本文主要研究内容
作者张小芳,董秋平,乔潇,乔亚科,王冰冰,张锴,李桂兰（2019）在《基于Cre/loxP系统的无筛选标记转耐低磷转录因子GmPTF1大豆种质创制与分析》一文中研究指出：筛选标记基因在转基因植物应用中存在一定潜在安全风险,在转基因植物改良中如何合理消除该基因非常必要。转录因子PTF1具有改善植物在低磷胁迫下吸收磷效率的作用。本研究用根癌农杆菌介导法将Cre/loxPGmPTF1导入大豆品种豫豆22,利用β-雌二醇诱导Cre/loxP系统删除筛选标记基因,获得了无筛选标记的转GmPTF1基因大豆。用PCR法扩增删除标记基因后的重组序列并测序显示,筛选标记基因在大豆基因组中已经被完全删除,重组序列中目的基因序列正确并保持了正确开放读码框;loxP位点重组出现一种新的拼接类型,重组后2个loxP序列全部缺失,新重组拼接位点长38 bp,与NCBI数据库的其他序列均无同源性,并且重组涉及2个loxP位点的外侧翼序列,造成Cre/loxP盒上游loxP和下游loxP外侧翼序列部分缺失。经过RT-PCR和Western杂交验证显示无筛选标记转基因大豆植株中GmPTF1能够正常转录和翻译,在根系、叶片及茎中的GmPTF1蛋白表达量均高于野生型对照,而在种子中与对照无显著差异。沙培试验表明,在低磷条件下无筛选标记转基因大豆苗期根系指标、生物干重、叶绿素含量和磷含量均显著高于野生型对照,而丙二醛含量低于对照。利用Cre/loxP重组系统可以有效删除转基因大豆中的筛选标记基因。
Abstract
shai shua biao ji ji yin zai zhuai ji yin zhi wu ying yong zhong cun zai yi ding qian zai an quan feng xian ,zai zhuai ji yin zhi wu gai liang zhong ru he ge li xiao chu gai ji yin fei chang bi yao 。zhuai lu yin zi PTF1ju you gai shan zhi wu zai di lin xie pai xia xi shou lin xiao lv de zuo yong 。ben yan jiu yong gen ai nong gan jun jie dao fa jiang Cre/loxPGmPTF1dao ru da dou pin chong yu dou 22,li yong β-ci er chun you dao Cre/loxPji tong shan chu shai shua biao ji ji yin ,huo de le mo shai shua biao ji de zhuai GmPTF1ji yin da dou 。yong PCRfa kuo zeng shan chu biao ji ji yin hou de chong zu xu lie bing ce xu xian shi ,shai shua biao ji ji yin zai da dou ji yin zu zhong yi jing bei wan quan shan chu ,chong zu xu lie zhong mu de ji yin xu lie zheng que bing bao chi le zheng que kai fang dou ma kuang ;loxPwei dian chong zu chu xian yi chong xin de pin jie lei xing ,chong zu hou 2ge loxPxu lie quan bu que shi ,xin chong zu pin jie wei dian chang 38 bp,yu NCBIshu ju ku de ji ta xu lie jun mo tong yuan xing ,bing ju chong zu she ji 2ge loxPwei dian de wai ce yi xu lie ,zao cheng Cre/loxPhe shang you loxPhe xia you loxPwai ce yi xu lie bu fen que shi 。jing guo RT-PCRhe Westernza jiao yan zheng xian shi mo shai shua biao ji zhuai ji yin da dou zhi zhu zhong GmPTF1neng gou zheng chang zhuai lu he fan yi ,zai gen ji 、xie pian ji jing zhong de GmPTF1dan bai biao da liang jun gao yu ye sheng xing dui zhao ,er zai chong zi zhong yu dui zhao mo xian zhe cha yi 。sha pei shi yan biao ming ,zai di lin tiao jian xia mo shai shua biao ji zhuai ji yin da dou miao ji gen ji zhi biao 、sheng wu gan chong 、xie lu su han liang he lin han liang jun xian zhe gao yu ye sheng xing dui zhao ,er bing er quan han liang di yu dui zhao 。li yong Cre/loxPchong zu ji tong ke yi you xiao shan chu zhuai ji yin da dou zhong de shai shua biao ji ji yin 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自作物学报的张小芳,董秋平,乔潇,乔亚科,王冰冰,张锴,李桂兰，发表于刊物作物学报2019年05期论文，是一篇关于无筛选标记论文,转基因大豆论文,作物学报2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自作物学报2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：无筛选标记论文; 转基因大豆论文; 作物学报2019年05期论文;