法存在受酶切位点受限、试剂盒价格昂贵等问题。本研究开发了一种新的克隆技术,命名为Nimble Cloning,其核心是在目标载体的克隆位点处设计SfiI-ccdB-SfiI结构,与此结构侧翼具有20bp左右重迭序列的目标DNA在Nimble Mix反应液作用下直接与环状质粒完成克隆。Nimble Mix反应液由SfiI限制性内切酶、T5核酸外切酶和Phusion DNA聚合酶混合组成,其介导的DNA重组原理为:先由SfiI切开环状载体,接着T5核酸外切酶在线性DNA两端沿5'-3'方向进行消化,目标基因和载体两端由于设计有重迭序列,消化后露出的互补DNA单链结合后由Phusion酶沿5'-3'填补T5核酸外切酶产生的缺口。Nimble Cloning的优点包括:1.直接将DNA克隆到环状载体,使用环状载体不仅简化了实验操作,还提高了克隆效率;2.试剂成本低,无需购买昂贵试剂盒;3.线性PCR产物和环状质粒上的DNA(单个,或多个,或混合)均可直接克隆到目标载体;4. DNA片段与目标载体SfiI-ccdB-SfiI结构侧翼的重迭序列可设计在接头序列的外围,不重迭的接头序列可由T5核酸外切酶的5'-3'外切酶活性和Phusion酶的3'-5'外切酶活性消化去除,使得该方法既可用于通用重迭序列(接头)的标准化克隆,也可用于特需要求的去除接头序列的无缝克隆。鉴于这些特点,Nimble Cloning可灵活用于单片段、多片段、多克隆位点等多种形式的克隆,有望在分子生物学研究中得到广泛应用。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集》期刊2018-10-25)

李静[2](2018)在《基于分子克隆及叁代测序技术的乙型肝炎病毒全长病毒准种的研究》一文中研究指出研究背景根据最新流行病学调查,目前全球约有2.5亿人感染乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV),HBV感染仍然是一个严重的全球公共卫生问题,其中部分慢性HBV感染者可进展为慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)、肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌(hepatocellar carcinoma,HCC),每年大约有超过100万人死于HBV感染相关疾病。HBV的高效复制及其逆转录过程缺乏校正机制导致HBV在感染患者体内以准种(quasispecies,QS)的形式存在,即某一感染患者体内的HBV病毒种群虽然在遗传学上高度相关,但病毒株间的基因组序列却存在差异,这一种病毒形式的存在定义为QS。HBV准种的特征和动态变化模式与疾病临床表现、抗病毒治疗应答和疫苗效果密切相关。了解HBV全长基因组准种的特征有助于患者抗病毒治疗的个性化管理。目前对于HBV准种的测序方法主要依赖聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)产物直接测序、PCR-克隆-测序(clone-based sequencing,CBS)以及二代测序(next generation sequencing,NGS)技术,其中直接PCR测序只能检测到整个HBV准种群中丰度为20%的突变,CBS被认为是“金标准”,但是这种方法费时费力,突变检测敏感性取决于克隆数量,对于全长准种通常敏感性不高。二代测序在研究准种方面较前两种方法有明显的优势,但也有其不足,例如读长的限制,通常为100~300个碱基对(base pair,bp),且需要结合分子克隆的结果进行判读。随着基因测序技术的快速发展,多种第叁代测序(the third-generation sequencing,TGS)技术出现,实现高通量测序的同时读长显着增加,其中以单分子实时测序(Single Molecule Real Time(SMRT)DNA sequencing technology)为突出代表,为 HBV 准种研究提供了潜在的新研究方法。研究目的目前尚无叁代测序应用于HBV全长准种的相关检测研究,本研究针对HBV全长基因组准种,通过比较PCR-克隆测序和叁代测序,初步探讨现有技术条件前提下,更适合于研究HBV全长基因组准种构成和特性的方法。研究方法本研究共纳入13例样本,分为质控组和实验组。质控组3个,命名为C01、C02、C03,由包含确定的不同比例的基因B型和C型HBV全基因克隆质粒组成,实验组10例为2015年2月至2015年12月间就诊于山东大学第二医院符合《慢性乙型肝炎防治指南》的CHB患者。所有入组样本均进行HBVDNA抽提,PCR扩增,应用CBS及TGS方法测序,并用两种方法所得测序结果分别分析HBV准种的复杂度、离散度和HBV突变检测等指标,以探讨TGS在分析HBV准种异质性方面的效能和特点。研究结果两种方法获得的准种克隆数量比较。平均每个样本由CBS方法获得的准种克隆数为21.77±3.63个,而TGS方法获得的准种克隆数为560.31±233.42个,TGS方法获得的准种数远大于CBS方法(P<0.01)。质控组的结果表明两种方法检测到的准种异质性的比例均与预期标准值相符,且TGS方法检测准种异质性的比例比由CBS方法检测得到的与预期标准值更加接近。质控组从TGS方法获得的准种复杂度与从CBS方法获得的准种复杂度具有较好的一致性,均与准种复杂度的理论值相符。试验组在分析准种复杂度方面,利用配对t检验(或者Mann-Whitney检验),除了核苷酸水平的PreS2区(P=0.021)和氨基酸水平的PreS1区(P=0.025)、PreS2区(P=0.019)外,HBV全长基因组及其他分区两种方法得到的准种复杂度值没有差异(P>0.05)。在相关性分析中,除了 HBV全基因组外,各个分区的准种复杂度值均呈正相关。在Bland-Altman一致性分析中,结果显示除了 HBV全基因组(P = 0.13)外,HBV其他各个分区CBS和TGS有较高的一致性。在分析准种离散度方面,利用配对t检验(或者Mann-Whitney检验),除了核苷酸水平BCP区、X区(P值分别为0.044和0.021)的遗传距离,S区的dS(P=0.030)外,HBV全长基因组及其他分区的准种复杂度值没有差异(P>0.05)。在相关性分析中,HBV全基因组及各个分区的准种复杂度值均呈正相关。在Bland-Altman 一致性分析中,HBV全基因组及HBV其他各个分区CBS和TGS有较高的一致性。与基因B型标准序列D00330和基因C型标准序列AB033556进行比对,CBS共检测出1101个变异,平均每位患者检测到110.1±26.98个变异,TGS共检测出3059个变异,平均每位患者检测到305.9±162.45个变异。针对RT区,S区,C区,X区,PreC区,BCP区文献中已有报道的常见单核苷酸突变位点,两种方法共同检出50个阳性突变,阳性率为15.15%。CBS方法没有能够单独地检测出阳性突变,其阳性率为0%。TGS单独检出40个阳性突变,阳性率为12.12%,明显高于CBS(x2 =157.14,P<0.01),表明TGS在突变检测方面明显敏感于CBS。在进一步的Kappa 一致性检验中,Kappa值为0.645,表明两种方法在突变检测方面的一致性为高度。对于联合突变,A1762T/G1764A(5/10)和M204[Ⅰ/Ⅴ]/A1 81T(4/10)仅由TGS检测出。由CBS和TGS方法获得的HBV全长病毒序列构建的进化树显示两株进化树的拓扑结构相似,并且由TGS方法获得的序列构建的拓扑结构比CBS方法获得的序列构建的拓扑结构更加复杂。结论叁代测序技术TGS在检测HBV全长准种异质性特征方面与“金标准”CBS具有良好的一致性。并且在准种克隆数量和突变检测的数量、敏感度方面均明显优于CBS。本研究初步认为TGS适合于研究HBV全长基因组准种构成和特性,并有高通量、高灵敏度及低成本的优势。以叁代测序技术为基础的临床相关HBV全长准种特征值得进一步研究。随着基因测序技术提高和实验方法进一步地完善,检测患者HBV全长准种特征将更加方便快捷并有望标准化,使临床上针对不同准种特征的HBV感染者开展个体化诊疗成为可能。(本文来源于《山东大学》期刊2018-05-20)

韩悦,龚玲,张欣欣[3](2013)在《应用超深度焦磷酸测序与基于传统分子克隆测序技术分析乙型肝炎病毒逆转录酶区准种特征的比较研究》一文中研究指出目的本课题组利用分子克隆结合测序方法研究乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区(RT)抗病毒早期的准种特征,发现准种异质性变化可预测核苷类似物治疗应答。但分子克隆方法有成本高、易污染、对操作员要求较高及选取准种数目有限等诸多限制,因此难以推广到临床诊断。本次研究旨在比较超深度焦磷酸测序与基于分子克隆的测序方法在确定准种特性能力上的差异。方法研究对象为31位慢性乙型肝炎患者,从患者血清中提取了HBV基因组,特异性分段重迭扩增RT区,同时平行使用两种策略对该组患者血清HBV RT区的准种特征进行分析:(1)基于传统分子克隆结合测序的分析方法;(本文来源于《中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编》期刊2013-06-20)

张伟丽,张雅君,王伟权[4](2012)在《四步法深化分子克隆技术课程改革的探索》一文中研究指出尝试采用"基础针对性练习—科研论文讨论—自主设计综合实验—生物公司参观"四步法模式,对分子克隆技术课程进行教学改革的探索与实践。主要围绕分子克隆技术中"DNA重组克隆包括切、接、转、增、检五大单元操作"。采用循序渐进,层层递进的步骤来深化分子克隆技术课程实践教学改革与创新,从而达到促进应用型人才培养的目的。"四步法"具体内容及作用如下:第1步巧设作业题目,打牢基础,强化应用能力。第2步,任务引领,剖析实例,组织课堂辩论,创造应用机会。第3步,实施综合设计性实验,实践中锻炼分析具体问题、验证具体设计和强化实际操作的能力。第4步,着名生物技术公司的生产流程的参观,明确分子克隆技术在生物技术产业中的整合效用和应用前景。(本文来源于《农业与技术》期刊2012年08期)

张伟丽,周玲艳,梁佳勇[5](2009)在《分子克隆技术实验课程的改革探索》一文中研究指出针对分子克隆技术在国内外开设过程中存在的普遍问题,尝试从该实验课程的实验目的、实验所选取的内容、教学组织形式、成绩评价方法等方面进行改革探索,这些系列改革措施使该课程的实验目的更明确实用,内容更加精炼科学,教学组织形式更有针对性和灵活性,评价方法更具体合理,改革措施实施后取得了很好的教学效果。(本文来源于《农业与技术》期刊2009年05期)

何艳,陈守恭,卢曼,修徇泽,朱凤明[6](2009)在《分子克隆技术制备D5S2845基因座的等位基因分型标准物及其法科学应用研究》一文中研究指出目的:调查D5S2845基因座在华东汉族人群的群体遗传学数据,解决长期困扰短串联重复序列(shorttandem repeat,STR)分型上存在的准确性和标准化问题。方法:首先利用PCR结合聚丙烯凝胶电泳技术调查华东汉族群体的等位基因频率及基因型分布,再用PCR扩增出D5S2845基因座的8个等位基因片段,将其插入pUC重组质粒中,经DNA测序分析证实插入片段的结构及大小,用国际标准将插入的等位基因片段进行命名,最后经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后,制备出标准的D5S2845等位基因分型标准物。结果:D5S2845基因座在华东汉族群体中均有较高的多态性,其非父排除概率及个人识别能力分别为0.558和0.896,应用分子克隆技术制备出大量的D5S2845基因座等位基因分型标准物。结论:D5S2845基因座是一个适合于群体遗传学研究和法科学应用的遗传标记。分子克隆方法制备的STR基因座等位基因分型标准物在法科学实践中应用价值较高。(本文来源于《南通医学院学报》期刊2009年05期)

白雪,丛斌,李淑瑾,侯志平,谷建立[7](2009)在《分子克隆技术制备miniSTR基因座等位基因分型标准物》一文中研究指出目的调查D9S2157、D9S1122、D10S1435、D12ATA63和D2S1776共5个miniSTR基因座在河北汉族人群中的遗传多态性,并用分子克隆的方法制备等位基因分型标准物。方法用荧光PCR和ABI310遗传分析仪对河北汉族120份无关个体血样中的5个miniSTR基因座进行遗传多态性分析。用分子克隆的方法构建等位基因分型标准物。结果5个基因座在河北汉族人群中分别检测出了8、8、7、5和8个等位基因,多态信息含量分别为0.790、0.720、0.750、0.630和0.850。结论5个基因座在河北汉族人群中有较高的多态信息含量,其分子克隆法制备的等位基因分型标准物具有较高的法医学应用价值。(本文来源于《法医学杂志》期刊2009年02期)

云利兵,邓建强,张霁,侯一平[8](2005)在《4个Y-STR基因座遗传多态性及分子克隆技术制备分型标准物》一文中研究指出目的研究Y染色体4个新发现的STR基因座在成都汉族群体中的遗传多态性,寻找适合于法医学应用的Y-STR基因座并用分子克隆法制备其等位基因分型标准物。方法用PCR扩增和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对105名成都地区汉族无血缘关系男性个体的4个Y-STR基因座进行分型。并通过分子克隆技术制备DYS643基因座的等位基因分型标准物。结果DYS632、DYS634、DYS642和DYS643四个STR基因座均具有Y染色体特异性,在成都汉族群体中等位基因个数分别为2、4、3和5,共检测出31种单倍型;DYS643基因座的等位基因分型标准物可以用于群体研究。结论DYS643基因座及其分子克隆法制备的等位基因分型标准物具有较高的法医学应用价值。(本文来源于《法医学杂志》期刊2005年04期)

张金国[9](2005)在《分子克隆技术制备4个STR基因座等位基因阶梯及法医学应用研究》一文中研究指出目的:用分子克隆技术制备D5S818、D19S253、DYS447、DYS448等4个STR基因座等位基因阶梯,解决STR分型的准确性和标准化问题,建立制备STR基因座等位基因阶梯的新方法,并且应用自制的D19S253基因座等位基因阶梯,进行该基因座在所选样本中的群体遗传学调查,探讨等位基因阶梯的法医学应用价值。 方法:用一种改进的酚、氯仿、异戊醇方法提取DNA,采用PCR扩增,聚丙烯酰氨凝胶电泳,银染显带分析技术,分子克隆技术和DNA测序技术,对352例男性样本,135例女性样本,筛选出4个STR基因座的等位基因片段,将其插入PGEM-T质粒载体中,导入大肠杆菌,使其随大肠杆菌的无性繁殖而复制,获得每一个等位基因片段的大量拷贝,PCR扩增鉴定,测序分析,制备出4个STR基因座的等位基因阶梯。 结果:所建方法制备出了4个STR基因座的等位基因阶梯,保存重组质粒及转染大肠杆菌,建立等位基因阶梯的重组质粒库,可实现等位基因阶梯的大量快速制备和永久同一性。 结论: 1.用分子克隆技术制备等位基因阶梯为标准化评估新研发的基因座提供了规范命名的标准; 2.建立等位基因阶梯的重组质粒库,可实现等位基因阶梯的大量快速制备和永久同一性; 3.分子克隆技术制备的等位基因阶梯在法医学实践中有较高的应用价值。(本文来源于《昆明医学院》期刊2005-05-01)

邓建强,应斌武,石美森,颜静,贾振军[10](2005)在《分子克隆技术制备4个短串联重复基因座等位基因分型标准物及应用于群体遗传学》一文中研究指出目的短串联重复序列(shorttandemrepeats,STR)分型的准确性和标准性是目前急需解决的关键问题之一,本研究采用分子克隆技术制备优质标准的4个(D1S1676、D2S2735、D11S1977和D22S444)STR基因座等位基因分型标准物,并用于中国成都汉族人群的群体研究,探讨该技术的实用性。方法PCR扩增出4个基因座的各等位基因片段后,将其插入pGEMR-T重组质粒中,DNA测序证实插入片段的大小和结构,等位基因片段按国际标准进行命名后,经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后制备出该4个基因座的等位基因分型标准物,进行群体研究。结果这4个基因座的等位基因分型标准物得以大量成功制备,并成功地应用于成都地区汉族群体研究。结论分子克隆技术是制备STR等位基因分型标准物的可靠方法;群体资料显示,D1S1676和D2S2735基因座是一个适合中国成都汉族群体分析和法医学应用的遗传标记,而D11S1977和D22S444基因座在中国成都汉族群体中的应用价值有限。(本文来源于《中华医学遗传学杂志》期刊2005年01期)

分子克隆技术论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

研究背景根据最新流行病学调查,目前全球约有2.5亿人感染乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV),HBV感染仍然是一个严重的全球公共卫生问题,其中部分慢性HBV感染者可进展为慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)、肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌(hepatocellar carcinoma,HCC),每年大约有超过100万人死于HBV感染相关疾病。HBV的高效复制及其逆转录过程缺乏校正机制导致HBV在感染患者体内以准种(quasispecies,QS)的形式存在,即某一感染患者体内的HBV病毒种群虽然在遗传学上高度相关,但病毒株间的基因组序列却存在差异,这一种病毒形式的存在定义为QS。HBV准种的特征和动态变化模式与疾病临床表现、抗病毒治疗应答和疫苗效果密切相关。了解HBV全长基因组准种的特征有助于患者抗病毒治疗的个性化管理。目前对于HBV准种的测序方法主要依赖聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)产物直接测序、PCR-克隆-测序(clone-based sequencing,CBS)以及二代测序(next generation sequencing,NGS)技术,其中直接PCR测序只能检测到整个HBV准种群中丰度为20%的突变,CBS被认为是“金标准”,但是这种方法费时费力,突变检测敏感性取决于克隆数量,对于全长准种通常敏感性不高。二代测序在研究准种方面较前两种方法有明显的优势,但也有其不足,例如读长的限制,通常为100~300个碱基对(base pair,bp),且需要结合分子克隆的结果进行判读。随着基因测序技术的快速发展,多种第叁代测序(the third-generation sequencing,TGS)技术出现,实现高通量测序的同时读长显着增加,其中以单分子实时测序(Single Molecule Real Time(SMRT)DNA sequencing technology)为突出代表,为 HBV 准种研究提供了潜在的新研究方法。研究目的目前尚无叁代测序应用于HBV全长准种的相关检测研究,本研究针对HBV全长基因组准种,通过比较PCR-克隆测序和叁代测序,初步探讨现有技术条件前提下,更适合于研究HBV全长基因组准种构成和特性的方法。研究方法本研究共纳入13例样本,分为质控组和实验组。质控组3个,命名为C01、C02、C03,由包含确定的不同比例的基因B型和C型HBV全基因克隆质粒组成,实验组10例为2015年2月至2015年12月间就诊于山东大学第二医院符合《慢性乙型肝炎防治指南》的CHB患者。所有入组样本均进行HBVDNA抽提,PCR扩增,应用CBS及TGS方法测序,并用两种方法所得测序结果分别分析HBV准种的复杂度、离散度和HBV突变检测等指标,以探讨TGS在分析HBV准种异质性方面的效能和特点。研究结果两种方法获得的准种克隆数量比较。平均每个样本由CBS方法获得的准种克隆数为21.77±3.63个,而TGS方法获得的准种克隆数为560.31±233.42个,TGS方法获得的准种数远大于CBS方法(P<0.01)。质控组的结果表明两种方法检测到的准种异质性的比例均与预期标准值相符,且TGS方法检测准种异质性的比例比由CBS方法检测得到的与预期标准值更加接近。质控组从TGS方法获得的准种复杂度与从CBS方法获得的准种复杂度具有较好的一致性,均与准种复杂度的理论值相符。试验组在分析准种复杂度方面,利用配对t检验(或者Mann-Whitney检验),除了核苷酸水平的PreS2区(P=0.021)和氨基酸水平的PreS1区(P=0.025)、PreS2区(P=0.019)外,HBV全长基因组及其他分区两种方法得到的准种复杂度值没有差异(P>0.05)。在相关性分析中,除了 HBV全基因组外,各个分区的准种复杂度值均呈正相关。在Bland-Altman一致性分析中,结果显示除了 HBV全基因组(P = 0.13)外,HBV其他各个分区CBS和TGS有较高的一致性。在分析准种离散度方面,利用配对t检验(或者Mann-Whitney检验),除了核苷酸水平BCP区、X区(P值分别为0.044和0.021)的遗传距离,S区的dS(P=0.030)外,HBV全长基因组及其他分区的准种复杂度值没有差异(P>0.05)。在相关性分析中,HBV全基因组及各个分区的准种复杂度值均呈正相关。在Bland-Altman 一致性分析中,HBV全基因组及HBV其他各个分区CBS和TGS有较高的一致性。与基因B型标准序列D00330和基因C型标准序列AB033556进行比对,CBS共检测出1101个变异,平均每位患者检测到110.1±26.98个变异,TGS共检测出3059个变异,平均每位患者检测到305.9±162.45个变异。针对RT区,S区,C区,X区,PreC区,BCP区文献中已有报道的常见单核苷酸突变位点,两种方法共同检出50个阳性突变,阳性率为15.15%。CBS方法没有能够单独地检测出阳性突变,其阳性率为0%。TGS单独检出40个阳性突变,阳性率为12.12%,明显高于CBS(x2 =157.14,P<0.01),表明TGS在突变检测方面明显敏感于CBS。在进一步的Kappa 一致性检验中,Kappa值为0.645,表明两种方法在突变检测方面的一致性为高度。对于联合突变,A1762T/G1764A(5/10)和M204[Ⅰ/Ⅴ]/A1 81T(4/10)仅由TGS检测出。由CBS和TGS方法获得的HBV全长病毒序列构建的进化树显示两株进化树的拓扑结构相似,并且由TGS方法获得的序列构建的拓扑结构比CBS方法获得的序列构建的拓扑结构更加复杂。结论叁代测序技术TGS在检测HBV全长准种异质性特征方面与“金标准”CBS具有良好的一致性。并且在准种克隆数量和突变检测的数量、敏感度方面均明显优于CBS。本研究初步认为TGS适合于研究HBV全长基因组准种构成和特性,并有高通量、高灵敏度及低成本的优势。以叁代测序技术为基础的临床相关HBV全长准种特征值得进一步研究。随着基因测序技术提高和实验方法进一步地完善,检测患者HBV全长准种特征将更加方便快捷并有望标准化,使临床上针对不同准种特征的HBV感染者开展个体化诊疗成为可能。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

分子克隆技术论文参考文献

[1].言普,曾妍静,沈文涛,庹德财,黎小瑛.新型DNA分子克隆技术——NimbleCloning[C].中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集.2018

[2].李静.基于分子克隆及叁代测序技术的乙型肝炎病毒全长病毒准种的研究[D].山东大学.2018

[3].韩悦,龚玲,张欣欣.应用超深度焦磷酸测序与基于传统分子克隆测序技术分析乙型肝炎病毒逆转录酶区准种特征的比较研究[C].中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编.2013

[4].张伟丽,张雅君,王伟权.四步法深化分子克隆技术课程改革的探索[J].农业与技术.2012

[5].张伟丽,周玲艳,梁佳勇.分子克隆技术实验课程的改革探索[J].农业与技术.2009

[6].何艳,陈守恭,卢曼,修徇泽,朱凤明.分子克隆技术制备D5S2845基因座的等位基因分型标准物及其法科学应用研究[J].南通医学院学报.2009

[7].白雪,丛斌,李淑瑾,侯志平,谷建立.分子克隆技术制备miniSTR基因座等位基因分型标准物[J].法医学杂志.2009

[8].云利兵,邓建强,张霁,侯一平.4个Y-STR基因座遗传多态性及分子克隆技术制备分型标准物[J].法医学杂志.2005

[9].张金国.分子克隆技术制备4个STR基因座等位基因阶梯及法医学应用研究[D].昆明医学院.2005

[10].邓建强,应斌武,石美森,颜静,贾振军.分子克隆技术制备4个短串联重复基因座等位基因分型标准物及应用于群体遗传学[J].中华医学遗传学杂志.2005

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